高效液相色谱法测定人血浆中麦考酚酸的浓度

目的:建立人血浆中麦考酚酸(MPA)含量的高效液相色谱法(HPLC法),并用该方法对肾移植患者血浆中的浓度进行测定。方法:Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-0.1%三氟乙酸(40∶60),流速为1.0 mL.min-1,柱温为35℃,紫外检测波长为215 nm,血样用乙腈沉淀蛋白法进行处理。结果:麦考酚酸浓度在0.20～49.96μg.mL-1(r=0.999 6)范围内线性关系良好,最小检测浓度为0.20μg.mL-1,平均回收率均>90%,提取回收率>100%,批间和批内RSD<15%。结论:本方法准确、简便、重现性好,可用于麦考酚酸的血药浓度监测及药动学研究。     

胍丁胺的衍生化GC-NPD测定及大鼠药动学研究

目的建立衍生化气相色谱法测定大鼠血浆中胍丁胺浓度方法并研究其在大鼠体内的药动学。方法应用六氟乙酰丙酮(HFAA)衍生化气相色谱氮磷检测器(GC-NPD)分析血浆样品中的胍丁胺浓度。结果胍丁胺在大鼠血浆中的线性范围为0.1～50μg.mL-1,最低检测浓度为0.1μg.mL-1。高、中、低三种浓度的平均方法回收率分别为87.7%,90.7%,101%。日内、日间精密度(RSD)均小于12%。大鼠灌胃胍丁胺符合二室模型,t1/2为109 min,tmax为26 min,Cmax为1.91μg.mL-1,AUC0-300 min为145μg.min.mL-1。结论本方法稳定、可靠,可用于胍丁胺的血药浓度分析及大鼠灌胃药代动力学研究。     

LC/MS/MS法测定人血浆中罗红霉素的血药浓度

目的建立LC/MS/MS法测定人血浆中罗红霉素的浓度。方法采用Diamonsil C18色谱柱,流动相甲醇-水-甲酸(75∶25∶0.5),流速为0.5mL·min-1。质谱检测方式:SIM。克拉霉素为内标,血浆样品用乙醚提取浓集,进行LC/MS/MS分析。结果本方法在0.1～40.0μg·mL-1内线性关系良好(r=0.9997),平均回收率87.6%,日内和日间RSD<10%。结论本方法快速、准确,适用于罗红霉素的临床药动学研究和血药浓度检测。     

高效液相色谱法测定患者血浆中胺碘酮的浓度

目的 建立人血浆中胺碘酮含量测定的HPLC法.方法 Diamonsil C18色谱柱（250mm×4.6mm,5μm）;流动相：乙腈-0.01mol·mL-1醋酸铵溶液（82：18）,醋酸调pH至4.00;流速为1.0mL·min-1,柱温为35℃,紫外检测波长为240nm,内标物为苯丙酸诺龙,血样用乙腈沉淀蛋白法进行处理.结果 胺碘酮浓度在0.21～4.26μg·mL-1（r=0.999 6）范围内线性关系良好,定量下限为0.21μg·mL-1,平均回收率均＞90%,提取回收率＞90%,批间和批内RSD＜15%.结论 本方法准确、简便、重现性好,可用于胺碘酮的常规血药浓度监测.     

RP-HPLC法测定硫唑嘌呤代谢产物6-巯基嘌呤血浆药物浓度

目的：建立RP-HPLC法检测人血浆中硫唑嘌呤(AZA)代谢产物6-巯基嘌呤(6-MP)的浓度,为临床进行血药浓度监测提供基础。方法：采用Hypersil ODS2色谱柱(250 nm * 4.6 nm,5μm),流动相为乙腈-0.3%冰乙酸化(3:97),流速为0.8 mL.min-1,检测波长323 nm,血浆样品经15%高氯酸去蛋白后加氢氧钠(NaOH)调节PH后20μL进样分析。结果：6-MP血浆样品在0.02-2μg.mL-1范围内线性关系良好,最低检测下限(LLOQ)为0.02μg.mL-1；LLOQ、高浓度(1.5μg.mL-1)、中浓度(1μg.mL-1)和低浓度(0.05μg.mL-1)提取回收率分别为85.71%、92.93%、103.53%和96.02%,质控四个浓度的日内与日间精密度均<15.0%,符合中国药典生物样本分析相关规定。结论：本实验成功建立一种简单、快速、高灵敏度的6-MP血浆浓度测定方法,符合AZA血药浓度监测和药代动力学研究的相关规定。     

滋肾丸中肉桂酸在大鼠体内的测定及药动学研究

目的建立简便的测定大鼠血浆中肉桂酸血药浓度的高效液相色谱法.方法样品血浆以1 moL·L-1HCI酸化,用乙酸乙酯萃取,取上清液进行分析.色谱条件为:流动相:甲醇-乙腈-水-三乙胺(7:22:73:0.2,V/V),磷酸调pH=4,流速:0.9 mL·min-1,检测波长:340nm.结果肉桂酸的血药浓度标准曲线的线性范围为1.92-192.0μg@mL-1,其最低定量限为1.92μg·mL-1,日内及日间RSD均小于8%.平均回收率为82.0%.大鼠口服滋肾丸后在体内的药动学参数为:Tmax≈0.5 h,Cmax=46.65±4.9μg@mL-1,t1/2=5.44h,k=0.127h and AUC0-t=256.91(μg·min·nL-1),AUC0-∞=290.52(μg·rmin·mL-1).结论本方法为滋肾丸中肉桂酸的血药浓度监测及药动学研究提供了方法学基础.     

大鼠血浆中芦荟大黄素浓度的固相萃取-高效液相色谱法测定及其药代动力学研究

目的:建立芦荟大黄素在大鼠血浆中的固相萃取-高效液相色谱(SPE-HPLC)分析方法,研究大鼠体内的药代动力学过程。方法:SD大鼠,按50和20 mg.kg-1剂量灌胃给药,不同时间点尾静脉取血,以SPE处理血浆样品,用HPLC内标法测定血药浓度,甲醇-0.1%磷酸水(70∶30)为流动相,柱温为30℃,检测波长254 nm,以DAS2.0软件计算药代动力学参数。结果:血浆中芦荟大黄素在0.016～19.53μg.mL-1(r=0.998 1)范围内线性关系良好,提取回收率为88.7%～94.6%,最低检测限为0.008μg.mL-1,定量限为0.016μg.mL-1,日内和日间精密度RSD均<6%。结论:芦荟大黄素在大鼠体内呈二室模型,分布广泛。建立的测定大鼠体内芦荟大黄素含量的方法具有良好的准确度、精密度以及专属性,适用于芦荟大黄素在大鼠体内的药代动力学研究。     

LC-MS/MS测定人血浆中的米氮平

目的 采用LC-MS/MS法测定人血浆中的米氮平.方法 采用Ultimate C18色谱柱(50 mm ×4.6 mm,5 μm);流动相为甲醇-水-甲酸(80∶20∶0.05);流速0.2 mL·min-1;柱温为室温;多反应离子监测,正离子模式扫描,电喷雾离子源.血浆样品碱化后经二氯甲烷萃取进样.结果 米氮平的线性范围为0.1～120 ng·mL-1,最低定量限为0.1 ng·mL-1.米氮平和内标的tR均为2.4 min,批内和批间RSD分别小于7.12%、9.01%,方法回收率和萃取回收率分别为103.77%～106.38%、84.86%～91.92%,基质效应为7.60%～10.32%.血浆样品-30 ℃下保存40 d、室温下放置5 h、反复冻融3次均稳定,血药浓度变化率小于±15%.结论 所建方法简单、快速,可用于米氮平血药浓度、药物动力学及生物等效性的研究.     

高效液相色谱法测定小鼠血浆头孢匹胺钠的含量

目的:建立小鼠血浆中头孢匹胺钠HPLC检测方法,为临床上头孢匹胺钠血药浓度监测提供试验依据。方法:样品处理采用25%高氯酸(v/v)沉淀蛋白质。PLATISILTMC18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-三乙胺醋酸(三乙胺14 mL,冰醋酸5.7 mL,加蒸馏水定容至100 mL)-水(10∶0.2∶89.8),1 mol.L-1醋酸调节pH5.38,流速为0.8 mL.min-1;检测波长为254 nm。结果:所建立方法在0.2～250.0μg.mL-1范围内线性良好,方法平均回收率为96.1%,平均提取回收率为77.7%;日内变异RSD小于5%。小鼠尾静脉给药150 mg.kg-1后1 h血浆头孢匹胺钠浓度为(196.1±11.9)μg.mL-1,24 h血药浓度降至(0.5±1.6)μg.mL-1,采用DAS2.0程序求得药物动力学参数t1/2为3.41 h,MRT为3.24 h。结论:该法准确、灵敏、快速,内源性成分无干扰,适用于血浆中头孢匹胺钠的分析测定。     

HPLC法测定大鼠静脉注射汉黄芩素的血药浓度及其药动学研究

目的:建立测定汉黄芩素大鼠血药浓度的HPLC方法,应用该法进行大鼠静脉注射汉黄芩素的药动学研究.方法:采用Lichrospher ODS色谱柱(150 mm×6.0 mm,5μm),流动相为甲醇-水-乙酸(60∶40∶0.5);流速为1 mL·min-1;检测波长为275 nm;柱温为35℃.健康大鼠禁食16 h后,尾静脉iv汉黄芩素溶液,测定不同时间血药浓度,血药浓度-时间数据采用3p97程序拟合其药动学参数.结果:线性范围为0.02-5μg·mL-1,最低定量限为20 ng·mL-1,批内批间精密度(RSD)均小于10%.其主要药动学参数为:t1/2,α0.0656 h,t1/2,β4.447 h,AUC为883 h·ng·mL-1.结论:该方法快速简便,符合生物样品的测定要求,可用于汉黄芩素血药浓度的测定和药动学研究,静脉注射汉黄芩素的大鼠体内药动学呈开放二室模型,分布较快,代谢较慢.     

LC-MS/MS法测定犬体内托拉塞米浓度及相对生物利用度研究

目的:建立LC-MS/MS法测定Beagle犬体内托拉塞米的浓度,并研究托拉塞米缓释片的相对生物利用度。方法:色谱柱为Waters Sym-metry-C18(100mm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇∶20mmol/L甲酸铵(65∶35,V∶V);流速0.4mL/min;柱温30℃。采用两制剂双周期随机交叉试验设计,分别给予6只Beagle犬受试制剂或参比制剂5mg,采用LC-MS/MS法测定给药后不同时间的血药浓度。结果:托拉塞米线性范围为0.02～5μg/mL,最低定量限为0.02μg/mL,分析方法灵敏、稳定、特异性高。受试制剂和参比制剂的主要药动学参数:峰浓度(Cmax)、达峰时间(tmax)和药-时曲线下面积(AUC0-48h)分别为(2.6±0.5)g/mL和(3.0±0.6)g/mL、(3.3±1.4)h和(1.2±0.8)h、(36.1±11.0)g.h.mL-1和(32.1±13.1)g.h.mL-1。以AUC0-48h计算,受试制剂的相对生物利用度F为(118.0±28.3)%。结论:该方法操作简单、准确、重复性好,并成功地运用于犬体内托拉塞米相对生物利用度的研究。     

LC-MS/MS法定量测定人血浆中普罗布考的浓度

目的：建立一种特异、灵敏的液质联用方法定量测定人体血浆中普罗布考的浓度。方法：在25.0μL含待测药物的血浆中加入内标Pr-1312及萃取液混匀沉淀蛋白。采用X-Terra RPC（82.1mm×50mm,3.5μm）色谱柱;柱温50℃;流动相为10mmol·L-1碳酸氢铵水溶液-乙腈（20：80）;进样量5μL;流速0.2mL·min-1。质谱检测方式为ESI-,MRM扫描,监测普罗布考m/z515.3→236.1,内标Pr-1312m/z382.2→161.0,分析时间3.3min。结果：普罗布考在10.0～5000.0ng·mL-1的浓度范围内线性关系良好（r〉0.99）,日内与日间精密度（RSD）〈10.2%,准确度（RE）〈±15.0%。所有稳定性考察项目结果均符合要求。结论：本文采用蛋白沉淀样品前处理以及液质联用定量测定人体血浆中普罗布考的浓度方法,能够满足临床试验中生物样品分析的需要。     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中多潘立酮浓度

目的建立高效液相色谱-串联质谱测定人血浆中多潘立酮(第2代胃动力药)浓度的方法。方法用TC-C18色谱柱,流动相为甲醇(含0.025%甲酸)-1 mmol.L-1甲酸铵溶液(含0.05%甲酸),用梯度洗脱进行分离,流速为1.0 mL.min-1。用正离子化模式,多重反应监测(MRM)扫描方式进行检测定量。结果多潘立酮的线性范围为0.1～50.0 ng.mL-1,日内、日间精密度均小于15%,提取回收率大于80%。结论本方法灵敏、准确、快速,可用于人血浆中多潘立酮浓度的测定和药代动力学研究。     

LC-MS/MS法测定人血浆及唾液中伏立康唑浓度

目的:采用LC-MS/MS法测定人血浆及唾液中伏立康唑的浓度。方法:血浆样品及唾液样品经氢氧化钠碱化,萃取剂萃取后进行分析。使用Agilent C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%甲酸为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1。结果:线性范围为10～4 000 ng·mL-1,最低定量限为10 ng·mL-1,萃取回收率为81.3%～94.4%,基质效应为-5.35%～1.25%,日内和日间RSD均<7.9%。结论:所用方法快速、简便、灵敏度高,适用于人血浆伏立康唑浓度测定及药代动力学和生物利用度的研究。     

LC-MS/MS法同时测定人血浆中紫杉醇和多西他赛的质量浓度

目的建立一种简单、快速,可同时测定人血浆中紫杉醇和多西他赛药物质量浓度的LC-MS/MS方法。方法以罗红霉素为内标,血浆经乙腈沉淀蛋白、离心后进样分析;色谱柱为Hypersil GOLD aQ;流动相为1mL·L-1甲酸溶液-乙腈;梯度洗脱;流速为0.4mL·min-1;离子源为可加热电喷雾离子源(HESI);检测方式:正离子检测;扫描方式为多反应监测(MRM),紫杉醇、多西他赛和罗红霉素的检测离子对分别为m/z854.3→509.1,808.3→527.1和837.6→679.3。结果每份含紫杉醇和多西他赛的样品分析时间为6min,血浆中紫杉醇和多西他赛的药物质量浓度在0.005~1.000μg·mL-1范围内线性关系良好,最低定量限为0.005μg·mL-1,两药测定的日内和日间精密度RSD<15%,提取回收率分别为94.97%~101.95%和96.07%~112.86%,基质效应分别为101.14%~115.59%和82.40%~95.77%。紫杉醇和多西他赛血浆样品在反复冻融3次、4℃保存2h和-80℃保存1个月的条件下稳定。结论该研究建立的LC-MS/MS分析方法简便、快速、灵敏和准确,能同时测定人血浆中紫杉醇和多西他赛的质量浓度。     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中兰索拉唑及其代谢物浓度

目的建立液相色谱-串联质谱同时测定人血浆中兰索拉唑及其代谢物兰索拉唑砜、5-羟基兰索拉唑浓度的方法。方法用Agilent SB-C18色谱柱,流动相为0.002 mol.L-1乙酸铵(用甲酸调pH为4)-乙腈(60∶40,v/v),流速为0.3 mL.min-1。用正离子电离,多离子反应监测进行定量分析。结果兰索拉唑、兰索拉唑砜、5-羟基兰索拉唑线性范围分别为5～3044,1.5～550,2～549.5 ng.mL-1,三者日内、日间精密度均小于10%,三者的提取回收率为81.55%～98.74%(RSD<10%)。结论本方法灵敏、准确、快速,可用于人血浆中兰索拉唑及其代谢物浓度的测定和药代动力学研究。     

LC-MS/MS方法同时检测人血浆中异烟肼、乙胺丁醇和吡嗪酰胺的浓度

目的:建立同时检测人血浆中3种抗结核药物异烟肼、乙胺丁醇和吡嗪酰胺浓度的LC-MS/MS方法,用于肺结核患者及临床试验中三药血药浓度的测定。方法:以对乙酰氨基酚为内标,血浆样品经乙腈沉淀蛋白等处理后检测。采用AgilentZORBAX SB-Aq色谱柱(2.1 mm×100 mm,3.5μm)为分析柱,ZORBAX SB-Aq柱(2.1 mm×12.5 mm,5μm)为保护柱,以乙腈-5 mmol·L-1甲酸铵水溶液(含0.1%甲酸)(8:92,v/v)为流动相,使用电喷雾离子源(ESI),以正离子多反应监测(MRM)方式进行检测,异烟肼m/z 138.2→121.0,乙胺丁醇m/z 205.2→116.1,吡嗪酰胺m/z 124.1→81.1,对乙酰氨基酚m/z152.0→110.0。分析时间为5 min。结果:血浆中内源性物质对测定无干扰,异烟肼线性范围为0.1～6.0μg.mL-1,定量下限(LLOQ)为0.1μg.mL-1,乙胺丁醇线性范围为0.1～5.0μg.mL-1,定量下限(LLOQ)为0.1μg.mL-1,吡嗪酰胺线性范围为1.0～50.0μg.mL-1,定量下限(LLOQ)为1.0μg.mL-1。日内、日间精密度(RSD)均小于10%,准确率为90.4%～108.7%。结论:本方法特异性强,灵敏度高,测定结果可靠,适用于临床血浆样品的高通量分析。     

LC-MS/MS法测定恒河猴血浆中巴替非班的浓度及药代动力学研究

目的:建立恒河猴血浆中巴替非班浓度的高效液相-串联质谱(Liquid Chromatography-TandemMass Spectrometry,LC-MS/MS)测定法,并研究其在恒河猴体内的药代动力学。方法:取恒河猴血浆200μL,加入含2μg.mL-1内标依替巴肽的乙腈-甲醇(70∶30)混合溶剂600μL沉淀蛋白,取上清液吹干,残留物加100μL流动相复溶,取上清液进行LC-MS/MS分析。色谱柱为ODS C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-20 mmol.L-1甲酸铵(50∶50),流速为0.4 mL.min-1;质谱采用电喷雾离子化,正离子检测,巴替非班和内标的选择性检测离子分别为m/z 818.3→632.4和m/z 832.0→646.2。结果:巴替非班的线性范围为25～5 000 ng.mL-1,最低定量下限(lower limit of quantitation,LLOQ)为25 ng.mL-1,准确度、精密度及回收率均符合要求。结论:本方法专属性强,检测限低,灵敏度高,线性关系良好,方法简便快捷,适用于巴替非班临床前药代动力学研究。     

LC-MS/MS测定人血浆中哌甲酯

目的建立LC-MS/MS测定人血浆中盐酸哌甲酯的浓度。方法待测血浆1.0 mL,经1 mol.L-1的氢氧化钠40μL碱化后,用4 mL乙醚萃取处理,采用Eclipse XDB-C18（4.6 mm×150 mm,5μm）色谱柱,以甲醇和水为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1。以电喷雾正离子源离子化,检测离子对盐酸哌甲酯为234.0/84.0,内标卡马西平为237.0/194.0。结果血浆中内源性物质对测定无干扰,最低定量限为0.1 ng·mL^-1,在1-100 ng·mL^-1内盐酸哌甲酯线性关系良好（r=0.999 1）,日内、日间RSD均小于8%,样品分析时间为10 min。结论该法专属性强、灵敏度高,操作简便快速,测定结果可靠,适于进行盐酸哌甲酯血药浓度监测。     

LC-MS/MS法测定家兔全血中的磷丙泊酚钠

目的采用高效液物色谱一串联质谱(HPLC-MS/MS)测定家兔全血中水溶性异丙酚前药磷丙泊酚钠的浓度。方法采用Welch Ultimate XB C8柱(100 mm×2.1 mm,3μm),7-羟基香豆素为内标,流动相为5 mmol.L-1乙酸铵-乙腈(57∶43),流速0.4 mL.min-1。HPLC-MS/MS采用负离子电喷雾离子源,以多反应离子模式监测。全血样品经含内标的甲醇溶液直接沉淀蛋白后进样。结果标准曲线的线性范围是0.12～15μg.mL-1,最低定量下限为120 ng.mL-1;日内和日间RSD小于7.04%,RSD均小于8.40%。结论所用方法简便快速、准确灵敏,可用于磷丙泊酚钠血药浓度的测定和药动学的研究。