雌激素对血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的 :观察雌激素对血管平滑肌细胞 (SMC)凋亡的影响。方法 :以大鼠为对象 ,观察正常对照组、去卵巢组及去卵巢 +雌二醇治疗组大鼠血管平滑肌细胞凋亡的关系。结果 :雌二醇治疗组血管平滑肌细胞凋亡较去卵巢组相比明显减少(P>0 .0 5 ) ,与正常对照组比较差别无显著性意义 (P >0 .0 5 )。结论 :雌二醇对血管平滑肌细胞的凋亡有抑制作用 ,可能是其预防动脉粥样硬化的机制     

氧化型低密度脂蛋白诱导血管平滑肌细胞凋亡

AIM: To examine whether oxidized low density lipoproteins (ox-LDL) could induce apoptosis in rabbit aortic smooth muscle cells (VSMC). METHODS: Low density lipoproteins (n-LDL) were isolated from healthy human plasma by gradient ultracentrifugation and oxidized by CuSO4 10 mumol.L-1. VSMC were exposed to ox-LDL, n-LDL, or phosphate-buffer solution (PBS) as control. Morphological changes were observed under fluorescene microscope after Hoechst 33258 staining. Extracted DNA was electrophoresized on agarose gel. RESULTS: Incubation of VSMC with ox-LDL 300 mg.L-1, not n-LDL, for 24 h induced morphological apoptosis changes (chromatin condensation, nucleus fragmentation) and DNA fragmentation, which was furthered with the incubation time up to 48 h or at a concentration of 400 mg.L-1. Dextran sulfate, a scavenger receptor blocker and butylated hydroxytoluene (BHT), an antioxidant, exhibited no effect on DNA fragmentation. Lysophosphatidylcholine (LPC) at a concentration up to 125 mumol.L-1 (equivalent to ox-LDL 300 mg.L-1) did not elicit DNA fragmentation. CONCLUSION: Ox-LDL induced apoptosis in VSMC without involving oxygen free radicals and LPC.     

雷公藤甲素对兔血管平滑肌细胞增生和凋亡的影响

目的：研究雷公藤甲素（TP）是否具有抑制血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖并诱导其发生凋亡的作用,为临床开发新型药物洗脱支架提供实验依据。方法：体外主动脉SMCs培养和流式细胞仪检测,DNA凝胶电泳。结果：TP组与空白对照组及地塞米松组相比,凋亡率有显著提高;TP干预组凝胶电泳谱型呈凋亡特征性梯状条带。结论：TP可抑制指数生长期SMCs增殖并诱导其凋亡。     

葛根素对血管平滑肌细胞凋亡的影响

葛根素是中药葛根的有效成分 ,对心脑血管疾病具有广泛的药理作用[1] 。研究表明 ,经皮腔内冠状动脉成型术(ＰＴＣＡ)后最主要的并发症为再狭窄 ,其主要表现为血管平滑肌细胞 (ＶＳＭＣ)的增殖和迁移以及细胞外基质的增多 ,而ＶＳＭＣ和巨噬细胞的凋亡功能失调和 (或 )凋亡小体的清除不足是促进动脉粥样硬化发生、发展的重要因素[2 ] 。因而寻找能够促进动脉粥样硬化中ＶＳＭＣ凋亡的手段具有重要的临床意义。本实验利用体外细胞培养技术、流式细胞术、荧光显微镜观察了葛根素对ＶＳＭＣ凋亡的影响。1　材料和方法1.1　血管平滑肌原代细胞的…     

淫羊藿通过调控多基因表达促进血管平滑肌细胞的凋亡

目的：研究淫羊藿影响血管平滑肌细胞（VSMC）凋亡的机理。方法：取家兔主动脉平滑肌进行细胞培养，培养基中加入不同浓度的淫羊藿后72小时收集细胞，流式细胞仪测定淫羊藿组和对照组的细胞凋亡率，荧光显微镜观察两组凋亡细胞形态变化，基因差示分析系统检测两组细胞多基因表达水平的改变。结果：各浓度的淫羊藿均引起细胞凋亡率高于对照组，并呈现剂量依赖关系；荧光显微镜观察到了典型的凋亡细胞核形态学改变；多基因差示分析显示，淫羊藿正调与人类原粒细胞系的KG-1基因的cDNA序列，人类DNA的CpG岛基因序列同源的基因表达，结论：淫羊藿通过影响多基因表达水平而促进血管平滑肌细胞的凋亡过程。     

他汀类药物与血管内皮功能的改善

为了讨论他汀类药物对血管内皮功能的影响，笔者引用近年来文献中的基础研究报道，发现他汀类药物在调脂的同时，还能够改善血管内皮的功能。     

泛素-蛋白酶体抑制剂对血管平滑肌细胞凋亡的影响

血管平滑肌细胞(Vascular smooth muscle,VSMC)是构成血管壁的重要成分。在动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)病变中,VSMC在病理状态下凋亡失平衡引起血管重塑,导致动脉粥样硬化的发生。目前研究发现,细胞凋亡在动脉粥样硬化形成的发病和治疗中具有重要意义,而泛素-蛋白酶体抑制剂(The ubiquitinproteasome inhibitor,UPI)能够促进VSM C凋亡进而影响动脉粥样硬化。本文对泛素-蛋白酶体抑制剂影响VSM C凋亡的机制进行了综述。     

葛根通脉饮诱导血管平滑肌细胞凋亡的实验研究

目的研究葛根通脉饮对同型半胱氨酸(homocysteinemia,HCY)诱导增殖大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)的促凋亡作用。方法制备葛根通脉饮含药血清,大鼠VSMC原代培养、鉴定,分为空白组、HCY组、葛根通脉饮组、瑞舒伐他汀(可定)组、葛根通脉饮联合可定组。药物干预后,Annexin/PI双染法检测细胞凋亡率。结果与空白组比较,HCY组细胞凋亡率显著降低(P<0.01);与HCY组比较,葛根通脉饮组、可定组、葛根通脉饮联合可定组细胞凋亡率显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论葛根通脉饮可促进HCY诱导增殖的大鼠VSMC凋亡,可能是其抗动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)作用机制之一。     

他汀类药物的非调脂作用研究进展

他汀类(Statins)药物是一类有效减低总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇的调脂药物[1,2],主要包括辛伐他汀、氟伐他汀、洛伐他汀、普伐他汀、西伐他汀、美伐他汀及阿伐他汀等,现已在临床广泛应用于血脂紊乱的治疗.其共同的作用机制是通过抑制3-羟-3-甲戊二酯辅酶A(HMG-CoA)还原酶抑制胆固醇合成.该抑制作用主要发生在肝脏(25%的胆固醇在肝脏中合成).随着实验和临床的研究发现,他汀类药物不仅具有调脂作用,还具有许多非调脂作用,因此进一步研究将开发其药理作用,并扩大其应用范围.本文将就近年来有关他汀类药物的最新研究作一综述.     

药物对血管紧张素Ⅱ致平滑肌细胞凋亡的影响

目的:探讨血管紧张素Ⅱ在不同浓度和不同作用时间下,对血管平滑肌细胞凋亡的作用及卡托普利和氯沙坦对其影响。方法:采用流式细胞技术测定了在血管紧张素Ⅱ不同浓度和不同作用时间下,血管平滑肌细胞凋亡率的变化和卡托普利、氯沙坦及二者舍用对其影响。结果:血管紧张素Ⅱ中低剂量对血管平滑肌细胞凋亡无明显作用,大剂量有诱导凋亡的作用;单用氯沙坦对细胞凋亡无明显作用,卡托普利有一定的作用,二者合用时明显增加凋亡率。结论:血管紧张素Ⅱ具有促进血管平滑肌细胞凋亡作用,大剂量作用尤为明显;合用卡托普利和氯沙坦可明显增加平滑肌细胞的凋亡作用。     

粉防己碱促进和敏化肾性高血压大鼠血管平滑肌细胞凋亡

目的：从大鼠血管平滑肌细胞凋亡角度探讨粉防己碱逆转肾血管性高血压血管重构的机制。方法：两肾-夹法制备肾性高血压模型,原位末端标记法检测主动脉和尾动脉动脉壁平滑肌细胞凋亡数量;[3H]-TdR掺入和流式细胞术分析粉防己碱对培养细胞凋亡率的影响。结果：粉防己碱能够诱导血管平滑肌细胞凋亡,并使低血清和TNFα、转化生长因子（TGFβ1）诱导的细胞凋亡率增加。结论：粉防己碱逆转肾性高血压大鼠（RHR）血管重构的机制可能与诱导和敏化RHR血管平滑肌细胞凋亡有关。     

福辛普利对平滑肌细胞凋亡及凋亡调控基因的影响

目的：探讨血管紧张素Ⅱ在不同浓度和不同作用时间下对血管平滑肌细胞凋亡及凋亡调控基因表达的作用，并研究福辛普利对其的影响。方法：采用流式细胞技术测定在不同浓度和不同作用时间血管紧张素Ⅱ作用下血管平滑肌细胞凋亡率及凋亡调控基因Fas、Bcl-2表达的变化和福辛普利对其的影响。结果：血管紧张素Ⅱ对血管平滑肌细胞凋亡和凋亡调控基因表达有较明显的诱导作用。福辛普利可抑制AngⅡ作用，对细胞凋亡有一定的影响，同时可影响凋亡调控基因的表达。结论：血管紧张素Ⅱ具有一定的的促进血管平滑肌细胞凋亡作用和调节凋亡调控基因表达的作用，尤其大剂量作用较明显。而福辛普利可明显抑制AngⅡ对血管平滑肌细胞的作用。     

曲古菌素A抑制血管平滑肌增殖和诱导凋亡的研究

目的观察曲古菌素A(TrichostatinA,TSA)体外抑制血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和诱导凋亡的作用。方法采用MTT比色法和BrdU参入法观察TSA对血清诱导的VSMC增殖的抑制作用;采用流式细胞仪和检测细胞周期蛋白表达的方法观察TSA对VSMC细胞周期的影响;采用测定DNA片段和活化caspase-3表达的方法观察TSA诱导VSMC发生凋亡的作用。结果小剂量TSA抑制血清诱导的VSMC增殖而无明显的细胞毒作用,大剂量TSA激活caspase-3并诱导VSMC发生凋亡。TSA干预可延缓血清诱导VSMC进入S期,此效应与抑制cyclinD1和cyclinA表达有关。结论TSA能抑制血清诱导的VSMC增殖,使VSMC停滞于静止期,大剂量条件下诱导VSMC凋亡。TSA有望成为治疗血管增殖性疾病的新策略。     

缬沙坦对人脐静脉平滑肌细胞凋亡的影响

目的:研究血管紧张素受体阻滞剂缬沙坦对人脐静脉血管平滑肌细胞(VSMC)凋亡的调节作用,以探讨缬沙坦抗动脉粥样硬化的作用机制.方法:荧光显微镜观察缬沙坦作用后VSMC凋亡的形态学变化,用流式细胞仪测定缬沙坦用药前后VSMC凋亡率并作周期分析,用流式细胞仪检测缬沙坦对凋亡相关基因Bax,Bcl-2和caspase3表达的影响.结果:缬沙坦高浓度 血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)组的VSMC凋亡率较AngⅡ模型组明显提高,缬沙坦单药高、中、低浓度组的VSMC凋亡率较对照组明显提高.细胞周期分析表明,AngⅡ 缬沙坦组与AngⅡ组比较,G0/G1期百分率显著升高,S期百分率显著降低,且具有浓度依赖性.Bax和caspase 3基因经高浓度缬沙坦组作用24 h后表达水平增加,Bcl-2则没有改变.结论:缬沙坦对AngⅡ诱导VSMC的增殖有抑制作用;缬沙坦可能促进VSMC凋亡;缬沙坦促进VSMC凋亡可能与Bax和caspase基因表达增加有关.     

钙诱导的钙释放引起一株血管平滑肌细胞株凋亡

目的：对钙诱导的钙释放引起血管平滑肌细胞株A10凋亡的可行性及其钙调节机制进行初步研究.方法：以钾离子孵育并以多种工具药进行干预,观测对A10细胞细胞核形态学,DNA琼脂糖凝胶电泳,细胞凋亡率,细胞线粒体膜电位的影响.结果：钾离子孵育能浓度相关性地促进A10细胞凋亡;硝本地平、ryanodine、BAPTA/AM、环胞素对中浓度钾离子孵育所致A10细胞凋亡有抑制作用;Zn^2＋、肝素对钾离子所致A10凋亡无抑制作用.结论：钾离子孵育将导致外钙经电压依赖性钙通道内流,通过升高胞浆内钙离子浓度激活ryanodine受体而不是IP3受体释放内钙,促进线粒体大量摄取而致A10细胞凋亡,该过程可能需要内钙持续释放但与容量依赖性外钙内流无关.     

氧化甾醇抑制血管平滑肌细胞(VSMC)增殖及诱导其凋亡的作用

目的 :研究 3β ,5α ,6 β 胆甾烷三醇 (Triol)和2 5 羟胆固醇 (2 5OH)对VSMC增殖的影响 ,探讨氧化甾醇在动脉粥样硬化 (AS)发病中的作用和意义。方法 :培养和鉴定新西兰白兔主动脉VSMC ;以含不同浓度的Triol和 2 5OH的培养液作用于VSMC为实验组 ,不含氧化甾醇或含胆固醇的培养液作为对照组。VSMC增殖及其代谢活性以WST 1测定 ,细胞凋亡以光镜、透射电镜、脱氧核苷酸末端转移酶介导脱氧尿苷三磷酸缺口末端标记 (TUNEL)判断。结果 :在1× 10 - 9～ 1× 10 - 7mol·L- 1范围的Triol和 2 5OH对VSMC的WST 1代谢活性无明显变化 (P >0 .0 5 ) ,而≥ 1× 10 - 6 mol·L- 1的氧化甾醇则使其代谢活性显著下降 (P <0 .0 1) ;≥ 2 0× 10 - 6 mol·L- 1的Triol和2 5OH诱导VSMC胞体皱缩变小、染色质在核周边浓集、核碎裂、空泡和凋亡小体形成等超微结构变化 ;TUNEL呈阳性反应。结论 :小剂量氧化甾醇无促进VSMC增殖而较大剂量氧化甾醇可诱导VSMC凋亡。     

氧化甾醇诱导血管平滑肌细胞凋亡及其作用特点的研究

目的研究３β,５α,６β－胆甾烷二醇（Ｔｒｉｏｌ）诱导血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣｓ）凋亡及其与２５－羟胆固醇（２５－ＯＨ）比较的特点。方法体外培养ＶＳＭＣｓ、光镜、透射电镜及ＴＵＮＥＬ技术。结果ＶＳＭＣｓ经Ｔｒｉｏｌ处理后,贴壁层细胞呈现核染色质浓集,核碎裂和凋亡小体形成等凋亡的超微结构变化;ＴＵＮＥＬ显示ＶＳＭＣｓ凋亡细胞数随Ｔｒｉｏｌ浓度的增加而增多;剂量为 ３０ μｍｏｌ·Ｌ－１的 Ｔｒｉｏｌ和 ２５－ＯＨ诱导 ＶＳＭＣｓ的凋亡作用,前者不能而后者能被 ５０ μｍｏｌ·Ｌ－１的胆固醇所抑制。结论Ｔｒｉｏｌ能诱导ＶＳＭＣｓ凋亡,不同氧化甾醇可能有不同的作用通道和机制;氧化甾醇诱导ＶＳＭＣｓ凋亡可能是引起动脉粥样硬化斑块破溃,导致急性心血管事件发生的机制之一。     

普罗布考抑制过氧化氢诱导血管平滑肌细胞的凋亡

目的研究抗氧化剂普罗布考(probucol)对过氧化氢(H2O2)诱导血管平滑肌细胞(VSMCs)凋亡的影响。方法以1mmol·L-1H2O2为VSMC凋亡诱导剂,probucol浓度为100、10和1μmol·L-1,孵育6h,采用Annexin V-FITC染色、TUNEL法和Hoechst33258染色法观察细胞凋亡;Western blot检测细胞中ASK-1和Trx-1蛋白的表达。结果H2O2可促使VSMCs凋亡,细胞中ASK-1蛋白表达增加,Trx-1蛋白表达降低。Probucol可减轻H2O2所致的细胞凋亡,呈浓度依赖性;同时细胞中ASK-1蛋白表达降低,Trx-1蛋白表达增加。结论probucol能拮抗H2O2诱导的血管平滑肌细胞凋亡,其机制可能与降低细胞中ASK-1蛋白表达,升高Trx-1蛋白表达有关。     

维拉帕米诱导血管平滑肌细胞凋亡及其在再狭窄机制中的作用

目的探讨维拉帕米能否诱导血管平滑肌细胞凋亡及细胞凋亡在再狭窄机制中的作用。方法分别取正常兔髂动脉,动脉粥样硬化及再狭窄髂动脉血管中膜组织进行平滑肌细胞培养,［３Ｈ］ ＴｄＲ参入法测定细胞增殖活性,维拉帕米诱导平滑肌细胞凋亡,通过电镜观察,ＤＮＡ凝胶电泳及流式细胞仪了解各组平滑肌细胞凋亡情况。结果维拉帕米诱导下,平滑肌细胞的变化具有凋亡的典型特征。血管成形术后,细胞增殖及凋亡系统均被激活,再狭窄组细胞增殖程度增加２６％,细胞凋亡激活程度增加１９％,二者比例失衡。结论维拉帕米能够引起血管平滑肌细胞凋亡,而平滑肌细胞凋亡的相对减少在再狭窄的发生机制中发挥一定的作用。