高胆固醇饲养对家兔肝细胞膜高密度脂蛋白受体的影响

为探讨高胆固醇喂养对兔肝细胞膜高密度脂蛋白受体的影响,用高胆固醇饲料喂养家兔６个月后剖杀,取肝脏用蔗糖密度梯度超速离心法分离肝细胞膜,用密度梯度超速离心法分离普通饲料喂养的家兔血浆不含载脂蛋白Ｅ的高密度脂蛋白３,用氯化单碘法对兔高密度脂蛋３进行＾１２５Ｉ标记,以＾１２５Ｉ标记的兔高密度脂蛋白３与体,对肝细胞膜高密度脂蛋白受体进行研究。结果发现,高胆固醇饲料和普通饲料喂养的家兔肝细胞膜高密度脂蛋白     

高密度脂蛋白受体及结合蛋白

高密度脂蛋白受体在脂质代谢中发挥着重要的作用。最近十年，有关高密度脂蛋白受体及结合蛋白的研究受到了广泛的重视，其中被公认为高密度脂蛋白受体的清道夫受体BI及很有可能被确定为受体的高密度脂蛋白结合蛋白2最引人注目。两者的分子结构、特异性配体及在胆固醇逆向转运中的作用具有较大的差异，进一步探明两者之间的关联可为研究动脉粥样硬化的发病机理及其新的治疗途径提供有力的理论基础。     

高密度脂蛋白抗动脉粥样硬化作用

高密度脂蛋白抗动脉粥样硬化作用刘秉文，曾成林（华西医科大学生物化学与分子生物学研究所成都６１００４１）血浆高密度脂蛋白（ＨＤＬ）的密度为１．０６３～１．２１０，其电泳迁移率处于α－带，又称为α—脂蛋白，主要由肝脏和肠道合成。ＨＤＬ含蛋白质５０％～５５...     

高密度脂蛋白蛋白成分修饰对其抗动脉粥样硬化功能的影响

高密度脂蛋白（HDL）通过胆固醇逆向转运、抗氧化、抗炎、抗血栓形成、保护血管内皮细胞等功能发挥其抗动脉粥样硬化（As）作用。近年来研究发现HDL含量与其功能不成比例,在As、代谢综合征、慢性炎症、免疫系统疾病患者体内,HDL组分改变如蛋白成分氧化、糖基化等修饰可降低其抗As功能,甚至表现出促炎、促氧化等特性,成为As发生发展的危险因素。     

高密度脂蛋白抗动脉粥样硬化的研究现状

高密度脂蛋白抗动脉粥样硬化的研究现状张兴义，赵洁，杨宝田（长春生物制品研究所，长春市中心血站）１高密度脂蛋白预防和治疗动脉硬化性疾病Ｇｏｆｍａｎ提出ＨＤＬ与动脉粥样硬化呈负相关的论断已近半个世纪。这期间不但大量临床资料证明了这个观点的正确性，而且已有...     

糖基化终产物对U937巨噬细胞高密度脂蛋白受体蛋白表达的影响

目的　研究诱导分化及糖基化终产物 (AGEs)对人单核 /巨噬细胞 (U937细胞 )高密度脂蛋白受体 (SR BI)蛋白表达的影响 ,探讨AGEs和巨噬细胞SR BI在动脉粥样硬化中的作用。方法　U937细胞经PMA诱导分化 ,并将不同浓度或同一浓度AGEs与诱导分化 48h后的U937细胞共同孵育 ,用免疫细胞化学法和Western印迹法检测SR BI蛋白的表达。结果　诱导分化后U937细胞SR BI表达在 2 4、48h逐渐升高 ,72h下降 ;1 0 0、2 0 0和 40 0 μg/mlAGEs刺激后细胞表面SR BI蛋白表达量分别是BSA组的 1 44、2 38和 2 77倍 (P <0 0 5) ;40 0 μg/ml的AGEs作用 6、1 2、2 4、48h后 ,U937巨噬细胞SR BI蛋白表达量分别为 0h的 1 38、2 49、3 76和 4 2 5倍 (P <0 0 5)。结论　AGEs可增加U937巨噬细胞SR BI蛋白表达且呈浓度和时间依赖性。     

肝X受体与动脉粥样硬化

肝X受体(liver X receptors,LXRs)属孤核受体家族,包括LXRα(NR1H3)和LXRβ (NR1H2)两种同源亚型,作为一种氧化固醇激活的核受体,参与调节脂类代谢的多种基因的表达,并通过抑制炎症介质基因的表达,从而阻碍动脉粥样硬化的形成。     

调肝导浊中药对血载脂蛋白含量及肝细胞膜脂蛋白受体的影响

为观察调肝导浊中药对血载脂蛋白的含量及肝细胞膜脂蛋白受体的影响。采用高胆固醇饮食造成动脉粥样硬化家兔模型，用免疫比浊法测定载脂蛋白AI和载脂蛋白B含量，体外培养大鼠肝细胞，将氧化型低密度脂蛋白直接加入培养液，采用原位杂交技术观察它对肝细胞膜脂蛋白受体的影响及调肝导浊中药对其的调节作用。结果发现，调肝导浊中药可有效升高载脂蛋白AI含量和降低载脂蛋白B含量，提示调肝导浊中药对脂蛋白受体途径具有良好的调节作用，可有效调节与脂质代谢密切相关的因素。从而防治高脂血症，抑制动脉粥样硬化的形成发展。     

肝X受体抗动脉粥样硬化作用研究进展

肝X受体属于核受体家族成员,通过与视黄醇类X受体结合形成异二聚体,刺激靶基因的表达。其内生性配体为氧化甾醇和胆固醇生物合成途径的中间产物。肝X受体作为胆固醇和脂肪酸代谢的调节者,在脂质代谢中起关键的调控作用。研究发现,肝X受体信号通路在动脉粥样硬化发展中起重要作用。在小鼠模型中,合成的肝X受体激动剂可抑制动脉粥样硬化的发展,其效应可能是源于对相关代谢和炎症基因表达的调控。这使肝X受体成为研究治疗动脉粥样硬化理想的靶基因。     

高密度脂蛋白功能与动脉粥样硬化

冠心病是东西方各国发病和死亡的第一位原因。冠状动脉粥样硬化是多因素疾病,从危险因素的作用,内皮功能的失调,致动脉粥样硬化脂蛋白滞留于动脉壁,炎症反应,到泡沫细胞和纤维斑块的形成,斑块破裂和血栓形成,构成了冠心病发生、发展和转归的序列过程。在众多的危险因素中,胆固醇升高是具有因果性致病性因子,     

Association of heterozygous familial hypercholesterolemia with smaller HDL particle size

Small, dense HDL particles have been associated with factors known to increase the risk of cardiovascular disease, such as obesity, hypertriglyceridemia, small dense LDL particles, decreased HDL-cholesterol levels and increased apoA-I fractional catabolic rate from plasma. In order to assess the potential contribution of HDL particle size to atherosclerosis in heterozygous familial hypercholesterolemia (FH), we examined the electrophoretic characteristics of HDL particles in a large cohort of well defined FH heterozygotes and controls. A total of 259 FH heterozygotes and 208 controls participated in the study. FH subjects were carriers of one of the nine French Canadian mutations in the LDL receptor gene. All subjects were apoE3 homozygotes. HDL particles were characterized by non-denaturing polyacrylamide gradient gel electrophoresis following a 6-week lipid-lowering drug-free baseline period. The integrated HDL size was significantly smaller in the FH group compared to controls (FH = 87.3 ± 5.2 Å versus controls = 91.6 ± 4.9 Å, P < 0.0001). In each groups, men had smaller HDL particles than women. Multiple regression linear analyses showed that the FH/Control status accounted for 20.3% of the variance in the integrated HDL size. These results suggest that the FH/control status was independently associated with variations in HDL particle size and that these variations could contribute to the development of premature atherosclerosis in these patients.     

人血浆高密度脂蛋白亚类分布与动脉粥样硬化

高密度脂蛋白(HDL)是一类不均一的脂蛋白,各种HDL亚类具有不同而又相关的代谢功能.血浆脂质和载脂蛋白含量变化会影响HDL亚类分布.高甘油三酯血症、高胆固醇血症、特别是混合型高脂血症患者血浆HDL颗粒变小,而且随着血浆甘油三酯、总胆固醇含量的升高,上述变化会更加明显.提示HDL成熟代谢受阻,胆固醇逆向转运减弱.不同的载脂蛋白在HDL合成及代谢中起着各不相同的作用.当血浆apoAⅠ含量增加时,所有的HDL亚类均增加,且大颗粒的HDL2b增加最为明显.ApoAⅡ具有双重功能,有使小颗粒HDL3b、HDL3a以及大颗粒的HDL2b同时增加的作用.血浆apoB100、CⅡ以及CⅢ在HDL组装中具有协同作用,apoAⅠ对抗上述载脂蛋白引起HDL颗粒变小的作用.此外,糖尿病和冠心病患者血浆HDL颗粒呈变小趋势.使用他汀治疗的冠心病患者血浆HDL亚类分布的改善滞后于血浆脂质水平的正常化,表明HDL亚类图谱分析有助于冠心病患者的风险分层.     

肝细胞膜低密度脂蛋白受体酶联免疫测定法的建立

实验建立了检测肝细胞膜低密度脂蛋白受体的抗配体抗体酶联免疫吸附测定法．测定中，固相膜受体蛋白量由包放前后膜蛋白浓度差值计算确定；低密度脂蛋白结含量按双抗体夹心法制作的低密度脂蛋白标准曲线确定，膜蛋白非村异吸附则用与酶联抗体来源相同的同种动物血浆低密度脂蛋白平行抑制试验消除．兔肝细胞膜低密度脂蛋白受体结合活性经Scatchard作图，Kd＝13．6mg／L，Bmax＝124μg／g膜蛋白（n=5）．测定结果说明建立的方法安全可靠，能反映受体的结合活性，在高脂血症及心血管病的研究中具有广泛的应用价值．本研究还对选择确定受体包被浓度、酶交联物稀释度等的棋盘滴定方法作了详细介绍和讨论．     

非诺贝特部分阻断氧化型低密度脂蛋白诱导的人单核细胞源树突状细胞的免疫成熟

目的研究过氧化物酶体增殖物激活型受体α激动剂非诺贝特对氧化型低密度脂蛋白诱导的人单核细胞源树突状细胞的免疫成熟的影响。方法采用免疫磁珠法分离人外周血CD14 单核细胞,经含重组人粒细胞—巨噬细胞集落刺激因子和重组人白细胞介素4的Cellgro培养5天,使其分化为未成熟树突状细胞。人单核细胞来源的树突状细胞经非诺贝特预干预后,加入氧化型低密度脂蛋白再干预,流式细胞术检测树突状细胞表型(CD1a、CD40、CD86和HLA-DR),FITC-右旋糖苷检测树突状细胞吞噬功能,酶联免疫吸附法检测细胞培养上清细胞因子(白细胞介素12、白细胞介素10和肿瘤坏死因子α)浓度。结果与氧化型低密度脂蛋白组比较,非诺贝特组CD1a、CD40、CD86和HLA-DR分别为46.50%±11.39%比68.80%±5.89%(P<0.05)、56.76%±11.16%比72.97%±10.38%(P<0.05)、65.74%±9.94%比79.82%±22.07%(P>0.05)和60.72%±11.85%比83.24%±6.60%(P<0.05);非诺贝特部分抑制氧化型低密度脂蛋白减弱树突状细胞吞噬功能(83.12%±3.10%比57.78%±23.28%,P<0.05)。与氧化型低密度脂蛋白组比较,非诺贝特组白细胞介素12、肿瘤坏死因子α和白细胞介素10分别为64.9±18.5 ng/L比106.7±20.7 ng/L(P<0.05)、26.0±8.8 ng/L比50.3±9.9 ng/L(P<0.05)和33.4±13.4 ng/L比66.1±2.6 ng/L(P<0.05)。结论过氧化物酶体增殖物激活型受体α激动剂非诺贝特可以部分阻断氧化型低密度脂蛋白诱导的树突状细胞的免疫成熟,这可能是它抗动脉粥样硬化的一个重要机制。     

人血高密度脂蛋白注射液对高胆固醇饲料所致新西兰白兔动脉粥样硬化病变的作用及与洛伐他汀的比较

目的研究人血高密度脂蛋白(HDL)注射液对喂高胆固醇饲料家兔主动脉粥样指纹病变的影响.方法实验家兔给与1%胆固醇饲料8周.在此期间,HDL组每只家兔每周静脉注射50 mg人血HDL;洛伐他汀组每只家兔每天皮下注射10mg洛伐他汀;安慰剂组每只家兔每天静脉注射20mL生理盐水.人血HDL注射液由清华紫光古汉生物制药集团有限公司生产并提供.结果在试验期间,各组实验动物喂高胆固醇饲料后血脂水平均有升高.第八周后,实验动物主动脉内膜表面富脂粥样病变面积比分别为安慰剂组32.6%±21.7%(x±s,下同);HDL组9.16%±7.87%;洛伐他汀组20.8%±13.1%.血清总胆固醇水平分别为安慰剂组10.0±2.30g/L;HDL组2.92±1.41g/L;洛伐他汀组3.74±1.73g/L.血清HDL胆固醇水平分别为安慰剂组0.43±0.12g/LHDL组 0.62±0.23g/L;洛伐他汀组0.23±0.14g/L.HDL组血管壁胆固醇含量比安慰剂组和洛伐他汀组都明显降低,说明人血HDL具有比洛伐他汀更有效的抗动脉粥样硬化病变作用.结论人血HDL能够有效地抑制喂胆固醇饲料家兔主动脉粥样病变的作用,并能够调节血脂,减少动脉壁脂质沉积.     

通心络对实验性家兔主动脉粥样斑块CAM-1表达影响的实验研究

目的 :观察通心络对动脉粥样斑块VCAM -1和ICAM -1表达的影响。方法 :构建实验性家兔主动脉粥样硬化模型 ,随机抽签分组 ,通心络组 8只 ,高脂饮食组 8只。另设普通饲料喂养兔 5只组成空白对照组。采用免疫组织化学方法 ,测定各组VCAM -1、ICAM -1信号强度。结果 :通心络可一定程度减少动脉粥样斑块VCAM -1和ICAM -1的表达 ,通心络组VCAM -1和ICAM -1均低于高脂饮食组 (P <0 .0 5 )。结论 :通心络可延缓粥样斑块形成的进程。     

动脉粥样硬化兔血管血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1表达及雷米普利的干预作用

目的探讨血管紧张素转化酶抑制剂对动脉粥样硬化家兔血管血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1表达的影响。方法以家兔动脉粥样硬化模型为研究对象,采用免疫组织化学和逆转录聚合酶链反应方法评价动脉粥样硬化家兔血管血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1蛋白和信使核糖核酸表达及口服雷米普利的干预效应。结果高脂组血管血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1蛋白和信使核糖核酸表达均显著增加,雷米普利组血管血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1蛋白和信使核糖核酸表达水平较高脂组显著下降(P均<0.05)。结论结果提示,服用雷米普利可明显抑制动脉粥样硬化病变血管血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1蛋白和信使核糖核酸表达,从而可能在动脉粥样硬化的预防中起重要作用。     

U937泡沫细胞模型的建立

为建立一个新的人单核细胞来源的泡沫细胞模型,将Ｕ９３７细胞与８０ｍｇ／Ｌ氧化型低密度脂蛋白孵育４８ｈ,应用高效液相色谱检测发现细胞内胆固醇和胆固醇酯增加,胆固醇脂含量大于总胆固醇含量的５０％,应用光镜和透射电镜观察发现细胞乐内出现大量的红染颗粒或脂质空泡,提示Ｕ９３７细胞与８０ｍｇ／Ｌ氧化型低密度脂蛋白孵育４８ｈ后,成功建立了人类单核细胞源性泡沫细胞。     

氧化型低密度脂蛋白介导单核细胞与血管内皮细胞粘附的单细胞定量研究

利用细胞微管吸唉技术对单核细胞与血管内皮细胞间的粘附力行单细胞定测量，以两种细胞间的临界分离应力Ｓｃ来表示细胞的粘附性，观察氧化型低密度脂蛋白对单细胞与培养人脐静脉内皮细胞附的影响。     

肥大细胞对平滑肌源性泡沫细胞Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原表达的影响

探讨大鼠腹腔肥大细胞对平滑肌源性泡沫细胞Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原表达的影响。用大鼠腹腔肥大细胞上清液和氧化型低密度脂蛋白处理平滑肌细胞48h后，逆转录聚合酶链反应检测平滑肌细胞Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原mRNA的表达，免疫细胞化学染色检测平滑肌细胞Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原蛋白的表达。结果发现，与对照组相比，处理组平滑肌细胞Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的mRNA表达降低，免疫细胞化学染色后，处理组细胞浆内棕色颗粒比对照组少且染色浅。结果提示，肥大细胞在体外抑制平滑肌细胞Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原表达，并且能协同氧化型低密度脂蛋白对Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原表达的抑制作用。肥大细胞释放的炎症介质可能参与了动脉粥样斑块纤维帽的重构。