冠心病外周血中CX3CL1、CX3CR1的表达及临床意义

目的研究冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)外周血中趋化因子(CX3CL1)、细胞受体(CX3CR1)的表达及临床意义。方法选取2015年1月~2016年10月于沧州市中心医院冠心病患者195例记为观察组,其中接受冠脉造影合并经皮冠状动脉介入治疗(PCI)治疗者157例,单纯接受冠脉造影但未PCI治疗者38例。根据患者的病情分成稳定型心绞痛(SAP)组53例,不稳定型心绞痛(UAP)组56例,急性心肌梗死(AMI)组86例,其中ST段抬高型AMI(STEMI)48例、非ST段抬高型AMI(NSTEMI)38例。另选同期在医院接受健康体检的志愿者60例纳入对照组。酶联免疫ELISA法检测其外周血内CX3CL1水平,利用流式细胞术测定CD4~+CD28-CX3CR1~+T细胞受体的有关表达水平。结果观察组CX3CL1及CD4~+CD28-CX3CR1~+T水平均较对照组高(P均0.05)。UAP组及AMI组的CX3CL1及CD4~+CD28-CX3CR1~+T水平高于SAP组,且AMI组较UAP组也更高,差异均有统计学意义(P均0.05)。冠脉造影合并PCI治疗者术前和术后的外周血CX3CL1和CD4~+CD28-CX3CR1~+T水平均分别较冠脉造影但未PCI治疗者升高,且STEMI者较NSTEMI者更高,差异均有统计学意义(P均0.05)。患者外周血CX3CL1和CD4~+CD28-CX3CR1~+T呈正相关(r=0.794)。结论冠心病外周血中CX3CL1与CX3CR1的表达均明显上调,且二者之间存在正相关,临床上可对二者的表达水平进行监测,从而更加有效地服务临床诊治过程。     

Fractalkine-CX3CR1与肺疾病

Fractalkine(CX3CL1)是一种独特的趋化因子,是CX3C类惟一的代表,以膜结合型和可溶型两种类型存在,具有黏附和趋化双重作用,CX3CL1与其受体(CX3CR1)结合后可参与细胞的多种生理和病理过程,CX3CL1-CX3CR4表达与感染性肺疾病、肺动脉高压、慢性阻塞性肺疾病、哮喘及肺肿瘤等肺部疾病的发生、...     

冠心病患者血清hsCRP水平和外周血单个核细胞CX3CR1的表达及其临床意义

目的:探讨冠心病(CHD)患者血清高敏C反应蛋白(hsCRP)水平和外周血单个核细胞(PBMC)上CX3C趋化因子受体-1(CX3CR1)的表达及其意义。方法:选择2016年3月~2017年3月我院收治的153例CHD患者为研究对象,其中稳定型心绞痛(SAP)患者50例,不稳定型心绞痛(UAP)患者52例,急性心肌梗死(AMI)患者51例;根据Gensini积分评估的冠脉病变程度,153例CHD患者又被分为轻度病变组(43例)、中度病变组(56例)和重度病变组(54例)。选择同期45例体检健康者为健康对照组。测量比较各组血清hsCRP水平和PBMC上CX3CR1表达水平,分析血清hsCRP、CX3CR1表达水平与Gensini积分之间的相关性。结果:与健康对照组比较,SAP组、UAP组和AMI组的血清hsCRP水平[(2.36±1.67)mg/L比(5.07±2.16)mg/L比(13.59±5.23)mg/L比(27.46±8.24)mg/L]和PBMC上的CX3CR1表达[(0.48±0.25)%比(11.13±5.42)%比(20.56±9.73)%比(37.49±12.82)%]均显著升高,且AMI组UAP组SAP组,两两比较均有显著差异,P均=0.001。与轻度病变组比较,中度、重度病变组血清hsCRP水平[(6.31±1.83)mg/L比(17.42±6.58)mg/L比(35.26±9.74)mg/L]和PBMC上CX3CR1的表达[(6.59±1.43)%比(25.86±9.37)%比(42.57±13.28)%]均显著升高,且重度病变组的显著高于中度病变组,P均=0.001。直线相关分析显示,血清hsCRP水平、PBMC上的CX3CR1表达与Gensini积分呈显著正相关(r=0.768,0.897,P均=0.001)。结论:随着冠脉病变程度的加重,CHD患者血清hsCRP水平、CX3CR1表达显著升高,二者有望成为预测CHD疾病严重程度的参考指标。     

辅助性T淋巴细胞1、2、17在慢性乙型肝炎病毒感染状态中的变化

目的 了解慢性HBV感染中辅助性T淋巴细胞(Th)1、Th2、Thl7产生的主要细胞因子的表达,以反映这3种细胞的功能状态.方法 ELISA测定34例慢性乙型肝炎、31例肝硬化、26例原发性肝癌、22例慢性重型乙型肝炎患者及15例健康对照者m清中的1FN-γ、IL-4和IL-17水平,对数据进行t检验和Pearson相关分析.结果 IFN-γ/IL-4在慢性乙型肝炎患者(1.08±0.66)比健康对照者(2.60±0.60)降低(P＜0.01),在慢性重型乙型肝炎患者(4.81±0.87)比健康对照者升高(P＜0.01);IFN-γ/IL-17在慢性乙型肝炎(1.13±0.85,P＜0.01)、肝硬化(1.69±0.92,P=0.010)、肝癌(1.76±0.84,P=0.011)患者比健康对照者(2.66±0.70)降低,在慢性重型乙型肝炎患者(3.68±0.42)比健康对照者升高(P=0.004);IL-4/IL-17在肝硬化(0.72±0.38,P=0.026)、肝癌(0.63±0.19,P＜0.01)患者比健康对照者(1.04±0.23)降低.结论 慢性乙型肝炎患者IL-4的表达占优势;肝硬化、肝癌患者IL-17的表达占优势;慢性重型乙型肝炎患者IFN-γ的表达占优势.     

免疫性血小板减少症患者中B细胞活化因子及其受体与白细胞介素-21变化及相关性分析

目的:检测免疫性血小板减少症(ITP)患者中B细胞活化因子(BAFF)、BAFF受体(BAFF-R)及白细胞介素-21(IL-21)的表达,并进行相关性分析,进一步探讨其临床意义。方法:应用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测18例ITP患者和15例对照者血浆BAFF和IL-21的表达;应用流式细胞术检测CD19+细胞上BAFF-R的表达及CD3+CD8-IL-21+和CD3+CD8+IL-21+细胞的比例。结果:活动性ITP患者血浆BAFF和IL-21水平均明显高于对照者[(589.9±201.9)pg/ml∶(424.5±164.2)pg/ml,(156.8±112.0)pg/ml∶(82.0±27.0)pg/ml,均P0.05]。CD19+细胞均表达BAFF-R,且ITP患者中BAFF-R表达明显低于对照者[(45.1±10.4)∶(71.2±18.8),P0.01]。发现IL-21表达于CD3+CD8-细胞和CD3+CD8+细胞上,ITP患者中CD3+CD8-IL-21+细胞亚群比例、CD3+CD8+IL-21+细胞亚群比例均显著高于对照者[(4.3±1.0)%∶(2.9±1.4)%,(1.0±0.6)%∶(0.6±0.3)%,均P0.05]。血浆BAFF与IL-21存在正相关(P0.01),BAFF-R与IL-21存在负相关(P0.05)。结论:ITP患者中BAFF、IL-21表达均升高,且两者血浆水平之间存在正相关,BAFF-R与IL-21存在负相关,提示BAFF/BAFF-R信号通路与IL-21在ITP的发病中发挥重要作用。     

CX3CL1/CX3CR1轴在HIV感染者动脉粥样硬化性心脏病中的作用北大核心CSCD

动脉粥样硬化性心脏病目前是HIV/AIDS患者死亡的主要原因之一,也是HIV/AIDS患者慢病管理的重要一环。然而,HIV/AIDS患者动脉粥样硬化性心脏病的发生机制仍不完全清楚。研究表明,慢性持续性炎症是HIV/AIDS患者心血管疾病发生的主要诱因。CX3CL1/CX3CR1是重要的炎症性趋化因子,HIV/AIDS患者中CX3CL1/CX3CR1的表达上调,可通过细胞趋化作用、炎性反应等参与动脉粥样硬化(AS)的形成。因此,了解CX3CL1/CX3CR1在HIV/AIDS患者动脉粥样硬化过程中的作用机制有助于研发新的干预措施,延缓甚至预防HIV/AIDS患者动脉粥样硬化性心脏病的发生发展。本文将从CX3CL1/CX3CR1与动脉粥样硬化的关系,CX3CL1/CX3CR1在HIV/AIDS患者动脉粥样硬化性心脏病中的作用机制等方面进行综述。     

普伐他汀对血管平滑肌细胞CX3CR1表达及其介导的趋化作用的影响

目的探讨普伐他汀对体外培养大鼠血管平滑肌细胞趋化因子受体CX3CR1表达及其介导的趋化作用的影响。方法分别以γ干扰素（IFN-γ）和氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）作用于体外培养的大鼠血管平滑肌细胞,以免疫组化法观察CX3CR1表达。用普伐他汀进行干预,通过免疫组织化学法、ELISA法观察其是否会抑制IFN-γ诱导的CX3CR1表达。利用Transwell细胞趋化试验观察Fractalkine对体外培养平滑肌细胞的趋化作用,及普伐他汀对趋化作用的影响。结果 IFN-γ和ox-LDL均可诱导血管平滑肌细胞CX3CR1表达,与对照组比较有统计学差异。以普伐他汀对血管平滑肌细胞预作用一段时间后I,FN-γ诱导的CX3CR1表达受到显著抑制。Fractalkine对血管平滑肌细胞具有趋化作用,普伐他汀可显著抑制Fractalkine对血管平滑肌细胞的趋化作用。结论普伐他汀可抑制血管平滑肌细胞CX3CR1表达及其介导的趋化作用。     

急性心肌梗死患者CCL2/CCR2与血小板聚集率的关系

目的:研究急性心肌梗死(AMI)患者CC类趋化因子配体2 (CCL2)及其受体(CCR2)表达与血小板聚集率的关系。方法:选择我院冠心病监护病房收治的60例AMI患者作为AMI组,另60例体检健康者作为正常对照组。检测两组血浆CCL2水平,及冠脉血栓组织中血小板CCL2和CCR2蛋白表达和定位情况,比较正常对照组CCL2刺激前后活化的糖蛋白Ⅱb/Ⅲa复合物(PAC-1)和CD62p水平变化,及不同CCL2水平对血小板聚集率的影响。结果:与正常对照组比较,AMI组血浆CCL2 [(159.63±54.32)pg/ml比(218.79±76.34)pg/ml]、血小板CCL2 [(0.86±0.38)比(2.05±0.59)]和CCR2 [(0.93±0.42)比(2.67±0.51)]蛋白表达均显著升高(P均=0.001),CCL2/CCR2与CD62p在AMI患者中存在共定位表达关系。与CCL2刺激前比较,正常对照组经CCL2刺激后PAC-1 [(9.83±3.14)%比(18.96±4.25)%]和CD62p[(5.08±1.16)%比(8.33±1.89)%]表达均显著升高(P均=0.001)。当CCL2浓度≥100ng/ml时起,血小板最大聚集率均显著高于CCL2浓度为0时水平(P均=0.001)。结论:急性心肌梗死患者CCL2/CCR2表达与血小板聚集率关系密切,CCL2/CCR2可能通过影响血小板聚集率,参与疾病进展。     

IL-21诱导自身免疫性肝炎患者促炎症细胞因子分泌

目的:探讨IL-21在自身免疫性肝炎(AIH)发生过程中的免疫病理作用.方法:采集21例AIH患者和25例健康成人外周血样本, 使用流式细胞仪检测PBMC表面IL-21R的表达. 培养外周血单核淋巴细胞(PBMC),使用IL-21和抗CD3单抗刺激, 使用ELISA检测上清液中TNF-α、IFN-γ和IL-2水平.结果:AIH患者外周血中CD4+、CD8+ T细胞表达IL-21R水平比健康对照者显著升高(7.66%±2.37% vs 3.12%±0.76%, 9.42%±2.48% vs4.02%±0.89%, 均P<0.05). 体外培养PBMC,发现IL-21可显著诱导AIH患者PBMC分泌高水平的TNF-α、IFN-γ和IL-2( P<0.05).结论:AIH患者外周血T细胞表达IL-21R水平明显升高, 并诱导T细胞分泌高水平的促炎症介质, 提示IL-21参与了肝脏自身免疫损伤过程.     

调节性T细胞在原发性干燥综合征中的异常表达

目的 观察调节性T细胞在原发性干燥综合征(pSS)患者外周血和唇腺中的表达.方法 选取23例pSS患者和15名健康对照组,通过流式细胞术检测2组之间外周血调节性T细胞的表达情况,采用免疫磁珠分选外周血CD4+T细胞,提取叉头样转录因子(Foxp3)的mRNA,进行实时荧光定量的聚合酶链反应(PCR)检测.选取23例pSS患者和5例除外pSS的原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者,通过免疫组织化学方法分析2组之间唇腺组织中CD4+和Foxp3+T细胞的表达差异.采用t检验进行统计 学处理.结果 pSS组[(5±6)％]外周血Foxp3+T细胞的表达比健康对照组[(10±5)％]明显降低(t=2.190; P=0.036); Foxp3-mRNA的含量pSS组(0.08±0.05)与健康对照组(0.09±0.03)之间差异无统计学意义(t=0.695;P＞0.05);与PBC对照组唇腺中CD4+T细胞[(11±6)％]和Foxp3+T细胞[(3.2±1.1)％]比较,pSS患者唇腺中CD4+T细胞[(30±10)％]和Foxp3+T细胞[(10.7±5.8)％]表达增加(t=4.072,2.840;P均＜0.05).结论 调节性T细胞在pSS外周血表达降低,而在唇腺中的表达并未减少,二者之间表达不一致,Foxp3参与了pSS的发病.     

γ链细胞因子对慢性乙型肝炎患者CD8~+T细胞上TIM-3表达的调节

目的通过检测T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子(TIM-3)在慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血单个核细胞(PBMC)CD8+T细胞上的表达,探讨共用γ链细胞因子对CHB患者CD8+T细胞上TIM-3表达的影响。方法选取2014年1-5月在第四军医大学唐都医院传染科就诊的CHB初治患者15例,以及健康体检者8例。抽取两组全血,利用Ficoll密度梯度离心法分离出PBMC。分别给予γ链细胞因子白细胞介素(IL)2、IL-7、IL-15、IL-21和人抗CD3/CD28刺激,未刺激孔作为阴性对照。培养4 d后,用单克隆抗体染色,采用流式细胞仪检测CD8+T细胞上TIM-3的表达情况。计量资料比较采用成组t检验。结果与未刺激组相比,TIM-3在CD8+T细胞上表达如下:人抗CD3/CD28和IL-2、IL-15、IL-7刺激组显著升高,分别为(9.629±9.916)%,P=0.000 1;(3.817±2.694)%,P=0.000 6;(5.772±4.732)%,P=0.005 4;(3.560±2.045)%,P=0.030 2。IL-21刺激组表达虽有所增加,为(2.503±2.117)%,但差异无统计学意义,P=0.934 1。结论人抗CD3/CD28、γ链细胞因子中的IL-2、IL-7和IL-15都能够有效上调TIM-3在CHB患者CD8+T细胞上的表达,提示通过抑制它们不仅可以下调TIM-3的表达,而且可能会增强CHB患者体内CD8+T细胞的杀伤作用。     

Y链细胞因子对慢性乙型肝炎患者CD8+T细胞上TIM-3表达的调节

目的 通过检测T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子(TIM-3)在慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血单个核细胞(PBMC)CD8+T细胞上的表达,探讨共用γ链细胞因子对CHB患者CD8+T细胞上TIM-3表达的影响.方法 选取2014年1-5月在第四军医大学唐都医院传染科就诊的CHB初治患者15例,以及健康体检者8例.抽取两组全血,利用Ficoll密度梯度离心法分离出PBMC.分别给予γ链细胞因子白细胞介素(IL)2、IL-7、IL-15、IL-21和人抗CD3/CD28刺激,未刺激孔作为阴性对照.培养4d后,用单克隆抗体染色,采用流式细胞仪检测CD8+T细胞上TIM-3的表达情况.计量资料比较采用成组t检验.结果 与未刺激组相比,TIM-3在CD8+T细胞上表达如下:人抗CD3/CD28和IL-2、IL-15、IL-7刺激组显著升高,分别为(9.629 ±9.916)％,P=0.000 1;(3.817 ±2.694)％,P=0.000 6;(5.772±4.732)％,P=0.005 4;(3.560 ±2.045)％,P=0.030 2.IL-21刺激组表达虽有所增加,为(2.503 ±2.117)％,但差异无统计学意义,P=0.934 l.结论 人抗CD3/CD28、γ链细胞因子中的IL-2、IL-7和IL-15都能够有效上调TIM-3在CHB患者CD8+T细胞上的表达,提示通过抑制它们不仅可以下调TIM-3的表达,而且可能会增强CHB患者体内CD8+T细胞的杀伤作用.     

急性髓系白血病患者外周血表达髓系抑制细胞的临床研究

目的:检测急性髓系白血病(AML)患者不同阶段外周血髓系抑制细胞(MDSCs)的表达量,并探讨其与肿瘤相关巨噬细胞(TAM,CD206+)、调节性T细胞(Tregs,CD4+CD25+)的关系。方法:采用流式细胞术检测AML患者30例初诊未治及完全缓解(CR)后外周血表型为CD33+/CD11b+/HLA-DR-/lin-的MDSCs比例,同时检测TAM及Tregs表达水平,并以健康体检者30例作为对照,检测以上指标的变化。结果:1AML患者初诊未治期外周血MDSCs高度表达,显著高于对照者[(5.83±1.66)%∶(0.63±0.31)%,P0.05],经化疗达CR后其数值显著下降,均值为(1.03±0.20)%,CR前、后比较差异有统计学意义(P=0.03);2AML患者初诊未治期外周血表达CD206+的TAM高于对照者[(5.32±1.55)%∶(1.69±0.44)%,P=0.15],经治疗达CR后明显回落;3AML患者初诊未治期外周血表达CD4+CD25+的Tregs明显高于治疗后及对照者[(6.75±0.68)%∶(2.21±0.45)%∶(1.98±0.65)%),P0.01]。结论:MDSCs在AML不同阶段呈规律性表达,与TAM及Tregs表达趋势一致,提示在AML发生、发展过程中MDSCs可能参与了白血病细胞的免疫耐受及肿瘤逃逸机制。     

原发性胆汁性肝硬化患者外周血单个核细胞Toll样受体表达与调节性T细胞相关性分析

目的 探讨原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血单个核细胞(PBMC)Toll样受体2、4、9(TLR2,TLR4,TLR9)表达及PBMC中CD4+ CD25+调节性T细胞(Tregs)特点和影响因素.方法 采用流式细胞术检测PBC患者(52例)和健康对照者(22例)外周血PBMC中TLR2、4、9阳性细胞及Tregs比例,比较其在PBC患者和健康对照者中的差别并分析TLR与Tregs相关性.结果 PBC患者Tregs比例低于健康对照者[(1.53+1.33)vs(4.42±1.43),P＜0.0001],TLR4阳性细胞比例高于健康对照者[(36.95±3.53)vs(32.84±8.06),P=0.003];PBC患者Tregs比例与TLR9阳性细胞比例呈负相关(R2 =0.115,P=0.016),健康对照者Tregs比例与TLR2,4和TLR2,4,9联合表达阳性细胞比例呈负相关(R2=0.326,P=0.007;R2 =0.226,P=0.034).结论 PBC患者外周血PBMC中Tregs比例降低,TLR4表达升高,可能受肝硬化失代偿期腹腔感染的影响.     

miR-146a对原发性胆汁性肝硬化辅助性T细胞增殖调控作用的研究

目的 研究miR-146a对原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者T细胞增殖以及白细胞介素(IL)-2分泌的调控作用.方法 荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测20例PBC患者和20名健康个体外周血单个核细胞( PBMC)、辅助性T细胞、细胞毒性T细胞、B细胞和单核细胞内miR-146a的表达.将miR-146a表达载体和表达抑制体转染入PBC患者辅助性T细胞内,以抗CD3抗体和抗CD28抗体刺激辅助性T细胞,以CCK-8法检测辅助性T细胞增殖能力,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测培养基内IL-2水平,以RT-PCR法监测辅助性T细胞内miR-146a的表达.2组间的比较采用t检验.结果 PBC患者PBMC内miR-146a的表达(0.46±0.20)较健康个体(1.00±0.26)明显降低(t=7.47,P＜0.01).PBC患者辅助性T细胞和单核细胞内miR-146a的表达(分别为(0.33±0.13,0.56±0.11)较健康个体(分别为1.00±0.14,1.00±0.11))明显降低(t=6.15,4.97;P＜0.01或P＜0.05),但PBC患者与健康个体细胞毒性T细胞(0.98±0.15,1.00±0.12,t=0.22,P＞0.05)和B细胞(0.91±0.06,1.00±0.14；t=0.97,P＞0.05)内miR-146a的表达量之间的差异无统计学意义.抗CD3和抗CD28可以诱导辅助性T细胞表达miR-146a(刺激前:1.00±0.18；刺激后:9.12±2.05；t=8.81,P＜0.01).PBC患者辅助性T细胞较健康个体具有较强的增殖能力{PBC:0.35±0.06[吸光度(A值)]；健康个体:0.26±0.04(A值)；t=2.83,P＜0.05}以及释放IL-2[ PBC (686±109)pg/ml;健康个体(512±72) pg/ml；t=2.96,P＜0.05]的能力.miR-146a可以抑制PBC患者T细胞的增殖以及分泌IL-2的能力.结论 miR-146a可以负向调控活化的PBC患者辅助性T细胞增殖以及分泌IL-2的能力.PBC的发病机制可能与患者辅助性T细胞内miR-146a表达降低、对细胞增殖的抑制作用减弱有关.     

日本血吸虫感染小鼠肠系膜淋巴结Th17细胞的免疫应答

目的观察C57BL/6小鼠感染日本血吸虫后肠系膜淋巴结Th17细胞的免疫应答。方法 20只C57BL/6小鼠随机分为感染组和对照组,每组10只,感染组小鼠经腹部皮肤感染日本血吸虫尾蚴,每鼠(40±5)条。感染后5~6周分离小鼠肠系膜淋巴结的淋巴细胞,分别用抗小鼠CD3单克隆抗体(anti-CD3,1μg/ml)和抗小鼠CD28单克隆抗体(anti-CD28,1μg/ml)刺激,培养4 h后收集细胞,RT-PCR检测小鼠肠系膜淋巴结淋巴细胞中白细胞介素17(IL-17)和维甲酸相关孤独受体(ROR-γt)mRNA的转录水平;培养72 h后,ELISA检测细胞培养上清液IL-17和γ干扰素(IFN-γ)的含量。同时用佛波酯(PMA,10 ng/ml)和离子霉素(1μg/ml)刺激淋巴细胞5 h后,胞内细胞因子染色,流式细胞术检测Th17细胞的含量和其他细胞因子的产生。结果 ELISA检测结果显示,感染小鼠肠系膜淋巴结培养物上清液中IFN-γ[(214.3±62.6)pg/ml]和IL-17[(176.8±62.1)pg/ml]的含量明显高于健康小鼠[(46.7±13.9)和0 pg/ml](P<0.05)。RT-PCR检测结果显示,IL-17和ROR-γt mRNA转录水平也明显高于健康小鼠。感染小鼠肠系膜淋巴细胞CD4+T细胞中,Th17细胞的比例为(0.55±0.03)%,明显高于健康小鼠[(0.16±0.01)%](P<0.05)。在CD4+T细胞中,IL-17+IL-4+细胞占0.06%,IL-17+IFN-γ+和IL-17+IL-5+细胞各占0.02%,IL-17+IL-9+细胞占0.01%,未检测到IL-17+IL-10+和IL-17+Foxp3+细胞。结论日本血吸虫感染C57BL/6小鼠的肠系膜淋巴结能诱导Th17细胞产生。Th17细胞能分泌IL-4,及少量的IFN-γ、IL-5和IL-9,不分泌IL-10,也不表达Foxp3。     

1,25-(OH)_2维生素D3对再生障碍性贫血患者T细胞亚群的影响

目的:研究再生障碍性贫血(AA)患者外周血中的T细胞亚群变化与血清中1,25-(OH)_2维生素D3水平的关系。方法:利用流式细胞仪检测15例AA患者和25例健康对照者外周血T细胞亚群的变化,并用ELISA法检测AA患者和健康对照者血清中1,25-(OH)_2维生素D3的水平。结果:AA患者血清中1,25-(OH)_2维生素D3水平明显低于健康对照者[(35.5±11.8)pmol/L∶(51.8±12.6)pmol/L,P0.05]。与健康对照者比较,AA患者外周血中CD4在淋巴细胞中比率无明显变化[(31.8±4.7)%∶(33.6±4.2)%,P=0.217],但CD8在淋巴细胞中比率显著升高[(31.5±5.2)%∶(24.8±3.8)%,P0.01],故CD4/CD8比值降低(P0.01);其中在CD4~+细胞中,TH1/TH2比值较健康对照者明显升高[(4.09±1.05)∶(3.12±0.89),P=0.003]。结论:AA患者外周血清中1,25-(OH)_2维生素D3水平异常降低,可能影响AA患者CD4~+T细胞的分化。     

白细胞介素-38抑制原发性胆汁性胆管炎患者调节性T细胞向辅助性T17细胞转分化

目的观察原发性胆汁性胆管炎(PBC)患者中IL-38的水平, 评估IL-38对PBC患者调节性T细胞(Tregs)向辅助性T细胞(Th)17转分化的调控作用。方法入组46例PBC患者和24名健康对照者, ELISA测定血清IL-38、IL-35、IL-17水平, 流式细胞术检测PMBCs中CD4+CD25+CD127dim/-Tregs和CD4+IL-17A+Th17细胞比例, 实时定量PCR法测定转录因子叉头盒蛋白P3(FoxP3)和维甲酸相关孤核受体γt(RORγt)mRNA表达。纯化的Tregs使用重组IL-38刺激后与自体PBMCs共培养, 通过测定细胞增殖和上清细胞因子表达评估Tregs功能。将Tregs向Th17细胞极化培养, 并加入重组IL-38刺激, 通过检测CCR4、CCR6表达以及IL-17分泌、RORγt mRNA评估IL-38对Tregs向Th17表型转分化的影响。组间比较采用独立样本t检验或Mann-WhitneyU检验。结果 PBC组血清IL-38水平低于健康对照组, 差异有统计学意义[68.0(48.5, 96.7)pg/ml与89.6(58.0, 265...     

IL-21对HIV-1感染者外周血CD19~+IgD~+CD38~(hi)B细胞及IL-10表达水平的影响

目的探讨白细胞介素-21(IL-21)/信号传导与转录激活因子3(STAT3)信号通路对1型艾滋病病毒(HIV-1)感染者外周血中调节B细胞(Breg)和IL-10表达水平的影响及与HIV-1感染疾病进展的关系。方法 CD40L单独或联合IL-21刺激联合抗反转录病毒治疗(cART)前后的HIV感染者及健康对照者外周血单个核细胞(PBMC)20 min或120 h,用流式细胞术(FCM)检测CD19~+IgD~+CD38~(hi)B细胞的比例变化,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定培养上清中IL-21及IL-10水平,并用蛋白印迹试验(WB)结合FCM检测B细胞中STAT3的磷酸化水平。结果本次研究纳入的健康对照(HC)、未经治疗的HIV-1感染者及cART48周的HIV-1感染者各15例。相对于健康对照组,HIV-1感染者CD4~+T淋巴细胞数量显著降低(P0.000 1),cART后显著升高(P=0.035 7);HIV-1感染者血浆中病毒载量为(5.025±0.952 6)Lg10拷贝/mL,cART后其病毒载量被有效抑制;HIV-1感染者Breg的比例(P=0.003 6)及IL-10水平(P=0.003)显著上调,且cART前后HIV-1感染者的IL-10水平与IL-21均呈正相关[(r=0.582 3,P=0.022 5),(r=0.578 9,P=0.023 7)];IL-21联合CD40L刺激能诱导HIV-1感染者STAT3磷酸化(P=0.003 9),进而上调其CD19~+IgD~+CD38~(hi)B细胞的比例(P=0.034 8)及IL-10的表达水平(P=0.015 3)。结论 HIV-1感染导致CD19~+IgD~+CD38~(hi)B细胞比例及IL-10表达水平均上调,且上调的IL-10水平与IL-21水平呈正相关。IL-21可能通过STAT3信号通路调控HIV-1感染者Breg细胞的分化及IL-10的分泌。     

羟氯喹抑制紫外线诱导的系统性红斑狼疮CD4+T细胞白细胞介素-10和干扰素-γ的表达

目的 研究紫外线对系统性红斑狼疮(SLE)CD4+T细胞因子的影响和羟氯喹的抑制作用.方法 选择SLE 30例,健康对照10名.磁珠分选SLE患者和健康人的CD4+T细胞,紫外线311 nm窄谱中波紫外线暴露,加入羟氯喹共培养,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测培养上清白细胞介素(IL)-10和干扰素-γ的表达水平.采用t检验进行统计学分析.结果 SLE患者CD4+T细胞IL-10表达高于健康对照[(27±4)和(18±3) pg/ml,P=0.011];经45、100 mJ/cm2紫外线暴露后,SLE活动患者CD4+T细胞IL-10表达升高[(27±4)和(77±42) pg/ml,(40±18)和(77±42) pg/ml,P=0.022,P=0.048],经100 mJ/cm2紫外线暴露后,活动患者CD4+T细胞IL-10表达高于稳定患者[(77±42)和(24±4)pg/ml,P=0.029];羟氯喹降低SLE活动患者CD4+T细胞IL-10和干扰素-γ表达[(2.6±4.0)和(17.9±2.3)pg/ml,P=0.018,P=-0.017)];羟氯喹降低经45,100 mJ/cm2紫外线暴露后SLE活动患者T细胞IL-10表达[(40±18)和(22±6)pg/ml,(77±42)和(21±5) pg/ml,P=0.037,P=0.04];羟氯喹降低经100 mJ/cm2紫外线暴露的SLE活动和稳定患者T细胞干扰素-γ表达[(18±3)和(13±14) pg/ml,(19±7)和(12±5) pg/ml,P=0.013,P=0.049].结论 紫外线加重SLE患者体内Th1/Th2细胞因子的比例失衡;羟氯喹抑制了紫外线诱发SLE患者干扰素-γ和IL-10的表达.

Abstract：

Objective To explore the role of hydroxychloroquine (HCQ) in ultraviolet B (UVB)- induced expression of interleukin (IL)-10 and interferon (IFN)-γ from CD4+T cells in patients with systemic lupus erythematosus (SLE). Methods Thirty patients with SLE and 10 healthy controls were enrolled in the study. CD4+ T cells were isolated using magnetic beads from SLE patients and healthy controls. HCQ was added in culture media before and after irradiation with UVB 311 nm narrow band ultraviolet B (NB-UVB). The levels of IL-10 and IFN-γ in the supernatant were detected with enzyme-linked immunosorbent (ELISA). Comparisons between groups were performed by t-test. Results The level of IL-10 was higher in SLE patients [(27±4) pg/ml] than that in healthy controls [(18±3) pg/ml, P=0.011]. After exposure of CD4+T cells to UVB in 45 or 100 mJ/cm2 dosages, the level of IL-10 was increased significantly in patients with active disease (P=0.022, P=0.048). After exposure of CD4+T cells to UVB in 100 mJ/cm2 dosages, the levels of IL-10 was higher in patients with active disease [(77±42) pg/ml] than patients with stable disease [(24± 4) pg/ml, P=0.029]. When CD4+ T cell were cultured with HCQ, IL-10 and IFN-γ levels in patients with active disease [(2.6±4.0), (17.5±2.3) pg/ml] were decreased significantly (P=0.018, P=0.017). HCQ reversed UVB-induced IL-10 expression in active SLE patients after exposure of CD4+T cells to UVB in 45 or 100 mJ/cm2 dosages (P=0.037, P=0.04). HCQ also reversed UVB-induced IFN-7 expression in active SLE patients and stable SLE patients after exposure to CD4+T cells with UVB in 100 mJ/cm2 dosages (P=0.013, P= 0.049). Conclusion UVB can aggravate the imbalance of Th1 and Th2 cytokines. HCQ inhibits UVB-induced IL-10 and IFN-7 expression of CD4+T cells in patients with SLE, especially in patients with active disease.