聚合酶链反应检测HBV-DNA的临床评价

检测2158例乙型肝炎患血清中HBVDNA以及HB-VM，对比分析表明，①抗-HBs出现后仍可有HBv低水平复制，②抗-HBC．HBVDVA阳性慢活旰多存在病毒基因突变，⑧单项抗-HBe阳性亦有部分HBV低水平携带．④人群中存在着HBVM阴性的HBV携带和患．PCR方法检测HBVDNA是一种可靠的、简单易行的判断HBV复制与传染性的指标．     

荧光定量PCR检测HBV-DNA的临床价值

目的:检测血清中乙型肝炎病毒(HBV)DNA拷贝数,以探讨乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)与血清免疫标志物的关系。方法:荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测血清样本中HBV-DNA含量;酶联免疫吸附法(ELISA)检测HBV血清标志物(HBVM)。结果:在HBsAg(+)HBeAg(+)HBcAb(+)组(大三阳组)患者血清HBV-DNA阳性率为97.63%(371/380),平均拷贝数为1.86×107/ml;HBsAg(+)HBeAg(+)组HBV-DNA阳性率为95.65%(22/23),平均拷贝数为1.75×107/ml;HBsAg(+)HBeAb(+)HBcAb(+)组(小三阳组)患者血清HBV-DNA阳性率为43.68%(83/190),平均拷贝数为4.85×105/ml;HBsAg(+)HBcAb(+)组血清HBV-DNA阳性率为82.22%(37/45),平均拷贝数为2.17×105/m1;小三阳及HBsAg(+)HBcAb(+)组HBV-DNA阳性检出率及拷贝数均低于大三阳及HBsAg(+)HBeAg(+)组,与之比较均具有显著性差异(P<0.05);HBVM全阴性组HBV-DNA检出率为1.78%(2/112),平均拷贝数为1.48×105/ml。结论:荧光定量PCR在乙肝的诊断、判断传染性强弱及评价抗病毒治疗效果方面具有较大的临床应用价值。     

荧光定量聚合酶链反应诊断乙型肝炎病毒感染研究进展

荧光定量聚合酶反应（FQ－PCR）是国内外近年发展起来的核酸检测技术，它在常规PCR基础上，加入了一条用荧光基因标记的特异性探讨。能克服常规PCR易受污、不可定量、准确度低的缺点，能更好地用于乙型肝炎病毒（HBV）的检测。本文就FQ－PCR的原理，标本收集和处理以及在HBV诊断中的影响因数和临床意义进行综述。     

荧光定量聚合酶链反应检测乙肝病毒及其临床意义

目的 :研究HBVDNA含量与乙型肝炎血清学免疫标志物表达关系及HBVDNA含量与肝细胞损害关系。方法 :以完全闭管式的PCR和荧光探针技术相结合的实时检测定量PCR方法 ,对 110例病毒性肝炎患者血清HBVDNA进行检测。结果 :HBeAg阳性 /抗HBe阴性患者HBVDNA拷贝数与HBeAg阴性 /抗HBe阳性患者或HBeAg阴性 /抗HBe阴性患者的拷贝数比较差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,而后二者比较差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;HBVDNA拷贝数与肝实质损害指标血清谷丙转氨酶 /谷草转氨酶 (ALT/AST)、总胆红素 (TBIL)、白蛋白 (ALB)、凝血酶原活动度 (PTA)不具相关性。结论 :抗e抗原抗体非病毒复制终止的标志、病毒性肝炎的肝实质损害程度与血清HBVDNA的含量无相关性。     

简化聚合酶链反应在检测血清HBV-DNA中的应用

自Saiki首先应用聚合酶链反应(Polsamerase Chain reaction,PCR)检测镰状红细胞贫血病人以来,PCR技术在临床检测中得到日趋广泛的应用。PCR利用变性、退火及延伸的反复循环,可在体外将目的DNA片段迅速扩增百万倍,极大提高了检测方法的敏感性及特异性。近来PCR技术不断改进。我们采用简化PCR反应步骤,合并退火及延     

荧光定量聚合酶链反应检测血清HBV DNA及临床应用价值

目的：应用光定量聚合酶链反应（FQ－PCR）技术检测血清HBV DNA,评价其临床应用价值。方法：选取乙型肝炎病毒感染各时期血清标本331例,用荧光定量PCR法测定HBV DNA浓度。结果：119例HBsAg,HBeAg,HBcAb阳性标本,HBV DNA阳性率为98．3％;182例HBsAg,HBeAg,HBcAb阳性的血清标本,阳性率为52．3％;HBsAg,HBeAg阴性标本20便,1例阳性。结论：FQ－PCR技术检测血清HBV DNA,可以反映乙肝病毒感染的实际情况及复制水平,为确定乙型肝炎的临床诊断,可为选择治疗方案和评估药物疗效提供较可靠的理论依据。     

荧光定量聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒-DNA的临床意义

目的　评价荧光定量聚合酶链反应 (PCR)检测乙型肝炎病毒 (HBV) DNA对辨别病毒复制的临床意义。　方法　采用荧光定量PCR和酶联免疫吸附试验 (ELISA)方法 ,检测 79份血清HBV DNA拷贝数和免疫学血清指标。　结果　在乙型肝炎病毒表面抗原 (HBsAg)、乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)、乙型肝炎病毒核心抗体 (抗 HBc)阳性的 2 6份标本中 ,HBV DNA全部阳性 ,平均拷贝数为2 7× 10 5/ml。 8例HBsAg、HBeAg阳性的标本中 ,HBV DNA全部阳性 ,平均拷贝数为 5 2× 10 4/ml。 2 1例HBsAg、乙型肝炎病毒e抗体 (抗 HBe)、抗 HBc阳性的标本中 ,HBV DNA阳性率为 6 6 7% ,平均拷贝数为 3 1× 10 4/ml。 9例HBsAg阳性的标本中HBV DNA阳性率为 11% ,平均拷贝数为 1 4× 10 3 /ml。　结论　荧光定量聚合酶链反应检测HBV DNA可以更加准确地判断HBV的感染和复制情况。     

荧光定量聚合酶链反应检测HCV-RNA

丙型肝炎病毒 (HCV)是引起输血后肝炎的主要致病因子 ,在血中含量极微 ,免疫学标志仅有抗 HCV一项 ,而且抗 HCV出现较晚或不出现 ,所以单凭血清学诊断是不够的。为此 ,采用荧光定量聚合酶链反应 (FQ PCR)检测血清中HCV RNA ,是确诊HCV感染的有效方法之一 ,可为制订治疗方案及疗效观察提供确切依据。1　材料与方法1 1　材料1.1.1　标本 :88份血清标本来源于哈尔滨医科大学第一临床医学院临床确诊的丙型肝炎患者。1.1.2　试剂 :①丙型肝炎 (HCV)核酸扩增 (PCR)荧光检测试剂盒 ,包括 :引物序列、荧光探针序列、RNA提取液、逆转录…     

荧光定量聚合酶链反应检测乙肝病毒DNA的临床意义

目的　研究荧光定量聚合酶链反应 (FQ -PCR)检测血清中乙型肝炎病毒 (HBV)DNA的临床意义。方法　用FQ -PCR诊断试剂盒 ,以完全闭管式的PCR和荧光探针技术相结合所产生的实时检测定量PCR方法 ,检测了 489份临床血清标本。结果　 132例HBsAg、HBeAg、抗 -HBc均阳性的标本 ,HBVDNA也全部阳性 ,平均HBVDNA拷贝数为 2 .83× 10 8·ml-1。 85例HBsAg、抗 -HBe和抗 -HBc均阳性的标本 ,检出HBVDNA 6 1例 (72 % ) ,平均拷贝数 7.9× 10 5·ml-1;HBV血清标志物均阴性的 74例标本 ,HBVDNA也全阴。结论　FQ -PCR可以检测HBV的感染和复制情况     

定量PCR检测乙肝患者HBV-DNA及其意义

目的 :了解乙肝患者E抗原阳性和抗 -HBe阳性血清的HBV -DNA含量和血清ALT水平之间的关系。方法 :临床标本经ELISA测定后 ,分为HBeAg(+) /HBeAb(- ) ,HBeAg(- ) /HBeAb(+)血清。采用BIO -RADiCyclerPCR定量技术 ,测定HBV -DNA使用全自动生化分析仪测定血清ALT水平。结果HBeAg(+) /HBeAb(- )血清 85例 ,HBV -DNA平均含量为 (4 .4 2± 3.2 3)× 10 7;HBeAg(- ) /HBeAb(+) 12 8例 ,HBV -DNA平均含量为 (8.32± 6 .4 4 )× 10 4。两组具显著差异。轻度慢型乙肝 2 9例 ,HBV -DNA平均含量为 (5 .92± 4 .0 1)× 10 7,中度 19例 ,HBV -DNA平均含量为 (1.2 9± 0 .72 )× 10 6,重度 2 5例 ,HBV -DNA平均含量为 (4 .4 3± 2 .4 1)× 10 3 ,轻重度组间HBV -DNA平均含量有显著差异 (P <0 .0 5 ) ,血清ALT水平与HBV-DNA含量无明显关系。结论 :多数抗 -HBE阳性患者HBV仍持续复制 ,血清病毒量低于HBeAg(+)者 ,慢乙肝病变程度与HBV -DNA平均拷贝数。     

PCR检测HBV—DNA及其临床意义探讨

应用多聚酶链反应（ＰＣＲ）检测肝炎患者血清中的乙肝病毒ＤＮＡ（ＨＢＶ－ＤＮＡ），以探讨ＰＣＲ技术在乙肝病毒感染诊断中的应用，及ＨＢＶ－ＤＮＡ与血清ＨＢＶ标记ＨＢＶ－Ｍ之间的关系。结果表明１１５例ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率与ＨＢＶ活动复制情况相一致，认为ＰＣＲ方法灵敏度高，特异性强，为早期发现病人的ＨＢＶ的隐性感染提供了可靠的手段。     

HBV—DNA分子杂交技术的建立及其临床方面的应用

本文采用目前最灵敏的HBV—DNA分子杂交技术,利用α—~(32)P和生物素标记DNA做为探针进行乙型肝炎的研究。对230例HBsAg阳性的携带者进行检测HBV—DNA阳性者占26.5%。230例中HBeAg占63%,抗—HBe占25.2%。而HBV—DNA阳性的血清中HBeAg阳性占86.9%为阳性。抗—HBe中只有8.1%。两者有显著差异。本文还对HBV—DNA与HBsAg免疫复合物的关系以及乙肝疫苗的检测有一些新的评价。     

HBV-M与HBV-DNA关系的研究

目的：研究乙肝5项免疫标志物(HBV-M)与乙肝核酸(HBV-DNA)之间的关系，从而评价检测HBV-DNA载量的临床应用价值。方法：血清HBV-DNA采用美国PE公司生产5700荧光定量PCR仪进行定量检测。5项免疫标志物采用ELISA法。结果表面抗原(HBsAg)、e抗原(HBeAg)和核心抗体(抗-HBc)阳性者，HBV-DNA阳性率为99．5％、e抗体、抗-HBc阳性者，HBV—DNA阳性率为56％；单项HBsAg阳性者，HBV-DNA阳性率为50．1％；HBsAg和抗-HBc阳性者，HBV—DNA阳性率为48．3％；5项免疫标志物皆阴性、含有3个抗体或2个抗体以及注射乙肝疫苗后单项抗-HBs阳性者，HBV—DNA阳性率为0。结论:HBV—DNA载量与抗原存在呈正相关性，而与抗体含量呈负相关性；慢性乙型肝炎患者机体无法清除乙肝病毒，HBV复制是激发机体免疫损害的关键环节，因此抗病毒治疗对减少或阻断肝病的发作和病情进展是十分必要的；HBV—DNA检测对乙肝早期诊断、传染性识别、病毒复制水平判断以及抗病毒治疗效果考核等均有重要的临床意义。     

应用聚合酶链反应检测112例乙型肝炎患者血液、尿液、唾液中HBV-DNA结果分析

本文以聚合酶链反应法检测乙型肝炎病人血液ＨＢＶ—ＤＮＡ１１２例，其中同时检测唾液ＨＢＶ—ＤＮＡ５３例，尿液ＨＢＶ—ＤＮＡ５９例，结果表明血液、唾液、尿液检出率分别为７５．８９％、４７．１７％、２３．７３％，三者之间均有显著性差异（Ｐ＜０．０５），同时发现血ＨＢＶ—ＤＮＡ、ＨＢｅＡｇ阳性组的唾液、尿液ＨＢＶ—ＤＮＡ检出率明显高于阴性组（Ｐ＜０．０１）。提示以血源性传染为主，其次为唾液与尿液，而且唾液、尿液ＨＢＶ—ＤＮＡ与血液ＨＢＶ—ＤＮＡ、ＨＢｅＡｇ之间具有密切相关性，为乙肝病毒多途径传播提供了依据。     

Roche定量试剂和国产PCR试剂检测HBV-DNA的比较分析

目的探讨Roche定量试剂和国产PCR试剂检测慢性HBV感染者血清HBV-DNA的差异。方法收集慢性HBV感染患者366例,包括慢性乙型肝炎患者247例,乙肝肝硬化失代偿患者72例,乙肝相关性肝癌患者28例,乙型慢加急性肝衰竭患者19例;采用Roche定量试剂(试剂A)和和国产PCR试剂(试剂B)检测患者血清HBV-DNA,比较检测结果的差异、相关性及影响因素。结果试剂B 124例(33.88%)低于检测下限而试剂A高于检测下限(包括24例超过1.00×10~3IU/m L,考虑试剂B为假阴性);试剂A的阳性率(70.49%)显著高于试剂B(36.61%)(P0.01)。试剂A的HBV-DNA检测均值高于试剂B(P0.05),HBe Ag滴度低者、终末期患者更容易出现COBAS系统的血清HBV-DNA检测值高于国产试剂的情况。Spearman相关分析显示,两种试剂在1.00×10~3IU/m LHBV-DNA1.00×10~7IU/m L时的相关性较好(r=0.74,P0.01)。结论国产PCR试剂可以满足慢性HBV感染患者抗病毒治疗随访、监测的需求;但针对那些怀疑有低病毒复制状态或病毒变异导致HBV-DNA检测结果假阴性的患者,有必要用COBAS系统予以复核。     

乙型肝炎患者HBV-DNA与HBV-M及HBV-DNA前C/C区变异的对比研究

目的:探讨乙型肝炎患者的乙型肝炎病毒血清学标志(HBVM)与HBVDNA及HBVDNA前C/C区变异检测结果的相关性与临床意义。方法:对359例乙型肝炎患者血清的HBVM和HBVDNA及HBVDNA前C区1896/1814位变异检测结果进行比较;HBVM用ELISA定性分析法检测;HBVDNA用PCR荧光定量法检测;HBVDNA前C/C区用基因芯片显色法检测。结果:急性乙型肝炎、慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化HBVDNA检出率分别为81.8%、62.4%、44.7%,三组进行组间比较,差异均有显著性(P<0.01);HBsAg与HBeAg均阳性组HBVDNA检出率显著高于HBsAg与抗HBe均阳性组(P<0.01);HBsAg与抗HBe均阳性组的变异率高达50.7%,显著高于HBsAg与HBeAg均阳性组(P<0.01)。结论:HBVDNA是评价HBV活动最理想的标志;HBVDNA前C/C区变异在我国乙型肝炎患者中普遍存在,对抗HBe阳性患者的临床意义更大;抗HBe的出现不能作为HBV复制停止的指标;HBVDNA量的变化可作为临床评价病毒复制和抗病毒疗效的参考指标。     

聚合酶链反应检测HBV－DNA的意义探讨

对肝功能试验正常的１４９例ＨＢＶ感染者用ＰＣＲ技术检测血清ＨＢＶ─ＤＮＡ，结果ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｓ、抗ＨＢｃ均阳性者，ＨＢＶ─ＤＮＡ全部阳性，ＨＢｓＡｓ、ＨＢｅＡｓ、抗ＨＢｅ、抗ＨＢｃ或抗ＨＢｓ单项或合并其它项阳性者，ＨＢＶ─ＤＮＡ阳性率分别为７９．４％、９４．６％、５０％、８１％和８．７％。这些结果与文献报告的相类似。     

乙型肝炎患者HBeAg水平与HBV-DNA含量相关性

目的对HBeAg阳性或阴性者与HBV-DNA含量的检测结果进行比较分析,并探讨它们之间的关系。方法采用电化学发光免疫分析方法检测HBeAg水平,采用实时荧光定量PCR检测HBV-DNA含量。结果当血清HBV-DNA拷贝数〈1×10^3或〉1×10^7时,血清HBeAg阳性者与HBeAg阴性者之间有显著差异（P〈0．01）。当血清HBV-DNA拷贝数为1×10^3-1×10^7时,血清HBeAg阳性者与HBeAg阴性者之间无显著差异（P〉0．05）。结论HBeAg水平与HBV-DNA含量有一定的相关性,但二者并不完全平行。     

200例慢性乙型病毒性肝炎患者血清标志物和HBV-DNA联合检测结果的分析

目的探讨慢性乙型肝炎血清标志物与血清HBV-DNA之间的相关性,评价血清标志物和HBV-DNA联合检测的应用价值。方法采用荧光定量聚合酶链反应检测我院收治的200例乙型肝炎患者的血清标志物和HBV-DNA。结果重度组HBV-DNA检出率为92.14%,中度组检出率为56.02%,轻度组未检出,且重度组高拷贝数所占的百分率远高于中度组。结论荧光定量聚合酶链反应检测血清HBV-DNA可检测HBV的复制状态和真实感染程度,可补充慢性乙肝病毒的血清标志物检测,同时检测HBV-DNA和血清标志物,对慢性乙肝的诊断及预后判断具有较大的价值。