PCNA、BCL—2和P53^mt蛋白在燃煤型砷中毒患者不同病变皮肤中的表达及相关性分析

目的 分析燃煤型砷中毒患者皮肤癌变过程中增殖细胞核抗原（PCNA）、B－淋巴细胞瘤／白血病－2抗凋亡蛋白（BCL－2）和突变型P53基因蛋白（P53^mt)的表达情况及相关性。方法 免疫组化ABC法和EnVision^TM System两步法。结果 PCNA、BCL－2和P53^mt蛋白在砷中毒患者的不同病变皮肤中均有表达，且无论是阳性细胞密度还是阳性率均呈现出癌变组（A组）＞癌前组（B组）＞一般病变组（C组）的趋势；癌变组3项指标协同阳性率为83．33％，明显高于癌前组的54．54％和一般病变组的23．08％；任何两指标间均有高度相关性（P＜0．01）。结论 PCNA、BCL－2和P53^mt的协同高表达是砷性皮肤病变恶性转化的重要标志，皮肤角化过度患者有相当比例的表达，提示其具有恶变的潜在危险；燃煤型砷中毒臻皮肤癌变过程中，PCNA、BCL－2和P53^mt的异常表达可对砷致皮肤癌的癌前监控和预测提供重要佐证。     

燃煤污染型地方性砷中毒患者皮肤组织P14ARF和MDM2及突变型P53蛋白表达

目的 观察燃煤污染型地方性砷中毒患者皮肤组织突变型P53( P53mt)蛋白及其下游基因P14ARG、MDM2蛋白的表达水平,为揭示砷致皮肤损害的分子机制提供依据.方法 以自愿手术治疗的60例燃煤污染型地方性砷中毒患者作为观察对象,依据皮肤病理学诊断分为一般皮肤病变组(35例)、癌前病变组(19例)、癌变组(6例);以某医院经病理学诊断无异常的非肿瘤手术患者的9例皮肤组织为对照,采用免疫组织化学EnVision二步法检测皮肤组织中P14ARF、MDM2和P53mt蛋白的表达情况.结果 4组皮肤组织P14ARF蛋白表达阳性率比较,差异有统计学意义(x2=9.39,P＜0.05);其中癌前病变组、癌变组[46.1％(6/19)、33.3％(2/6)]明显低于对照组[88.9％(8/9),P均＜0.05];且随着皮肤病变程度的加重,P14ARF蛋白表达呈降低趋势(P＜0.05).4组皮肤组织MDM2、P53mt蛋白表达阳性率比较,差异有统计学意义(x2值分别为6.21、20.64,P均＜ 0.05);其中一般病变组、癌前病变组和癌变组[54.2％( 19/35)、63.2％(10/19)、66.7％(4/6)和25.7％(9/35)、73.7％(14/19)、83.3％(5/6)]明显高于对照组(0、0,P均＜0.05);随着皮肤病变程度的加重,MDM2和P53mt蛋白表达呈增强趋势(P均＜0.05).结论 燃煤污染型地方性砷中毒患者皮肤组织P53mt蛋白表达阳性率升高,且P14ARF和MDM2蛋白表达异常,后者所致的细胞周期和凋亡调控失常可能是砷致皮肤病损发生发展的原因之一.     

砷中毒患者皮肤组织中DNA修复基因的表达变化

目的检测DNA修复基因MGMT、XRCC1、hMSH2mRNA在燃煤型砷中毒患者皮肤组织中的表达变化,探讨其表达与砷性皮肤癌发生发展及临床病理特征之间的关系。方法应用原位杂交技术检测了61例砷中毒患者皮肤组织中MGMT、XRCC1、hMSH2mRNA的表达变化。结果随着砷中毒患者皮肤病变的发展,MGMT、XRCC1、hMSH2mRNA的表达逐渐降低,癌变组MGMT和XRCC1mRNA阳性表达率与一般病变组比较差异有统计学意义(P<0.05、P<0.01)。结论MGMT、XRCC1、hMSH2作为DNA损伤修复基因,在砷性皮肤病变过程中起重要作用;砷可能通过抑制砷中毒患者皮肤组织中MGMT、XRCC1等DNA修复基因的表达,影响基因组DNA稳定性和DNA修复功能而导致对皮肤的致癌作用。     

燃煤型砷中毒患者外周血中P53基因突变分析

目的分析燃煤型砷中毒患者外周血中p53基因5～8外显子突变情况及意义.方法采用PCRSSCP和银染技术对60例砷中毒患者外周血中p53基因5～8外显子的突变情况进行检测.结果癌变组突变率为30%(3/10);癌前组突变率为16.67%(2/12);一般病变组未发现p53基因突变.差异具有显著意义(P＜0.01).结论燃煤型砷中毒患者外周血中p53基因突变的检出,为砷性肿瘤患者的基因诊断及其易感个体的筛选和监控创造了十分有利的条件,对分析砷致癌作用机理及开辟砷性肿瘤治疗新方法有着重要的理论意义和实践价值.     

PCNA与P53蛋白在先天性胆管扩张症患者胆管中的表达及意义

目的　增殖细胞核抗原 (PCNA)与抑癌蛋白 (P53蛋白 )在先天性胆管扩张症 (CBD)胆管粘膜上皮细胞中的表达 ,了解上皮细胞的增殖分化情况 ,探讨可能的胆管癌变机制。方法　应用免疫组化方法检测胆管上皮中 PCNA与 P53蛋白表达 ,以胆管癌和正常胆总管组织作为对照 ,进行相关关系分析。结果　 CBD的 PCNA与P53蛋白表达阳性率为 (4 3.5± 2 5 .5 ) %和 (2 8.5± 2 0 .0 ) % ,正常胆管表达阳性率为 (7.4± 5 .0 ) %和 (1.0± 2 .5 ) % ,胆管癌为 (74 .9± 18.9) %和 (6 4 .5± 16 .8) %。三者之间差别有极显著差异。 PCNA在化生部位表达率增高。结论　 CBD胆管上皮细胞的增殖分化处于高增殖状态 ,有可能引发癌变     

谷胱甘肽硫转移酶P1基因DNA甲基化、mRNA和蛋白表达与燃煤污染型地方性砷中毒关系探讨

目的 探讨谷胱甘肽硫转移酶P1 (GSTP1)基因启动子区DNA甲基化、mRNA和蛋白表达与砷中毒的关系.方法 123例砷中毒患者来自贵州省兴仁县交乐村燃煤污染型地方性砷中毒病区,按地方性砷中毒诊断标准(WS/T 211-2001),其中轻度42例、中度41例,重度40例.在距病区约13 km的非砷暴露村,选择47例正常健康人作为对照.根据知情同意的原则,采集被调查者的外周血,用PCR法检测外周血GSTP1基因启动子区DNA甲基化,用荧光实时定量PCR法检测GSTP1 mRNA表达.取自愿手术治疗的53例砷中毒患者的皮肤病理标本,其中一般病变28例、癌前病变20例、癌变5例,以病理学诊断无异常的15例非肿瘤手术患者的皮肤组织为对照组.采用免疫组织化学(IHC)法检测皮肤组织中GSTP1蛋白的表达.结果 在按病情分组中,外周血GSTP1基因DNA甲基化阳性率轻(28.57％,12/42)、中(57.10％,23/41)、重度(65.00％,26/40)砷中毒组与对照组(6.38％,3/47)比较差异有统计学意义(x2值分别为7.792、26.000、33.412,P均＜0.01);在按皮肤病理诊断分组中,GSTP1基因DNA甲基化阳性率一般病变(21.43％,6/28)、癌前病变(50.00％,10/20)、癌变组(80.00％,4/5)与对照组(6.67％,1/15)比较差异有统计学意义(x2值分别为3.562、7.468、10.756,P均＜0.05).GSTP1基因DNA甲基化阳性率随砷中毒患者病情及皮肤病理损害程度加重而升高(趋势x2=38.239、x2=13.659,P均＜0.01).与对照组(0.184 26)比较,中(0.087 77)、重度(0.05693)砷中毒组外周血GSTP1mRNA表达显著降低(P均＜0.01),其中重度砷中毒组低于中度砷中毒组(P＜0.01);与对照组(0.33845)、一般病变组(0.276 74)比较,癌前病变组(0.10481)、癌变组(0.043 70)GSTP1 mRNA表达显著降低(P均＜0.01),其中癌变组显著低于癌前病变组(P＜0.01).皮肤组织中GSTP1蛋白阳性表达率组间比较差异有统计学意义(x2=20.948,P＜ 0.05),其中癌前病变组(65.00％,13/20)、癌变组(40.00％,2/5)与对照组(100.00％,15/15)比较差异有统计学意义(x2=12.183、11.778,P均＜0.01).皮肤病损程度与GSTP1蛋白表达强度经Spearman等级相关分析,呈负相关关系(r=-0.520,P＜ 0.05).按GSTP1基因DNA甲基化分组,GSTP1 mRNA和蛋白表达阳性率与非甲基化组(0.187 07、95.74％)比较,甲基化组(0.03840、57.14％)显著降低(Z=9.032,P＜ 0.01;x2=23.134,P＜ 0.01).结论 砷中毒可通过导致人体GSTP1基因启动子区DNA甲基化,进而抑制其mRNA和蛋白表达,GSTP1基因在砷致病或致癌过程中起重要作用.     

燃煤污染型砷中毒患者DNA甲基转移酶1 mRNA的表达及临床意义

目的 了解DNA甲基转移酶1(DNMT1)Mrna在燃煤污染型地方性砷中毒(简称地砷病)患者中的转录及表达情况,探讨其在地砷病发生、发展乃至癌变中的作用.方法 2008年,在贵州省兴仁县交乐乡燃煤污染型地砷病病区,按"地方性砷中毒诊断标准"选择68例地砷病患者(轻度24例、中度28例,重度16例),其中有40例经过皮肤病理学诊断,分为一般病变组(20例)、癌前病变组(14例)及癌变组(6例).在距病区约12 km的非砷暴露村大果朵村.选择23例居民作为对照组.在知情同意的原则下,采集上述被调查者的外周血,采用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测血中DNMT1 Mrna的表达.另收集自愿接受手术治疗的61例地砷病患者皮肤组织标本(一般病变34例、痛前病变21例,癌变6例)和15例正常皮肤组织标本,采用免疫组织化学法检测地砷病患者皮肤及对照皮肤组织中DNMTl蛋白的表达.结果 轻、中、重度地砷病患者外周血DNMT1 Mrna表达分别为0.221 83±0.595 09、0.246 11±0.509 79和0.389 27±0.411 33,轻、中度患者的DNMT1 Mrna表达量明显低于对照组(0.695 95±0.463 98,P均<0.01);一般病变组、癌前病变组和癌变组患者外周血中DNMT1 Mrna表达分别为0.320 64±0.547 46、0.313 09±0.529 13和0.159 07±0.342 56,均低于对照组(0.695 95±0.463 98,P均<0.05).一般病变组、癌前病变组以及癌变组皮肤DNMT1蛋白阳性表达率分别为88.24%(30/34)、100.00%(21/21)和100.00%(6/6),与对照组[0(0/15)]比较表达增强(P均<0.01),并随患者皮肤损害程度加重而逐渐增强(r=0.740,P<0.01).结论 DNMT1参与了砷中毒的发生发展,其蛋白表达增强是砷中毒发生的早期事件,DNMT1有望成为砷中毒诊疗的新靶点.     

砷中毒患者皮肤组织增殖细胞核抗原的表达

目的　分析燃煤型砷中毒患者皮肤增殖细胞核抗原 (PCNA)的表达。方法　免疫组化 ABC法。结果　 A、B及 C3个组的阳性细胞密度分别为 6 2 .83± 16 .5 0、47.48± 2 1.30和 41.97± 13.6 0 ,差异有显著意义 (A与 B:P <0 .0 5 ;A与 C:P <0 .0 1) ;3个组的阳性率分别为 10 0 %、90 .91%和 84.6 2 % ;3个组阳性分级构成差别有显著意义 (P <0 .0 1)。结论　在燃煤型砷中毒发病过程中 ,细胞增殖起重要作用 ;PCNA可作为该病预后的生物标记物。     

金属硫蛋白-1与p53基因在燃煤型砷中毒患者口腔黏膜脱落细胞中的表达

目的观察金属硫蛋白-1(MT-1)、p53基因、雌激素受体(ERa)基因和甲胎蛋白(AFP)基因在燃煤型砷中毒患者口腔黏膜脱落细胞中的表达。方法收集贵州省兴仁县燃煤型砷中毒患者及非病区正常人口腔黏膜脱落细胞,提取mRNA,以荧光实时定量PCR(RT-PCR)方法检测与肝硬化及皮肤癌相关的MT-1及p53基因等表达。结果燃煤型砷中毒患者口腔黏膜脱落细胞MT-1基因表达与对照组比较明显减少(0.83±0.15、3.86±0.37),抑癌基因p53明显增加(4.35±2.79、0.90±0.58),ERa基因和AFP基因无变化。结论砷中毒患者口腔黏膜MT-1基因表达减少,抑癌基因p53表达增加,可作为燃煤型砷中毒患者皮肤及肝脏病变监测的敏感指标之一,RT-PCR技术可广泛用于砷中毒的防治、监测和科研。     

硫氧还蛋白还原酶1在燃煤污染型砷中毒病区砷暴露人群和大鼠血液和肝脏中的表达

目的 观察硫氧还蛋白还原酶(TrxR)1在燃煤污染型砷中毒病区砷暴露人群和大鼠血液和肝脏中的表达,探讨其在燃煤污染型砷中毒肝损伤中的作用.方法 ①人群研究:选择贵州省燃煤污染型砷中毒病区133例砷暴露者作为观察对象,依据临床检查和诊断结果分为病区非病人组(25例)、无明显肝病组(38例)、轻度(43例)和中重度肝病组(27例);以非砷污染村34名健康居民为对照组.采集上述观察对象的外周血,采用实时荧光定量PCR法检测TrxR1 mRNA表达,并用可见分光光度法检测TrxR酶活力.②动物实验:将30只体质量为80 ～ 100 g的Wiser大鼠,采用随机数字表法按体质量分为对照组、饮水型砷中毒组和低、中、高砷粮食污染组,共5组,每组6只.对照组常规喂养,饮水型砷中毒组饮用含10 mg/kg三氧化二砷(As2O3)的水溶液,低、中、高砷粮食污染组喂饲用病区高砷煤烘烤的玉米粉所配制的饲料(含砷量分别为25、50、100 mg/kg),均喂养3个月.采用实时荧光定量PCR法检测其外周血和肝组织中TrxR1 mRNA表达,免疫组织化学法检测肝组织TrxR1蛋白表达,可见分光光度法检测血清和肝组织中TrxR酶活力.结果 ①人群研究结果:病区非病人组、无明显肝病组、轻度和中重度肝病组外周血TrxR1 mRNA表达[中位数(四分位数)]分别为1.599 8(1.128 9～2.156 8)、1.469 3(1.146 1～1.976 3)、1.203 6(0.463 1～1.816 2)和0.912 3(0.631 8～1.535 0),轻度和中重度肝病组均低于对照组[1.649 7(1.161 1～2.380 2),P均＜0.05];血清TrxR酶活力分别为(3.12±0.76)、(2.81±0.84)、(2.52±0.73)、(2.42±0.76)kU/L,轻度和中重度肝病组均低于对照组[(3.02±0.70)kU/L,P均＜0.05].②动物实验结果:大鼠饮水型砷中毒组和低、中、高砷粮食污染组外周血TrxR1 mRNA表达分别为1.05±0.14、1.18±0.18、1.04±0.10、0.97±0.13,除低砷粮食污染组外,其余各染砷组均低于对照组(1.23±0.15,P均＜0.05);肝组织TrxR1 mRNA表达分别为0.78±0.10、0.83±0.10、0.79±0.09、0.77±0.11,除低砷粮食污染组外,其余各染砷组均低于对照组(0.94±0.12,P均＜0.05);肝组织TrxR1蛋白表达量分别为310.33±38.81、312.50±23.36、305.67±20.57、298.17±23.52,各染砷组均低于对照组(348.50±32.35,P均＜0.05);血清TrxR酶活力分别为(4.22±0.73)、(4.86±0.63)、(4.04±0.57)、(3.73±0.64)kU/L,各染砷组均低于对照组[(9.52±1.08)kU/L,P均＜0.05];肝组织TrxR酶活力分别为(14.82±1.67)、(18.76±2.76)、(14.90±2.17)、(11.55±1.74)U/mg,均低于对照组[(23.71±3.05)U/mg,P均＜0.05].结论 砷通过下调TrxR1转录表达和蛋白表达,降低其酶活力,加重燃煤污染型砷中毒肝损伤的发生发展.     

胃癌组织P16，P53蛋白和增殖细胞核抗原的表达意义

目的探讨Ｐ１６,Ｐ５３蛋白和增殖细胞核抗原（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇｃｅｌｎｕｃｌｅａｒａｎｔｉｇｅｎ,ＰＣＮＡ）在胃癌的发生、发展中的作用及临床意义．方法应用免疫组织化学方法,对７７例胃癌和癌旁粘膜组织、２１例胃正常组织中Ｐ１６,Ｐ５３蛋白表达产物和ＰＣＮＡ进行检测,并结合临床资料进行分析．结果胃癌组织中Ｐ１６蛋白的阳性率为２０８％（１６／７７）,明显低于癌旁粘膜组织５９７％（４６／７７）和胃正常组织９０５％（１９／２１,Ｐ＜００５）;Ｐ５３蛋白与ＰＣＮＡ在胃癌组织中的阳性率为８０５％（６２／７７）和９２２％（７１／７７）,明显高于癌旁粘膜组织４１６％（３２／７７）,６４９％（５０／７７）和胃正常组织００％（０／２１,Ｐ＜００５）．Ｐ１６,Ｐ５３蛋白和ＰＣＮＡ阳性表达与胃癌组织学类型、浸润深度、分化程度及淋巴结转移有显著性差异（Ｐ＜００５）,与患者年龄、性别、肿瘤大小及部位无关（Ｐ＞００１）．结论Ｐ１６,Ｐ５３蛋白和ＰＣＮＡ的异常表达对胃癌的发生发展、恶性程度、淋巴结转移及预后有密切关系和重要临床意义．     

胃黏膜病变中突变型p53、Mdm2和PCNA蛋白表达及与幽门螺杆菌感染的关系

目的探讨胃黏膜病变中突变型p53、Mdm2、增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白的表达及其与幽门螺杆菌（Hp）感染的关系。方法应用免疫组化PV-9000法染色及Giemsa染色检测胃黏膜病变中突变型p53、Mdm2、PC-NA蛋白的表达和Hp感染情况。结果在慢性浅表性胃炎（csG）、慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生（CAG伴IM）、不典型增生（Bys）及胃癌（GC）中,突变型p53、Mdm2、PCNA阳性表达随病变发展而逐渐升高,突变型p53在CSG组高于GC组,GC组高于CAG伴IM组（P均〈0．05）。不同胃黏膜病变之间Mdm2比较均有统计学差异（P〈0．05）。在同一病变中Hp阳性者突变型p53、Mdm2、PCNA阳性表达一般高于Hp阴性者,突变型p53在CAG伴IM组Hp阳性与阴性者间有统计学差异（P〈0．05）,PCNA和Mdm2在Dys组Hp阳性与阴性者有统计学差异（P〈0．05）。GC组中突变型p53、Mdm2、PCNA蛋白表达无相关关系。结论突变型p53、Mdm2和PCNA蛋白的表达及Hp感染共同参与胃黏膜病变的发生、发展。     

p27和增殖细胞核抗原及增殖相关核抗原在滑膜肉瘤中的表达及临床意义

目的 观察p27、增殖细胞核抗原(PCNA)、增殖相关核抗原(ki-67)在滑膜肉瘤中的表达,探讨三者的相互关系及对预后的影响.方法 10例正常滑膜和36例滑膜肉瘤石蜡切片标本,采用免疫组化(SP)方法,观察、p27,PCNA、ki-67在正常滑膜和滑膜肉瘤中的表达;通过对比分析,比较p27、PCNA、ki-67在滑膜肉瘤表达中的相关性;根据滑膜肉瘤镜下组织学分级、组织学分型和临床分期,分析p27、PCNA、ki-67表达与预后的关系.结果 ①正常滑膜组织中p27呈高表达[100%(10/10)],PCNA和ki-67无表达(0、0);滑膜肉瘤中p27[11.1%(4/36)]呈低表达,PCNA[86.1%(31/36)]和ki-67[69.4%(25/36)]呈高表达;p27、PCNA、ki-67在正常滑膜和滑膜肉瘤之间的表达比较差异有统计学意义(χ2值分别为25.16、22.63、12.54,P＜0.05).②p27表达与滑膜肉瘤的组织学分级、预后有关(χ2值分别为9.19、5.98,P＜0.05),与组织学类型、临床分期无关(χ2值分别为0.77、0.29,P＞0.05);PCNA和ki-67的表达与滑膜肉瘤的临床分期、组织学分级、预后有关(χ2值分别为7.40、8.12,7.17、9.18,13.03、10.66,P＜0.05),与组织学类型无关(χ2值分别为0.64、0.36,P＞0.05).③p27与PCNA表达呈负相关(r=-0.63,P＜0.05),p27与ki-67表达呈负相关(r=-0.53,P＜0.05),PCNA与ki-67的表达呈正相关(r=0.63,P＞0.05).结论 p27在滑膜肉瘤组织中表达缺失,PCNA和ki-67在滑膜肉瘤中呈高表达,滑膜肉瘤细胞增殖过程中p27与PCNA、ki-67互相调节共同发挥作用,联合检测p27和PCNA、ki-67表达对判断滑膜肉瘤患者的预后更有价值.     

Proliferating cell nuclear antigen, p53, and c-erbB-2 expression in relation to clinicopathological variables and prognosis in cancer of the ampulla of Vater.

BACKGROUND/AIMS: Various clinicopathological factors have been thought to influence the prognosis of ampullary cancers. Recent advances in molecular biology should provide much useful information on the prognostic factors of ampullary carcinomas. METHODOLOGY: PCNA (proliferating cell nuclear antigen), p53, and c-erbB-2 were immunohistochemically evaluated in 30 resectable ampullary carcinomas. PCNA, p53, and c-erbB-2 expression, 6 clinicopathological variables, and prognosis were studied and correlations among these factors were investigated. RESULTS: The mean PCNA-positive rate was 39.1%. The percentages of cases positive for p53 and c-erbB-2 were 53% and 23%, respectively. No correlation was seen between PCNA, p53, or c-erbB-2 expression and clinicopathological variables. The optimum cut-off of PCNA indices influencing recurrence was decided as 40% by receiver operator characteristic curves. The cumulative disease-free survival rate of patients from the > or = 40% PCNA positive rate group was significantly poorer than that of the < 40% PCNA positive rate group (P < 0.01). p53 accumulation and c-erbB-2 expression were not correlated with prognosis. Multivariate analysis revealed that the PCNA positive rate and lymph node metastasis independently contributed to survival (P < 0.05). CONCLUSIONS: PCNA expression is a useful prognostic marker; however, p53 and c-erbB-2 overexpression are not useful as biomarkers for ampullary cancers.     

食管癌与幽门螺杆菌L型感染和PCNA、CerbB-2、P53表达的关系

目的　探讨幽门螺杆菌L型 (Hp -L)感染和PCNA、CerbB - 2、P53 表达在食管癌发生机制中的作用。方法　应用免疫组化和革兰染色技术检测 112例食管癌和 30例对照组的Hp -L型、PCNA、CerbB - 2、和P53 基因蛋白 ,对Hp -L型阳性和阴性组织的PCNA、CerbB - 2和P53 表达进行比较分析。结果　癌组的革兰染色L型检出率 (6 7 9% )与对照组 (2 6 7% )有显著性差异 (P <0 0 5 ) ;与免疫组化Hp -L型抗原表达阳性率 (6 5 2 % )无显著性差异 (P >0 0 5 ) ,Hp -L型检出阳性率为6 1 6 % (6 9/ 112 )。癌组的PCNA、CerbB - 2、P53 表达阳性率明显高于对照组 ,癌组中Hp -L型感染阳性组的PCNA、CerbB -2、P53 表达阳性率也高于其Hp -L型阴性组 ,其差异均有显著性 (P <0 0 5 )。表明Hp -L型感染与食管癌相关 ,与食管癌的PCNA、CerbB - 2、P53 过表达也相关。结论　Hp -L型有可能通过促使细胞增殖加速和致基因突变而涉及食管癌的发生过程     

p53 C-myc和P-gp蛋白在胃癌细胞中表达

目的研究胃癌组织中ｐ５３和Ｃｍｙｃ的表达与多药耐药性（ＭＤＲ）的关系．方法应用ＬＳＡＢ免疫组织化学方法研究６７例（男４１例，女２６例，平均年龄４６±１５８岁）胃癌标本中ｐ５３，Ｃｍｙｃ和Ｐｇｐ的表达．结果本组胃癌中ｐ５３阳性３２例（４７８％），Ｃｍｙｃ阳性３７例（５５２％），Ｐｇｐ阳性３９例（５８２％）．淋巴结转移阳性胃癌ｐ５３阳性率（５６９％）和Ｃｍｙｃ阳性率（６４７％）显著高于淋巴结转移阴性的胃癌（Ｐ＜００５）．ｐ５３的异常表达与ｍｄｒ１基因表达呈显著正相关（ｒ＝０６３，Ｐ＜００５），而Ｃｍｙｃ和ｍｄｒ１的表达无明显相关．结论ｐ５３异常表达可增加ｍｄｒ１基因的表达，从而使胃癌细胞获得ＭＤＲ表型     

L-精氨酸抑制球囊损伤后大鼠血管内膜增生的机制研究

目的探讨L-精氨酸抗血管内膜增生的作用机制是否与影响球囊损伤后血管中细胞周期调控基因、细胞周期依赖性激酶2(CDK2)、细胞周期蛋白E(CyclinE)和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达有关。方法21只大鼠随机分为S组(假手术组),C组(球囊损伤对照组)及L组(球囊损伤+L-精氨酸组)各组n=7。术后14d采血测血浆一氧化氮(NO)水平,并处死大鼠取其胸主动脉,测新生内膜面积,采用免疫组化和计算机图像分析法测CDK2、CyclinE和PCNA的表达水平。结果C组的血浆NO水平明显低于S组,与C组相比,L组的血浆NO水平增高(P<0.01),新生内膜面积减少59.1%(P<0.01),CDK2、CyclinE及PCNA的阳性表达指数分别降低36.1%,46.3%和76.2%((P均<0.01)。结论L-精氨酸抑制球囊损伤后血管中CDK2、CyclinE及PCNA的高表达可能是其抑制血管损伤后内膜增生的分子机制之一。     

Flow cytometric DNA analysis, and immunohistochemical p53, PCNA and histopathologic study in primary achalasia: preliminary results

BACKGROUND/AIMS: Primary achalasia is a premalignant disorder of the esophagus. The studies for esophageal cancer pathogenesis may reveal early diagnosis of esophageal cancer. DNA aneuploidy, p53 mutations and cellular proliferation are important factors in cancer development. As far as we know, we have not encountered any study on these factors in achalasia. METHODOLOGY: We studied DNA ploidy by flow cytometry and p53 and PCNA index by immunohistochemical technique and studied histopathology in the esophageal mucosa of primary achalasia and control patients. RESULTS: DNA analysis revealed aneuploidy in 2 of 20 achalasia patients but none of the 18 control patients. Sixty-five percent of achalasia and 22% of normal patients showed p53 positivity (P < 0.05). We have found normal mucosa, basal cell hyperplasia-esophagitis and dysplasia in 13, 22 and 3 patients and p53 positivity in 2, 12 and 3 of these patients, respectively (P < 0.05). PCNA labeling indexes (as % +/- SD) were 34.8 +/- 12.2, and 28.4 +/- 9.3 in achalasia and control groups, respectively (P > 0.05). PCNA labeling index was 28.0 +/- 8.2 in p53(-) and 36.0 +/- 12.9 in p53(+) patients (P < 0.05). PCNA indexes were found 29.3 +/- 9.6 in normal histopathologic group, 31.8 +/- 13.4 in basal cell hyperplasia-esophagitis, and 41.7 +/- 6.5 in dysplasia group (P > 0.05). CONCLUSIONS: DNA aneuploidy, p53 positivity, and higher cellular proliferation index may have important role in the pathogenesis of esophageal cancer in primary achalasia.     

丙丁酚对兔经皮腔内血管成形术后内膜增生和细胞周期蛋白表达的抑制作用

目的　研究丙丁酚对兔经皮腔内血管成形术 (PTA)后内膜增生及管壁细胞周期蛋白表达的影响。方法　新西兰白兔随机分为假手术对照组 ,PTA术后 2周组及 PTA术加丙丁酚防治 3周组和 5周组。治疗组在 PTA术前1周给药 ,术后继续给药 2周和 4周 ,分别为丙丁酚防治 3周组和 5周组。取各组实验动脉段石蜡切片 ,采用计算机图象分析系统分别测出中膜面积 (MA)、新生内膜面积 (NEA) ,并计算新生内膜面积与中膜面积的比率 (NEA /MA)。用免疫组化测周期素 D1 (cyclin D1 )、周期素依赖激酶 4(cyclin- dependent kinase 4,cdk4)及增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达水平。结果　 PTA术后 2周组 ,内膜增生显著 ,cdk4、cyclin D1 和PCNA均在内膜层表达 ,而中膜表达较少或几乎检测不到。与 PTA术后 2周组相比 ,丙丁酚防治 3周组新生内膜减少达 71.3 % (P<0 .0 1) ,cdk4、cyclin D1 和 PCNA阳性表达指数分别低 69.9%、73 .7%和 79.6% (P均 <0 .0 1)。结论　丙丁酚防治 3周对兔血管损伤后内膜增生抑制作用显著 ,同时伴有 cdk4、cyclin D1 和 PCNA阳性表达下降。提示丙丁酚对新生内膜形成的抑制作用可能与细胞周期蛋白表达下降有关