姜黄素抑制C6胶质瘤细胞增殖＼诱导其凋亡的分子机制

PTEN基因是近年来发现的、继P53之后又一重要的抑癌基因，其突变率在胶质细胞瘤中约占40％。姜黄素（Cureumin）是否可以通过诱导野生型PTEN基因的表达而抑制脑胶质瘤细胞增殖和／或促进其凋亡，目前国内外尚无报道。目的观察Cureumin是否上调胶质瘤细胞野生型PTEN基因的表达而抑制脑胶质瘤细胞增殖和／或促进其凋亡并探讨其分子机制。方法采用大鼠胶质瘤细胞株（C6细胞）：MTT观察Curcumin对C6细胞存活增殖的影响；通过荧光标记的BrdU抗体，品微镜下观察Curcumin对C6细胞分裂增殖的影响；碘化丙啶（propldium iodide，PI）经流式细胞仪测定Curcumin对C6细胞周期的阻滞；用荧光染料AnnexinV—PE和7-AAD借助于流式细胞仪观察Curcumin对C6细胞早期凋亡的影响；DCFDA荧光探针检测Curcumin诱导的细胞内活性氧的产生；     

基因转移FasL诱导人脑胶质瘤细胞凋亡的体外实验研究

目的：探讨体外基因转移Fas配体（Fas-Ligand,FasL)对恶性人脑胶质瘤细胞凋亡的影响，方法：用携带人FasL cDNA的缺陷型重组腺病毒载体（Ad-FL)，在体外转导5株人脑胶质瘤细胞，并使其表达，通过流式细胞仪，RT－PCR，TUNEL法及荧光显微镜分别进行Fas/FasL表达检测和相关凋亡检测，分析，结果：RT－PCR和流式细胞仪检测5株胶质瘤细胞表达均表达Fas，不表达FasL,而Ad-FL转导的5株胶质瘤细胞均能表达FasL,Fas表达水平与抗Fas抗体诱导胶质瘤细胞凋亡敏感性无相关性，Ad-FL能显著诱导5株胶质细胞瘤在体外凋亡或抑制其生长，结论：重组腺病毒FasL在体外诱导人脑胶质瘤凋亡效果显著。     

甘草查尔酮A对人脑胶质瘤U251细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨甘草查尔酮A对人脑胶质瘤U251细胞增殖和凋亡的影响。方法 将体外培养的人脑胶质瘤U251细胞分为四组（n=20）,对照组予以等量0.9%NaCl处理,甘草查尔酮A低剂量组予以15μmol/L甘草查尔酮A处理,甘草查尔酮A中剂量组予以30μmol/L甘草查尔酮A处理,甘草查尔酮A高剂量组予以45μmol/L甘草查尔酮A处理,均干预48 h。通过噻唑蓝比色法检测四组的细胞增殖水平;采用实时荧光定量法检测四组的Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白β-catenin、Cyclin D1mRNA的表达水平;采用蛋白印迹法检测四组的增殖细胞核抗原Ki-67(Ki-67)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白表达水平。结果 甘草查尔酮A低剂量组、甘草查尔酮A中剂量组和甘草查尔酮A高剂量组的细胞增殖水平、β-catenin mRNA、Cyclin D1mRNA相对表达量、Ki-67和Bcl-2蛋白相对表达量均低于对照组,差异均有统计学意义（P<0.01）;甘草查尔酮A中剂量组和甘草查尔酮A高剂量组的细胞增殖水平、β-catenin mRNA、Cyclin D1mRNA相对表达量、...     

熊果酸对脑胶质瘤细胞株U251凋亡及survivin和caspase-3表达的影响

目的 观察熊果酸（ursolic acid, UA）诱导脑胶质瘤细胞株U251凋亡的机制. 方法 培养人脑胶质瘤细胞株U251,以Hoechst 33258染色法及琼脂糖凝胶电泳测定UA诱导脑胶质瘤细胞株U251凋亡的作用. 免疫印记法及荧光双标法测定survivin和caspase-3表达,荧光法测定caspase-3活性. 结果 Hoechst 33258染色法和琼脂糖凝胶电泳显示UA明显诱导U251细胞凋亡,细胞核DNA呈梯状降解. 免疫沉淀法以及荧光双标法均显示UA可抑制survivin表达;同时UA上调caspase-3表达. 结论 UA诱导U251细胞凋亡与其抑制survivin表达,同时上调caspase-3表达有关.     

KTDA抑制肿瘤细胞增殖和诱导凋亡的研究

目的探讨3-Keto-tirucall-8,24-dien-21-oic acid(KTDA)体外抑制肿瘤细胞增殖及诱导凋亡的作用。方法使用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察KTDA对肿瘤细胞的增殖抑制作用;通过吖啶橙染色,观察肿瘤细胞的形态学变化;琼脂糖凝胶电泳法检测它们对细胞DNA降解的影响。结果KTDA浓度为100、10、1μg.mL-1,作用72 h时,能抑制人乳腺癌细胞系MCF-7、人肝癌细胞株SMMC-7721、人慢性髓性白血病细胞系K562、人宫颈癌细胞系Hela、人舌癌细胞系Tca 8113的生长,并呈浓度依赖性。当KTDA浓度为10μg.mL-1时,处理72 h后,于荧光显微镜下观察到凋亡小体,电泳结果显示典型的DNA梯状条带。结论KTDA能抑制5种肿瘤细胞的增殖,并呈浓度依赖性,KTDA对MCF-7、SMMC-7721、K562、Hela比较敏感,Tca 8113次之,其机制可能为通过诱导5种肿瘤细胞凋亡而发挥抗肿瘤的作用。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体诱导人脑胶质瘤细胞凋亡作用的研究

目的研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）受体在不同级别胶质瘤中的表达及TRAIL对原代培养的胶质瘤细胞凋亡的诱导作用。方法应用原位杂交的方法检测TRAIL受体在45例胶质瘤和5例正常脑组织中的转录表达；分别对其中22例和3例进行原代培养，用流式细胞仪检测TRAIL作用后细胞的凋亡率。结果在45例胶质瘤中，DR4、DR5、DcR1、DcR2的mRNA的表达例数分别为38例、41例、40例、2例。成功培养出18例胶质瘤细胞和3例正常胶质细胞，TRAIL作用后凋亡率在80％以上、50％～80％、50％以下的例数分别为5例、9例、4例，正常胶质细胞无明显凋亡发生。结论TRAIL受体的表达与肿瘤的恶性程度无关；TRAIL能有效地选择性杀死胶质瘤细胞。     

基于Wnt通路分析沉默miR-720对脑胶质瘤细胞生物学行为的影响

目的 基于Wnt通路探究沉默miR-720对脑胶质瘤细胞生物学行为的影响.方法 选取脑胶质瘤细胞,经培养后分为空白组、过表达miR-720组和沉默miR-720组,对3组细胞增殖、凋亡能力进行检测,检测3组细胞侵袭、迁移能力,RT-PCR检测miR-720表达,Western blot法检测P53、caspase3、B...     

榄香烯抑制人脑胶质瘤U251细胞增殖和PCNA基因表达的研究

目的研究榄香烯(elemene)抑制人脑胶质瘤U251细胞增殖和抑制增殖细胞核抗原(PCNA)基因表达作用。方法应用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)测定不同浓度榄香烯对人脑胶质瘤U251细胞的抑制作用,同时观察时间—效应关系,并求出半数致死浓度(IC50);免疫组化法检测IC50浓度榄香烯作用0、24和48h的U251细胞中PCNA蛋白表达差异;RT-PCR检测不同浓度或不同作用时间的榄香烯抑制PCNA基因的表达。结果榄香烯对U251细胞株增殖具有抑制作用,呈剂量和作用时间的依赖性,IC50为0.062g·L-1。榄香烯对U251细胞内PCNA蛋白表达有明显的抑制作用;RT-PCR分别证实榄香烯抑制PCNA基因的表达,其PCNA基因mRNA表达值随药物浓度增加或作用时间延长增加而不断下降,呈剂量和作用时间的依赖性。结论榄香烯能有效下调PCNA基因表达,从而抑制人脑胶质瘤U251细胞增殖,对抗人脑胶质瘤具有广阔的前景。     

顺铂诱导人宫颈鳞癌细胞Caski细胞凋亡的分子机制

目的研究顺铂对人宫颈癌Caski细胞体外增殖抑制作用及凋亡的影响,探究顺铂诱导宫颈鳞癌细胞凋亡的分子机制。方法运用体外细胞培养,顺铂以不同浓度（20、10、5、2、1μg/ml）作用于人宫颈癌Caski细胞。采用噻唑蓝（MTT）法测定顺铂对细胞杀伤率;用流式细胞检测法测定细胞周期时相改变及细胞凋亡率;琼脂糖电泳法观察凋亡细胞DNALadder现象;Western blot检测凋亡相关基因Bcl-2等表达;荧光染色观察细胞线粒体膜电位的改变。结果顺铂对人宫颈癌Caski细胞有较强的抑制作用,有明显的时间和剂量依赖性;可使Caski细胞G2/M期比例明显下降（P〈0.01）,S期比例升高（P〈0.01）;诱导细胞凋亡发生;顺铂作用Caski细胞后,Bcl-2表达量减少,Bax表达增加,Caspase3活化,线粒体膜电位改变。结论顺铂在体外可有效抑制人宫颈癌Caski细胞增殖,可能通过影响肿瘤细胞DNA合成,改变细胞周期时相分布、诱导凋亡发挥抑制细胞增殖作用,其凋亡分子机制与Bcl-2家族表达调控,线粒体膜跨膜电位下降的线粒体参与凋亡途径相关。     

Isoliquiritigenin inhibits cell proliferation and induces apoptosis in human hepatoma cells

Isoliquiritigenin (4,2',4'-trihydroxychalcone, ISL) is a natural pigment with a simple chalcone structure. In this study, we report the ISL-induced inhibition on the growth of human hepatoma cells (Hep G2) for the first time. The cell growth inhibition achieved by ISL treatment resulted in programmed cell death in a caspase activation-dependent manner, with an IC50 of 10.51 microg/mL. Outcomes of ISL treatment included the up-regulation of IkappaBalpha expression in the cytoplasm, and the decrease of NF-kappaB level as well as its activity in the nucleus. In addition, ISL also suppressed the expression of Bcl-XL and c-IAP1/2 protein, the downstream target molecule of NF-kappaB. These results demonstrated that ISL treatment inhibited the NF-kappaB cell survival-signaling pathway and induced apoptotic cell death in Hep G2 cells.     

脑胶质瘤中p33ING1蛋白表达及其与细胞凋亡和增殖关系的研究

目的检测p33 ING1蛋白在脑胶质瘤中的表达,探讨其与肿瘤细胞增殖、凋亡及肿瘤恶性程度的关系。方法应用免疫组化S-P法分别检测p33 ING1和增殖细胞核抗原（PCNA）的表达,并用TUNEL法做原位细胞凋亡检测,实验数据进行统计分析。结果50例脑胶质瘤中p33ING1蛋白表达的总阳性率为90%（28/50）,随着胶质瘤恶性度的增高其表达水平下降,而且表达水平与细胞凋亡指数（AI）呈正相关与细胞增殖指数（PI）呈负相关（P〈0.01）。结论胶质瘤细胞中抑癌基因p33ING1的表达可促进细胞凋亡,抑制细胞过度增殖,与胶质瘤恶性程度密切相关。检测其表达水平的变化对胶质瘤的诊断、治疗及判断预后均有重要指导意义。     

告达庭对人胃癌细胞株SGC-7901细胞增殖和凋亡的调节作用

目的研究告达庭(caudatin)对SGC-7901胃癌细胞增殖与凋亡的调节作用及可能的分子机制。方法 MTT法检测告达庭对SGC-7901细胞增殖的影响;流式细胞术分析SGC-7901细胞周期的变化;细胞形态学、琼脂糖凝胶电泳及FITC-AnnexinⅤ/PI双标记检测对胃癌细胞凋亡的影响,免疫印迹实验检测细胞凋亡相关蛋白表达水平。结果可明显抑制SGC-7901细胞的增殖,且抑制作用呈时间和剂量依赖性;SGC-7901细胞经告达庭作用24h后,处于G1期的细胞数目增加,而G2期和S期的细胞数目明显减少,并发生明显的凋亡;调节Bcl-2家族相关因子的表达水平和活化caspase-9、caspase-3与告达庭诱导SGC-7901细胞凋亡相关。结论告达庭可抑制SGC-7901胃癌细胞的增殖并诱发凋亡,其分子机制可能与调节Bcl-2与Bax的平衡以及释放CytC,进而促进caspase-9、caspase-3和PARP的降解密切相关。     

丙戊酸对人脑胶质母细胞瘤细胞株抑制增殖及诱导凋亡作用研究

目的研究丙戊酸(2-propylpentanoic acid,VPA)体外对人脑胶质母细胞瘤细胞株增殖抑制、诱导细胞周期阻滞及促进凋亡的作用,为临床治疗提供理论依据。方法 MTT比色法检测VPA对胶质母细胞瘤细胞株的杀伤作用;流式细胞术检测其对细胞周期及凋亡的影响作用;Western blot法检测乙酰化组蛋白H3(acetyl-Histone H3)、乙酰化组蛋白H4(acetyl-histone H4)表达量变化情况。结果 VPA对胶质瘤母细胞瘤细胞株SF295、U87具有抑制增殖作用,诱导细胞周期阻滞于G2/M期,乙酰化组蛋白H3、H4表达量呈时间依赖性增加。大剂量可以诱导出现凋亡。结论 VPA能够在体外抑制胶质瘤细胞生长,诱导细胞周期阻滞及促进细胞凋亡,其机制可能与促进组蛋白乙酰化有关。     

苯丁酸钠对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的观察分析苯丁酸钠( Sodium phenylbutyrate,NaPB)对乳腺癌 MDA?MB?231细胞增殖和凋亡的影响,初步探究其可能的作用机制。方法以不同剂量 NaPB(0 mmol/L、2 mmol/L和 4 mmol/L)处理乳腺癌 MDA?MB?231细胞株并进行实验分组:对照组, 2 mmol/L NaPB组 4 mmol/L NaPB组。采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法( MTT法)检测各组乳腺癌细胞的增殖情况,使用流式细胞仪检测细胞凋亡,应用蛋白质印迹法(Western Blot)检测凋亡相关蛋白 B细胞淋巴瘤 /白血病 ?2(Bcl?2)、Bcl?2相关 X蛋白( Bax)和乳腺癌易感基因 1(BRCA1)蛋白表达的水平。结果 NaPB能显著抑制乳腺癌 MDA?MB?231细胞的生长增殖,并可诱导乳腺癌细胞凋亡,对照组、 2 mmol/L NaPB组和 4 mmol/L NaPB组乳腺癌细胞的凋亡率分别为( 4.25±0.89)%、(14.11±2.98)%和( 32.73±1.89)%,两两比较均差异有统计学意义( P＜0.05)NaPB可诱导凋亡相关蛋白 Bcl?2表达水平下降,而 Bax表达水平升高, NaPB的抗肿瘤作用在高剂量组中表现得更明显。与对相比 NaPB可显著下调 BRCA1蛋白的表达,差异照组,有统计学意义(P＜0.05)。结论 NaPB可抑制乳腺癌细胞增殖和诱导细胞凋亡,其作用机制可能与 NaPB下调 BRCA1表达有关。     

Citreoviridin inhibits cell proliferation and enhances apoptosis of human umbilical vein endothelial cells

In some areas of China, citreoviridin (CIT) is considered one of the risk factors for development of cardiovascular disease (CVD). Apoptosis of endothelial cell may induce vascular endothelium injury and atherosclerosis, which result in CVD probably. In this study, we investigated the effect of CIT on apoptosis and proliferation of human umbilical vein endothelial cells (HUVECs). The MTT assay was used to determinate HUVECs proliferation. Distribution of the cell cycle was analyzed by flow cytometry. The Annexin-V/PI staining was used to investigate cell apoptosis. Western blotting analysis was used to indicate changes in the expression level of apoptosis-related proteins. The results indicated that CIT inhibited HUVECs proliferation and the cells were arrested at G0/G1 phase, which is associated with decreased levels of cyclinD1 and increased expression of p53 and p21. The apoptosis rate of HUVECs was improved by CIT. The expression of Bcl-2 were down-regulated after CIT treatment, whereas the levels of Bax was significantly up-regulated. Furthermore, CIT-induced apoptosis was accompanied by the activation of caspase-3, -9. These findings demonstrate that CIT inhibits cell proliferation via DNA synthesis reduction and induces caspase-dependent apoptosis in HUVECs. CIT plays a pivotal role in the process of endothelial cell apoptosis, may thereby play an important role in the improvement of CVD in areas of China that have a high prevalence of CIT contamination.     

海兔素对人胃癌细胞SGC-7901增殖和凋亡的影响

目的研究海兔素(Aplysin)对人胃癌SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响。方法MTT法测定海兔素对胃癌SGC-7901细胞增殖的影响;倒置显微镜观察细胞生长状态的变化;HE染色检测细胞凋亡情况;RT-PCR法检测SGC-7901细胞中COX-2mRNA的表达。结果经60、120、240、480mg.L-1海兔素作用24、48h后,SGC-7901细胞的生长增殖均明显受到抑制,呈量效依赖性。延长作用时间,抑制作用差异无显著性(P>0.05);120、240mg·mL-1海兔素作用24h后,细胞生长状态明显下降;经120、240mg·mL-1海兔素处理18h后,细胞凋亡率分别为(15.0±2.12)%和(18.4±2.30)%,与对照组(1.4±0.55)%比较差异均有显著性(P<0.05);60、120、240mg·mL-1海兔素处理24h后,SGC-7901细胞COX2mRNA水平有下调趋势,但差异无显著性(P>0.05)。结论海兔素对人胃癌SGC-7901细胞具有抑制增殖和诱导凋亡的作用。