长胞内域瘦素受体全长mRNA表达增加对骨胳肌细胞葡萄糖氧化的影响

目的 观察增加骨胳肌细胞全长长胞内域瘦素受体(OBRb)mRNA表达以后,瘦素对原代培养的骨胳肌细胞葡萄糖氧化代谢的影响。方法 分离SD乳鼠的骨胳肌细胞,分4组进行细胞培养,其中转染重组质粒、转染空载质粒和非转染3组(分别加瘦素10ng/ml和胰岛素10mU/ml),另外1组为非转染未加瘦素和胰岛素的对照组。将载有全长OBRb cDNA的真核表达质粒或空载质粒在脂质体的介导下导入骨胳肌细胞。48h后加入瘦素和胰岛素,孵育1h,再加入D-[U-~(14)C]-葡萄糖,继续培养2h后终止反应,收集~(14)CO_2,液体闪烁计数。同时以RT-PCR检测转染细胞的OBRb mRNA表达水平。结果 重组质粒转染、空载质粒转染和非转染3组,特异性条带和β-actin条带积分光密度比值分别为1.22±0.10、0.41±0.08和0.49±0.09,前者较其它两组明显升高(均P<0.001)。葡萄糖氧化前者明显高于其他3组(均P<0.005)。结论 增加SD乳鼠骨胳肌细胞OBRb mRNA的表达,明显改善细胞葡萄糖氧化,提示OBRbmRNA的高度表达能改善瘦素的作用。     

正钒酸钠对大鼠骨胳肌体外葡萄糖摄取的影响及其与cAMP …

钒酸盐可以独立或在胰岛素条件下促进骨胳肌、脂肪细胞的葡萄糖摄取 ,并成为其降血糖的机制之一。但众多研究显示钒酸盐具有增加细胞内ｃＡＭＰ含量的作用〔1,2〕,ｃＡＭＰ的增加可能抑制细胞对葡萄糖的摄取〔3〕。目前尚没有钒酸盐对骨胳肌ｃＡＭＰ含量影响的报道 ,也没有关于钒酸盐作用下糖摄取变化与ｃＡＭＰ关系的报道。本实验旨在了解钒酸盐对骨胳肌ｃＡＭＰ含量的影响和钒酸盐促进糖摄取过程中ｃＡＭＰ的作用。一、材料与方法1.动物分组与模型建立 :将 10～ 12周龄的雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠 (第三军医大学实验动物所提供 ) ,分成 (1)正…     

胰岛素抵抗、胰岛β细胞分泌功能对妊娠糖尿病发生的影响

妊娠糖尿病 (ＧＤＭ)往往是妊娠中晚期伴随胰岛素抵抗(ＩＲ)的发展而发生的 ,故经典的观点认为ＧＤＭ主要与ＩＲ有关。ＩＲ是指胰岛素靶组织 (如骨胳肌、脂肪组织、肝脏等 )对胰岛素敏感性降低 ,对葡萄糖的利用降低及抑制肝葡萄糖输出的作用减弱。妊娠期的ＩＲ与胎盘分泌具有拮抗胰岛素作用的激素有关。不过 ,单一的ＩＲ尚不能引起ＧＤＭ。因为妊娠中晚期ＩＲ均增加 ,但仅约 5 %发展为ＧＤＭ。提示ＧＤＭ妇女除了有ＩＲ ,胰岛素分泌可能也存在缺陷〔1〕。本研究通过观察不同糖耐量状态〔ＧＤＭ、糖耐量低减(ＩＧＴ)、糖耐量正常 (ＮＧＴ)〕…     

瘦素对胰岛β细胞胰岛素分泌及葡萄糖信号传递的影响

瘦素是近年发现的一种与肥胖症有关的激素。它通过与下丘脑特异受体结合 ,发挥维持机体正常体重的功能。同时瘦素对胰岛素分泌及胰岛素的外周作用亦存在影响 ,但结果不一 ,对其作用机制尚少有报道。我们研究瘦素对胰岛素分泌的急性与慢性影响 ,并通过观察细胞内游离钙、葡萄糖激酶 (ＧＫ)ｍＲＮＡ表达的变化 ,初步探讨瘦素影响胰岛素分泌的机制。一、研究方法1.胰岛 β细胞培养 :β ＴＣ3 细胞 (由美国爱因斯坦大学Ｅｆｒａｔ教授惠赠 )以含 15 %马血清、2 5 %胎牛血清 (ＰＢＳ)、10 0Ｕ/ｍｌ青霉素、0 1ｍｇ/ｍｌ链霉素的ＤＭＥＭ培养液 …     

瘦素对培养肝细胞的糖原合成及糖原合成酶mRNA表达的影响

瘦素是近年发现的肥胖基因 (ｏｂ基因 )的表达产物 ,由脂肪细胞分泌 ,具有促进产热及抑制食欲的功能 ,是机体维持正常体重不可缺少的激素。肥胖者表现高瘦素血症 ,且易发生糖代谢异常 ,是糖尿病发病的独立危险因素。本研究观察不同剂量的瘦素对肝细胞基础状态和胰岛素刺激下对糖原合成和糖原合成酶 (ＧＳ)的影响。一、材料和方法1.材料与试剂 :正常大鼠肝细胞株ＢＲＬ(上海细胞生物研究所 ) ,ＲＰＭＩ16 40培养基和ＭＥＭ培养基 (ＧｉｂｃｏＢＲＬ) ,瘦素 (Ｒ＆Ｄ) ,小牛血清和Ｗｈａｔｍａｎ滤纸 (天象人 ) ,Ｄ 〔Ｕ 14 Ｃ〕葡萄糖 (中国科…     

肿瘤坏死因子α对3T3-L1脂肪细胞摄取葡萄糖影响的研究

胰岛素抵抗 (ＩＲ)在 2型糖尿病的发生、发展及并发症的形成中起着非常重要的作用。肥胖是产生ＩＲ的一个重要原因 ,但其致病机制比较复杂。国外研究报道脂肪组织来源的ＴＮＦα过度表达影响胰岛素的生物学作用。为此 ,我们研究ＴＮＦα对脂肪细胞 (3Ｔ3 Ｌ1)葡萄糖摄取的影响。一、材料和方法1.材料 :(1)细胞株 :3Ｔ3 Ｌ1脂肪前体细胞由卫生部北京老年医学研究所细胞室赠送 ;(2 )试剂 :重组人ＴＮＦα(邦定公司 ) ;ＤＭＥＭ培养基 (ＧＩＢＣＯ公司 ) ;牛血清 (Ｈｙｃｌｏｎｅ公司 ) ;胎牛血清 (ＧＩＢＣＯ公司 ) ;3 异丁基 1 甲基黄嘌呤 (3…     

甲状腺激素促进骨骼肌葡萄糖转运

０８９甲状腺激素促进骨骼肌葡萄糖转运［英］／Ｗｅｉｎ－ｓｔｅｉｎＳｐ…／／Ｄｉａｂｅｔｅｓ。－１９９４，４３．－１１８５～１１８９甲状腺激素能促进入及动物骨胳肌基础葡萄糖转运，但对胰岛素刺激的葡萄糖转运研究结果不完全一致。为明确甲状腺激素对骨路肌葡萄...     

雌激素对小鼠长骨c-fos和c-jun表达的影响

雌激素在骨代谢 ,尤其在分解代谢中起着相当重要的作用 ,但有关雌激素对骨组织的确切作用机制迄今尚未完全阐明。本研究拟通过观察雌激素对体外培养小鼠胚胎长骨ｃ ｆｏｓ和ｃ ｊｕｎ表达的影响。一、材料和方法1.材料 :雌酚酮购自浙江仙居药厂。培养基ＢＧＪ、ＨＥＰＥＳ、胎牛血清、胃蛋白酶均购自Ｓｉｇｍａ公司。兔抗人ｃ ｆｏｓ多克隆抗体和兔抗小鼠ｃ ｊｕｎ多克隆抗体 (一抗 )购自美国ＳａｎｔａＣｒｕｚ公司 ,兔ＳＰＴＭ试剂盒 (含生物素化羊抗兔ＩｇＧ ,二抗 )购自美国Ｚｙｍｅｄ公司。隔水式恒温培养箱 ,旋转装置 ,超净工作台 ,Ｏ…     

正钒酸钠对大鼠骨胳肌体外葡萄糖摄取的影响及其与cAMP的关系

钒酸盐可以独立或在胰岛素条件下促进骨胳肌、脂肪细胞的葡萄糖摄取,并成为其降血糖的机制之一.但众多研究显示钒酸盐具有增加细胞内cAMP含量的作用[1,2],cAMP的增加可能抑制细胞对葡萄糖的摄取[3].目前尚没有钒酸盐对骨胳肌cAMP含量影响的报道,也没有关于钒酸盐作用下糖摄取变化与cAMP关系的报道.本实验旨在了解钒酸盐对骨胳肌cAMP含量的影响和钒酸盐促进糖摄取过程中cAMP的作用.     

骨胳肌葡萄糖载体研究进展

骨胳肌是全身利用葡萄糖的最主要组织,葡萄糖跨细胞膜转运是骨胳肌葡萄糖代谢的限速步骤.葡萄糖的跨膜转运是由位于细胞膜上的葡萄糖载体(glu-cose transporter,GLUT)介导并以易化扩散方式实现的.目前已发现5种葡萄糖载体,骨胳肌中存在2种,即GLUT_1和GLUT_(4).GLUT_1主要存在于红细胞、血脑屏障、胎盘等中,也存在于骨胳肌、心肌及脂肪组织中;GLUT_4则只存在于对胰岛素敏感的组织,如骨胳肌、心肌及脂肪组织中.这两种GLUT在骨胳肌细胞中的含量、分布及对葡萄糖的跨膜转运功能的改变,     

State of knowledge of helminth fauna of freshwater fishes of Poland

A total 89 fish and lamprey species has been recorded from Polish freshwater habitats. Twenty-seven of them (30.3%) have not been surveyed for parasitic helminthes. Some of the latter fishes are either rare or not easily accessible. Other live only in specific habitats in scattered localities. An important obstacle for studying parasite faunas of some fishes may be their status on an endangered species. Among the non-surveyed fishes, are those which have been relatively recently introduced to Poland or migrated there on their own. The present paper attempts to review all hitherto not studied helminthologically fish species, their habitats, localities and current protection status.     

高血压降压治疗目标的再认识

根据传统的高血压水平的定义,1993年WHO高血压治疗指南提出血压控制目标为<140/90mm Hg(1mm Hg=0.133kPa),但是并非所有患者都必须将血压降至同一水平,而应根据患者情况进行个体化治疗。Framingham进行的一项长达10～12年的心血管事件研究发现,第5年后,正常上限血压[收缩压(SBP