丝素蛋白葡萄糖氧化膜在FIA系统的应用研究

以家蚕丝素蛋白为载体，共价交联法制得葡萄糖氧化酶膜后组成酶电极，并引入到流动注射分析系统中，ＦＩＡ系统测定葡萄糖的线性范围在０－２０．０ｍｏｌ／Ｌ，样品分析速度为８０份／小时，酶膜使用寿命超过３０００次，系统的准确性和抗干扰能力也得到了研究，该系统可用于细胞培养发酵过程中葡萄糖浓度的监测。     

酶电极用葡萄糖氧化酶酶膜的性能及应

在一种过氧化氢能选择性透过的不对称膜上固定葡萄糖氧化酶,酶活力在0.35 u/cm~2以上。将酶膜与聚砜膜合并,安装在 DL-311型血糖快速分析仪上,临床血清标本测试结果与 Gilford BSA-300型自动生化分析仪相比较相关系数为0.991。在 ERMA GLU-1型血糖分析仪上本品与进口酶膜的测定结果,相关系数为1.001。c.v.=2.54%。葡萄糖浓度的线性范围为0～1000mg/dl,可连续测试1070次以上。应答时间为14～15s。酶膜于4℃保存半年活力仍不变。     

葡萄糖氧化酶电极中酶固定化的研究

研究了以丝纤维为载体，三聚氯氰为交联剂固定化葡萄糖氧化酶膜的方法和条件。实验表明，用二氧六环－二甲苯（质量比１１）为三聚氯氰的溶剂，固定化酶膜效果较好。酶的偶联条件以温度２５℃、ｐＨ＝９、酶液浓度４ｍｇ／ｍｌ为最佳，此时固定化酶膜稳定性好，反复使用３０次酶膜活性保留９０％以上，贮存在离子强度较高的溶液中，酶膜的半衰期为４０～５０周。     

葡萄糖氧化酶生物传感器的构建和性能研究

目的以固定化葡萄糖氧化酶酶膜构建葡萄糖生物传感器,并对其性能进行评价。方法优化载体及戊二醛交联固定化条件,制备性能良好的葡萄糖氧化酶酶膜,研究固定化酶的性能并用于构建葡萄糖传感器。结果固定化葡萄糖氧化酶的最适催化温度为40℃、pH为7.0;葡萄糖生物传感器的响应时间小于20 s,在0～1.5 g·L-1葡萄糖浓度范围内有良好的线性,具有很强抗干扰和稳定性。结论该葡萄糖生物传感器性能良好,可用于生物样品中葡萄糖测定。     

酶膜生物反应器中酶的固定化方法研究及其应用进展

利用膜作为固定化酶载体的酶膜反应器，能有效地将酶固定，可实现产物的原位分离，消除位阻效应和抑制效应，且可连续操作，便于放大，已广泛应用于蛋白质、纤维素、淀粉等的酶解、污水处理等。文章对酶膜反应器中的固定化方法研究进行了分类，介绍并综合了酶膜反应器的应用，及存在问题。对其前景做了展望。     

两种方法检测血糖和尿素的结果比较

血浆葡萄糖 (Glu)和尿素 (U rea)测定在临床上具有重要意义 ,常用的方法有分光光度法、缩合法、酶偶联速率法和终点法 [1 ,2 ]等。但近几年 ,随着新的电极技术的发展 ,除电解质外 ,更多的生化指标可应用电极法进行分析。美国NOVA公司生产的 UL TRA- M急诊血气生化一体分析仪 ,即采用酶膜电极技术测定血中的葡萄糖和尿素 ,为了了解电极法与常用方法的关联性 ,我们将其与终点法作了比较。1　材料和方法1.1　材料1.1.1　仪器 :日本 OL YMPUS- AU 6 0 0型全自动生化分析仪 ;美国 N OVA公司生产 U L TRA- M急诊血气生化一体分析仪。…     

丝藤治疗膜性肾炎模型的药效学研究

目的 观察丝藤治疗膜性肾炎的药效学情况。方法 用阳离子牛血清白蛋白(C-BSA)制备家兔膜性肾炎模型，设立正常对照组、中药丝藤治疗组、激素治疗组和模型组。每周测定一次24h尿蛋白，实验结束时测定血浆白蛋白、血脂和肾功能等生化指标。结果 丝藤中药丝藤治疗组的24h尿蛋白、血浆白蛋白、血脂和肾功能等生化指标较模型组明显改善(P＜0.01或P＜0.05)，而激素治疗组与模型组比较无明显差异(p＞0.05)。结论 丝藤能降低尿蛋白，提高血浆白蛋白，改善肾功能，对膜性肾病有显著疗效。     

假丝酵母脂酶催化消旋萘普生酯不对称水解的研究

在不同 pH、温度及底物浓度的条件下,以柱状假丝酵母脂酶对消旋萘普生酯进行不对称催化水解,考察了几种脂酶催化该底物水解的活性,其中,lipase-OF(Meito Sangyo)的催化活性最强,以此脂酶10mg 催化水解消旋萘普生氯乙酯1mmol 时,转化率可达40%。     

丝蛋白创面敷料促进Ⅱ度创面愈合的临床疗效

目的 评价丝蛋白创面敷料治疗Ⅱ度烧伤创面的临床疗效与安全性.方法 48例Ⅱ度烧伤患者随机均分为治疗组(用丝蛋白创面敷料覆盖,B组)及对照组(用灭菌凡士林纱布覆盖,A组),观察创面愈合时间、创面边缘炎性反应程度和疼痛程度.结果 与A组比较,B组创面愈合时间短、疼痛程度评分低(P＜0.01);两组炎性反应程度评分差异无统计学意义(P＞0.05).结论 丝蛋白创面敷料能明显促进Ⅱ度创面的愈合.     

山奈酚对白假丝酵母生物被膜抑制作用的研究

目的 研究山奈酚抗白假丝酵母生物被膜的作用及其可能机制。方法 测定山奈酚对白假丝酵母处于形成过程中的生物被膜和成熟生物被膜代谢活性的影响;测定山奈酚对生物被膜基质产生水平的影响;显微镜下观察山奈酚对菌丝形成的抑制作用;水-烃两相分离法测定山奈酚对白假丝酵母细胞表面疏水性的影响;实时定量RT-PCR法测定山奈酚对生物被膜形成相关基因表达的影响。结果 山奈酚抑制白假丝酵母生物被膜形成,且呈剂量依赖性,同时具有抗成熟生物被膜作用,显著降低生物被膜基质含量;与对照组相比,山奈酚明显抑制白假丝酵母菌丝形成并降低其细胞表面疏水性;经山奈酚处理的白假丝酵母生物被膜形成相关基因BCR1、NRG1和TUP1的表达升高,同时HWP1、EFG1、CPH1、ALS1、ALS3和CSH1的表达下降。结论 山奈酚具有抗白假丝酵母生物被膜活性,其机制与抑制菌丝形成及降低其细胞表面疏水性相关。     

穿膜肽与蛋白微球偶联物的制备及鉴定

目的:制备穿膜肽TAT-EGFP与白蛋白微球(BSA-NP)偶联物,并检测其对膀胱癌EJ细胞的穿膜活性.方法:通过异型双功能交联剂N-羟基琥珀酰亚胺基-3-(2-吡基二硫 )-丙酸酯 ( SPDP) 交联的方法制备穿膜肽TAT-EGFP与白蛋白微球偶联物.SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、电镜、荧光显微镜及...     

酶法制备水解鳗鱼头蛋白及其应用的研究

测定了烤鳗下脚料鳗鱼头的成分 ,研究了酶解鳗鱼头提取水解鱼蛋白及其在海鲜调味料中的应用。双酶水解的最适条件为 :温度 50℃ ,p H7.0 ,加酶量为中性蛋白酶 :木瓜蛋白酶 60 μ·g-140 μ· g-1,水解时间4 .5h,料液比 1:1.1～ 1.5,水解鱼蛋白中粗蛋白含量达 87.63% ,蛋白质收率 37.1%。确定了以水解鱼蛋白为基料制备风味调料的最适配方 ,该产品具有营养价值高 ,海鲜风味浓郁的特点。     

酶工程制备1.6—二磷酸果糖的中试研究

本文报道了采用聚乙烯醇为介质包埋法制成固定化酵母细胞用以制备１．６－二磷酸果糖的中试研究，确定了以蔗糖为底物，通过固定化酶转化，阴离子交换，过滤除菌，冻干的制备１．６－二磷酸果糖工艺路线，该工艺过程简单，产品质量稳定，可以连续操作，适合于工业化生产，固定化酶表现活力大于５５０ｍｇＦＤＰ／ｄ／ｇ湿细胞，底物转化率大于１５％，固定化酶半衰期大于２０天。     

氧化葡萄糖酸杆菌胞内脱氢酶Gox0525的酶学性质研究

将氧化葡萄糖酸杆菌胞内脱氢酶推测基因Gox0525克隆至表达载体pET-28a(+)中,并在大肠杆菌中得到可溶性表达的蛋白,纯化后经HPLC以及SDS-PAGE检测,表明其活性形式为四聚体.重组蛋白Gox0525属于短链脱氢酶家族,选择该家族的催化底物谱测试,结果表明Gox0525具有还原二酮的能力,且专一性利用辅酶NADPH,在pH 9.0、30℃条件下活性较高,适合保存在pH 7.0、4℃条件下.酶反应的发生对金属离子无依赖性,添加Ca2+对酶活力有促进作用,而Fe3+有抑制作用.     

固定化金属亲和层析胶与亲和层析膜纯化rhMn-SOD和rhCu,Zn-SOD的比较研究

为比较固定化金属亲和层析膜与亲和层析胶的纯化效果,分别用固定化金属亲和层析胶Cu2 柱、Ni2 柱、固定化金属亲和层析膜Cu2 柱、Ni2 柱分离纯化rhCu,Zn-SOD、rhMn-SOD/24a、rhMn-SOD/28.结果表明,亲和胶与亲和膜分离SOD获得相似的纯化效果,纯化倍数均在3到5之间,亲和膜分离所得SOD比活略高于亲和胶,rhCu,Zn-SOD与Cu2 的亲和能力高于rhMn-SOD.固定化金属亲和层析膜色谱为基因工程产物的快速分离鉴定提供了一个简便的方法.     

皱落假丝酵母脂酶的研究Ⅱ,酶的性质的研究

对来源于皱落假丝酵母(Candida rugosa)SIPI2.230的脂酶的性质,进行了较为系统的研究,发现该酶能在常温下于短时间内完全水解底物为甘油和脂肪酸,可用于酶联试剂盒测定血清甘油三酯。     

ABC跨膜转运蛋白基因表达与乳腺癌铂类药物敏感性的相关性研究

目的：研究乳腺癌患者肿瘤细胞对3种铂类药物的体外敏感性,并进一步研究其敏感性与乳腺癌细胞中ABC跨膜转运蛋白基因表达的关系。方法：对人乳腺癌细胞进行体外培养,用MTT法检测顺铂、卡铂、奥沙利铂等药物作用后肿瘤细胞的活力变化;同时采用实时荧光定量PCR技术,对乳腺癌细胞中的11种ABC跨膜转运蛋白基因表达水平进行检测。结果：顺铂耐药组的ABCB1、ABCG2表达明显高于敏感组;卡铂耐药组的ABCB1表达明显高于敏感组;乳腺癌细胞的ABCB1、ABCC6表达水平与顺铂对肿瘤细胞的抑制率有明显相关性;ABCB1的表达水平与卡铂对肿瘤细胞的抑制率有明显相关性。奥沙利铂对肿瘤细胞的抑制率与ABC跨膜转运蛋白的基因表达水平无明显相关性。结论：ABC跨膜转运蛋白家族的多个蛋白的高表达与顺铂、卡铂的耐药有关,其中ABCB1的高表达与药物耐药的关系最为显著。     

海洋溶菌酶膜的制备及质量控制

目的:制备海洋溶菌酶膜,并建立其质量控制方法。方法:以海洋溶菌酶为主药、羟丙基甲基纤维素为成膜材料制成膜剂,采用Folin-酚测定法和平板扩散法分别测定海洋溶菌酶的蛋白浓度和酶活性,以紫外分光光度法测定海洋溶菌酶膜中海洋溶菌酶的含量。结果:海洋溶菌酶的蛋白浓度和酶活性符合抑菌要求;样品平均回收率为101·0%(RSD=0·67%);样品放置6mo内各项指标均无明显变化。结论:本制剂制备工艺简单、质量可控,可为临床治疗阴道炎提供一种新型制剂。     

丝切蛋白-1和内皮细胞分化因子受体-1的研究进展

丝切蛋白(Cofilin,CFL)是一种肌动蛋白结合蛋白,存在于真核生物中,通过肌动蛋白纤维解聚作用,可以使肌动蛋白重复使用,以确保快速的肌动蛋白纤维聚合/解聚,从而改变细胞和细胞外基质之间的粘附,并最终促进细胞迁移和运动。CFL-1是丝切蛋白家族的重要成员,其活性影响着细胞内信号转导以及细胞骨架肌动蛋白重组,与肿瘤细胞的迁移和侵袭有关,可能是恶性肿瘤的一个潜在治疗靶点。内皮细胞分化因子受体-1(EDG-1)可通过激活促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)、磷脂酰肌3激酶(PI3K)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt)和Rho等信号分子而发挥生物学效应,在细胞的增殖和移动、心血管系统、免疫系统等多方面发挥着重要的作用,特别是在肿瘤的发生、发展、浸润、转移过程中的作用受到日益广泛的重视。关于EDG-1的相关研究表明,EDG-1将可能成为一个新的肿瘤靶向治疗的潜在靶点。本文综述了CFL-1与EDG-1这两个可能成为恶性肿瘤治疗靶点分子的最新研究进展。