抗幽门螺杆菌尿素酶B亚单位单克隆抗体制备和鉴定及其应用

目的制备抗幽门螺杆菌(Hp)的单克隆抗体(mAb),并对该Hp mAb进行分析鉴定,建立一种检测患者由于Hp感染而在血清中产生Hp抗体的竞争ELISA检测方法。方法用灭活的Hp免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术制备Hp mAb。我们采用Hp混合蛋白包括毒素相关蛋白A(CagA)、空泡毒素A(VacA)和尿素酶以及灭活的Hp菌体筛选阳性杂交瘤细胞株,用ELISA和Western blot等技术对所获得的Hp mAb进行鉴定。利用辣根过氧化物酶(HRP)标记所筛选的Hp mAb来建立一个可检测患者血清中Hp抗体的竞争ELISA。结果通过大规模的杂交瘤筛选,我们选择了1株将其命名为C3 Hp mAb,其抗体亚型为IgG2a,腹水效价可达1×107。Western blot法、ELISA和质谱检测结果显示,该C3 Hp mAb能特异地识别Hp的尿素酶B亚单位。用这个C3 Hp mAb,我们建立了一种可检测患者血清中Hp抗体的竞争ELISA。结论成功获得一种可以特异识别Hp尿素酶B亚单位的mAb,建立了一种可检测患者血清中Hp抗体的竞争ELISA。     

IL-1β血清水平及IL-1B和IL-1受体拮抗剂基因多态性与胃癌关系探讨

目的 探讨白细胞介素(IL)-1β血清水平及IL-1B和IL-1RN基因多态性与胃癌及幽门螺杆菌(Hp)感染胃癌发生发展的相关性.方法 以酶联免疫吸附试验(ELISA)测定IL-1β血清水平及抗Hp抗体IgG、IgM和IgA浓度;采用基因芯片技术检测260例胃癌患者和284例不相关联的健康对照人群中IL-1B-31C/T、-511C/T位点单核苷酸多态性(SNP);以琼脂糖凝胶电泳检测IL-1RN基因多态性(VNTR).结果 胃癌组IL-1β血清水平[(802±148) ng/L]显著高于对照组[(501±125) ng/L],P<0.01;胃癌组Hp感染率明显高于对照组[P<0.001, 相对危险度(OR)=2.59].胃癌组IL-1B-31TT基因型频率明显高于对照组(P<0.01,OR=1.95);胃癌组IL-1B-511TT基因型频率明显高于对照组(P<0.05,OR=1.62);Hp阳性(Hp+)胃癌组-511TT基因型频率明显高于Hp阴性(Hp-)胃癌(P<0.05,OR= 2.00);胃癌组T-T单体型频率显著高于对照组(χ2=4.45,P<0.05).不论在胃癌组还是在Hp+胃癌组,携带IL-1B-31T或-511T等位基因者血清IL-1β水平均高于其相应CC基因型携带者,且IL-1B-31T、-511T携带者在Hp+胃癌组较Hp-胃癌组的IL-1β水平显著增高(P<0.001).未见IL-1RN基因型及其他IL-1B基因型与胃癌或Hp+胃癌有显著相关性.结论 IL-1B-31TT基因型与胃癌易感性相关;IL-1B-511TT基因型与胃癌特别是Hp+胃癌易感性相关.IL-1B-31T/-511T等位基因均与IL-1β血清水平显著相关(P<0.001).T-T单体型可能是胃癌的遗传易感因素.     

高原地区Hp相关性胃病患者血清Th1/Th2细胞因子的变化

目的 观察青海高原幽门螺杆菌(Hp)相关性胃病患者血清Th1/Th2细胞因子(IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6 、IL-8 、TNF)水平变化,以探讨其在发病中的可能免疫致病机制.方法 用放射免疫法(RIA)测定57例慢性萎缩性胃炎(CAG) 、55例消化性溃疡(PU)和35例进展期胃癌(GC)患者血清IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6 、IL-8 、TNF的含量.比较Hp感染者三组胃病之间; Hp感染与非感染CAG之间;Hp感染CAG活动与非活动之间;Hp感染单纯CAG、IM、Dys之间;Hp感染与非感染PU之间及Hp感染与非感染GC之间血清6种细胞因子含量的差异.结果 Hp 相关性CAG和PU血清IL-4含量非常显著低于GC(P＜0.01);Hp感染与非感染CAG之间6种细胞因子含量均无差异(P＞0.05);Hp 相关性CAG活动者血清IL-4含量显著低于非活者(P＜0.05),IM和Dys均非常显著低于单纯CAG (P＜0.01),IL-2在Dys显著高于单纯CAG(P＜0.05);Hp感染PU血清IL-4非常显著低于非感染者 (P＜0.01); Hp感染GC血清 IL-β1 显著低于非感染者(P＜0.05).结论 Hp感染对本地区CAG患者血清Th1/ Th2平衡影响不大;Hp感染后IL-4分泌减少与CAG炎症活动和胃黏膜癌前病变(IM和Dys)及PU的发生密切相关,Th2弱势应答为其主要的免疫致病机制;Hp相关性进展期GC患者IL-β1分泌减少,Th1应答减弱,IL-4分泌增加,Th2应答上调,对机体具有明显的抗炎抗肿瘤和保护作用.     

IL-1β、IL-6、p53与胃癌组织幽门螺杆菌感染的相关性分析

目的 探讨IL-1β、IL-6、p53与胃癌组织幽门螺杆菌(Hp)感染的相关性.方法 选取2016年6月至2017年10月期间我院收治的100例胃癌患者,根据检查结果Hp阳性有89例,Hp阴性有11例.选取同期体检健康者50例作为对照组.比较各组间血清IL-1β、IL-6、p53水平以及相关性.结果 胃癌组血清IL-1β、IL-6、p53水平显著高于对照组(P＜0.05).胃癌组Hp阳性率(89.0％)显著高于对照组(22.0％)(P＜0.05).Hp(+)胃癌组血清IL-1β、IL-6、p53水平显著高于Hp(-)胃癌组(P＜0.05).胃癌Hp感染密度3级患者血清IL-1β、IL-6、p53水平显著高于1级和2级(P＜0.05).经过Spearson相关性分析,IL-1β、IL-6、p53水平与胃癌Hp感染密度均呈正相关关系.结论 胃癌组织Hp感染可引起血清IL-1β、IL-6水平等炎性因子提高和抑癌基因p53的激活,并通过联合作用机制共同促进胃癌的发生、发展.     

CagA和机体免疫反应在幽门螺杆菌致病中的作用及相互关系

目的　探讨幽门螺杆菌 (Helicobacterpylori,Hp)菌型差异和机体免疫反应在Hp致病中的作用及其相互关系。方法　采用间接ELISA法检测了 175例患者血清抗HpCagA IgG和抗HpIgE。结果　①Hp感染者抗HpCagA IgG的阳性率 (80 % )明显高于抗HpIgE(5 8 2 9% ,P <0 0 1)。②血清抗HpCagA IgG在慢性活动性胃炎 (ACG)和十二指肠球部溃疡 (DU)患者显著高于胃溃疡 (GU)、胃癌(GCa)、慢性非活动性胃炎 (NACG)和对照组 (P <0 0 1) ,而后 4组之间差异无显著性。③血清抗HpIgE在ACG显著高于DU、GU、GCa、NACG和对照组 (P <0 0 1) ,并且在中重度胃炎显著高于轻度胃炎(P <0 0 0 1)。④血清抗HpCagA IgG和抗HpIgE无明显相关性 (r=0 2 45 9,P >0 0 5 )。结论　CagA和血清抗HpIgE参与了Hp的致病过程 ,但是两者之间无明显相关性 ,并且它们在疾病中的含量也有一定差异 ,这说明二者在Hp的致病过程中是相互独立的因素 ,Hp感染引起疾病是多因素的综合作用。     

α_1抗胰蛋白酶缺乏症的产前诊断

α_1抗胰蛋白酶(α_1-AT)是广泛分布于人血清及其它体液和组织中的一种蛋白水解酶抑制剂,能抑制血清中蛋白酶活力的90%。它是一种由肝脏合成的糖蛋白,正常血浆中含有180～250mg/dl。在代谢旺盛的情况下,如肿瘤、妊娠等,血中α_1-AT水平明显增高。应用区带电泳技术分析人类α_1-AT电泳的迁移率,发现人群中存在着多态现象,最常见的为MM型,同时还观察到这种MM型的不同亚型在一些种族中有所差异。现已鉴定出近50种α_1-AT的变异类型,其中有些变异类型如S、Z等可导致α_1-AT的遗传缺陷。α_1-AT缺陷的结果与肺气肿、婴儿早期肝硬化和脉管炎,肾炎等病的发生发展有关。大量的研究表     

胃癌患者的血清蛋白类型(Hp,GC,C5)

胃癌的发病率因群体差异而有明显不同。经研究认为胃癌的病原学具有遗传因素。胃癌患者的亲属及 A 型血人中患这种恶性肿瘤的数量略高于其他人群。在发现其他类型肿瘤患者的 Hp1和 GC2-2增高的同时,发现胃癌患者的 Hp2-2频率也有增高。在一次研究中还发现 C3~*F 与肾腺癌有关,但这种关系还没有被认定。本文主要论述 Hp、GC 和 C3血清蛋白类型与胃癌之间的关系。     

乙醇代谢酶基因多态与肿瘤关系研究进展

致癌物代谢酶基因多态是肿瘤遗传易感性的一个重要方面,体内参与惭醇代谢的酶主要有乙醇脱氢酶（ADH）,乙醛脱氢酶（ALDH）和细胞色素P450－2E1（CYP2E1）,它们均存在基因多态现象,有研究表明,乙醇代谢酶基因多态与肝癌,胃癌和食管癌等肿瘤存在关联,但结果不一致。     

慢性胃炎儿童血清胃泌素水平与幽门螺杆菌感染的关系

有研究表明[1～ 2 ] ,血清胃泌素 (Gas)水平与幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,Hp)感染有关。为探讨慢性胃炎儿童血清胃泌素水平与幽门螺杆菌感染的关系 ,我们测定了 5 0例慢性胃炎儿童血清胃泌素水平 ,其中 ,Hp感染阳性者 2 1例 ,Hp阴性者 2 9例 ,现将结果报告如下。材料和方法一、对象 :选择 2 0 0 1年 7月～ 2 0 0 3年 5月在我院儿科消化道门诊经胃镜及病理组织活检确诊为慢性胃炎患儿 5 0例(男 2 7,女 2 3) ,年龄 3～ 1 4岁 ,平均 6 7岁。其中 ,经病理组织活检及Giemsa染色检查 ,Hp阳性者 2 1例 ,Hp阴性者 2 9例。另选择 30例 (男 1…     

慢性阻塞性肺病患者幽门螺杆菌感染状况与肺功能的关系

目的 探讨幽门螺杆菌(Helicobacter pylory,Hp)感染及其产生的毒力因子与慢性阻塞性肺病的关系.方法 根据GOLD指南临床确诊的80例COPD稳定期的患旨(男50例,女30例,平均年龄(58.11±10.5)岁),80例年龄和性别相当的正常健康志愿者作为对照组(男45例,女35例,半均年龄57.55±9.43).所有病例用幽门螺杆菌测定仪-AUTOBLOT SYSTEM36专用试剂盒通过免疫印迹法检测幽门螺杆菌血清抗体及进行肺功能检测.结果 ①COPD患者组幽门螺杆菌血清感染率为:71.25%,对照组幽门螺杆菌血清感染率为:43.75%(P=0.002).去除年龄、性别、吸烟及吸烟指数等危险因素后,Hp感染者患COPD的相对危险性明显增高,其OR值为3.19,95%CI为1.65-6.14.②COPD组中Ⅰ型Hp检出率高于对照组,分别为:38.75%和31.25%,去除年龄、性别、吸烟及吸烟指数等危险因素后Ⅰ型Hp菌株感染组患COPD的危险性显著增高,其OR值为3.68,95%CI为1.83-7.40,高于Hp感染阳性者患COPD危险性的OR值3.19.但Ⅱ型Hp菌株感染组并未明显增加患COPD的危险性,OR值为1.03,95%CI为0.41-2.57.结论 Hp感染是导致COPD的独立危险因素,Ⅰ型Hp感染可能更增加患COPD的危险性,且可能是使COPD患者肺功能恶化的因素之一.     

血清Gs RIA在幽门Hp感染性疾病中的临床意义

目的 :探讨幽门螺旋杆菌 (Hp)感染性胃十二指肠疾病中胃泌素 (Gs)表达的临床意义及Hp感染与血清Gs水平的关系。方法 :用放射免疫分析对 4 6例Hp阳性患者及 33例Hp阴性的患者进行血清Gs测定 ,并观察Hp阳性患者Hp根除前后血清Gs的变化。 结果 :Hp阳性患者血清Gs的表达高于Hp阴性者 (p <0 0 5 ) ,Hp根除前血清Gs水平明显高于Hp根除后 (p <0 0 5 )。 结论 :Hp感染可引起血清Gs升高 ,Gs可作为Hp感染与否的一项指标     

IL-1B-511单核苷酸多态性与我国胃癌高发区胃黏膜萎缩关系的研究

目的： 研究我国胃癌高发区IL-1B-511基因多态性、幽门螺杆菌(Hp)感染与胃黏膜萎缩的关系。方法： 研究对象为胃癌高发区（陕西）健康志愿者500例，人群按照年龄分成20-29岁、30-39岁、40-49岁、50-59岁、60岁以上等5组，每组100例。IL-1B-511基因多态性的分析采用限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法，以血清胃蛋白酶原Ⅰ（PGⅠ）浓度和PGⅠ/PGⅡ比值作为胃黏膜萎缩的指标，血清PGⅠ、PGⅡ浓度和抗Hp-IgG抗体的检测均采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测。结果： 随着年龄的增长，血清PGⅠ的浓度与 PGⅠ/PGⅡ 的比值呈逐渐下降的趋势；在各年龄组中，IL-1B-511 T/T基因型Hp阳性者其血清PGⅠ及PGⅠ/PGⅡ低于相应年龄组Hp阴性者（P<0.05）；多因素回归分析提示“IL-1B-511 T/T基因型”、“年龄段”和“Hp”对“PGⅠ/PGⅡ比值”有显著影响 (P<0.05、P<0.05和P<0.01)。结论： 我国胃癌高发区胃黏膜萎缩的发生与IL-1B-511 T/T基因型、年龄和Hp感染有密切关系，IL-1B-511 T/T基因型增加Hp感染后胃黏膜萎缩发生的危险性。     

血清结合珠蛋白的免疫功能

目前国外对结合珠蛋白(Haptoglobin,Hp)研究报道较多。本文旨在综述有关Hp的免疫功能方面的研究进展情况,以便为更深入地探讨Hp与某些疾病的关系提供一些线索。一、问题的提出血清中一些蛋白组     

血清微小核糖核酸-4286与幽门螺旋杆菌感染的子痫前期患者妊娠结局的关系

目的 分析血清微小核糖核酸-4286(miR-4286)与幽门螺旋杆菌(Hp)感染的子痫前期(PE)患者妊娠结局的关系。 方法 选择 Hp 感染的孕妇 89 例[Hp 组;年龄 24 ～ 40 岁,平均年龄 31.67 岁;孕前体质量指数(BMI)21.30 ～31.55 kg/m²,平均孕前 BMI 25.47 kg/m²]和 204 例 Hp 感 染 的 PE 患 者 (Hp + PE 组 ;年 龄 24 ～ 40 岁 ,平均 年 龄 31.87 岁 ;孕前 BMI 21.01 ～ 31.55 kg/m²,平均孕前 BMI 25.69 kg/m²)作为研究对象。 采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测 miR-4286 表达水平。 随访获取 Hp 感染的 PE 患者妊娠结局,并分析 miR-4286 与其妊娠结局的关系。 结果 Hp组妊娠 28 周第 1 天(T2)和妊娠 30 周第 1 天(T3)的 miR-4286 水平均高于 Hp + PE 组(1.95 ± 0.39 vs...     

根除幽门螺杆菌治疗对类风湿关节炎患者血清IL-8、IL-18水平的影响

目的:探讨根除幽门螺杆菌治疗对类风湿关节炎血清IL-8、IL-18水平的影响。方法:采用14-C尿素呼气试验对140例活动期类风湿关节炎患者进行Hp检测,依据14-C尿素呼气试验结果分为Hp(+)组和Hp(-)组。Hp(+)组的患者依据是否进行抗Hp治疗分为对照组和抗Hp组。于治疗前及治疗后12周记录患者关节肿胀数、关节痛/压痛数、晨僵时间、双手握力,并监测血沉、C反应蛋白、类风湿因子、IL-8、IL-18水平。结果:治疗12周后,Hp(-)组、抗Hp组的有效率均高于对照组(84.09%vs 62.50%,χ2=5.41,81.25%vs 62.50%,χ2=4.17,P0.05),三组患者的关节肿胀数、关节痛/压痛数、晨僵时间、双手握力及血沉、C反应蛋白、类风湿因子、IL-8、IL-18水平均较治疗前显著改善(P0.05)。Hp(-)组、抗Hp组患者的晨僵、关节压痛数、关节肿胀数、双手握力等临床症状较对照组改善更为明显,Hp(-)组、抗Hp组患者ESR、CRP、IL-8、IL-18水平较对照组低,但三组患者RF水平相比较差异无统计学意义。结论:根除HP治疗可从一定程度上提高类风湿性关节炎的临床疗效。     

胃蛋白酶原与幽门螺杆菌感染相关性研究

为研究血清胃蛋白酶原亚群（pepsinogen,PG）含量在幽门螺杆菌感染人群血清中的含量及其临床意义,应用酶联免疫吸附实验（ELISA）,对34名正常人、51例幽门螺杆菌阳性者进行血清胃蛋酶原亚群（PGⅠ、PGⅡ）含量测定,并观察PGⅠ/PGⅡ比值变化。Hp阳性组血清与Hp阴性组血清PGⅠ值比较无显著性差异。Hp阳性组血清与Hp阴性组血清PGⅡ值进行比较有显著性差异。Hp阳性组与Hp阴性组PGⅠ/PGⅡ值比较差异非常显著。Hp阳性组血清PGⅡ升高和PGⅠ/PGⅡ比值的降低,是胃癌发生的危险因素,因此血清胃蛋白酶原检测可以作为人群筛查和辅助诊断胃癌的一项血清学指标。     

健康体检人群胃部疾病相关血清学标志物含量分析及异常结果干预策略

目的 通过检测并分析健康体检人群中胃部疾病相关血清学标志物的含量及其影响因素,为胃部疾病的诊断及风险评估提供参考,并探讨胃部疾病相关血清学标志物异常结果的干预策略.方法 选取2015年5月至2016年4月来我院进行健康体检人员555例作为研究对象,测定受检者血清胃蛋白酶原Ⅰ(PGI)、胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)、胃泌素-17(G-17)和Hp-IgG抗体等指标.结果 在555例体检人群中,随着年龄增长,PGⅠ、PGⅡ、G-17含量上升而PGⅠ/PGⅡ下降.Hp阳性组血清PGIⅠ、PGⅡ、G-17含量较Hp阴性组升高,而PGⅠ/PGⅡ下降.依据血清PGⅠ、PGⅡ、G-17、Hp-IgG抗体四种不同组合进行胃部疾病风险评估:A组354例(63.78％),B组192例(34.59％),C组9例(1.62％).结论 PGⅠ、PGⅡ、G-17指标与年龄、Hp感染呈正相关,健康体检人群中,有较高的血清PG、G-17异常率和Hp感染率,我们依据胃部疾病风险评估情况,应对体检人群进行分层健康管理,并给予积极干预与管理.     

简单重复序列—一类新的DNA多态标志

简单重复序列──一类新的ＤＮＡ多态标志颜真综述苏成芝审阅ＤＮＡ多态现象是一类发生在ＤＮＡ水平的中性突变，并以孟德尔共显性遗传方式在人群中世代相传。对ＤＮＡ多态现象的认识，极大地推动了人类基因组的研究。多态性标志已广泛用于构建人类遗传连锁图谱、基因定位...     

肾细胞癌的血清蛋白分类

肾细胞癌的发病率在男性比女性高1.5～3倍.并且与吸烟有明显的相关,吸烟男性较不吸烟者发病率增加5～10倍.遗传标记的研究提示,基因-环境相互作用在病因学上可能起重要作用,最近,Germenis等(1974)报道,在肾细胞癌患者中C3~F和Gc~2基因明显升高,而病人与对照组之间Hp和运铁蛋白Tf系统无明显差异.本文介绍了66例原发性肾细胞癌患者结合珠蛋白(Hp)、补体3(C3),血型特异成份(Gc)和Tf四个遗传标记的研究结果.     

幽门螺杆菌感染通过 MDM2 / P53 通路调控食管癌细胞凋亡的作用及机制

目的 研究幽门螺杆菌 (helicobacter pylori, Hp) 感染通过 MDM2 / P53 通路调控食管癌细胞凋 亡的作用及机制。 方法 收集手术切除的食管癌组织, 检测 Hp 感染情况及 MDM2、 P53 的表达水平。 培养 食管癌 TE-1 细胞株, 给予 Hp 感染、 生理盐水 (NS) 或泛素-蛋白酶体抑制剂 PS341 干预、 转染阴性对照 (NC) siRNA 或 MDM2 siRNA, 检测细胞活力、 凋亡率、 MDM2 及 P53 的表达水平、 P53 的泛素化水平。 结果 Hp 阳性的食管癌组织中 MDM2 的表达水平高于 Hp 阴性的食管癌组织、 P53 的表达水平低于 Hp 阴性 的食管癌组织 (P< 0. 05); Hp 组 TE-1 细胞的细胞活力、 MDM2 表达水平、 P53 泛素化水平高于对照组, 凋亡率、 P53 表达水平低于对照组; PS341 + Hp 组 TE-1 细胞的 P53 的表达水平高于 NS + Hp 组 (P< 0. 05); si-MDM2 + Hp 组 TE-1 细胞的细胞活力、 MDM2 的表达水平、 P53 的泛素化水平均低于 si-NC + Hp 组, 凋亡 率、 P53 的表达水平高于 si-NC + Hp 组 (P< 0. 05)。 结论 Hp 感染抑制食管癌细胞凋亡的作用与增加 MDM2 表达、 促进 P53 的泛素化降解有关。