益气活血药对舒张功能不全大鼠心功能及钙转运的干预研究

目的:研究益气活血药对舒张功能不全大鼠心肌细胞心功能及钙转运的干预作用。方法:建立压力负荷致舒张功能不全大鼠模型,按干预因素分为假手术组、模型组、益气组、活血组、益气活血组。造模后给药8周检测大鼠心功能,分离心肌细胞,检测心肌细胞收缩、舒张功能及钙瞬变、胞内钙浓度。结果:益气活血组舒张早/晚期峰值血流速度(E/A)较模型组升高;各给药组舒张50%时间(TR50)较模型组均显著降低,其中益气活血组效果最明显;活血组、益气活血组钙瞬变衰减常数(Tau)较模型组缩短;益气活血组舒张期钙浓度较模型组降低。结论:益气活血药通过改善心肌细胞钙转运能力,提高心肌细胞舒张功能,改善心脏舒张功能,并降低心衰心肌细胞钙浓度,从而预防心衰室性心律失常的发生。     

益气活血方对心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡影响的研究

目的观察益气活血方对心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡和B细胞淋巴瘤-2(B cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-Associated X protein,Bax)、活化的含半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved caspase 3,C-caspase 3)表达情况的影响,探讨益气活血方影响心肌细胞凋亡的作用机制。方法结扎左冠状动脉前降支构建心肌梗死大鼠模型,并随机分为模型组、益气活血组、培哚普利组,假手术组(即对照组,只穿线不结扎),每组大鼠10只。术后第二天开始灌胃给药,以28天作为观察时间点。小动物超声检测各组大鼠心脏结构和功能的变化,HE染色观察心肌组织病理形态变化,TdT介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)染色法检测大鼠心肌细胞凋亡指数,Western blot技术检测心肌梗死边缘区Bax、Bcl-2、C-caspase 3蛋白表达水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠左心室射血分数(left venteicular ejection fraction,LVEF)、左室短轴缩短率(left ventricular shortening fraction,LVFS)均显著降低(P<0.01),左心室收缩末期内径(left ventricular end-systolic dimension,LVESD)、左心室舒张末期内径(left ventricular end-diastolic dimension,LVEDD)均升高(P<0.01);两用药组LVEF、LVFS相较于模型组均显著升高(P<0.01),LVESD、LVEDD均降低(P<0.01)。与假手术组相比,模型组心肌细胞凋亡指数明显上升(P<0.01);与模型组比较,益气活血组与培哚普利组大鼠心肌细胞凋亡指数明显降低(P<0.01)。Western blot结果显示,模型组大鼠Bax、C-caspase 3表达与假手术组相比均有明显升高(P<0.01),Bcl-2表达及Bcl-2/Bax相较于假手术组有所降低(P<0.01)。与模型组比较,益气活血组大鼠Bax蛋白表达有所下降(P<0.01),Bcl-2蛋白表达与Bcl-2/Bax显著升高(P<0.05,P<0.01),C-caspase 3蛋白表达有所降低,但差异无统计学意义(P>0.05);相较于模型组,培哚普利组大鼠Bax表达降低(P<0.01),Bcl-2/Bax比值上升(P<0.05),Bcl-2呈升高趋势,C-caspase 3有下降趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论益气活血方能够提高心肌梗死大鼠心功能,下调促凋亡蛋白Bax的表达,上调抗凋亡蛋白Bcl-2表达及Bcl-2/Bax比值,从而减轻心肌凋亡损伤以保护心脏。     

益气活血方对慢性心力衰竭大鼠心肌NCX与SERCA2a mRNA及蛋白表达水平的影响

目的观察益气活血方(由丹参、黄芪、香加皮等组成)对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心肌钠钙交换蛋白(Sodium-calcium exchanger,NCX)与肌浆网钙泵-2a(SR calcium ATPase-2a,SERCA2a)mRNA及蛋白表达水平的影响,初步探讨益气活血方改善慢性心衰大鼠心功能的作用机制。方法采用结扎大鼠冠状动脉左前降支的方法制备急性心肌梗死后慢性心力衰竭模型。实验分6组:假手术组,模型组,卡托普利组,益气活血方高、中、低3个剂量组,连续ig给药4周后取材,检测心肌组织NCX与SERCA2a mRNA及蛋白表达。结果各给药组均可不同程度的下调NCX mRNA的表达,上调SERCA2a mRNA的表达,其中益气活血方高、低剂量组以及卡托普利组与模型组比较有显著性差异(P<0.05);各给药组均能降低NCX/SERCA2a mRNA的比值,与模型组比较差异显著(P<0.05)。各给药组均有下调NCX蛋白、上调SERCA蛋白表达的趋势,但与模型组相比无显著差异(P>0.05)。结论益气活血方能够降低CHF大鼠NCX mRNA的表达,升高SERCA mRNA的表达,降低NCX/SERCA mRNA的比值,调节心肌细胞内钙循环,从而改善心肌的舒缩功能,其可能为益气活血方改善心脏功能、抗心力衰竭的机制之一。     

自拟强心汤对心梗后心力衰竭大鼠心肌舒缩功能的实验研究

目的:探讨自拟强心汤对心梗后心力衰竭大鼠心肌舒缩功能的作用机制。方法:采用结扎左冠状动脉法制备大鼠心梗后慢性心力衰竭动物模型;8周后,给予药物灌胃治疗;经治疗4周后,采用通过颈动脉插管测定大鼠血流动力学状态,通过实时荧光定量PCR(FQ-PCR)法和Western Bolt法检测心肌钙调控蛋白肌浆网钙泵(SERCA2a)、雷尼丁受体2(RYR2)mRNA水平及其蛋白表达量。结果:模型组大鼠的心功能显著下降,主要表现在血流动力学参数改变,其中左室舒张末期压(LVEDP)明显升高(P0.01),左室收缩压(LVSP)、左室上升最大速率(+LVdp/dtmax)及左室下降最大速率(-LVdp/dtmax)绝对值均降低(P0.05);心肌钙调控蛋白SERCA2a、RYR2 mRNA水平及其蛋白表达量均明显下降(P0.05)。给予自拟强心汤干预后,能够有效的降低心力衰竭大鼠LVEDP水平(P0.05),升高LVSP、+LVdp/dtmax、-LVdp/dtmax水平(P0.01);能够升高心肌钙调控蛋白SERCA2a、RYR2 mRNA及其蛋白表达量的水平(P0.05)。结论:自拟强心汤能够有效的改善心力衰竭大鼠的心功能,其机制可能与升高心肌钙调控蛋白SERCA2a、RYR2的蛋白表达量,改善钙循环有关。     

强心方改善心肌梗死后心力衰竭大鼠心功能的实验研究

目的:观察强心方对心肌梗死后心力衰竭大鼠心肌重构的影响,探讨其治疗心肌梗死后心力衰竭大鼠的作用机制。方法:选取结扎左冠状动脉法制备大鼠心肌梗死后慢性心力衰竭动物模型;将心肌梗死的54只大鼠随机分为强心方组、缬沙坦组、模型组,每组18只,另选10只为对照组,对照组大鼠穿线后不行冠脉结扎,其余操作同模型组。12周后通过彩色多普勒超声心动图检测左室舒张末期内径(LVDd)、左室收缩末期内径(LVDs)、射血分数(EF);采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)测定血浆钙调磷酸酶(Ca N)的水平;采用Western Blotting法检测心肌钙调控蛋白肌浆网钙泵(SERCA2a)、雷尼丁受体2(RYR2)、活化T细胞核因子(NFAT3)蛋白表达。结果:模型组即未经中药和西药灌胃治疗的大鼠心功能明显下降,心肌钙调控蛋白SERCA2a、RYR2表达均明显下降,差异有统计学意义(P 0. 05); Ca N、NFAT3的表达明显升高,差异有统计学意义(P 0. 05)。给予强心方灌胃治疗后强心方组,大鼠的心功能得到明显的改善,心肌钙调控蛋白SERCA2a、RYR2的表达得到明显的升高,差异有统计学意义(P 0. 05),Ca N、NFAT3水平明显降低。结论:强心方能够有效的改善心力衰竭大鼠的心功能,改善钙回摄及钙释放,抑制心肌重构,其作用机制可能与抑制Ca N-NFAT3信号通路相关。     

益气活血药对心梗大鼠心肌细胞肥大和HDAC4-MEF2C的影响

目的观察益气活血药对心梗大鼠心肌细胞肥大和组蛋白去乙酰化酶4(histone deacetylases4,HDAC4)-肌细胞增强因子(myocyte enhancer facter 2C,MEF2C)的影响,探讨益气活血药影响心肌细胞肥大的机制。方法结扎左冠状动脉前降支构建心肌梗死大鼠模型,并随机分为模型组、培哚普利组、益气活血组,另设假手术组只穿线不结扎,每组大鼠15只。术后两天灌胃给药,以7、28天为观测点。小动物超声检测各组大鼠心脏结构和功能的变化,HE染色观察心肌病理形态改变,用Western blot法检测大鼠心肌梗死边缘区HDAC4及其磷酸化蛋白p-HDAC4的表达,用RT-PCR法检测MEF2C mRNA的表达。结果模型组大鼠与假手术组相比,心脏左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)、左室短轴率(left ventricular fractional shortening,LVFS)显著降低(P0.01),左室收缩末期内径(left ventricular internal dimension systole,LVIDs)、左室舒张末期内径(left ventricular end diastolic diameter,LVIDd)显著升高(P0.01);与模型组相比,各给药组LVEF、LVFS均显著升高(P0.05,P0.01);术后28天,益气活血组LVIDs、LVIDd显著低于模型组(P0.01)。与假手术组比较,模型组和用药组的心肌细胞的横截面面积明显增大(P0.01);与模型组比较,用药组的心肌细胞的横截面积降低(P0.01,P0.05)。模型组大鼠HDAC4表达显著高于假手术组(P0.01),用药组与模型组相比有所降低但差异无统计学意义。模型组大鼠p-HDAC4蛋白表达显著高于假手术组(P0.01),7天时,用药组大鼠表达量显著低于模型组(P0.01);28天时,益气活血组与模型组相比有所降低(P0.05)。模型组大鼠MEF2C mRNA均高于假手术组(P0.01),用药组与模型组相比MEF2C mRNA表达降低(P0.01,P0.05)。结论益气活血药可能通过抑制HDAC4磷酸化影响HDAC4-MEF2C通路异常病理信号传导减轻心梗大鼠心肌细胞肥大水平。     

石斛合剂对高脂高糖糖尿病大鼠心肌细胞Ca^2+代谢的影响

目的以糖尿病心肌病大鼠为研究对象,探讨石斛合剂对糖尿病心肌病心肌细胞Ca^2+代谢的影响。方法 Wistar大鼠24只,取5只作为正常组,余19只采用高脂高糖饮食联合链脲佐菌素腹腔注射进行糖尿病心肌病造模。成模后,随机分为模型组、二甲双胍组、石斛合剂组。二甲双胍组、石斛合剂组分别予二甲双胍、石斛合剂灌胃,正常组、模型组予生理盐水灌胃。4周后,测空腹血糖,取左心室心肌组织进行组织病理学观察和心肌细胞内游离钙(MyoCa^2+)浓度测定,Western blot法检测肌浆网Ca^2+-ATP酶(SERCA2a)、L型钙通道α1C亚单位蛋白(CACNA1C)蛋白表达,RT-PCR法测定SERCA2a mRNA表达。结果石斛合剂组心肌纤维较模型组、二甲双胍组排列整齐,断裂较少。与正常组比较,模型组血糖、心肌细胞MyoCa^2+含量和CACNA1C蛋白表达明显升高(P<0.01,P<0.05),SERCA2a mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.01)。与模型组比较,石斛合剂组血糖、心肌细胞MyoCa^2+含量和CACNA1C蛋白表达明显降低(P<0.01,P<0.05),SERCA2a mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.01,P<0.05);二甲双胍组血糖明显降低(P<0.01)。与二甲双胍组比较,石斛合剂组心肌细胞MyoCa^2+含量明显降低(P<0.01,P<0.05),血糖、SERCA2a mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论石斛合剂通过提高SERCA2a mRNA和蛋白表达,加快摄取Ca^2+的速率,降低细胞质Ca^2+负荷,缓解钙超载,最终达到维持糖尿病心肌病钙稳态的作用,有效维持心肌细胞的正常收缩舒张功能;其降糖作用不是预防糖尿病心肌病的主要机理,而在于抑制CACNA1C蛋白表达,抑制钙诱导钙释放过程。     

益气活血药对心梗后心功能不全大鼠心肌细胞RYR2、SERCA2a及PLB mRNA表达的影响

目的:探讨党参、黄芪、丹参等益气活血药对心梗后心功能不全大鼠心肌细胞RYR2,SERCA2a,PLB mRNA表达的干预作用。方法:SD大鼠42只,冠状动脉前降支结扎术后随机分成3组:假手术组(对照组)、模型组、中药组。模型组和对照组给予生理盐水灌服。中药组给予益气活血中药浸膏灌胃,治疗4周和8周后分别杀死一半大鼠,取出心脏PCR检测RYR2、SERCA2a及PLB mRNA。结果:各组心衰大鼠RYR2、SERCA2a及PLB mRNA的表达较对照组下降,但中药干预4周后中药组RYR2、SERCA2a及PLB mRNA表达较模型组都有明显增高(P<0.05)。中药干预8周后,RYR2、SERCA2a mRNA仍然高于模型组(P<0.05)。结论:党参、黄芪等中药能抑制心梗后心衰大鼠RYR2、SERCA2a及PLB mRNA下降的作用,但缺乏特异性,可能与益气活血药能促进心肌细胞的能量代谢,防止心衰后心肌细胞的凋亡,心室重构有关。     

益气活血方对心梗后左室重构大鼠心肌基质金属蛋白酶-2、肿瘤坏死因子-α的影响

目的:通过观察该方对心梗后左室重构(Left Ventricular Remodeling,LVRM)大鼠心梗边缘区心肌基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)及血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,探讨益气活血方防治心梗后左室重构的作用机理。方法:结扎大鼠冠状动脉前降支建立心肌梗死模型,术后24 h存活大鼠分为益气活血方大剂量组(简称大剂量组)、益气活血方小剂量组(简称小剂量组)、卡托普利组(简称西药组)、模型组,另设假手术组。分别以相应药物灌胃6周。6周末检测各组大鼠左心室质量指数(LVMI),梗死边缘区心肌MMP-2、TIMP-2蛋白的表达及血清TNF-α的含量。结果:与假手术组比较,模型组6周末大鼠MMP-2、TIMP-2蛋白的表达明显增加,左心室质量指数增加;药物干预组,尤以大剂量组为优,可显著降低心肌梗死后心肌MMP-2蛋白表达,增加心肌TIMP-2蛋白表达,降低MMP-2/TIMP-2比值,降低左心室质量指数,降低血清TNF-α的含量。结论:益气活血方可抑制心肌MMP-2蛋白表达,增加心肌TIMP-2蛋白表达,降低MMP-2/TIMP-2,这可能是益气活血方抑制左室重构,防治心梗后心衰的作用机制之一,且存在量效关系。其抑制心肌MMP-2、增加心肌TIMP-2蛋白表达的作用可能跟降低血清TNF-α含量有关。     

黄芪对乳鼠肥大心肌细胞钙瞬变及钙调蛋白激酶Ⅱ的影响

目的:研究黄芪注射液对体外培养乳鼠肥大心肌细胞内钙瞬变及钙调蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)的影响。方法:原代培养乳鼠心肌细胞,分为对照组(不加任何干预因素)、模型组(AngⅡ刺激心肌细胞肥大)、黄芪组(AngⅡ+黄芪注射液)。MTT法确定最佳检测时间,激光共聚焦显微镜检测单个心肌细胞(给予KN-93前后)钙瞬变。Western blot法检测CaMKⅡδ蛋白含量。结果:①AngⅡ作用48h后乳鼠心肌细胞存活率下降(P<0.05);②与对照组相比,模型组总蛋白含量显著增加,黄芪组较模型组显著下降;③与对照组相比,模型组钙瞬变荧光强度变化率降低,达峰时间、峰回落时间显著增高,黄芪治疗后钙瞬变荧光强度变化率回升,并降低峰回落时间与达峰时间;④与对照组相比,模型组CaMKⅡδ的蛋白含量显著增加,黄芪组较之模型组则显著下降。⑤与对照组相比,给予KN-93后模型组仅使峰回落时间显著增加,黄芪组较模型组可显著降低峰回落时间。结论:黄芪注射液可抑制心肌细胞肥大,其机制可能与抑制钙调蛋白激酶途径中CaMKⅡδ的表达改善收缩功能有关,并可能通过其他机制而改善舒张功能。     

益气活血方对心肌梗死后心力衰竭大鼠心功能的影响及其细胞凋亡机制

目的观察益气活血方对心肌梗死后心力衰竭大鼠心功能的影响并探讨其中的细胞凋亡机制。方法将50只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、酒石酸美托洛尔组、益气活血小剂量组和益气活血大剂量组。所有组别均进行大鼠冠状动脉结扎术,假手术组不进行最后的冠状动脉结扎。益气活血方由人参、黄芪、当归按一定比例组成。酒石酸美托洛尔组按12 mg/(kg·d)给药剂量灌胃,益气活血小剂量组和大剂量组分别按2 g/(kg·d)和20 g/(kg·d)给药剂量灌胃,假手术组和模型组给予生理盐水灌胃。于造模后24小时开始,连续给药8周后进行小动物心动超声检测以及心脏组织取材TUNEL染色检测细胞凋亡。结果小动物心动超声结果显示,与假手术组比,模型组大鼠的心脏LVDd、LVDs显著增加(P<0.05),LVEF%、LVFS%显著降低(P<0.05)。与模型组比,给予益气活血方小剂量可以显著改善LVEF%、LVFS%(P<0.05),而大剂量益气活血方有改善LVEF%、LVFS%的趋势,但差异没有统计学意义(P>0.05)。大鼠心肌组织TUNEL染色表明,模型组大鼠心肌细胞TUNEL染色阳性细胞核显著增高(与假手术组比较,P<0.01),益气活血小剂量和大剂量可以明显抑制冠状动脉结扎大鼠模型心肌组织细胞凋亡的发生(P<0.05;P<0.01)。结论益气活血方可以改善心肌梗死后心功能,抑制细胞凋亡的发生可能是其中重要的机制。     

龙牙楤木总皂苷对缺血/再灌注心肌细胞收缩功能和钙瞬变的影响

为探讨龙牙楤木总皂苷(AS)对缺血/再灌注(I/R)诱导大鼠心肌细胞损伤的保护作用,采用乳酸钠灌注液灌注成年大鼠的心室肌细胞模拟缺血,含钙台式液模拟再灌注,细胞收缩与离子浓度同步测定系统同步检测AS对单个I/R细胞收缩和钙瞬变的影响.发现AS使再灌注后心肌细胞静息态肌小节长度、收缩幅度、收缩/舒张速度以及钙瞬变幅度、速度增大(P ＜0.05,P＜0.01),细胞达到舒张时最大长度的90.0％的时间、细胞收缩达峰值的时间、稳态钙静息值、收缩期[Ca2+]i上升到最高的50.0％的时间、胞内钙瞬变衰减率减少(P ＜0.05,P＜0.01).因此,推测AS改善了缺血再灌注后细胞收缩与钙稳态的损伤.     

生脉注射液对心肌细胞内钙离子调节功能的影响

目的:探讨中药生脉注射液对心肌细胞内钙调节功能的影响。方法:采用 Fu-ra-2/AM 荧光标记及同位素~(45)Ca~(2 )负载示踪法测定了心肌细胞内钙浓度及肌浆网摄钙功能。结果:生脉注射液作用早期(10min)能够增加心肌细胞外钙的快相内流,使心肌细胞内游离钙浓度增高,肌浆网摄钙量也有明显增加;生脉注射液作用60min 时,与对照组比较细胞内~(45)Ca~(2 )总量增加,肌浆网对~(45)Ca~(2 )的摄取量明显增高,而细胞浆内游离钙浓度无明显变化。维拉帕米可阻断生脉注射液对细胞内钙的调节作用。结论:生脉注射液通过增加心肌细胞钙内流速度和肌浆网摄钙量,增强了心肌细胞钙贮备能力,进而调节心肌细胞的收缩舒张功能。     

芪参益气滴丸对模型大鼠心肌梗死后左室结构及心功能的影响

目的探讨芪参益气滴丸对心肌梗死后左室结构及心肌细胞的作用及可能的机制。方法成功建立大鼠心肌梗死模型后随机分为对照组、药物组,各15只,另设假手术组15只。药物组给予38m g/(kg.d)-1芪参益气滴丸灌胃;对照组和假手术组给等量生理盐水。8周后测定血流动力学、超声心动图、心肌梗死面积、心肌及血浆血管紧张素Ⅱ(A ngⅡ)水平、心肌细胞凋亡指数(A I)、心肌细胞B cl-2和B ax蛋白表达等指标,并用光镜和透射电镜作形态学观察。结果对照组左室重量指数(LVM I)、室间隔厚度(IV ST)、左室后壁厚度(LVPW T)、左室舒张末压(LVEDP)、心肌梗死面积等均大于假手术组(P<0.05或P<0.01);药物组LVM I、IV ST、LVEDP、梗死面积、心肌及血浆A ngⅡ、A I等均低于对照组(P<0.05或P<0.01),心肌B cl-2蛋白阳性表达高于对照组(P<0.05),B ax蛋白阳性表达低于对照组(P<0.05)。光镜和电镜观察显示药物组心肌损害程度较对照组明显减轻。结论应用芪参益气滴丸可减轻大鼠心肌梗死后左室重构并改善血流动力学指标,其作用可能与降低A ngⅡ水平,调节心肌B cl-2和B ax蛋白表达,减轻心肌细胞凋亡有关。     

基于NCX/SERCA2a平衡假说探讨燧心胶囊对心肌梗死后心衰大鼠的心肌保护作用

目的观察燧心胶囊对心肌梗死后心衰(HF)大鼠的心肌保护作用,并初步探究作用机制。方法将大鼠分为假手术组、模型组及燧心胶囊低、中、高剂量组、阳性药物组(卡托普利),观察大鼠心肌组织形态学和心肌组织梗死体积变化;检测大鼠心室功能、血清中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、醛固酮(ALD)水平、心肌组织中钠钙交换蛋白(NCX)、肌浆网钙泵2a(SERCA2a)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Cleaved-Cas-pase-3蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室收缩末期内径(LVESD)、心肌梗死体积比例、左心室质量指数(LVMI)、心肌细胞凋亡率、AngⅡ、ALD及NCX、Bax、Cleaved-Caspase-3蛋白表达升高,左室收缩期后壁厚度(LVPWDs)、左心室射血分数(LVEF)、左室缩短分数(LVFS)及SERCA2a、Bcl-2蛋白表达降低(P 0.05)。与模型组比较,燧心胶囊各组与阳性药物组LVEDD、LVESD、心肌梗死体积比例、LVMI、心肌细胞凋亡率、AngⅡ、ALD及NCX、Bax、Cleaved-Caspase-3蛋白表达均显著降低,LVPWDs、LVEF、LVFS及SERCA2a、Bcl-2蛋白表达均显著升高(P 0.05)。与阳性药物组比较,燧心低剂量组LVEDD、AngⅡ、ALD及燧心低、中剂量组LVESD、心肌梗死体积比例、心肌细胞凋亡率、Bax、Cleaved-Caspase-3及燧心胶囊各剂量组NCX均显著升高,燧心胶囊各剂量组SERCA2a及燧心低、中剂量组LVEF、Bcl-2均显著降低(P 0.05)。燧心胶囊各剂量组LVEDD、LVESD、心肌梗死体积比例、心肌细胞凋亡率、AngⅡ及NCX、Bax、Cleaved-Caspase-3随剂量增加呈下降趋势,LVEF、SERCA2a、Bcl-2则呈上升趋势。结论燧心胶囊对心肌梗死后心衰大鼠的心肌具有保护作用,其作用可能通过恢复NCX/SERCA2a平衡,从而降低心肌梗死引起的组织损伤和细胞凋亡来实现的。     

益气逐瘀方对心肌梗死大鼠心功能、细胞凋亡及miR-24相关基因表达的影响

目的探讨益气逐瘀方参元益气活血胶囊(SYD)对急性心肌梗死大鼠心功能、细胞凋亡及miR-24相关基因表达的影响。方法 50只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、SYD高剂量组、SYD中剂量组、SYD低剂量组,每组10只,采用左冠状动脉前降支结扎法建立心肌梗死模型,SYD高、中、低剂量组从术后第2天开始给予SYD药液灌胃,共给药2周。治疗结束后检测大鼠血清CK、LDH水平,超声心动图检测左室功能,TUNEL法检测心肌细胞凋亡,RT-PCR检测心肌组织miR-24、Bim、Bcl-2、Bax、caspase-9mRNA表达。结果与模型组比较,SYD高、中、低剂量组均能显著降低血清CK、LDH水平(P0.05,P0.01),降低左室舒张和收缩末期内径(P0.05,P0.01),升高左室短轴缩短率及射血分数(P0.05,P0.01),升高心肌组织miR-24、Bcl-2 mRNA表达(P0.05,P0.01),降低Bim、Bax、caspase-9 mRNA表达(P0.05,P0.01),同时降低心肌细胞凋亡指数(P0.05,P0.01)。结论 SYD能够减轻心肌梗死大鼠心肌损伤及细胞凋亡,其作用机制可能与上调miR-24表达,抑制靶基因Bim及促凋亡基因Bax、caspase-9表达有关。     

益气活血方对心肌梗塞后左室重构大鼠心肌基质金属蛋白酶-2、白细胞介素-1β的影响

目的 通过观察益气活血方对心肌梗塞后左室重构大鼠心肌梗塞边缘区心肌基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2)及血清白细胞介素-1β(IL-1β)的影响,探讨益气活血方防治心肌梗塞后左室重构的作用机理.方法 结扎大鼠冠状动脉前降支建立心肌梗塞模型,术后24h存活大鼠分为益气活血方大剂量组(简称大剂量组)、益气活血方小剂量组(简称小剂量组)、卡托普利组(简称西药组),模型组.另设假手术组.分别以相应药物灌胃6周.6周末检测各组大鼠左心室质量指数,梗塞边缘区心肌MMP-2、TIMP-2蛋白的表达及血清IL-1β的含量.结果 与假手术组比较,模型组6周末大鼠MMP-2、TIMP-2蛋白的表达明显增加,左心室质量指数增加;药物干预组,尤以大剂量组为优,可显著降低心肌梗塞后心肌MMP-2蛋白表达,增加心肌TIMP-2蛋白表达,降低MMP-2/ TIMP-2比值,降低左心室质量指数,降低血清IL-1β的含量.结论 益气活血方可抑制心肌MMP-2蛋白表达,增加心肌TIMP-2蛋白表达,降低MMP-2/TIMP-2,这可能是益气活血方抑制左室重构,防治心梗后心衰的作用机制之一,且存在量效关系.其抑制心肌MMP-2、增加心肌TIMP-2蛋白表达的作用可能跟降低血清IL-1β含量有关.     

益气活血方作用NGF对大鼠心肌梗死后神经重构的影响

目的观察益气活血方对心肌梗死大鼠神经重构和相关因子神经生长因子(nerve growth factor,NGF)及其受体酪氨酸蛋白激酶A(tyrosine kinase A,TrkA)、p75神经营养因子受体(p75 neurotrophic receptor,p75NTR),以及巨噬细胞表达情况的影响,探讨益气活血方作用神经重构的作用机制。方法结扎大鼠冠状动脉左前降支建里急性心肌梗死动物模型,将造模成功的大鼠进行依术后24小时心电图坏死性Q波数量随机分组,共分为4组,对照组(即假手术组)、模型组、益气活血方组、阳性药物美托洛尔组,每组20只,并以术后7天、28天作为观察时间点。按时间点处死取材,取大鼠梗死及周围组织,用HE染色法观察心肌梗死周围组织的病理情况;用免疫组化法观察交感神经阳性纤维表达,以及巨噬细胞浸润情况;用免疫蛋白印迹法检测大鼠NGF、TrkA、p75NTR的蛋白表达。结果两个时间点模型组梗死周围游离壁酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)阳性纤维的密度显著高于假手术组(P0.01);与模型组相比,各给药组TH显著降低(P0.01)。两个时间点模型组相较假手术组CD68巨噬细胞阳性计数增加(P0.01),两用药组较模型组均有减少(P0.01)。两个时间点模型组梗死周围NGF及其受体TrkA、p75NTR表达相较于假手术组均有明显升高(P0.01),术后7天,美托洛尔组的NGF、TrkA、p75NTR蛋白表达较模型组均有所降低(P0.01),益气活血组的NGF、TrkA、p75NTR蛋白表达较模型组也均有所下降(P0.05);术后28天,美托洛尔组的NGF、p75NTR蛋白表达较模型组均明显降低(P0.01),TrkA蛋白表达较模型组有所降低(P0.05);益气活血组的NGF、TrkA、p75NTR蛋白表达较模型组也均有所下降(P0.05)。结论益气活血方可以有效减少巨噬细胞浸润,降低NGF及其受体TrkA、p75NTR的分泌和表达,从而改善心肌梗死后神经重构的情况。     

济川煎对CaMKⅡγ沉默及过表达结肠平滑肌细胞的影响及机制研究

目的:观察济川煎对钙调蛋白依赖性激酶Ⅱγ(Calmodulin-dependent protein kinases Ⅱγ,CaMKⅡγ)沉默及过表达大鼠结肠平滑肌细胞的影响及机制。方法:基于慢病毒介导构建原代大鼠结肠平滑肌细胞CaMKⅡγRNA干扰载体，建立CaMKⅡγ沉默及过表达结肠平滑肌细胞模型。将模型成功并计数的细胞悬液，随机分为空白对照组、阴性载体对照组、CaMKⅡγ沉默及过表达组、莫沙必利+CaMKⅡγ沉默及过表达1.88 mg/kg组、济川煎+CaMKⅡγ沉默及过表达4.31 g/kg组。每组细胞给药后培养24 h,采用流式细胞仪检测胞内钙离子(Ca²⁺)浓度变化；采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)法检测胞内钙调蛋白(CaM)、CaMKⅡγ、L型钙离子通道Cav1.2、SR钙离子依赖性ATP酶1(SERCA1)、兰尼碱受体(RYR2)的表达情况。结果:与空白对照组比较，模型对照CaMKⅡγ沉默组CamkⅡγ mRNA表达下调，Ca²⁺浓度显著降低(P<0.01),CaM、...     

益气活血药对心肌梗死大鼠心脏蛋白激酶C表达的影响

目的探讨益气活血中药(生脉注射液联合血塞通注射液)对心肌梗死大鼠心脏蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)表达的影响。方法 SD大鼠随机分为模型组、假手术组、卡托普利组和益气活血组。结扎大鼠心脏左冠状动脉前降支建立心肌梗死模型(假手术组只穿线,不结扎)。模型组和假手术组给予生理盐水;卡托普利组给予卡托普利片4.39 mg/(kg·d)溶解灌胃;益气活血组给予生脉注射液3.51 m L/(kg·d)联合血塞通注射液17.54 mg/(kg·d)腹腔注射。治疗4周后取材,称重计算心脏质量指数;RT-PCR法检测左心室心肌组织PKC mRNA的表达;Western blot法检测PKC蛋白的表达。结果与假手术组比较,模型组心脏质量指数显著增加(P0.01),PKC的mRNA和蛋白表达亦显著增加(P0.05或P0.01);与模型组比较,益气活血组和卡托普利组心脏质量指数显著降低(P0.05),同时PKC的mRNA和蛋白表达也显著降低(P0.05或P0.01)。结论益气活血药(生脉注射液联合血塞通注射液)可以改善心脏重构,其机制与抑制心肌梗死后心肌组织PKC的高表达有关。