氮离子注入土霉素产生菌诱变高产菌株的研究

以土霉索生产菌株48。为出发菌株，采用氮离子注入诱变处理，经摇瓶筛选，得到土霉素02—2-44^#菌株。该菌株特性优良，经57m^3发酵罐试验。150批平均发酵效价高于对照菌株（1158．6μg／ml），提高3．42％。发酵总亿及发酵指数分别提高3.17％和3．99％。     

用紫外线诱变育种筛选土霉素菌种的高效价菌株

以土霉素产生菌龟裂链霉菌 F_1为出发菌株,经紫外线诱变处理后,再经摇瓶初筛、复筛获得高效价菌株 F_2。     

耐磷酸盐土霉素菌株选育和发酵的研究

以土霉素生产菌株138^#为出发菌株，经饥饿培养、5-FU、UV、咖啡因复合诱变处理，再用含高磷酸盐的培养基定向筛选，得到高产突变菌株100^#。该突变株遗传特性稳定，代谢特性优于出发菌株，经57m^3发酵罐生产验证，生产稳定，低效价罐批减少59．5％，在磷酸盐浓度提高到0.04％～0.05％时，统计一年的正常罐批平均发酵效价比对照菌株提高5．76％。     

氮离子注入土霉素产生菌的诱变育种

目的获得土霉素产生菌的高产菌株,提高发酵单位。方法用土霉素产生菌龟裂链霉菌经分离纯化的2810#菌株的分生孢子作处理样品,使用发射能量为15×103eV的氮离子束对其进行诱变处理,氮离子的注入剂量为每平方厘米注入2.0×1015个离子,分生孢子死亡率为98.2%。结果诱变处理后经摇瓶筛选得到1082#高产菌种,其摇瓶发酵单位提高11.2%,投入发酵生产后平均发酵单位提高8.9%。结论氮离子注入方法对提高龟裂链霉菌的产量正向突变频率有明显效果。     

土霉素高产菌株N56育种及工业发酵条件优化

目的 以五氟尿嘧啶与紫外线复合氯化锂诱变土霉素产生菌,得到高产突变株.方法 以龟裂链霉菌(Streptomyces rimosus)M-2 4#为出发菌,采用不同工作浓度的五氟尿嘧啶与不同处理时间的紫外线复合氯化锂处理该菌株,经过琼脂块抑菌圈初筛、摇瓶筛选和罐上试验,得到生产性状优良的菌株.结果 经过诱变及各步筛选后,获得3株高产菌株,并根据培养特性对它们进行发酵条件的优化,选出经济高效菌株199#,经过自然分离得到高产稳定的菌株N56,在生产车间进行四批30吨罐发酵的研究,发酵水平提高8.75％,同时节约了无菌空气量11.1％.结论 五氟尿嘧啶与紫外线复合氯化锂诱变土霉素产生菌效果显著,所获得的高产菌株效价高、需氧量低,节约了大量无菌空气,降低了生产成本.     

盐酸土霉素HPLC测定方法的研究

StudiesonthedeterminationofoxytetracyclinehydrocbloridebyHPLCmethodGuoChengmingandXueJing（TianjinInstituteforDrugControl，Tianjin300070）ChengDecal（TheHealthBureauofTianjinJinnanDistrict，Tianjin300350）盐酸土霉素为四环素类抗生素，抗菌谐与四环素相近，其原料及制剂国内外药典均有收载，含量测定方法除英国药典1993年版规定为HPLC法外，其它药典均采用微生物效价测定法进行测定，方法繁琐，实验周期较长，而BP1993年版收载的HPLC方法系采用梯度洗脱法，色谱柱为聚苯乙烯填料，往温60C，此方法色谱条件要…     

土霉素提炼工艺的改进

本文对土霉素提炼工艺进行了改进，主要改造了树脂柱形态、改变滤液流量、改进了温度控制和搅拌转数。     

高纯度土霉素碱制备工艺研究Ⅱ．土霉素新产品中2—乙酰—2—去酰胺土霉素的去除

2－乙酰－2－去酰胺土霉素（ADOTC）是土霉素发酵过程中产生的共生物杂质,母环结构与土霉素（OTC）相同,所以很难去除。本文提出的沉淀分离方法,根据A酸能与ADOTC和OTC形成不同溶解度的络合物的性质,使沉淀和溶液分开,因而能有效地把OTC中的ADOTC分离出来,且加入K4Fe(CN)6-ZnSO4净化超滤后使OTC的HPLC测定纯度由96．14％提高到98．72％,ADOTC含量由1．89％下降到0．37％。     

降低土霉素杂质的工艺研究

在抗生素家族中,土霉素是一个老品种,但由于它广谱和价廉的特点,仍被广泛应用于城乡医疗卫生和畜牧行业。近年来,随着出口量的增加,一些生产厂家通过了美国ＦＤＡ的验收,国内生产总量也由８０年代末的８０００ｔ／年,增加到目前的１２０００ｔ／年。随着市场竞争的加剧和ＢＰ８８、ＢＰ９３标准的相继采用,对土霉素产品质量的要求越来越高,而４９０ｎｍ的杂质吸收度则是衡量产品中杂质含量的一个重要指标。大部分厂家通过调整发酵液预处理净化剂加入量、提高酸化时草酸的比例、加强树脂的再生以提高脱色液透光度等办法来解决这一难…     

Case Report: Coma Due to Oxytetracycline

Summary

An unusual case is reported of coma of gradual onset in a 67-year old woman being treated with oxytetracycline. Ten hours after the last dose, the patient regained consciousness but remained confused with hallucinations for another 24 hours. The possibility of side-effects should be borne in mind in any patient who develops coma whilst on oxytetracycline.     

HPLC法测定土霉素片含量的研究

目的：建立高效液相色谱法测定土霉素片含量的方法。方法：采用Spursil C185μm 250mm×4.6mm色谱柱,流动相组成为：[0.25mol·L-1乙酸铵溶液∶0.05mol·L-1乙二胺四醋酸二钠溶液∶三乙胺（100∶10∶1）,用醋酸调pH值至7.6]∶乙腈（87∶13）;柱检测波长（λ）280nm,流速1.0ml·min-1,柱温为35℃。结果：土霉素在0.005～1.0mg·ml-1范围内线性关系良好,r=0.9999,平均回收率为99.0%, RSD=1.0%（n=9）。结论：本方法简便、准确、重现性好,适用于土霉素片的质量控制。     

HPLC测定土霉素片中主药及有关物质的含量

目的建立土霉素片主药及有关物质的含量测定方法。方法采用HPLC法,样品片粉用0.1mol.L-1盐酸溶解,过滤后,取续滤液作为供试品溶液。采用Luna-C18柱,以0.05mol.L-1草酸铵溶液-二甲基甲酰胺-0.2mol.L-1磷酸氢二铵溶液(75∶20∶5)、用氨试液调pH8.0为流动相,检测波长280nm。结果土霉素浓度在0.01~0.50mg.ml-1的范围内有良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为100.6%。结论所用方法准确、快速、稳定。     

土霉素片溶出度测定方法研究

目的建立土霉素片溶出度的测定方法。方法采用溶出度测定第二法,以盐酸溶液（9→1 000）为溶出介质,转速为50 r/min,经30 min取样,用紫外分光光度法在354 nm波长处测定土霉素片的溶出量,溶出限度为标示量的75%。结果土霉素质量浓度在6.108～21.378μg/mL范围内与吸光度线性关系良好,r=0.999 8（n=6）,平均回收率为101.31%,RSD=0.34%（n=9）。结论该方法简便、准确、重现性好,可用于土霉素片的质量控制。     

高效液相色谱法测定土霉素片的含量

目的建立土霉素片的含量测定方法。方法高效液相色谱法。采用Luna-C18色谱柱,以0.05 mol/L草酸铵溶液-二甲基甲酰胺-0.2 mol/L磷酸氢二铵(70∶25∶5)为流动相,用紫外检测器在282 nm波长处检测。结果土霉素片浓度在0.01¹ mg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9990),平均回收率为100.1%。结论高效液相色谱法快速、简便、准确,可用于土霉素片的含量测定。     

The Effects of pH and Mixed Solvent Systems on the Solubility of Oxytetracycline

The solubility of oxytetracycline (OTC) in aqueous and mixed solvent systems was studied. The effects of pH and cosolvent composition on the solubility and apparent dissociation constants (pK′_a) of OTC were determined by a solubility method. The pK′_a values of OTC in each mixed solvent system were estimated and used to generate expressions for predicting drug solubility in each cosolvent as a function of pH. Cosolvent systems of PEG 400, propylene glycol, glycerin, and 2-pyrrolidone were studied in the pH range of 2.5–9. Solubility results showed increased solubility with increased cosolvent concentration, especially in 2-pyrrolidone solvent systems. These results also showed that cosolvents enhanced drug solubility through either their effects on polarity of the solvent medium or complex formation with OTC. Aqueous and mixed solvent systems at lower pH values resulted in higher OTC solubilization because the drug existed primarily in its cationic form. A mass balance equation including all ionic species of OTC allowed for estimation of the intrinsic solubilities and pK′_a values in each solvent system. pK′_a values and intrinsic solubility of the OTC zwitterion increased with increasing cosolvent content. These parameters allowed prediction of drug solubility within the pH range and cosolvent concentrations used in this study.     

盐酸土霉素细菌内毒素检查方法的确立

目的：考察盐酸盐霉素进行细菌内毒检查的可行性,以便控制质量使其达到出口要求。方法：抑制／增强试验及细菌内毒发值检查,结果：0．156mg.ml^-1的盐酸土霉素溶液对细菌内毒素检查无干扰,其内毒素限值符合规定,结论：盐酸土霉素可采用细菌内毒素检查法来控制其质量。     

时间分辨荧光法高通量筛选鱼肉组织中土霉素的残留量

目的动物组织中抗生素残留量的测定一般需要多步骤的样品处理过程。本文介绍了一种全新的、简便和快速筛选鱼肉中土霉素残留量的方法。采用固相萃取和时间分辨荧光(time resolved luminescence,TRL)技术,无须离心和过滤,简化了分析过程。方法将C18小片浸在组织匀浆液中提取和富集20min,取出,在水中浸泡3min,接着浸在TRL试剂溶液中2min,最后取出干燥。干燥后,在C18小片表面上直接进行荧光测定。结果土霉素在0~8μg/g的范围内,仪器信号的响应与浓度呈现良好的线性关系(γ2=0.9992),检测限为0.026μg/g,采用本法对45个加标准液的样品(浓度范围在0~4μg/g)进行分析,其中41个样品的定性结果正确,只有4个样品定性结果显假阳性。结论本方法简便,快速,准确,适用于鱼肉组织中土霉素的高通量筛选分析。     

The Interaction Between Oxytetracycline and Divalent Metal Ions in Aqueous and Mixed Solvent Systems

The effects of pH, mixed solvent systems, and divalent metal ions on oxytetracycline (OTC) solubility and the interactions between OTC and metal ions in aqueous and mixed solvent systems were investigated. OTC solubility profiles were obtained for pH 4–9. The cosolvents studied were glycerin, propylene glycol, PEG 400, and 2-pyrrolidone with the following metal ions: magnesium, calcium, and zinc. OTC and its interactions with these metal ions were evaluated by solubility, NMR, circular dichroism (CD), and electron diffraction (ED) methods. At pH 5.6, no complexation occurred with these metal ions, but OTC zwitterion formed aggregates in aqueous solutions as shown by NMR spectra. The hydration of the metal ions was observed to affect OTC aggregation, with Mg⁺² causing the greatest OTC aggregation. At pH 7.5, OTC aggregation and metal–OTC complexation were observed in solutions with Ca⁺² and Mg⁺². Zinc ion was found to decrease OTC solubility because of zincate formation, which caused anionic OTC to precipitate. Electron diffraction revealed a relationship between OTC and metal–OTC complex crystallinity and solubility behavior. The zinc–OTC complex exhibited the highest crystallinity and lowest solubility at pH 8.0. Various cosolvents generally enhanced OTC solubility, with 2-pyrrolidone having the best solubility power. In OTC–metal-2-pyrrolidone and OTC–Zn⁺²-PEG 400 systems, circular dichroism provided evidence for the formation of soluble ternary complexes.     

膜分离法回收土霉素结晶母液中的土霉素

土霉素结晶母液经超滤膜预处理后 ,通过反渗透膜所得浓缩液 ,再经超滤膜处理后 ,15 %氨水调p H值从土霉素结晶母液回收土霉素 ,得到的土霉素纯度 82 .9% ,效价 771u/ mg,回收率 6 2 %。此结晶母液为二次母液 ,与车间冲洗水等混合后可较容易地进行生物降解