谷氨酰胺对急性肺损伤大鼠肺泡上皮屏障功能的影响

目的:观察谷氨酰胺对急性肺损伤大鼠肺泡上皮屏障功能及紧密连接(TJ)特征性蛋白occludin和黏附连接蛋白E-cadherin的影响。方法:40只SD大鼠随机分为对照组、谷氨酰胺处理组(Gln组)、内毒素处理组(LPS组)、谷氨酰胺并内毒素处理组(Gln+LPS组)。测定支气管肺泡渗透性、运用免疫印迹测定和RT-PCR测定肺泡Ⅱ型上皮细胞中occludin和E-cadherin的蛋白及mRNA表达。结果:内毒素导致支气管肺泡上皮渗透性明显增高2倍左右(P<0.01);补充谷氨酰胺可以明显改善由内毒素处理引起的支气管肺泡上皮渗透性增高(P<0.05),但Gln+LPS组支气管肺泡渗透性仍较对照组及Gln组增高(P<0.05)。免疫印迹和RT-PCR显示在LPS组的occludin和E-cadherin蛋白和mRNA表达水平均较对照组及Gln组的低(P<0.01);在Gln+LPS组中occludin和E-cadherin的蛋白和mRNA表达水平较LPS组的高(P<0.05),而较对照组及Gln组的表达水平低(P<0.05)。结论:实验提示内毒素通过降低TJ分子occludin和E-cadherin的mRNA、蛋白表达水平导致肺泡上皮屏障功能受损,补充谷氨酰胺通过上调其mRNA、蛋白表达水平而对肺泡上皮屏障功能有保护作用。     

重症急性胰腺炎大鼠HMGB1对肠上皮细胞occludin表达的影响

目的 观察重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肠组织中高迁移率族蛋白B1 (HMGB1)表达对肠黏膜上皮细胞紧密连接occludin蛋白表达的影响.方法 逆行胰胆管注射5％牛磺胆酸钠制作SAP模型.健康Wistar大鼠随机(随机数字法)分为对照组、SAP组、二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)处理组.测定血淀粉酶(AMY)、内毒素(LPS)及D-乳酸水平;光镜下观察胰腺和肠组织的病理变化;免疫组织化学法观察occludin分布和表达的变化;RT-PCR法检测大鼠肠组织中HMGB1的表达水平;Western blot法检测大鼠肠组织中HMGB1及occludin蛋白的表达水平.采用SPSS 13.0统计分析软件进行处理,P＜ 0.05为差异具有统计学意义.结果 在建模后24 h,SAP组大鼠血浆LPS及D-乳酸水平明显高于对照组,提示肠屏障通透性明显增加;PDTC处理组大鼠血浆LPS及D-乳酸水平明显低于SAP组(P＜0.05).SAP组大鼠肠组织HMGB1表达水平较对照组明显升高,而occludin蛋白的表达较对照组下降;PDTC组大鼠肠组织HMGB1表达水平明显低于SAP组,occludin水平较SAP组升高(P＜0.05).结论 SAP时,大鼠肠组织内HMGB1表达升高,通过降低occludin蛋白表达,来增加肠黏膜屏障通透性;PDTC可抑制HMGB1表达,上调occludin蛋白表达,改善肠黏膜屏障通透性.     

丹参与甲基泼尼松龙联用对急性肺损伤大鼠肺组织水通道蛋白-1表达的影响

目的:观察联合应用丹参和甲基泼尼松龙对急性肺损伤(AII)大鼠肺组织水通道蛋白-l(AQP-1)表达的影响及其机制.方法:使用内毒素(LPS)3 mg/kg气管内滴入建立大鼠LPS吸入性ALI模型.50只大鼠随机分为:生理盐水对照组、LPS损伤组、甲基泼尼松龙组(LPS+甲基泼尼松龙)、丹参组(LPS+丹参)、联合用药组(LPS+甲基泼尼松龙+丹参).观察支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白含量、肺组织湿/干重(W/D)比、肺脏病理改变,免疫组化法测定AQP-1表达.结果:经气管滴入LPS可致大鼠发生ALI.与LPS损伤组相比,单用甲基泼尼松龙或丹参组BALF中蛋白含量、肺组织W/D比值均明显降低(P＜0.01),肺组织AQP-1表达则明显升高(P＜0.01),以联合用药组更为明显(P＜0.01).结论:联合应用甲基泼尼松龙和丹参对ALI大鼠具有良好的治疗作用,其机制可能与促进肺组织AQP-1高表达有关.     

紧密连接蛋白occludin在三硝基苯磺酸诱导大鼠结肠炎肠黏膜屏障中的作用研究

目的探讨紧密连接蛋白occludin在三硝基苯磺酸（trinitro-benzen-sulfonic acid,TNBS）诱导大鼠结肠炎肠黏膜屏障中的作用。方法建立大鼠结肠炎模型。SD大鼠18只,按随机数字表法分为TNBS诱导大鼠结肠炎模型组（n=10）和正常对照组（n=8）,进行疾病活动指数（DAI）和组织学损伤评分,用ELISA法测定结肠组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-10（IL-10）和血清内毒素,采用免疫组织学染色检测紧密连接（tight junction,TJ）相关蛋白occludin的分布。结果TNBS诱导大鼠结肠炎后,和正常组比较,TJ结构遭到破坏,TJ相关蛋白的表达亦减少,结肠组织TNF-α水平升高、IL-10水平降低和血清内毒素水平升高（P〈0.05）。结论TNBS诱导大鼠结肠炎肠黏膜上皮细胞TJ相关蛋白occludin表达下降,肠黏膜上皮屏障的完整性被破坏,导致肠黏膜屏障功能低下,促发炎症反应。     

脂氧素A4对内毒素攻击的肺泡Ⅱ型上皮细胞Na+-K+-ATP酶的影响

目的 探讨促炎症消退介质脂氧素A4(LipoxinA4,LXA4)对内毒素(endotoxin)攻击的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(Alveolar type Ⅱ epithelial cells,ATⅡ)Na+-K+-ATP酶的影响.方法 AT Ⅱ成功分离纯化后随机(随机数字法)分为5组:①空白组(PBS);②溶剂对照组(乙醇,0.7μL/mL);③脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)(1μg/mL)组;④LXA4(1×10-7mol/mL)组;⑤LPS(1μg/mL)+LXA4(1×10-7mol/mL)组.药物干预4 h后用RT-PCR法检测ATⅡ上Na+-K+-ATP酶α1,β1亚基的mRNA的表达,用高效液相法测定细胞ATP,ADP,AMP和腺嘌呤核苷酸总量(TAN),间接测得Na+-K+-ATP酶的活性和AT Ⅱ能荷.结果 RT-PCR结果显示:LPS组α1,β1亚基的mRNA表达较空白组明显降低(P＜0.05),而LPS+LXA4组的α1,β1亚基的mRNA表达较LPS模型组有明显增高(P＜0.05).酶活性检测结果显示:LPS组Na+-K+-ATP酶活性较空白组明显增高(P＜0.05).与LPS刺激组比较,LPS+LXA4组酶活性明显增高(P＜0.05).能荷结果显示:LPS组较空白组明显增高(P＜0.05),其余各组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 LXA4能上调内毒素攻击的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞Na+-K+-ATP酶α1,β1亚基mRNA表达,增强Na+-K+-ATP酶的活性,并能有效维持细胞的能量代谢平衡,提示LXA4可能通过上调Na+-K+-ATP酶的基因表达和功能活性,维持细胞代谢稳定,从而起到促进肺泡水肿液清除的作用.     

内毒素性休克大鼠肺组织糖皮质激素受体mRNA的表达

目的 探讨内毒素(LPS)性休克大鼠肺组织糖皮质激素受体(GR)mRNA的表达.方法 56只SD大鼠,随机(随机数字法)分IPS休克组(16只)、LPS+血管活性肠肽(vasosctive intestinal peptide,VIP)组(16只)、LPS+VIP+糖皮质激素(GC)组(16只)和对照组(8只).尾静脉注射LPS制作休克模型,尾静脉注射LPS 10 mg/kg后,分别于15 min内注射VIP 5 nmol/kg或VIP 5 nmol/ks+甲基强的松龙3 mg/kg,对照组注射等容量生理盐水,分别于沣射后6 h和24 h处死,留取肺标本,观察肺组织病理变化,RT-PCR榆测肺组织GR mRNA的表达.结果 (1)肺组织病理改变:LPS组见肺泡腔结构破坏、肺泡间隔增宽、炎性细胞浸润、出血、间质水肿,细胞器破坏,LPS+VIP组和IPS+VIP+GC组病变较轻.(2)GR mRNA的表达:注射LPS后6 h,LPS组和LPs+VIP组GR mRNA表达下降,与对照组相比,差异具有统计学意义(P＜0.05).LPS组下降较LPS+VIP组稍明显,但差异无统计学意义(P＞0.05).24 h GR mRNA表达恢复.LPS+VIP+GC组GR mRNA表达6 h增加,24 h GR mRNA表达更高(P＜0.05).结论 LPS致肺损伤时,肺组织GR mRNA的表达减少.VIP和GC可抵抗炎症反应、减轻肺损伤,其机制可能与增强GR mRNA的表达有关.     

失血性休克和内毒素二次打击肺损伤时转化生长因子-β1/smad2信号通路的变化

目的 观察失血性休克(HS)+内毒素二次打击致肺损伤时肺转化生长因子-β1(TGF-β1)/smad2信号通路的变化.方法 24只SD大鼠被随机分为假手术(Sham)组和HS组,每组12只.HS组建立未控制HS+内毒素二次打击模型,并按失血前期90 min、复苏期60 min、观察期210 min进行实验.监测各时间点平均动脉压(MAP)、心率、呼吸频率,实验结束后取血测定动脉血气,活杀大鼠取肺组织测定肺毛细血管通透性及肺湿/干重(W/D)比值,采用苏木素-伊红(HE)染色在光镜下观察肺组织病理学改变,用免疫组化法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定肺组织TGF-61的蛋白及mRNA表达,用蛋白质免疫印迹法(West-ern blotting)测定肺组织smad2蛋白表达.结果 与Sham组比较,HS组MAP自院前期60 min后明显降低,血乳酸(Lac)明显升高,pH值、动脉血氧分压(PaO2)、HCO-3、动脉血氧饱和度(SaO2)均明显降低,剩余碱(BE)负值增大,肺毛细血管通透性及W/D比值明显升高(P均＜0.01);HS组肺组织TGF-β1呈强阳性表达,主要分布于肺泡上皮、间质炎性细胞、肺泡腔内巨噬细胞和小支气管黏膜上皮细胞;TGF-β1 mRNA和smad2蛋白表达均较Sham组明显上调(P均＜0.01).结论 二次打击大鼠TGF-β1/smad2信号通路被激活,并与肺毛细血管通透性和肺损伤的严重程度密切相关,可能是HS后肺损伤的重要机制之一.     

急性肺损伤肺大鼠组织细胞间黏附分子表达及生脉饮对其影响

目的 探讨肺组织细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达与急性肺损伤(ALI)的关系以及中药生脉饮对其影响.方法 注射脂多糖(LPS)复制大鼠ALI模型,根据干预因素不同随机分为四组,即生理盐水对照组、LPS组、生脉饮+LPS组、地塞米松+LPS组.观察肺组织病理形态和ALI生物学标志并测定肺组织ICAM-1 mRNA.结果 肺血管内皮细胞ICAM-1 mRNA表达在LPS组显著高于对照组(P<0.01),生脉饮+LPS组和地塞米松+LPS组显著弱于LPS组(P<0.05,P<0.01);肺湿/干质量比,肺泡灌洗液中性粒细胞比、蛋白含量以及肺血管壁通透性、肺泡通透指数也显著小于LPS组.结论 肺组织ICAM-1 mRNA表达增强参与了ALI发生、发展,生脉饮和地塞米松可使肺组织损伤减轻,其机制可能是抑制了肺组织ICAM-1 mRNA表达.     

硫化氢对内毒素攻击大鼠肺组织细胞凋亡的影响及肺保护作用

目的 初步探讨硫化氢(H2S)对内毒素(LPS)所致急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织细胞凋亡的影响.方法 将140只大鼠,随机分为4组;盐水对照组、LPS组、LPS+硫氢化钠(NaHS)组、LPS+炔丙基甘氨酸(PPG)组,每组35只,其中7只大鼠应用右心导管法测定2小时、4小时、6小时、8小时时平均肺动脉压(MPAP);剩余28只大鼠均于4小时或8小时时经颈总动脉放血处死动物留取肺组织,采用免疫组织化学技术检测肺组织B细胞淋巴瘤2基因(Bcl-2)、Fas蛋白表达变化;光镜下观察肺组织形态学变化并计算肺泡损伤数比值(IQA)作为肺损伤的组织学定量评价指标.结果 气管内滴注LPS可引起肺组织损伤、IQA升高(P＜0.01);各时间点肺MPAP升高(P＜0.01);Bcl-2蛋白表达降低(P＜0.05)、Fas蛋白的表达升高(P＜0.01).预先给予NaHS可显著减轻LPS所致肺组织损伤、IQA下降;MPAP降低;Bcl-2蛋白表达升高、Fas蛋白的表达降低(均P＜0.01);而预先给予PPG可加重LPS所致肺损伤,IQA及各时间点肺MPAP升高更加明显;同时Bcl-2蛋白表达也降低更加明显、Fas蛋白的表达升高也更加显著(均P＜0.05).结论 H2S可通过减轻LPS攻击大鼠肺组织细胞凋亡程度而起到肺保护作用.     

谷氨酰胺对脓毒症大鼠心肌细胞Caspase-3基因及蛋白表达的影响

目的:研究脓毒症大鼠心肌细胞凋亡的变化及其与Caspase-3基因及蛋白表达的关系,同时探讨谷氨酰胺(Gln)对脓毒症心肌损伤的保护作用及机理.方法:采用内毒素(LPS)腹腔注射法制作脓毒症大鼠模型,大鼠随机分为对照组、LPS组及LPS+Gln组,再分为0 h、6 h、12 h、24 h亚组(n=6),检测各时点心肌细胞凋亡率和Caspase-3蛋白的含量,同时检测心肌Caspase-3 mRNA表达,对各组结果进行比较.结果:LPS组大鼠心肌细胞凋亡率均明显高于对照组(P<0.05);心肌细胞Caspase-3蛋白表达均高于对照组(P<0.05);Caspase-3mRNA较对照组均明显上调(P<0.05).LPS+Gln组与LPS组比较,心肌细胞凋亡率明显低于LPS组(P<0.05);Caspase-3蛋白表达下降(P<0.05);Caspase-3 mRNA较LPS组均明显下调(P<0.05).结论:依赖Caspase-3基因的凋亡通路在脓毒症发病机制中起到重要作用,Gln通过阻止Caspase-3 mRNA及蛋白表达而减少脓毒症心肌细胞凋亡程度,可利用它对脓毒症进行早期干预.     

Der p 1 facilitates transepithelial allergen delivery by disruption of tight junctions

House dust mite (HDM) allergens are important factors in the increasing prevalence of asthma. The lung epithelium forms a barrier that allergens must cross before they can cause sensitization. However, the mechanisms involved are unknown. Here we show that the cysteine proteinase allergen Der p 1 from fecal pellets of the HDM Dermatophagoides pteronyssinus causes disruption of intercellular tight junctions (TJs), which are the principal components of the epithelial paracellular permeability barrier. In confluent airway epithelial cells, Der p 1 led to cleavage of the TJ adhesion protein occludin. Cleavage was attenuated by antipain, but not by inhibitors of serine, aspartic, or matrix metalloproteinases. Putative Der p 1 cleavage sites were found in peptides from an extracellular domain of occludin and in the TJ adhesion protein claudin-1. TJ breakdown nonspecifically increased epithelial permeability, allowing Der p 1 to cross the epithelial barrier. Thus, transepithelial movement of Der p 1 to dendritic antigen-presenting cells via the paracellular pathway may be promoted by the allergen's own proteolytic activity. These results suggest that opening of TJs by environmental proteinases may be the initial step in the development of asthma to a variety of allergens.     

肺复张手法对急性肺损伤大鼠肺泡上皮细胞屏障功能的影响

目的 观察肺复张手法对急性肺损伤（ALI）大鼠肺泡上皮细胞屏障功能的影响。方法雄性清洁级SD大鼠48只，静脉注射脂多糖（LPS）复制ALI模型，随机分为对照组、ALI模型组（ALI组）、小潮气量（VT）通气组（LV组）和肺复张联合小VT通气组（SI组）。采用控制性肺膨胀（SI）实施肺复张手法。机械通气4h后，观察肺组织病理学改变；采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法（TUNEL）检测肺泡上皮细胞凋亡情况；用重力法测定血管外肺水（EVLW）含量；用单核素示踪技术测定肺泡上皮细胞通透性改变；用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测肺组织肺泡表面活性蛋白-C（SP—C）mRNA表达；用酶联免疫吸附法（ELISA）检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中白细胞介素-6（IL-6）和IL-10浓度。结果 光镜下，SI组肺组织损伤程度轻于ALI组和LV组。LV组凋亡肺泡上皮细胞散在分布，SI组凋亡上皮细胞明显减少。与对照组相比，ALI组、LV组及SI组肺损伤评分和EVLW均显著升高；与ALI组比较，LV组和SI组肺损伤评分显著降低，SI组肺损伤评分及EVLW显著低于LV组（P均〈0．05）。与对照组相比，ALI组、LV组及SI组肺组织SP—C mRNA表达均显著降低，而SI组肺组织SP—C mRNA表达显著高于LV组（P〈0．05），但与ALI组比较差异无显著性。ALI组、LV组和SI组BALF中IL-6和IL-10浓度均显著高于对照组（P均〈0．05），SI组IL-6浓度显著低于LV组（P〈0．05）。各组肺泡上皮细胞通透性间比较差异均无显著性。结论 肺复张手法可以减轻ALI肺组织病理损伤，增加肺泡上皮细胞SP—C mRNA的合成，下调肺部炎症反应，改善肺泡上皮细胞屏障功能。     

不同液体治疗对急性肺损伤大鼠肺泡上皮细胞屏障功能的影响

目的 观察不同液体治疗对急性肺损伤(ALI)大鼠肺泡上皮细胞屏障功能的影响.方法 ①与对照组比较,LPS组、NS组肺损伤评分明显升高(P均<0.05);与NS组比较,5%人血白蛋白(ALB)组、6%羟乙基淀粉130/0.4(HES)组评分均明显降低(P均<0.05),4%琥珀酰明胶(GEL)组无明显差异(P>0.05),且后3组间比较差异也无统计学意义.②与对照组比较,LPS组、NS组肺W/D比值明显升高(P均<0.05);ALB组、HES组、GEL组均较NS组明显下降(P均<0.05),3组间比较无差异.③LPS组、NS组肺泡上皮通透性均较对照组明显升高(P均<0.05);ALB组、HES组、GEL组肺泡上皮通透性均较NS组明显降低,且后两组明显低于ALB组(P均<0.05),但仍高于对照组.④LPS组、NS组、ALB组、GEL组肺组织SP-C mRNA表达较对照组、HES组明显下降(P均<0.05);而HES组和对照组间无明显差异(P>0.05).⑤各组肺泡上皮细胞凋亡指数(AI)明显高于对照组(P均<0.05);ALB组、HES组AI较NS组明显下降(P均<0.05),但与GEL组无明显差异(P均>0.05).结论 胶体液较NS更能改善ALI大鼠肺泡上皮通透性,保护上皮细胞屏障功能.     

IL-13在急性肺损伤小鼠肺内的表达及其意义研究

[目的]观察急性肺损伤(ALI)小鼠肺内白介素-13(IL-13)表达及其在肺损伤炎症反应中的作用.[方法]采用气管注射脂多糖(LPS)复制ALI小鼠ALI动物模型,采用real-time PCR和ELISA法分别检测小鼠肺内IL-13 mRNA和支气管肺泡灌洗液(BALF)以及血清中IL-13含量.采用IL-13中和抗体预处理小鼠后,观察其对LPS诱导的小鼠ALI的炎症反应的影响,运用ELISA法检测小鼠BALF和血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和IL-1β的含量,HE染色观察肺组织形态学改变.[结果]与对照组相比,气管注射LPS诱导的ALI小鼠肺组织中IL-13 mRNA以及BALF和血清IL-13蛋白含量显著增加.与ALI组相比,IL-13中和抗体预处理组小鼠肺内TNF-α和IL-1β含量进一步增高,肺组织形态学损伤加重.[结论]ALI时小鼠肺内IL-13含量应激性增加,抑制IL13的受体活性,加重LPS诱导的小鼠ALI,提示IL-13是ALI内源性保护因子.     

Nonischemic lung injury by mediators from unilateral ischemic reperfused lung: ameliorating effect of tumor necrosis factor-alpha-converting enzyme inhibitor

We hypothesized that the ischemic reperfused (I/R) lung expresses and liberates tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha) to injure the nonischemic lung, and that a TNF-alpha-converting enzyme inhibitor (TACEI) prevents injury of the nonischemic lung by blocking TNF-alpha liberation from the I/R lung. In isolated ventilated rat lungs in which differential perfusion to the right (RL) or left (LL) lung was feasible, LLs were selectively made ischemic (60 min) while maintaining perfusion to RLs, then reperfused (30 min) in a nonrecirculating manner with buffer solution (non-R; n = 18) or in a recirculating manner with buffer containing TACEI (TACEI[+]; n = 18) or without TACEI (TACEI[-]; n = 18). Ischemia reperfusion induced TNF-alpha messenger RNA expression in the ischemic LLs; the expression was highest in TACEI(+) group (P < 0.01). The expression of TNF-alpha, which was detected as immunofluorescence signals on CD34-positive endothelial cells, was observed in ischemic LLs; the highest expression being that in the TACEI(+) group. Wet/dry ratio and protein content in bronchoalveolar lavage fluid were higher in LLs than in RLs, and among the RLs, these 2 parameters were significantly increased in the TACEI(-) group (P < 0.01) in which the RLs were exposed to the TNF-alpha-rich perfusate. On the other hand, protein content in bronchoalveolar lavage fluid of the TACEI(+) group in which RLs were exposed to recirculating perfusate containing little TNF-alpha was decreased to a level close to but still higher than that in the non-R group (P < 0.05). The unilateral I/R lung affected the permeability of the nonischemic lung by liberating mainly TNF-alpha and induced TNF-alpha, interleukin (IL)-1beta, IL-6, and IL-10 messenger RNA expression in the nonischemic lung. These findings support the idea of organ-organ interaction in which an injured organ affects a remote organ by liberating humoral mediators.     

神经激肽-1受体在急性坏死性胰腺炎肺损害中的作用

目的 :研究神经激肽 1受体 (NK 1R)在急性坏死性胰腺炎 (ANP)大鼠肺组织中的表达 ,探讨该受体在 ANP肺损害中的作用。方法 :健康成年 Sprague Dawley大鼠按抽签法随机分为 ANP组 (90只 )和正常对照组 (30只 )。正常对照组开腹后只翻动胰腺 ,ANP组大鼠经胰胆管恒速逆行注射质量分数为 5 %的牛磺胆酸钠 (0 .1ml/ kg)制成 ANP大鼠模型。检测肺脏髓过氧化物酶 (MPO)的活性和肺脏毛细血管通透性 (L CP)。应用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测肺组织中 NK 1R m RNA水平 ,应用 Western Blot技术检测NK 1R的蛋白水平 ,以免疫组织化学方法进行 NK 1R的组织学定位。结果 :ANP组 6 h后肺组织 MPO和L CP水平即明显高于正常对照组。与正常对照组相比 ,ANP肺组织中 NK 1R m RNA和蛋白都过度表达 ;NK 1R m RNA表达分别与 MPO(r=0 .83,P<0 .0 1)和 L CP(r=0 .79,P<0 .0 1)水平相关。免疫组织化学检测显示 ,NK 1R的表达主要位于肺泡隔血管内皮细胞表面及部分肺泡 型、 型上皮细胞表面等处。结论 :ANP肺组织中 NK 1R的表达水平明显上调 ,导致中性粒细胞等炎性细胞聚集 ,加剧 ANP时的肺损害。     

Increased iNOS activity is essential for intestinal epithelial tight junction dysfunction in endotoxemic mice

We tested the hypothesis that increased production of nitric oxide (NO.) associated with lipopolysaccharide (LPS)-induced systemic inflammation leads to functionally significant alterations in the expression and/or targeting of key tight junction (TJ) proteins in ileal and colonic epithelium. Wild-type or inducible NO. synthase (iNOS) knockout male C57B1/6J mice were injected intraperitoneally with 2 mg/kg Escherichia coli O111:B4 LPS. iNOS was inhibited using intraperitoneal L-N(6)-(1-iminoethyl)lysine (L-NIL; 5 mg/kg). Immunoblotting of total protein and NP-40 insoluble proteins revealed decreased expression and decreased TJ localization, respectively, of the TJ proteins, zonula occludens (ZO)-1, ZO-2, ZO-3, and/or occludin in ileal mucosa and colonic mucosa (total protein only) after injection of C57B1/6J mice with LPS. Immunohistochemistry showed deranged distribution of ZO-1 and occludin in both tissues from endotoxemic mice. Endotoxemia was associated with evidence of gut epithelial barrier dysfunction evidenced by increased ileal mucosal permeability to fluorescein isothiocyanate-dextran (Mr=4 kDa) and increased bacterial translocation to mesenteric lymph nodes. Pharmacologic inhibition of iNOS activity using L-NIL or genetic ablation of the iNOS gene ameliorated LPS-induced changes in TJ protein expression and gut mucosal barrier function. These results support the view that at least one mechanism contributing to the pathogenesis of gastrointestinal epithelial dysfunction secondary to systemic inflammation is increased iNOS-dependent NO. production leading to altered expression and localization of key TJ proteins.     

Exocyst复合物关键亚基Sec3蛋白在气道黏液高分泌中的作用研究

目的 探讨Exocyst复合物关键亚基Sec3蛋白在气道黏液高分泌形成过程中的作用.方法 将60只大鼠随机分成3组:正常对照组,烟雾暴露组、烟雾暴露+人中性粒细胞弹性蛋白酶(HNE)组.烟雾暴露组大鼠采用烟雾暴露法建立慢性支气管炎症病理性改变,HNE攻击形成气道黏液高分泌大鼠模型.取肺组织支气管上皮,观察气道上皮杯状细...