吸入一氧化碳对大鼠脑死亡致肺损伤的影响

目的 评价吸入一氧化碳(CO)对大鼠脑死亡致肺损伤的影响.方法 成年雄性Wistar 大鼠24只,随机分为3组(n=8),假手术组(SH组)颅内置入Fogarty管,但不诱导脑死亡,吸入40%氧气,持续150 min;脑死亡组(BD组)膨胀Fogarty球囊,确认脑死亡后吸入40%氧气,持续120 min;脑死亡+CO组(BDCO组)膨胀Fogarty球囊,确认脑死亡后吸人40%氧气+0.025%CO混合气,持续120 min.于麻醉前、确认脑死亡即刻、吸入CO 30、60、90、120 min时行动脉血气分析;于吸人CO 120 min时.检测血浆白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和IL-10的浓度;计算肺湿干重比(W/D);检测肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性,行肺组织损伤评分.结果 与SH组比较,BD组和BDCO组脑死亡后PaO2/FiO:、BE和pH值下降,血浆IL-6、TNF-α和IL-10的浓度和肺组织损伤评分升高,BD组肺W/D、MPO活性升高(P<0.05);与BD组比较,BDCO组脑死亡后PaO2/FiO2、BE、pH值和血浆IL-10浓度升高,肺组织MPO活性、血浆IL-6、TNF-α的浓度和肺组织损伤评分降低(P<0.05).结论 吸入CO可减轻大鼠脑死亡诱发的肺损伤,其机制可能与CO降低肺组织局部和全身炎性反应有关.     

外源性一氧化碳改善供体肺功能的实验研究

目的观察一氧化碳(CO)对长时间低温保存的供体肺的保护作用。方法建立大鼠肺移植离体肺灌注实验模型:SD大鼠24只随机分为空白对照组、实验组(CO组),每组6对作为肺移植的供体鼠和受体鼠。对照组大鼠供肺移植全程吸入100%氧气直至再灌注后1h;CO组移植全程吸入500×10-6CO和O2的混合气,并且供体肺在冷保存的12h内肺内仍充盈着CO和O2的混合气,余同对照组。于供体肺循环灌注l,20,40,60min测定供肺氧合后动脉血氧分压(PaO2)、平均肺动脉压、气道峰压;灌注结束后测定肺组织湿干比、丙二醛(MDA)含量、髓过氧化物酶(MPO)活性、白细胞介素8(IL-8)的含量。结果作为受体的12只(每组6只)进入结果分析:①CO组供体肺的PaO2在再灌注20、40、60min明显高于对照组,平均动脉压、气道峰压分别在再灌注20、40、60min和40、60min明显低于对照组(P<0.05);②与空白对照组比较,CO组供体肺再灌注后湿干比、MDA、MPO、IL-8含量均明显降低(P<0.05)。结论在肺移植的全程吸入低剂量CO可以减轻供肺的缺血再灌注损伤,改善供肺功能。     

不同血液pH值对大鼠肺移植时缺血再灌注损伤的影响

目的 评价不同血液pH值对大鼠肺移植时缺血再灌注损伤的影响.方法 纯种雄性SD大鼠64只(供体和受体鼠各32只),体重250～350 g,行同种异体左单肺移植术,32只受体鼠随机分为4组(n=8),移植肺再灌注前经股静脉注射1 mol/L HCl溶液和7.5%NaHCO3溶液,调整其血液pH值,Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组pH值分别调整为7.4、7.2、7.3和7.5.移植肺再灌注2 h时取肺组织,测定肺湿/干重比(W/D)、髓过氧化物酶(MPO)和SOD活性、MDA、TNF-α和IL-8的含量,光镜下观察肺组织病理学结果.结果 与Ⅰ组比较,Ⅲ组移植肺组织SOD活性明显升高(P＜0.01),MPO活性、MDA、TNF-α及IL-8含量均降低(P＜0.05),W/D差异无统计学意义(P＞0.05),与其它3组比较,Ⅲ组肺组织病理损伤减轻;Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅳ组各指标比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 降低血液pH值到7.3可减轻大鼠肺移植时缺血再灌注损伤.     

吸入不同浓度一氧化碳对大鼠脑死亡致肺损伤的影响

目的 评价吸入不同浓度一氧化碳(CO)对大鼠脑死亡(BD)致肺损伤的影响.方法 成年雄性Wistar大鼠32只,随机分为4组(n=8),假手术组(S组)向大鼠颅内置入Fogarty导管,吸入40%O2 150 min;BD组、C1组和C2组向大鼠颅内置入Fogarty导管,通过膨胀导管前端球囊诱导BD,膨胀球囊30 min后确认BD情况.发生BD后BD组吸入40%O2 120min,C1组和C2组分别吸入40%O2+0.025%CO和40%O2+0.050%CO混合气120 min.于麻醉前(基础状态)、吸入CO前即刻、吸入CO 30、60、90和120 min时采集动脉血样,进行动脉血气分析.吸入CO 120 min时采集动脉血样,测定血浆IL-6和TNF-α浓度;采集血样后,处死大鼠,取肺组织,测定髓过氧化物酶(MPO)活性;计算肺组织湿/干重比(W/D比),并进行肺组织损伤评分(LIS评分).结果 与S组比较,BD组、C1组和C2组PaO2/FiO2、BE和pH值降低,血浆IL-6和TNF-α的浓度、MPO活性、肺组织W/D比和LIS评分升高(P＜0.05);与BD组比较,C1组和C2组PaO2/FiO2、BE和pH值升高,血浆IL-6和TNF-α的浓度、MPO活性、肺组织W/D比和LIS评分降低(P＜0.05);与C1组比较,C2组血浆IL-6和TNF-α的浓度降低(P＜0.05),血气分析指标、MPO活性、肺组织W/D比和LIS评分差异无统计学意义(P＞0.05).结论 吸入0.025%和0.050%CO减轻大鼠BD致肺损伤的效应无差异.     

低浓度一氧化碳通气减轻无心跳供体肺的热缺血损伤

目的 探讨低浓度一氧化碳通气对无心跳供体(NHBD)移植肺组织的热缺血损伤保护机制.方法 对供体大鼠NHBD给予低浓度CO机械通气,利用大鼠左肺移植动物模型进行研究;再灌注后测定动脉血气分析、移植肺组织湿/干(W/D)重量比、髓过氧化物酶(MPO)活性和支气管肺泡灌洗液(BAL)中中性粒细胞计数等参数,同时检测移植肺组织中前炎症因子IL-1β和凋亡相关基因caspase 3的表达量.结果 移植肺再灌注后1、2和4 h CO组的动脉血氧分压均显著大于对照组.再灌注4 h后,对照组的W/D重量比值、MPO活性值以及BAL中性粒细胞计数均明显大于CO组.CO组移植左肺组织的IL-1β和caspase 3基因的mRNA相对表达量均显著低于对照组IL-1β和caspase 3基因的mRNA相对表达量.结论 低浓度CO机械通气可以通过抑制前炎症因子IL-1β和凋亡相关基因caspase 3表达的机制减轻NHBD供肺的热缺血损伤.     

白细胞介素12在大鼠肺缺血再灌注损伤中的作用

目的 评价白细胞介素12(IL-12)在大鼠肺缺血再灌注损伤中的作用.方法 健康成年雄性SD大鼠24只,8-10周龄,体重250-280 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为3组(n=8):假手术组(S组),肺缺血再灌注损伤组([/R组),IL-12单克隆抗体组(IL-12组).S组只分离肺门不夹闭；I/R组夹闭肺门60 min后,恢复灌注2 h；IL-12组于夹闭肺门前1h尾静脉注射IL-12单克隆抗体200μg/kg.于再灌注结束时采集血样和肺绀织,测定血浆TNF-α浓度、辅助性T细胞(Th)1和Th2水平、肺组织湿干重(W/D)比、髓过氧化物酶(MPO)活性、MDA含量及动脉血氧分压(PaO2)及二氧化碳分压(PaCO2).光镜下观察肺组织病理学改变.结果 与S组比较,I/R组和IL-12组肺组织W/D比、MDA含量、MPO活性、血浆TNF-α浓度升高,I/R组PaO2降低,PaCO2、Th1水平和Th1/Th2升高(P＜0.01),Th2水平差异无统计学意义(P＞0.05),IL-12组PaO2、PaCO2、Th1、Th2水平及Th1/Th2差异无统计学意义(P＞0.05)；与I/R组比较,IL-12组PaCO2、肺组织W/D比、MDA含量、MPO活性、血浆TNF-α浓度、Th1水平和Th1/Th2降低,Th2水平和PaO2升高(P＜0.01).I/R组肺组织损伤明显,IL-12组肺组织损伤程度明显减轻.结论IL-12通过使Tn1/Th2失衡而参与肺缺血再灌注损伤.     

不同热缺血时限及肺灌注方式对猪自体肺叶移植的影响

目的 观察不同的肺热缺血时间及肺灌注方法对猪自体肺叶移植术后氧自由基水平、细胞因子的影响,探讨其机制.方法 本地健康杂种猪36头,随机分为6组,各组均经不同时间热缺血及灌注液灌注后行自体肺叶移植,并于移植前,移植后0.5、1、2、4 h检测移植肺组织中的氧自由基髓过氧化物酶(MPO)活性及丙二醛(MDA)含量;测定移植后4 h肺静脉血浆肿瘤坏死因子(TNF-α)及基质金属蛋白酶(MMP)-9浓度及移植肺组织中MMP-9含量.结果 移植前,移植后0.5 h各组的肺组织中的MDA及MPO的含量无统计学意义(P＞0.05);与低温EC液缺血120min及常温肝素对照组比较,常温肝素120min术后2 h的MPO有统计学意义(P＞0.05),术后4 h肺组织中的MPO及MDA有统计学意义(P＜0.01).移植后4 h血浆TNF-α、MMP-9浓度有统计学意义(P＜0.01),肺组织MMP-9阳性评分也有统计学意义(P＜0.05).结论 热缺血及肺灌注可以导致自体肺移植术后氧自由基水平、细胞因子的升高,术后2 h低温EC液灌注移植肺叶通过降低MDA及MPO的含量,抑制血浆TNF-α、MMP-9及肺组织MMP-9浓度的升高减轻肺损伤.     

冷缺血期氢混合气膨肺对大鼠肺移植后的能量代谢保护作用

目的探讨冷缺血期氢混合气膨肺对大鼠肺移植后能量代谢的保护作用。方法健康雄性SD大鼠42只,8～10周龄,体重250～300 g,随机取21只大鼠为供体大鼠,其余21只为受体大鼠,采用随机数字法将两组大鼠进一步分为三个亚组(每组7只):对照组、氧气组和氢气组。冷缺血期对照组不使用气体膨肺,氧气组采用40%O_2+60%N_2膨肺,氢气组采用3%H_2+40%O_2+57%N_2膨肺,2 h后肺移植。受体大鼠于肺移植前、再灌注3 min、1、2 h时行动脉血气分析检测PaO_2、PaCO_2、pH、碱剩余(BE),计算氧合指数(OI),留取血清与移植肺组织,术后2 h采用ELISA法检测血清白介素-8(IL-8)、白介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度。肺组织HE染色,记录肺组织损伤评分(LIS)。采用ELISA法检测肺组织中乳酸(Lac)、丙酮酸(PA)、三磷酸腺苷(ATP)浓度,采用透射电镜观察肺线粒体结构。结果与对照组比较,再灌注2 h氢气组、氧气组pH、BE、OI明显升高(P0.05);与对照组比较,氢气组、氧气组血清IL-8、TNF-α浓度明显降低,IL-10浓度明显升高(P0.05)。与氧气组比较,再灌注2 h氢气组OI、pH、BE明显升高(P0.05);与氧气组比较,氢气组血清IL-8、TNF-α浓度明显降低,IL-10浓度明显升高(P0.05)。LIS评分氢气组明显高于氧气组(P0.05)。对照组移植肺组织肺泡中有大量透明膜形成,肺泡内出血明显,肺泡隔和肺泡重度水肿,大量中性粒细胞浸润;氢气组、氧气组移植肺组织病理损伤程度轻于对照组,氢气组轻于氧气组。与对照组比较,氧气组和氢气组受体大鼠移植肺组织中Lac、PA浓度明显降低(P0.05),ATP浓度明显升高(P0.05),移植肺组织线粒体的面积、周长、费雷特径明显增大(P0.05),线粒体圆度明显降低(P0.05),嵴紊乱比例明显小于氧气组(P0.05)。结论冷缺血期氢混合气膨肺能提高大鼠移植肺氧合功能,降低乳酸/丙酮酸比值,减轻炎症反应,部分改善肺损伤,提高组织ATP含量,保护肺线粒体,对移植肺的能量代谢功能具有保护作用,这种效果可能是通过对线粒体保护作用而产生的。     

输注不同贮存时间红细胞对内毒素休克家兔急性肺损伤的影响

目的观察输注不同贮存时间的红细胞对内毒素休克家兔急性肺损伤的影响。方法清洁级健康雄性新西兰家兔48只,6月龄,体重2～2.5 kg,采用随机数字表法分为六组:假手术组(S组)、内毒素休克组(ES组)、内毒素休克+输注贮存1 d红细胞组(R_0组)、内毒素休克+输注贮存1周红细胞组(R_1组)、内毒素休克+输注贮存2周红细胞组(R_2组)和内毒素休克+输注贮存3周红细胞组(R_3组),每组8只。实验前1 d从家兔耳中央动脉采集15%的血容量模拟家兔失血状态。次日ES组、R_0组、R_1组、R_2组和R_3组经耳缘静脉注入脂多糖(LPS)5 mg/kg制备内毒素休克模型,S组静注等量生理盐水。2 h后,S组和ES组给予适量的复方乳酸钠,维持MAP65 mmHg, R_0组、R_1组、R_2组和R_3组分别输注不同贮存时间的红细胞,输注量为8 ml,为家兔血容量的5%,输血后继续输注适量的复方乳酸钠,维持MAP65 mmHg。采用ELISA法测定血浆IL-1β、IL-8、TNF-α的浓度。处死家兔后取肺组织,采用HE染色法观察肺组织病理变化、肺损伤评分,测定肺湿/干重比值(W/D);检测肺组织中丙二醛(MDA)含量、髓过氧化物酶(MPO)活性和氧化物歧化酶(SOD)活性。结果与S组比较,ES组、R_0组、R_1组、R_2组和R_3组血浆IL-1β、IL-8、TNF-α浓度明显升高,肺损伤评分、W/D明显增大,肺组织MDA含量明显增加,MPO活性明显升高,SOD活性明显降低(P0.05)。与ES组比较,R_0组、R_1组、R_2组和R_3组血浆IL-1β、IL-8、TNF-α浓度明显降低,肺损伤评分、W/D明显减小,肺组织MDA含量明显减少,MPO活性明显降低,SOD活性明显升高(P0.05)。与R_0组比较,R_1组和R_2组血浆IL-8浓度明显升高,R_3组血浆IL-1β、IL-8、TNF-α浓度明显升高,R_1组、R_2组和R_3组肺损伤评分、W/D明显增大,肺组织MDA含量明显增加,MPO活性明显升高,SOD活性明显降低(P0.05)。与R_1组比较,R_2组血浆IL-8浓度明显升高,R_3组血浆IL-1β、IL-8、TNF-α浓度明显升高,R_1组和R_2组肺损伤评分明显升高,肺组织MDA含量明显增加,SOD活性明显降低(P0.05)。与R_2组比较,R_3组血浆IL-1β、IL-8、TNF-α浓度明显升高,肺损伤评分、W/D明显增大,肺组织MDA含量明显增加,MPO活性明显升高,SOD活性明显降低(P0.05)。结论输注不同贮存时间的红细胞均可改善内毒素休克家兔急性肺损伤,贮存时间不超过2周的红细胞对内毒素休克家兔急性肺损伤治疗效果更佳。     

胆绿素对脑死亡致大鼠肺损伤的影响

目的 评价胆绿素对脑死亡致大鼠肺损伤的影响.方法 成年雄性清洁级Wistar大鼠23只,体重250～300 g,随机分为3组,假手术组(S组,n=7)仅向大鼠颅内置入Fogarty导管;脑死亡组(BD组,n=8)和胆绿素组(B组,n=8)向大鼠颅内置入Fogarty导管,通过膨胀球囊诱导脑死亡,膨胀球囊后30 min确认脑死亡情况,发生脑死亡后分别腹腔注射生理盐水1 ml或胆绿素35 mg/kg.分别于给予胆绿素前、后间断采集动脉血样,进行血气分析,计算PaO2/FiO2,并测定血浆胆红素浓度.给予胆绿素后1.5 h处死大鼠,取肺组织,测定MDA含量、SOD活性、总抗氧化能力、肺组织细胞凋亡情况及胆绿素还原酶的表达水平,对细胞凋亡情况进行免疫组化评分.结果 与S组比较,BD组PaO2/FiO2、SOD活性和总抗氧化能力降低,MDA含量和凋亡细胞免疫组化评分升高(P＜0.05);与BD组比较,B组PaO2/FiO2、胆红素浓度、SOD活性、总抗氧化能力和胆绿素还原酶表达水平升高,MDA含量和凋亡细胞免疫组化评分降低(P＜0.05).结论 外源性给予胆绿素可减轻脑死亡致大鼠肺损伤,其机制与抑制肺组织氧化应激反应和细胞凋亡有关.     

降钙素基因相关肽体外转染对大鼠同种异体肺移植物缺血再灌注损伤的影响

目的 观察和探讨腺病毒介导降钙素基因相关肽(CGRP)体外转染对大鼠同种异体肺移植物缺血再灌注损伤(IRI)的影响.方法 SD大鼠建立同种异体左肺移植模型.设立假手术对照组(A组)、空白对照组(B组)、空载体对照组(C组)和基因转染组(D组).D组供肺体外转染增强型绿色荧光蛋白标记降钙素基因相关肽重组腺病毒载体(Ad5-CGRP-EGFP),颗粒滴度为3.2×109vp/ml.供肺保存6 h行左肺原位移植.4 h后检测动脉血气分析和气道内压(AWP);荧光显微镜下观察移植肺组织绿色荧光变化;放射免疫法测定移植肺组织CGRP含量;检测移植肺湿-干重比率(W/D)比率、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、髓过氧化物酶(MPO)活性;光镜观察移植肺病理组织学变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定移植肺肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-10表达水平.结果 B、C、D组出现明显IRI反应.但D组IRI反应明显减轻.荧光显微镜下C组和D组标本呈强绿色荧光反应.放射免疫法测定D组肺组织CGRP含量明显升高,AWP下降,PaO2上升、PaCO2下降、W/D比率下降,SOD活性增高,MDA含量和MPO活性下降;D组病理组织学检查示肺组织炎细胞浸润、水肿和渗出改变明显减轻;TNF-α表达水平下调、IL-10表达水平增强.结论 CGRP体外转染可明显减轻IRI对供肺的损害,对大鼠肺移植的供肺起保护作用.     

亚甲蓝预处理对大鼠肝缺血再灌注肺损伤的保护作用

目的研究肝缺血再灌注后肺损伤的机制以及亚甲蓝的保护作用。方法 36只SD大鼠随机分为假手术组（S组,n=12）、缺血再灌注组（I/R组,n=12）和亚甲蓝处理组（MB组,n=12）。阻断肝门30分钟后开放血流,建立大鼠全肝缺血再灌注模型。I/R组与MB组分别于肝门阻断前10分钟腹腔注射亚甲蓝10mg/kg或相应剂量生理盐水,于再灌注1小时取血、处死动物。假手术组不阻断肝门,于上述相应时间点注射生理盐水与取血、处死动物。肝肺病理切片光镜观察、肺干湿重比、肺组织丙二醛（MDA）含量、髓过氧化物酶（MPO）活力、血清TNF-α和IL-8含量。结果病理结果显示,亚甲蓝组缺血再灌注后肺损害程度较缺血再灌注组减轻。缺血再灌注组较假手术组肺组织干湿重比、MDA含量、MPO活性和血清TNF-α和IL-8含量升高（P〈0.01）,而亚甲蓝组较缺血再灌注组肺组织干湿重比和血清TNF-α和IL-8含量（P〈0.01）,MDA含量和MPO活性（P〈0.05）均有下降。结论肝缺血再灌注会导致肺损伤,缺血前给予亚甲蓝对大鼠肝I/R后肺损伤具有有保护作用。     

L-N6-(1-亚氨乙基)赖氨酸对大鼠移植肺缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨L-N6-(1-亚氨乙基)赖氨酸(L-NIL)对大鼠移植肺缺血再灌注损伤的影响.方法 清洁级雄性SD大鼠18只,体重250～350 g,随机分为3组(n=6),假手术组(S组);肺移植组(L组)肺移植后恢复再灌注,冷缺血时间约1 h;L-NIL组再灌注即刻经尾静脉输注L-NIL 3 mg/kg.各组均于再灌注即刻经尾静脉注射0.5%伊文氏蓝0.2 ml.再灌注2 h时取左肺组织,测定肺湿/干重(W/D)比、伊文氏蓝含量、MDA含量、髓过氧化物酶(MPO)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及内皮源性一氧化氮合酶(eNOS)活性;并行病理学观察.结果 与S组比较,L组肺组织W/D比和伊文氏蓝含量增加,MDA含量、MPO及iNOS活性升高,eNOS活性降低(P＜0.05).与L组比较,L-NIL组肺组织W/D比和伊文氏蓝含量减少,MDA含量、MPO及iNOS活性降低,eNOS活性升高(P＜0.05),肺组织毛细血管内充血减少,炎性细胞浸润减少.结论 再灌注早期静脉注射L-NIL可减轻大鼠移植肺缺血再灌注损伤.     

肢体缺血预处理对兔肺组织缺血再灌注后氧自由基及细胞因子分泌的影响

目的 研究肢体缺血预处理对兔肺组织缺血再灌注后氧自由基及细胞因子分泌的影响.方法 将18只日本大耳白兔随机分为对照组(C组)、缺血再灌注组(I/R组)及肢体缺血预处理组(L组),每组6只.实验结束时,取肺组织测定湿/干重比(W/D)、超氧化物歧化酶(SOD)和髓过氧化物酶(MPO)活性、丙二醛(MDA)和肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-6、IL-8及IL-10的含量;检测支气管肺泡灌洗液和血清中蛋白含量,计算肺通透性指数;观察肺组织病理学变化.结果 与I/R组比较,L组W/D、肺通透性指数、MPO活性、MDA和TNF-α、IL-6、IL-8的含量均降低(P<0.05),SOD活性(P<0.05)和IL-10含量升高(P<0.01).C、L两组间上述指标的差异无统计学意义(P>0.05).光镜榆查结果发现L组肺组织病理学改变较I/R组明显减轻.结论 肢体缺血预处理可以抑制缺血再灌注肺组织中氧自由基产生和促炎细胞因子TNF-α、IL-6、IL-8的释放,上调抗炎细胞因子IL-10的合成,从而减轻肺缺血再灌注损伤.