银杏内酯A、B和白果内酯的分离与纯化

以银杏叶浸膏ＥＧｂ７６１为原料,通过预处理,制备色谱和重结晶过程,得到纯度达９８％以上的银杏内酯Ａ、Ｂ和白果内酯纯品。建立了一种较简单的分离和纯化银杏内酯Ａ、Ｂ和白果内酯的方法。     

HPLC-ELSD法测定注射用银杏内酯中银杏内酯A与银杏内酯B的含量

目的　研究并建立注射用银杏内酯中银杏内酯A与银杏内酯B的含量测定方法。方法　采用RP HPLC法 ,以正丙醇 四氢呋喃 水 (1∶30∶6 9) (V/V/V)为流动相 ,ELSD为检测器同时测定银杏内酯A和银杏内酯B的含量。结果　注射用银杏内酯中银杏内酯A、银杏内酯B与其它成分分离良好 ,银杏内酯A进样量在 2 .12～ 10 .6 0 μg ,银杏内酯B进样量在3.78～ 18.90 μg范围之间呈良好的线性关系 ;加样回收率分别为 97.2 4 %和 97.17% ,RSD分别为 1.94 %和 0 .78%。 结论本法简便 ,重现性好 ,可用于注射用银杏内酯的质量控制      

银杏内酯B醇质体的药剂学性质及其制备分析

目的：探讨银杏内酯B醇质体的制备方法以及药剂特性。方法将包封率作为考察依据,之后进行正交设计优化处方;观测经处方优化后的醇质体的粒子半径以及Ze-ta等指标。结果银杏内酯B醇质体在筛选过程中在磷脂浓度为1.5 g/L,超声时间在10 min以及醇含量在40%时最佳,同时利用优化工艺制备的银杏内酯B醇质体平均的包封率可达到（87.94±1.31）%;在这种工艺条件下制备的醇质体平均半径是（89.41±6.13） nm,Ze-ta电位是-（37.87±2.75）MV。结论银杏内酯B醇质体的制备方法简单且经优化处方后醇质体的药剂特性符合具体的临床要求。     

银杏萜内酯提取与纯化技术

银杏萜内酯的独特药理作用引起了国内外学者的关注,其提取纯化成为研究的重要内容.对银杏萜内酯的提取与纯化技术包括溶剂萃取法、柱提取法、溶剂萃取-柱提取法、超临界提取法及色谱或柱层析纯化法进行了介绍.     

银杏内酯B药理作用研究进展

银杏叶制剂是当前植物药开发研究的热点之一,银杏叶制剂的主要有效成分是黄酮类和银杏内酯类化合物,银杏内酯包括银杏内酯A、B、C、J、M和白果内酯等单体,其中银杏内酯B(ginkgolide B,GB)生物学活性很强,被认为是自然界中最强的天然血小板活化因子(platelet acti-vating factor,PAF)拮抗剂[1]。     

高速逆流色谱法分离纯化银杏叶中白果内酯和银杏内酯A、B、C

目的从银杏叶中分离纯化白果内酯和银杏内酯A、B、C。方法银杏叶提取液经醋酸乙酯萃取、D-101大孔吸附树脂柱和Al2O3柱纯化后得到总内酯提取物,提取物再经两次高速逆流色谱分离制备4种内酯单体。结果25%乙醇热提取、醋酸乙酯萃取、D-101柱、pH4.0的Al2O3柱对总内酯的提纯最终使总内酯质量分数达到44.98%。经高速逆流色谱制备得到的白果内酯和银杏内酯A、B、C最高质量分数分别为98.3%、98.9%、98.8%、98.4%。结论本法简便快速、回收率高,为银杏叶中内酯单体的制备提供了一种新方法     

银杏内酯B剂型研究进展

正银杏萜内酯类化合物是银杏叶提取物的主要活性成分,具有广泛的药理活性,主要用于神经和心脑血管系统疾病的治疗[1-2]。银杏内酯(ginkgolides,GG)是银杏(Ginkgo biloba L.)中的脂溶性生理活性成分,是具有高度专属性的血小板活化因子(platelet-activating factor,PAF)受体拮抗剂,具有     

分析用银杏内酯对照品的制备研究

目的研究银杏内酯制备提纯的工艺。方法银杏叶提取物(EG b)经柱色谱制备出半成品,以HPLC法制备分离。结果同时得到银杏内酯A、B、C和白果内酯纯品。结论达到分析用对照品的要求。     

银杏内酯B对内皮细胞损伤的保护作用及机制

目的探讨银杏内酯B(GB)对TNFα刺激内皮细胞引起的氧化应激性损伤的保护作用及机制。方法用分子探针2,7-DCF测定细胞内ROS的产生量以及用Western blot测定ERK2激酶和转录因子AP-1的蛋白表达。结果TNFα(5ng/ml)作用24h后,脑血管内皮细胞(BVEC)中ROS的产生量明显增加(P<0.05),细胞内AP-1、ERK2的蛋白表达显著增强;但GB(50mg/L)和NAC(20mM)能显著性抑制TNFα诱导的细胞内ROS的产生和AP-1、ERK2的表达(P<0.05)。结论GB能抑制TNFα诱导的BVEC内ROS的水平,此作用可能是通过抑制ROS介导的ERK2激酶及转录因子AP-1的表达而实现。     

HPLC-ELSD法测定银杏滴丸中银杏内酯A、B、C和白果内酯

目的 采用高效液相-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)法测定银杏滴丸中银杏内酯A、B、C及白果内酯。方法 样品以甲醇溶解,蒸干后水溶,醋酸乙酯提取处理。采用HPLC-ELSD法测定,ALLtech C18色谱柱(250 mm×45 mm,5 μm);流动相：甲醇-四氢呋喃-水(35∶10∶65);体积流量：0.8 mL/min;气速：2.85 L/min;漂移管温度：105 ℃;柱温：30 ℃。结果 银杏内酯A、B、C及白果内酯的平均加样回收率分别为98.5%、103.5%、99.7%、101.6%,RSD分别为25%、1.9%、2.8%、2.0%。结论 建立的滴丸制剂中银杏内酯A、B、C及白果内酯的定量方法可行性好、简便、可靠。     

银杏叶中银杏总内酯提取工艺研究

目的:探讨银杏叶中银杏总内酯的提取工艺。方法:采用正交试验法,以银杏叶中银杏总内酯的提取率为评价指标,考察提取工艺。结果:银杏总内酯的最佳提取条件为12倍量的70%乙醇,采取热回流提取的方法,提取2次。结论:该方法能充分有效的提取银杏总内酯,可作为提取内酯的优选工艺。     

银杏内酯对大鼠局灶性脑缺血的保护作用

目的 研究银杏内酯对大鼠局灶性脑缺血的作用。方法 选用中动脉阻塞－再灌模型观测对比脑缺血大鼠给药组和模型组的各项指标。结果 银杏内酯口服能使脑缺血大鼠的神经行为明显改善,脑梗塞面积和脑含水量显著降低;高、中、低三个剂量组与缺血模型组相比均有显著性差异,该药还能降低缺血后脑组织匀浆中的MDA、LD含量,提高SOD和GSH活性。脑组织病理切片也证实了该药对神经细胞的保护作用。结论 银杏内酯对大鼠局灶性脑缺血有保护作用。     

SP-B中间产物特异性抗体的制备与鉴定

目的制备和鉴定表面活性物质蛋白B(surfactant protein B,SP-B)加工处理过程中部分中间产物的特异性抗体。方法利用Lasergene 7.0和Macvector 11.0.4软件进行抗原表位分析,确定作为抗原的3条多肽序列,将人工合成的多肽与钥孔戚血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)偶联,免疫兔制备抗血清,间接酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测免疫前血清背景和免疫后血清效价,抗原亲和纯化抗血清,超滤浓缩抗体,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)检测抗体纯度,间接ELISA法检测抗体效价,蛋白质印迹(Western blot)鉴定抗体特异性。结果免疫前兔血清背景均低,免疫后抗血清效价均达到要求,抗原亲和纯化后所得抗体纯度及效价高,特异性好。结论成功制备了3种SP-B中间产物特异性多克隆抗体,为深入研究SP-B的加工处理奠定了基础。     

银杏二萜内酯葡胺注射液对离体心脏缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

[目的]研究银杏二萜内酯葡胺注射液（DGMI）对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用并探讨其机制。[方法]取120只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、DGMI低（1.5 mg/kg）、中（3 mg/kg）、高（6 mg/kg）剂量组和维拉帕米2.5 mg/kg组（阳性药物对照组）,各20只;手术前2 h,腹腔注射给药,正常对照组和模型组同步给予生理盐水。采用Langendorff灌流系统建立离体心脏灌注模型,正常对照组持续灌注Krebs-Henseleit液（K-H液）,模型组、DGMI各剂量组和维拉帕米组平衡灌注20 min后停灌30 min、再灌注60 min后行各指标检测。测定冠脉流出液心肌酶活性;2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色测定心脏组织梗死面积,苏木精-伊红（HE）染色观察心脏组织病变;测定血流动力学指标;测定心肌组织中抗氧化酶活性以及丙二醛（MDA）含量;测定心肌组织ATPase活力。[结果]与模型组比较,DGMI中、高剂量组和维拉帕米2.5 mg/kg组大鼠血清心肌酶谷草转氨酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）和肌酸激酶MB同工酶（CK-MB）活性均显著降低（P<0.05或P<0.01）;心脏组织梗死面积显著降低（P<0.01）,心脏组织病变明显改善;明显改善血流动力学指标：心率（HR）、左室收缩压（LVSP）、左室收缩压最大上升速率（+dP/dt_max）、左室舒张压最大下降速率（-dP/dt_min）均显著升高且左室舒张末压（LVEDP）显著降低（P<0.05或P<0.01）;抗氧化酶[超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）]活性显著升高且MDA含量显著降低（P<0.05或P<0.01）;Na⁺-ATPase、Ca²⁺-ATPase酶活力显著升高（P<0.05或P<0.01）。[结论]DGMI可能通过改善血液流变学、降低氧化应激损伤、改善ATPase活力而对大鼠离体心脏表现出一定的保护作用。     

银杏总黄酮和银杏内酯配伍对心肌缺血猫心外膜心电及心肌SOD的影响

[目的]初步探索不同比例银杏总黄酮和银杏内酯伍用对猫心肌缺血的保护作用。[方法]将35只家猫随机分为7组,银杏总黄酮组、银杏内酯组、总黄酮与内酯比例分别为3：1、1：1、1：3组,生理盐水组和美托洛尔组,给药剂量为0．5mg生药／kg。将家猫开胸,结扎左冠脉前降支造成局部心肌暂时缺血模型,测定结扎前和造模后第1、3、5、10、15min各时间点缺血区心外膜心电图ST段高度;恢复供血后给药,再次结扎,重复上述时间点ST段测定;t检验自身对照比较给药前后心肌缺血sT段变化。术后剪取缺血区心肌测定其SOD活性;对缺血心肌抗氧化能力进行方差分析。[结果]银杏总黄酮与银杏内酯比例为3：1时,抑制心外膜心电图ST段抬高的效果最明显,且心肌组织SOD活性最高。[结论]在本实验条件下,银杏总黄酮与银杏内酯比例为3：1时,能较好改善猫心肌缺血的症状。     

银杏内酯对过氧化氢损伤的皮层神经元和SH—SY5Y细胞亲环蛋白A（CypA）表达的影响

目的：研究银杏内酯（ginkgolides,Gin）对过氧化氢（H2O2）诱导的皮层神经元及SH-SY5Y细胞（神经母细胞瘤细胞）损伤的保护作用及其机制。方法：在培养1周的小鼠皮层神经元培养基中加入H2O2,建立神经元氧化损伤模型,用同样方法建立SH-SY5Y细胞氧化损伤模型。采用MTT比色法检测细胞活力,Western Blot技术分析亲环蛋白A的表达变化。结果：H2O2可诱导神经元和SH-SY5Y细胞损伤,使细胞活力降低,可下调亲环蛋白A的表达;Gin预处理12 h可提高细胞活力,可使亲环蛋白A表达增加。结论：Gin可抑制H2O2引起的神经元及SH-SY5Y细胞损伤,该保护作用与其上调亲环蛋白A的表达有关。     

高丽参注射液的制备与含量测定

目的研究制备高丽参注射液的工艺和质量控制方法。方法以65%乙醇回流提取,用75%、85%乙醇分别醇沉,配成贮备液冷藏等方法生产生产高丽参注射液。用紫外分光光度法测定含量。结果本制备工艺及测定方法可行。结论紫外分光光度法测定人参皂苷含量可作为控制高丽参注射液质量的手段。     

妥布霉素化学提取精制特性研究

对硫酸妥布霉素生产中发酵液的水解、离子交换层离、成盐等条件进行了研究。结果表明：６＾〃－Ｏ－氨甲酰妥布霉素水解形成妥布霉素的反应为一级反应,其水解介质最佳ｐＨ值为１０。用氨水作为离子交换层离妥布霉素解吸剂的最佳浓度为０．１ｍｏｌ／Ｌ。妥布霉素碱转盐应采用高限量计算的硫酸。按上述条件生产的硫酸妥布霉素产品附合ＵＳＰ标准。     

整体护理对尿毒症血液透析患者净化效果的影响研究

目的分析整体护理对尿毒症血液透析患者净化效果的影响。方法选取60例尿毒症血液透析患者作为本次研究对象,按照不同护理措施,将其分为常规组与实验组,每组人数为30例。常规组患者实施常规护理,实验组患者实施整体护理,对比两组患者的护理效果。结果护理后,实验组患者焦虑评分及抑郁评分明显高于常规组,P<0.05;实验组患者净化效果明显比常规组更好,P<0.05,两组数据组间差异明显,具有统计学意义。结论将整体护理应用于尿毒症血液透析患者护理中,有明显护理效果,不仅能够有效改善患者心理情绪,提高净化效果,还能够有效提高患者生活质量,具有临床应用价值。     

抗病毒分散片的制剂工艺研究

目的筛选抗病毒分散片处方及制剂工艺。方法以崩解时限为指标,采用正交设计实验,对抗病毒分散片处方及制剂工艺进行筛选。结果按优选处方制备的抗病毒分散片,可在3 min内完全崩解。结论优选处方及制剂工艺的抗病毒分散片溶出度明显优于软胶囊。