丹参注射液对重症急性胰腺炎大鼠胰腺NF-κB活化的影响

目的观察重症急性胰腺炎（SAP）大鼠胰腺核因子-κB（NF-κB）活性的变化及丹参注射液对其的影响,从而探讨丹参注射液治疗急性胰腺炎的机理。方法将大鼠随机分为正常对照组、SAP组和丹参治疗组3组,采用腹腔和皮下同时注射L-精氨酸的方法制成大鼠急性胰腺炎模型,分别测量血浆、腹水淀粉酶,并采用免疫组化方法测定胰腺组织中NF-κB的表达。结果与正常对照组比较,SAP组血浆、腹水淀粉酶水平明显增高,胰腺组织NF-κB表达强度升高（P〈0.05）;丹参治疗组上述指标与SAP组相比均有明显下降（P〈0.05）,且胰腺的病理损伤减轻,存活时间更长。结论丹参注射液可能通过降低胰腺组织中NF-κB的表达而对急性胰腺炎的治疗发挥作用。     

花姜酮通过NF-κB保护重症急性胰腺炎大鼠胰腺损伤

目的探讨花姜酮对重症急性胰腺炎大鼠胰腺损伤可能的保护作用,为重症急性胰腺炎防治提供理论依据。方法 70只Wistar大鼠,雄性,按照随机数字表法随机分为4组,即正常对照组(NC组,n=10)、重症急性胰腺炎组(SAP组,n=40)、花姜酮预处理组(ZER组,n=10)及花姜酮药物对照组(ZER-CON组,n=10),SAP组又分为建模后1、3、6及12 h 4个时间点组(n=10)。SAP组及ZER组大鼠采用胆胰管逆行注射5%硫磺胆酸钠溶液(0.1 m L/100 g)制备SAP模型,NC组及ZER-CON组则向胆胰管注入等量生理盐水。ZER组及ZER-CON组于模型制备前30 min由股静脉穿刺给予10 mg/kg的花姜酮溶液。NC组、ZER组及ZER-CON组于建模后12 h处死大鼠,SAP组分别于建模后1、3、6及12 h处死大鼠。分别观察各组大鼠的死亡情况,测定其腹水量、血清淀粉酶(AMY)和磷脂酶A2水平;光镜下观察胰腺组织的病理学改变;采用免疫组化法检测各组大鼠胰腺组织中核因子-κB(Nuclear Factor-kappa B,NF-κB)p65的表达。结果 ZER-CON组大鼠的死亡情况、腹水量、AMY及磷脂酶A2水平和胰腺组织的病理学评分以及NF-κB p65蛋白表达与NC组相近,其差异均无统计学意义(P0.05);SAP组上述指标均明显高于NC组(P0.05)。ZER组组大鼠的上述指标与SAP组相比明显降低(P0.05),但均高于NC组(P0.05)。结论应用花姜酮可以减少SAP大鼠的死亡,减少腹水量,减轻胰酶及胰腺病理学损伤,同时可降低胰腺NF-κB p65蛋白的表达。提示花姜酮可能通过核因子NF-κB途径对SAP大鼠胰腺起保护作用。     

甘遂对重症急性胰腺炎大鼠核因子-κB活化的影响

目的：观察重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis ,SAP) 大鼠胰腺核因子κB ( nuclear factor-κB ,NF-κB) 的活性变化及甘遂对其的影响,以探讨甘遂治疗SAP的作用机制。方法：将SD大鼠随机分为假手术组（S组）、重症急性胰腺炎组（SAP组）、甘遂治疗组（K组），每组40只。分别在手术后2，6，12，24h处死大鼠后检测血清淀粉酶水平、胰腺组织核内NF-κB/p65蛋白表达、胰腺组织光镜检查、各组术后72h死亡率。结果： （1）血清淀粉酶：与S组比较，SAP组2，6，12，24h均显著升高（P<0.01）;K组与SAP组比较，除2h外，其余各时间点均有显著降低（P<0.01），但仍高于对照组（P<0.01）;（2）核内NF-κB/p65蛋白表达：S组表达量极弱;SAP组2，6，12h表达均显著高于S组（P<0.01），K组6，12h表达量显著低于SAP组（P<0.01）;（3）光镜观察：S组胰腺组织结构正常，SAP组胰腺组织有出血坏死及炎性细胞浸润， K组胰腺组织损害较SAP组减轻。（4）72h死亡率：S组死亡率为0%;K组为12.5%，两者均明显低于SAP组（62.5%）（P<0.05）。结论：甘遂能有效治疗SAP，其机制可能是通过减轻胰腺组织中NF -κB 活化而发挥治疗作用。     

栗精胺对重症急性胰腺炎大鼠肾脏损伤保护作用的研究

目的探讨栗精胺(CS)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肾损伤的保护作用及其可能的分子机理。方法将24只SPF级成年雄性SD大鼠随机分为假手术组(SO组)、SAP组和CS组,每组8只大鼠。采用逆行胰胆管注射5%牛磺胆酸钠溶液(1 mL/kg)的方法建立大鼠SAP肾损伤模型。CS组大鼠在SAP建模后立即经腹腔注射CS生理盐水溶液(200 mg/kg)。SO组大鼠开腹后仅翻动十二指肠及胰腺后关腹。建模后12 h处死大鼠,采集3组大鼠的血清、胰腺及肾脏组织标本。采用全自动多功能生化分析仪检测大鼠血清中的尿素氮(BUN)水平、肌酐(Cr)水平及淀粉酶(AMY)活性;采用HE染色并在光镜下观察大鼠胰腺及肾脏组织的病理学改变;采用免疫组织化学染色法检测3组大鼠肾脏组织中核因子-κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)及含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)蛋白的表达。结果 (1)在胰腺及肾脏病理损伤程度方面,SAP组大鼠较SO组严重,但CS组大鼠却较SAP组有所减轻。(2)与SO组比较,SAP组大鼠的血清Cr水平、BUN水平及AMY活性均较高(P0.05);与SAP组比较,CS组大鼠的血清Cr水平、BUN水平及AMY活性均较低(P0.05)。(3)与SO组比较,SAP组大鼠肾脏组织中NF-κB、TNF-α、ICAM-1及Caspase-3蛋白的积分光密度值(IOD值)均较高(P0.05);与SAP组比较,CS组大鼠肾脏组织中NF-κB、TNF-α、ICAM-1及Caspase-3蛋白的IOD值均较低(P0.05)。结论 CS可减轻SAP大鼠的急性肾损伤,其机制可能是通过抑制NF-κB的活化,下调下游炎性介质如TNF-α和ICAM-1蛋白的表达,以及抑制凋亡蛋白Caspase-3的表达来发挥保护作用的。     

大黄素对重症急性胰腺炎大鼠核因子-кB的影响

目的 观察大黄素对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠核因子-кB(NF-кB)的影响,探讨大黄素治疗SAP的作用机制.方法 胰胆管逆行注射牛磺胆酸钠建立大鼠SAP模型.将雄性Wistar大鼠随机分为SAP模型组、大黄素干预组(E1组)及正常对照组(Sham组).观测各组不同时间点(注射牛磺胆酸钠后3、6、12 h)血清淀粉酶、肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-6的含量,胰腺病理组织学评分,免疫组织化学方法 检测各组胰腺组织的核因子(NF)-кB的表达.结果 与SAP组比较,EI组各时间点(3、6、12 h)的病理学评分(13.41±2.14比18.42±3.14比15.89±1.98)、血清淀粉酶(U/L)(3634.2±247.8比4758.5±305.2比4687.8±345.8)、TNF-α(g/L)(2.24±0.47比2.87±0.87比2.76 ±0.82)和IL-6(g/L)(2.14±0.34比2.83±0.44比2.71±0.37)明显降低(P＜0.05),NFKB p65阳性表达率(0.31±0.06比0.44±0.09比0.33±0.08)下降(P＜0.05).各时间点SAP大鼠胰腺组织NF-κB p65的阳性率随血清TNF-α及IL-6含量变化.结论 大黄素可能通过胰腺组织NF-κB而调控血清炎症因子含量,以降低SAP大鼠血淀粉酶,发挥治疗作用.     

七叶皂苷对大鼠重症急性胰腺炎NF-κB表达的影响

目的 观察重症急性胰腺(severe acute pancreatitis,SAP)大鼠胰腺核因子-κB(NF-κB)的活性、血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平及七叶皂苷对其的影响.探讨七叶皂苷治疗SAP的作用机制.方法 96只雄性Wistar大鼠,质量250～300 g,随机分为3组(假手术组、SAP组、七叶皂苷治疗组).每组32只.各组分别在术后第3,6和12小时各处死8只大鼠检测胰腺组织NF-κB活性、血清TNF-α水平及胰腺病理评分,各组剩余8只大鼠观察术后24 h死亡率.结果 SAP组与假手术组比较,胰腺组织NF-κB活性增强(p＜0.05),血清TNF-α水平明显升高(P＜0.05),七叶皂苷治疗组胰腺组织NF-κB活性、血清TNF-α水平、胰腺病理损害、24 h大鼠死亡率明显低于SAP组(P均＜0.05).结论 七叶皂苷可以在体内抑制NF-κB在胰腺组织中的活化,减少细胞因子TNF-α过度释放.可能是其治疗SAP的作用机制之一.     

蛋白酶体抑制剂MG132减轻大鼠移植胰腺缺血再灌注损伤的作用

目的 研究蛋白酶体抑制剂MG132减轻大鼠移植胰腺缺血再灌注(IR)损伤的作用及其机制.方法 采用随机数字表法将SD大鼠分为假手术组、IR组和MG132组,IR组和MG132组建立同系大鼠胰腺十二指肠移植模型.分别于再灌注后1、3、6h,检测受鼠血清淀粉酶含量,光镜下观察胰腺组织病理变化,采用蛋白质印迹法测定胰腺组织中核因子-κB(NF-κB) P65蛋白的水平,采用免疫组织化学和逆转录聚合酶链反应法分别检测胰腺组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和细胞间黏附因子-1(ICAM-1)的表达情况.结果 与假手术组比较,IR组再灌注后相同时点的组织病理损伤明显较重,血清淀粉酶含量、胰腺组织中P65蛋白水平以及TNF-α和ICAM-1水平均明显上升;与IR组比较,MG132组相同时点的组织损伤减轻,血清淀粉酶含量、胰腺组织中P65蛋白水平及TNF-α和ICAM-1水平均明显降低.结论 MG132能够减轻大鼠移植胰腺的IR损伤,其机制可能是通过抑制NF-κB的活化,从而下调TNF-α和ICAM-1的表达.     

氢饱和生理盐水对重症急性胰腺炎肺损伤的作用及对NOX2/ROS/NF-κB 通路的影响

目的:探讨氢饱和生理盐水(HRS)对大鼠重症急性胰腺炎(SAP)肺损伤的影响及其与NOX2/ROS/NF-κB通路的关系。方法:72只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、SAP模型组(SAP组)、SAP模型+HRS治疗组(HRS组);SAP模型以胆胰管逆行注射5%牛磺胆酸钠制备;术后5min,HRS组经尾静脉注射HRS(6mL/kg),假手术组与SAP组以等体积生理盐水代替;术后3、12、24h分批剖杀大鼠,胰腺和肺组织行病理学检查,以及血清胰酶水平、肺组织丙二醛(MDA)与超氧化物歧化酶(SOD)水平、肺组织NOX2、NF-κB及TNF-α表达水平检测。结果:与假手术组比较,SAP组和HRS组大鼠各时间点均出现明显的SAP与肺损伤表现,表现为胰腺、肺组织病理学评分增加,血清胰酶水平升高,肺组织MDA含量升高、SOD活性降低(均P0.05),但除胰酶水平外(均P0.05),HRS组各损伤指标均明显低于SAP组(均P0.05);术后12h免疫组化结果显示,SAP组和HRS组大鼠肺组织中NOX2、NF-κB和TNF-α的表达均较假手术组升高(P0.05),HRS组上述指标均较SAP组明显低于SAP组降低(均P0.05)。结论:HRS有减轻SAP大鼠肺损伤的作用,机制可能与抑制NOX2/ROS/NF-κB通路活性有关。     

核转录因子抑制剂对重症急性胰腺炎的影响

目的 探讨核转录因子（NF-κB）抑制剂对重症急性胰腺炎（SAP）的影响。方法 将72只Wistar大鼠随机均分为6组：sham组、SAP组、吡咯烷二硫氨基甲酸酯（PDTC）I组（100mg／kg体重）、PDTCⅡ组（25mg／kg体重）、PDTCⅢ组（10mg／kg体重）和丹参干预组。各组于造模6h后，测定血清淀粉酶、脂肪酶、TNF-α和IL-10含量；检测胰腺细胞NF-κB激活水平及凋亡情况；对胰腺组织进行病理学评分。结果 与SAP组比较。PDTC干预各组和丹参组内的血清淀粉酶、脂肪酶和TNF-α含量、胰腺组织NF-κB活性水平和病理学评分明显降低（P〈0．05），胰腺细胞凋亡指数显著升高（P〈0．05），血清IL-10含量无显著性变化；PDTC各组和丹参组组间相互比较，各项指标差异无统计学意义。结论 应用NF-κB抑制剂可有效降低SAP血清中TNF-α的水平，而不影响IL-10含量；减少胰酶及炎症因子的持续释放；促进胰腺细胞凋亡；改善SAP病情。     

花姜酮对重症急性胰腺炎大鼠肝损伤的保护作用及机制

目的 观察花姜酮对重症急性胰腺炎大鼠肝损伤的作用,并探讨其机制.方法 雄性56只Wistar大鼠,随机分为4组.正常对照组(SO组,n=8);重症急性胰腺炎组(SAP组)按时间分1、3、6、12h亚组(n =8);花姜酮预处理组(ZER组,n=8);花姜酮药物对照组(ZER-CON组,n=8).留取血清,固定及冻存胰腺及肝脏.血清检测血淀粉酶(AMY)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)以及磷脂酶A2(PLA2)水平,病理学检测胰腺与肝脏评分.提取各组大鼠新鲜肝脏组织核蛋白行凝胶电泳迁移实验(EMSA),免疫组织化学法检测各组大鼠肝脏核因子-κB p65(NF-κBp65)表达水平,提取各组大鼠肝脏组织浆蛋白检测白细胞介素-1β(IL-1β)水平.结果 SAP组大鼠血清AMY、ALT、AST、PLA2以及胰腺病理评分、肝脏病理分级较正常与药物对照组升高明显(P＜0.05);使用花姜酮后上述指标有明显下降(P＜0.05).SO、SAP 1、3、6、12 h、ZER、ZER-CON组、AMY[(U/L)1 485.6±130.5、2865.5±536.9、4 858.0±707.3、5702.3±885.2、7072.6±868.2、4 367.3±811.4、1 833.4±216.9],PLA2[(nmol/min· ml) 493.6±86.1、522.5±102.3、992.3±97.8、1 144.7±94.4、825.9±87.8、653.5±92.3、552.4±86.2],ALT[(U/L) 87.3±8.5、92.7±10.4、166.9±21.7、188.3±26.6、267.4±30.4、179.4±27.9、96.6±15.0],AST[(U/L) 103.5±11.7、230.8±48.4、381.0 ±76.0、510.7±84.3、484.1±74.5、317.1±66.2、120.3±35.1],胰腺病理评分[(分)0.40±0.39、3.45±0.93、6.70±1.40、9.35±1.68、10.85±1.89、6.96±1.21、0.52 ±0.15].SAP组大鼠肝脏NF-κB水平以及活性、IL-1β水平较正常组与药物对照组升高明显(P＜0.05),在使用花姜酮干预后,上述指标均有明显下降(P＜0.05).结论 花姜酮可以通过减少重症急性胰腺炎大鼠肝脏组织NF-κB蛋白表达,并进一步抑制下游炎性分子IL-1β,对胰腺炎肝损伤起到保护作用.     

罗格列酮对重症急性胰腺炎大鼠胰腺组织STAT1的影响

目的 探讨罗格列酮对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠胰腺组织信号转导与转录激活因子1(STAT1)的影响.方法 将54只Wistar大鼠随机分为假手术组(S0组)、重症急性胰腺炎组(SAP组)、罗格列酮预处理组(ROSI组),每组18只.逆行胆胰管注射5%牛磺胆酸钠制备SAP模型.ROSI组造模前30 min经股静脉注射罗格列酮(6 mg/kg),然后制备SAP模型.术后3、6、12 h心脏取血处死大鼠,每个时间点6只,测定血清淀粉酶水平,胰腺组织病理切片HE染色后评分;免疫组织化学方法检测胰腺组织磷酸化STAT1蛋白的表达情况;RT-PCR测定胰腺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA的表达水平.结果 SAP组各时间点磷酸化STAT1蛋白、TNF-α mRNA的表达水平、血清淀粉酶及胰腺组织光镜下病理评分较SO组显著升高(P<0.01);ROSI组各时间点上述指标较SAP组降低(P<0.05),但较SO组增高(P<0.05).结论 SAP时胰腺组织STAT1活化;罗格列酮对SAP大鼠具有保护作用,其机制可能是通过抑制Janus激酶-信号转导与转录激活因子通路来抑制其下游炎性介质的产生.     

姜黄素对大鼠重症急性胰腺炎防治作用及其机制

目的:探讨姜黄素对重症急性胰腺炎(SAP)的防治作用及其机制。方法:将54只SD大鼠随机均分为:假手术组,SAP模型组(SAP组),姜黄素预处理+SAP组(姜黄素预处理组)。用5%牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射法制作SAP模型,分别于术后3,6,12 h测各组腹水量和以下各项观察指标:血清淀粉酶(AMY),IL-6,TNF-α水水平;胰腺的病理学损伤和评分和胰腺组织NF-κB p65和Toll样受体4(TLR4)的表达。结果:与假手术组比较,SAP组和姜黄素预处理组的腹水量、血清AMY,IL-6,TNF-α水平在各时间点均明显升高(均P<0.01),但姜黄素预处理组的以上各项指标的升高程度均不如SAP组明显,特别是在6 h和12 h时间点,两者间差异均有统计学意义(均P<0.05);除假手术组外,SAP组和姜黄素预处理组均呈典型SAP病理改变,但姜黄素预处理组各时间点的病理改变均较SAP组为轻,且姜黄素预处理组Schmidt评分在6 h和12 h时间点明显低于SAP组(均P<0.05);SAP组和姜黄素预处理组各时间点胰腺组织NF-κB p65和TLR4蛋白表达均较假手术组明显增加,但姜黄素预处理组两者的表达低于SAP组。结论:姜黄素对SAP有防治作用,其作用机制可能是其抑制NF-κB及TLR4信号通路的激活,缓解胰腺炎症,从而减轻SAP的病理损伤。     

p38MAPK信号途径抑制剂SB203580对大鼠重症急性胰腺炎胰腺组织中TNF-α表达的调控作用

目的研究p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号转导通路在大鼠重症急性胰腺炎(SAP)胰腺组织中的变化规律,探讨p38 MAPK特异性抑制剂SB203580对SAP发展和胰腺组织中TNF-α表达水平的影响。方法采用胰胆管内注射牛磺胆酸钠的方法诱导大鼠重症急性胰腺炎模型,使用SB203580抑制P38MAPK信号传导通路,通过监测大鼠血清淀粉酶(Serum amylase,AMS)和TNF-α的表达检测,观察P38MAPK抑制剂SB203580对大鼠SAP发展和TNF-α表达水平的影响。结果 SAP组TNF-α的表达明显高于对照组。胰腺组织TNF-α的表达水平随胰腺炎病情的进展而升高(P<0.05),使用p38MAPK抑制剂可以显著降低TNF-α的表达(P<0.05)。结论 SB203580可能通过抑制胰腺组织p38 MAPK信号通路进而降低TNF-α的活性,减少炎症介质的释放,达到减轻胰腺损伤,治疗急性胰腺炎的目的。     

槲皮素对重症急性胰腺炎相关性肺损伤肺泡中性粒细胞TLR4/NF-κB通路的影响

目的探讨槲皮素(Quercetin)对大鼠重症急性胰腺炎相关性肺损伤(SAP-LI)肺泡中性粒细胞(PMN)TLR4/NF-κB信号通路的影响。方法 48只成年SD大鼠随机分为4组,每组12只,假手术(Sham)组、重症急性胰腺炎(SAP)组、槲皮素低剂量组(50 mg/kg)及槲皮素高剂量组(100 mg/kg)。逆行性胰胆管注射5%牛磺酸钠建立SAP大鼠模型。槲皮素组在胰腺炎模型基础上予槲皮素干预,Sham组、SAP组给予等量生理盐水。计算肺湿/干重比(W/D)和肺通透指数(LPI),经支气管肺泡灌洗分离收集PMN,ELISA检测PMN培养上清液中TNF-α含量,RT-PCR检测PMN TLR4 m RNA表达,Western blotting检测PMN TLR4和NF-κB p65的表达。结果与Sham组比较,其余三组W/D、LPI及TNF-α含量明显升高,TLR4 m RNA及其蛋白和NF-κB p65蛋白表达上调;与SAP组比较,槲皮素处理组W/D、LPI及TNF-α含量降低,TLR4 m RNA及其蛋白和NF-κB p65蛋白表达下调。结论槲皮素减轻SAP引起的肺损伤可能与其抑制PMN TLR4/NF-κB信号通路活化有关。     

NF-κB圈套技术在小鼠重症急性胰腺炎并发肺损伤中的实验研究

目的 探讨NF-κB圈套技术对小鼠重症急性胰腺炎(SAP)肺损伤的影响.方法 36只BALB/c雌性小鼠随机分为正常对照组、SAP组、NF-κB decoy处理组、错配decoy处理组,每组9只.除正常对照组外,其他组采用雨蛙素联合脂多糖改良法制备小鼠SAP肺损伤模型.制模12 h后处死,采用EMSA法、Western印迹法检测肺脏NF-κB活性和P65蛋白含量的变化;采用逆转录-聚合酶联反应(RT-PCR)法测定肺脏TNF-α、ICAM-1、IL-1 mRNA表达;同时行肺脏病理学损伤评分.结果 12 h后急性胰腺炎组和错配decoy处理组NF-κB活性较正常对照组和圈套技术处理组显著增高;然而除正常对照组外,其他三组间细胞核中NF-κB P65蛋白含量表达没有显著差异;正常对照组下游调控因子TNF-α(0.362±0.043)、ICAM-1(0.198±0.065)、IL-1 mRNA(0.321±0.089)低表达;急性胰腺炎组和错配decoy处理组下游调控因子TNF-α(1.131±0.066;1.031±0.058)、ICAM-1(0.365±0.051;0.385±0.050)、IL-1(0.869±0.110;0.961±0.061)mRNA水平升高(P<0.05);圈套技术处理组下游调控因子TNF-α(0.329±0.059)、ICAM-1(0.186±0.086)、IL-1(0.318±0.136)mRNA水平较上述两组降低(P<0.05).急性胰腺炎组和错配decoy处理组,肺脏组织水肿、炎性浸润方面的病理损伤评分高于正常对照组和圈套处理组(P<0.05).结论 应用圈套技术抑制NF-κB的活性及减少下游炎症介质的表达,可减轻SAP并发的肺组织损伤.     

低分子量肝素治疗重症急性胰腺炎的实验研究

目的　探讨低分子量肝素 (LMWH )治疗重症急性胰腺炎的机理。方法　比较假手术组(S组 )、重症急性胰腺炎组 (SAP组 )和LMWH治疗组 (H组 )各组死亡率、血清淀粉酶、IL 6、胰腺组织NF κB活性和 p65mRNA表达程度。 结果　H组死亡率、血清淀粉酶和IL 6明显低于SAP组 (P<0 .0 0 1)。H组胰腺组织NF κB活性和 p65mRNA表达程度明显弱于SAP组。 结论　LMWH可能通过抑制NF κB的活性 ,从而减少炎症介质的释放 ,减轻SAP的程度。     

CO_2气腹对SD大鼠重症急性胰腺炎炎性细胞因子的表达及胰腺病理变化的影响

目的探讨腹腔镜手术时CO2气腹对SD大鼠重症急性胰腺炎(severe acute pancretitis,SAP)胰腺局部病变及血淀粉酶、炎症细胞因子IL-6、TNF-α、C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)及核转录因子-κB(NF-κB)的影响。方法雄性SD大鼠50只,随机分为3组:Ⅰ组20只(CO2组,5%牛磺胆酸钠胆胰管逆行注射方法建立SAP动物模型后,腹腔镜气腹机向大鼠腹腔内注入CO2,压力12mm Hg,维持30min);Ⅱ组20只(开腹组,建立SAP动物模型后关腹,不充入CO2);Ⅲ组10只(对照组,仅开腹翻动胰腺后关腹)。各组均于术后2.5h处死动物,测定血淀粉酶、IL-6、TNF-α及CRP的变化,进行胰腺组织病理学检查,并用免疫组化法检测NF-κB的变化。结果Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组病理组织学评分值分别为(1.90±0.37)分、(1.75±0.26)分、(0.00±0.00)分,差异有统计学意义(F=365.91,P=0.000),但Ⅰ组与Ⅱ组比较,差异无统计学意义(q=2.372,P0.05)。与Ⅲ组相比,Ⅰ组和Ⅱ组血清淀粉酶、IL-6、TNF-α均明显升高(P0.05)。与Ⅱ组相比,Ⅰ组IL-6降低(P0.05),淀粉酶明显升高(P0.05),Ⅰ组与Ⅱ组TNF-α、CRP差异无统计学意义(P0.05)。Ⅰ、Ⅱ组与Ⅲ组NF-κB阳性表达值分别为3.91±0.81、3.55±0.76、0.92±0.51,差异有显著性(F=56.59,P=0.000),Ⅰ组与Ⅱ组比较,NF-κB表达差异有统计学意义(q=3.387,P0.05),Ⅰ、Ⅱ组与Ⅲ组比较,NF-κb阳性表达值有显著性差异(q=14.764,P0.05;q=11.999,P0.05)。结论CO2气腹对SD大鼠SAP胰腺病理变化无明显影响。SAP时CO2气腹对SD大鼠TNF-α、CRP的表达无明显影响,对IL-6的表达有一定的抑制作用,能增强NF-κB阳性表达。     

TNF-α抑制剂和乌司他定联合应用治疗重症急性胰腺炎的实验研究

目的探讨TNF-α抑制剂和乌司他定联合应用对重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis,SAP）治疗是否有协同治疗作用。方法采用逆行性胰胆管注射5%牛磺胆酸钠制备SAP模型。80只SD大鼠随机分为假手术组（n=20）、SAP组（n=20）、治疗Ⅰ组（乌司他定治疗组,n=20）、治疗Ⅱ组（TNF-α抑制剂联合乌司他定治疗组,n=20）。各组模型建立后12h处死动物,测血清TNF-α、淀粉酶;应用TUNEL检测细胞凋亡并计算凋亡指数（apoptotic index,AI）;免疫组化法检测胰腺组织NF-κB及ET-1阳性细胞表达,对胰腺组织进行病理学检查。结果治疗Ⅰ组、治疗Ⅱ组两组与SAP组相比,除凋亡指数偏高外,其余各项指标均较SAP组低（P〈0.05）;治疗Ⅱ组的TNF-α、淀粉酶、胰腺组织NF-κB和ET-1表达及病理学评分较治疗Ⅰ组明显偏低（P〈0.05）,而细胞凋亡指数比治疗Ⅰ组高（P〈0.05）。结论联合应用乌司他定和TNF-α抑制剂治疗重症急性胰腺炎能更有效抑制重症急性胰腺炎恶化,控制炎症反应,改善胰腺微循环。     

PS-341对小鼠重症急性胰腺炎核因子-κB活化的影响

目的观察PS-341对重症急性胰腺炎(SAP)小鼠胰腺组织核因子-κB(NF-κB)活化的影响,阐明PS-341对SAP的作用机制。方法采用连续7次腹内注射雨蛙素(每次间隔1h)及脂多糖制作小鼠SAP模型,将60只ICR雌性小鼠随机分为PS-341治疗组(注射脂多糖前0.5h腹内注射0.5mg/kgPS-341),模型对照组(注射脂多糖前0.5h腹内注射50%DMSO),空白对照组(生理盐水制模)。最后一次注射雨蛙素后2h麻醉小鼠,取血检测血淀粉酶,光镜下观察小鼠胰腺和肺脏的病理形态,测定胰腺组织中髓过氧化物酶水平,实时荧光定量PCR测定胰腺组织中黏附分子(ICAM-1)的含量,免疫印迹法(Westernblotting)检测胰腺组织中IκBα的表达,电泳迁移率实验(EMSA)测定NF-κB活性。结果 PS-341治疗组和模型对照组比较,胰腺组织中I-κB降解减少,NF-κB活性显著下降,血清淀粉酶、MPO、胰腺组织中细胞黏附分子ICAM-1的表达都明显降低(P<0.05)。胰腺和肺脏组织病理学有明显的改善(P<0.05)。结论 PS-341通过抑制胰腺内NF-κB活化而抑制炎症反应。PS-341可能是治疗SAP的一个新措施。     

N-乙酰半胱氨酸对大鼠急性胰腺炎保护作用的研究

目的 探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对大鼠急性胰腺炎(AP)的保护作用的机理.方法 雄性SPF级SD大鼠30只,随机分为三组(n=10):假手术组(SO组)、急性胰腺炎模型组(AP组)、NAC治疗组(NAC组).胰胆管逆行注射5%牛磺胆酸钠诱导AP模型,造模后30min腹腔注射5%NAC(0.2 ml/100 g).检测血清淀粉酶(AMY)、髓过氧化物酶(MPO)活性的变化,观察胰腺组织病理学变化并评分,免疫组化SABC法检测胰腺组织NF-κB表达的变化,RT-PCR法检测胰腺组织TNF-α mRNA表达的变化.结果 与AP组相比,NAC治疗后血清AMY水平、病理评分、胰腺组织MPO活性、NF-κB阳性表达率以及TNF-αmRNA表达均下降(P<0.01);但上述指标仍高于SO组(P<0.01).结论 NAC通过抑制胰腺组织NF-κB活化、减少TNF-αa mRNA的表达从而减轻胰腺损伤,对AP具有治疗和保护作用.