高温固化瘤苗在高压氧环境下抗肿瘤免疫的动物实验研究

目的探讨高温固化瘤苗在高压氧环境下诱发的抗肿瘤效应.方法随机分为常压瘤苗组、高压氧瘤苗组和对照组,采用高温固化瘤苗免疫对小鼠进行动物实验,通过TCR-STV-MHC三分子复合体实验,观察其在体外诱导淋巴细胞杀伤活性;通过免疫预防接种和免疫治疗荷瘤实验,观察其在小鼠体内诱发的抗瘤效应.结果高压氧瘤苗组对肿瘤细胞杀伤活性达90.56%,常压瘤苗组对肿瘤细胞杀伤活性达75.90%,而对照组对肿瘤细胞杀伤活性为25.80%.用其免疫小鼠可使小鼠获得对随后接种同源细胞攻击,有免疫保护作用,并产生免疫记忆;高压氧瘤苗组抑瘤率为92.63,常压瘤苗组抑瘤率为82.11%.对照组抑瘤率为00.00%.结论高压氧结合高温固化瘤苗能显著地提高激活宿主免疫系统,抑制肿瘤生长,有望成为一种新的、安全的、疗效好及毒副作用低绿色治疗方法.     

高强度聚焦超声固化瘤苗的研制

目的：探讨运用高强度聚焦超声治疗系统（HIFU）制备小鼠肝癌H22固化瘤苗的方法,并初步评价瘤苗的免疫活性。方法：应用HIFU治疗系统样机分别在声强246W/cm2和1054W/cm2下处理小鼠肝癌H22细胞。结果：声强1054W/cm2下细胞破裂成碎片状,而声强246W/cm2细胞外形基本如常,前者作为瘤苗具有明显强的抗肿瘤细胞攻击作用P＜0.05。结论：HIFU能一次性灭活肿瘤细胞,并在一定声强下破坏肿瘤细胞膜结构使细胞内抗原充分暴露和释放,从而增加了瘤苗免疫原性。     

高压氧暴露下肝癌(H22)固化瘤苗免疫的动物实验研究

目的探讨肝癌(H22)超声固化瘤苗在高压氧环境下诱发小鼠的抗肿瘤效应及对免疫功能的影响。方法将实验小鼠随机分为对照组、常压瘤苗组和高压氧瘤苗组,采用肝癌(H22)超声固化瘤苗对小鼠进行免疫实验,通过癌细胞攻击实验和胸腺细胞自发性3H-TdR掺入量测定,观察其在小鼠体内诱发的抗瘤和胸腺免疫效应。结果A组的抑瘤率为0、B组和C组的抑瘤率分别为83.33%和91.67%,死亡率分别为16.67%和8.33%,生命延长率分别为75%和87%,6周生存天数(39.14±5.6)d和(51.28±3.7)d,肿瘤发生率分别为41.66%和25%,其两组与A组比较差异有统计学意义(P<0.05),而B组和C组比较差异也有统计学意义(P<0.05)。免疫B组和C组的腺细胞平均数显著上升,而胸腺细胞3H-TdR掺入量明显下降。结论免疫小鼠可获得对随后接种同源细胞攻击,有免疫保护作用,并产生免疫记忆;高压氧曝露的免疫小鼠的抗肿瘤效应和免疫力明显强于另外两组,超声固化瘤苗与高压氧结合能显著地提高激活宿主免疫系统,抑制肿瘤生长和延长生命,有望成为一种新的、安全的、有效和无毒副作用的综合治疗新模式。     

瘤苗联合当归多糖抗瘤的实验研究

以皮下接种Ｓ１０８肉瘤细胞的昆明鼠为荷瘤动物模型,用Ｓ１８０瘤菌和／或当多糖免疫治疗。结果二者联用能显著增强荷瘤鼠的巨噬细胞介导细胞毒作用及ＮＫ活性。提示Ａｐ能促进免疫功能,具有免疫佐剂活性,与瘤苗联用可提高瘤苗的主动免疫治疗效应。     

SLC基因修饰瘤苗免疫小鼠脾细胞过继治疗胃癌实验研究

目的探讨次级淋巴组织趋化因子(secondarylymphoidtissuechemokine,SLC)免疫基因转染胃癌细胞瘤苗免疫小鼠后获得的脾淋巴细胞后治疗经同一免疫基因修饰瘤苗转染的小鼠胃癌的可行性和疗效。方法用200PFU/细胞滴度的重组腺病毒载体(pVAX1)将人SLC基因转染小鼠胃癌SGC-7901细胞株,经80mg/L丝裂霉素(MMC)处理制备成胃癌细胞瘤苗,免疫同系小鼠后分离其脾淋巴细胞,转染SLC基因(腺病毒载体滴度200PFU/细胞)后注射入直径1cm的小鼠胃癌淋巴结转移模型瘤体内,观察抗瘤效果。结果转SLC基因瘤苗治疗组小鼠瘤体增加值最小(0.08±0.05)cm3,与各对照组比差异有显著性[转染SLC基因,未转染SLC和生理盐水注射组分别为(1.46±0.15)、(1.56±0.23)和(2.12±0.54)cm3,P<0.05]。结论SLC基因修饰癌瘤苗诱导小鼠产生的免疫脾淋巴细胞可能成为一种新的过继免疫治疗效应细胞及SLC基因瘤苗诱导特异性主动免疫治疗结合将有更优越的抗瘤效果和应用前景。     

冷冻瘤苗对小鼠肿瘤浸润性淋巴细胞增殖及抗肿瘤活性的影响

目的：探讨冷冻瘤苗对小鼠肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)增殖及体内抗肿瘤活性的影响。方法：分离TIL,一组常规培养,另一组加冷冻瘤苗进行培养,检测TIL的增殖活性。荷瘤小鼠分3组：对照组用生理盐水治疗,实验1组用常规培养TIL治疗,实验2组用冷冻瘤苗刺激培养TIL治疗,切除肿瘤送病理。结果：常规培养组TIL增殖慢,存活时间短,冷冻瘤苗刺激组TIL增殖快,存活时间长。对照组肿瘤生长迅速,无或仅少量淋巴细胞浸润,实验1组肿瘤稳定,少至中量淋巴细胞浸润,实验2组部分小鼠肿瘤缩小,中至大量淋巴细胞浸润,3组间肿瘤大小及淋巴细胞浸润程度差异有显著性(P＜0.01和P＜0．05)。结论：冷冻瘤苗可维持TIL增殖及增强在小鼠体内的抗肿瘤作用。     

用免疫缺陷型小鼠研究L615瘤株的继承性免疫和瘤苗免疫的原理

利用不同免疫缺陷小鼠研究转输正常脾细胞诱导受体鼠产生免疫预防效应的部分机理和瘤苗自动免疫的免疫细胞基础。结果表明:转输脾细胞诱导受体鼠产生免疫预防效应的有效脾细胞成分是T和/或NK细胞,似只有在受体鼠体内有T细胞的条件下才可使其产生免疫预防效应。还表明:MMC-L_(615)瘤苗诱导受体鼠产生的自动免疫保护效应,是通过体内T细胞介导实现的,T细胞可能是效应细胞。     

SE异构新型瘤苗的实验免疫治疗研究

目的探讨三棱、莪术提取物(SE)异构的MFC瘤苗的免疫原性及实验治疗效果.方法将经SE处理的MFC细胞作为异构瘤苗,进行免疫接种及实验治疗观察.结果SE异构的瘤苗免疫治疗荷瘤小鼠,可显著减慢小鼠肿瘤的生长、存活时间延长、成瘤率降低,有较好的实验治疗效果.结论SE可以增加肿瘤细胞的免疫原性,介导机体抗瘤效应,此疫苗可作为治疗该肿瘤的手段之一.     

瘤苗主动免疫对小鼠腹水型肝癌(H_(22))免疫预防和治疗效应的实验研究

本文应用小鼠腹水型肝癌淋巴道转移模型(H_(22)/F23),初步探讨了瘤苗主动免疫对H_(22)/F23的免疫预防效应以及对肿瘤生长和淋巴道转移的治疗作用。CFW系小鼠经β-榄香烯和丝裂霉素C处理的H_(22)/F23瘤细胞腹腔免疫三次,末次免疫后两周分别用H_(22)/F23和H_(22)交叉进行攻击。结果表明:β-榄香烯及MMC瘤苗均能诱导不同程度的免疫保护效应,后者效果更为显著。两种方法处理的H_(22)/F23瘤苗免疫对H_(22)/F23攻击的保护效应显著低于对H_(22)的保护效应,提示高淋巴道转移株H_(22)/F23细胞的免疫原性较低,推测这可能与其转移能力的增高有一定关系。用MMC处理的瘤苗细胞和非特异性免疫制剂(CP)对带瘤小鼠进行免疫治疗的结果证示:免疫治疗不仅明显抑制肿瘤生长,并可显著降低肿瘤淋巴道转移的发生率。     

榄香烯复合瘤苗免疫治疗对肿瘤生长和脾细胞细胞毒活性的影响

采用榄香烯复合瘤苗治疗６１５系小鼠乳腺癌和小鼠肝癌Ｈｃａ的高淋巴道转移亚系。Ｃａ７６１和ＨＣａ－Ｆ的生长均受到抑制;结果提示榄香烯复合瘤苗对ＭＨＣ表达水平不同的肿瘤都可能有治疗效应。     

NDV诱导肿瘤疫苗的制备及其在肿瘤主动免疫治疗中的应用

目的:探讨新城鸡瘟病毒 (NDV )修饰的自体肿瘤细胞疫苗 (ATV - NDV)的作用机制及临床意义。 方法 :用 NDV对自体肿瘤细胞进行活化、修饰、灭活后制备成肿瘤疫苗 ,用 EL ISA法对 5 2例肿瘤患者手术前后及免疫接种后外周血清中的 SIL- 2、IL- 2 R、IL- 6和 TNF进行检测 ,并与正常对照组进行比较。 结果:5 2例肿瘤患者IL- 2 R、IL- 6、TNF水平明显高于正常对照组 (P <0 .0 1) ,而 SIL- 2水平明显降低 (P <0 .0 1)。患者手术后 IL- 2 R、IL- 6较手术前明显增高 (P <0 .0 1) ,SIL- 2、TNF较手术前有所降低 (P >0 .0 5 )。经免疫接种 ,患者 SIL- 2较接种前明显增高 (P <0 .0 1) ,而 IL- 2 R、IL- 6、TNF较接种前明显降低 (P <0 .0 1)。 结论 :经 NDV修饰的 ATV- NDV是一种免疫源性高和安全有效的免疫制剂 ,具有针对性强、特异性高的优点 ,并能改善患者的抗肿瘤免疫反应     

伤寒杆菌菌苗抗肿瘤的实验研究

应用伤寒杆菌菌苗作为疫苗对小鼠进行体内,外抗肿瘤治疗实验。结果表明腹腔注射一定剂量的伤寒杆菌菌苗在体内具有明显的抑制作用,而在体外对却多种瘤细胞无直接杀伤作用,提示伤寒杆菌菌苗的抑瘤作用是由机体介导的。进一步的免疫学指标显示以伤寒杆菌菌苗作为抗肿瘤商苗可增强荷瘤小鼠的ＮＫ细胞和Ｍφ细胞的杀伤活性。因此证明伤寒杆菌菌苗有较强的体内抗肿瘤作用。     

小鼠肝癌细胞系Hepa1-6 B7.1瘤苗抗肿瘤免疫的实验研究

目的：研究小鼠肝癌细胞系Hepal-6转染B7.1基因后在体内外抗肿瘤免疫的作用。方法：采用脂质体介导的方法用pLXSNB7.1转染PA317包装细胞,经G418筛选出高滴度阳性的细胞克隆,以流式细胞仪检测B7.1分子的表达情况;用所获病毒上清进一步感染Hepal-6细胞,观察转染B7.1基因后Hepal-6细胞作为肿瘤疫苗在体内外诱发抗肿瘤免疫的情况。结果：Hepal-6/B7.1高表达B7.1分子,其致瘤性明显降低。接种小鼠后成瘤率为20%,而亲代Hepal-6细胞成瘤率为100%,转B7.1基因肿瘤细胞疫苗可抑制肿瘤生长速度,延长荷瘤小鼠生存期;且转B7.1基因肿瘤细胞疫苗具有保护性免疫反应。结论：转B7.1基因的肿瘤细胞作为肿瘤疫苗可有效地激发机体的抗肿瘤免疫反应。     

肿瘤疫苗对小鼠肝癌作用的研究

目的 :通过动物实验评价肿瘤疫苗对肝癌的防治作用 ,为临床应用提供实验依据。方法 :用小鼠肝癌细胞系MM45T .Li经过化学修饰制成肿瘤疫苗免疫小鼠 ,然后再用该细胞系接种于小鼠腋下。分别观察免疫鼠及未免疫小鼠的肿瘤生长情况 ,进行病理学检查 ;并用3H -TdR释放法检测小鼠脾细胞对MM45T .Li细胞的杀伤能力差异。结果 :①经肿瘤疫苗免疫的小鼠的肿瘤生长速度明显低于未免疫小鼠 ;②病理学检查发现免疫鼠肿瘤组织内大量淋巴细胞浸润 ,未免疫鼠内罕见淋巴细胞浸润 ;③3H -TdR释放实验显示免疫鼠脾细胞对MM45T .Li细胞的杀伤能力明显高于未免疫鼠。结论 :按我们现行方法制备的肿瘤疫苗能激活小鼠抗肝癌的免疫反应 ,抑制肝癌的生长 ,但完全保护作用尚不明确     

琐阳花色甙复合瘤苗对实验性肺癌小鼠免疫功能影响的研究

目的观察琐阳花色甙复合瘤苗治疗实验性肺癌小鼠体内免疫功能效应。方法用LCC细胞接种的方法制造肺癌模型，分别观察对照组（荷瘤小鼠注射生理盐水）、实验组（荷瘤小鼠免疫接种琐阳花色甙复合瘤苗）体内血清白细胞介素-2（IL-2）、肿瘤坏死因子（TNF）水平及脾细胞对肺癌（LCC）的细胞毒活性的变化。结果实验组IL-2、TNF血清含量与对照组相比，差异有显著性（P〈0．05），实验组小鼠脾细胞对小鼠肺癌（LCC）的细胞毒活性显著增强，明显高于对照组（P〈0．05）。结论琐阳花色甙复合瘤苗能明显提高实验性肺癌小鼠的免疫功能。     

小鼠树突状细胞介导CT-26实体肿瘤凋亡研究

目的研究负载树突状细胞诱导实体肿瘤凋亡作用,为其用于临床生物治疗提供依据。方法从小鼠骨髓诱导培养树突状细胞,以CT-26肿瘤细胞冻融液为DC负载抗原,测定此负载的DC体内诱导CT-26实体肿瘤凋亡效果。结果诱导的树突状细胞形态典型;CT-26细胞冻融液负载的DC诱导实体瘤外周细胞凋亡明显,而内部细胞罕见凋亡。结论负载DC治疗体积较大的实体瘤作用有限,可能更适合微瘤治疗。     

联合树突状细胞负载胶质瘤细胞肿瘤疫苗治疗脑胶质瘤

目的探讨树突状细胞负载胶质瘤细胞肿瘤疫苗治疗脑胶质瘤母细胞的临床疗效。方法将64例脑胶质瘤患者随机均分为两组,两组均采用传统的手术及术后放化疗治疗,实验组在此基础上采用树突状细胞负载胶质瘤细胞肿瘤疫苗联合术后放化疗治疗,比较两组的疗效。结果放化疗后,实验组完全缓解者17例,部分缓解11例,稳定病变4例,有效28例,有效率为87.50%;对照组完全缓解者13例,部分缓解8例,稳定病变11例,有效21例,有效率为65.63%。两组有效率比较差异有统计学意义(χ2=4.2667,P=0.0389),实验组高于对照组;实验组1、3年生存率分别为100.0%、68.9%,对照组1、3年生存率分别为100.0%、52.7%,实验组疗效优于对照组(χ2=4.231,P=0.014);实验组接种疫苗后不良反应发生率34.38%,对照组31.25%,两组差异无统计学意义(χ2=0.071,P=0.790)。结论采用树突状细胞负载胶质瘤细胞肿瘤疫苗联合术后放化疗治疗脑胶质瘤患者疗效较好,有重要临床参考价值。     

苦参碱对小鼠H22细胞抗肿瘤作用的实验研究

目的:观察苦参碱在体内和体外的抗肿瘤作用.方法:MTT法检测苦参碱对小鼠腹水瘤细胞H22的体外杀伤作用;Annexin V-FITC/PI双标记法检测苦参碱对体外培养的H22细胞的诱导凋亡作用;在BALB/C小鼠H22移植瘤模型上观察苦参碱的体内抑瘤活性,透射电镜观察苦参碱治疗后荷瘤小鼠肝癌细胞的超微结构改变;免疫组化法检测荷瘤小鼠肝癌组织中Bcl-2、Bax蛋白表达.结果:苦参碱在体外能够明显抑制H22细胞的生长和增殖,并可诱导细胞凋亡;对小鼠肿瘤生长也有明显抑制作用,高、低浓度组抑瘤率分别为60.71%和62.53%;用药组小鼠肿瘤组织中,电镜下可见较为典型的细胞凋亡的形态学改变;肿瘤组织中Bcl-2蛋白表达明显降低,Bax蛋白表达增强,与荷瘤对照组相比有显著性差异(P＜0.01).结论:苦参碱在体内外对H22肿瘤细胞生长均有抑制作用,同时可促进肿瘤细胞表达Bax蛋白,抑制Bcl-2表达,诱导肿瘤细胞凋亡.     

负载辐射凋亡MB49肿瘤细胞抗原的树突状细胞(DC)疫苗对小鼠膀胱癌的抑制作用

 目的 研究辐射凋亡MB49肿瘤细胞诱导的树突状细胞(dendritic cell,DC)疫苗的制备及对C57BL/6小鼠体内膀胱肿瘤的免疫学效应。方法 采用辐射法获取MB49细胞抗原并用其致敏骨髓来源的DC来制备DC疫苗。用MB49小鼠膀胱癌细胞建立荷瘤动物模型,随机分为实验组和对照组,于肿瘤细胞接种后第7、14天给予相应DC疫苗治疗或者PBS,每组分为2个亚组,分别用于测量瘤质量、体积及用于观察荷瘤小鼠存活情况。结果 负载辐射凋亡肿瘤细胞DC疫苗的实验组荷瘤小鼠,其肿瘤的平均体积和平均质量均显著低于对照组(P<0.01),生存期长于对照组。DC疫苗实验组中有2只小鼠30天内无肿瘤生长,再次皮下接种MB49细胞观察30天仍无肿瘤发生。结论 负载辐射凋亡肿瘤细胞的DC疫苗对膀胱肿瘤荷瘤小鼠具有抑瘤效应和延长生存期的作用。