骨髓基质干细胞与骨基质明胶复合构建组织工程化骨

目的探讨骨髓基质干细胞(MSCs)与同种异体骨基质明胶(BMG)复合培养构建组织工程化骨的可能性。方法将SD大鼠来源的MSCs与同种异体BMG复合培养后植入SD大鼠竖脊肌肌袋内,于术后不同的时间点处死大鼠,标本进行碱性磷酸酶(ALP)活性测定及组织形态学观察。结果MSCs与同种异体BMG复合植入体内可产生成熟的骨组织。结论利用MSCs与同种异体BMG复合可产生组织工程化新生骨组织。     

化学去细胞神经同种异系(体)移植的免疫学反应

目的:观察化学去细胞神经同种异系(体)移植的免疫学反应,研究化学萃取去细胞处理对同种异系(体)神经抗原性的影响。方法:在W istar大鼠的背部和腹部皮下植入取自SD大鼠的化学去细胞神经,对照组植入新鲜同种异系(体)神经。用ELISA法测定大鼠血清内的抗体滴度。免疫组化染色检测各时间点异系(体)神经及周围组织中T淋巴细胞的浸润程度。结果:实验组和对照组2周、4周、8周、12周的大鼠血清均没有呈现阳性的抗体滴度。化学去细胞同种异系(体)神经移植组植入后2和4周时CD3 、CD4 和CD8 T淋巴细胞的浸润程度明显轻于未去除细胞的新鲜同种异系(体)神经移植组。8和12周时埋入的新鲜同种异系(体)神经已经被受体吸收,而去细胞同种异系(体)神经移植组的植入组织保持原形态,周围仅见极少量淋巴细胞浸润。结论:化学萃取去细胞同种异系(体)神经的抗原性明显降低,植入体内后免疫排斥反应不明显。     

深低温处理同种异体肌腱移植组织形态学变化实验研究

目的探讨经深低温冷冻处理(-80℃)、未经处理同种异体肌腱和自体肌腱移植后组织形态学的变化。方法采用兔跟腱缺损修复模型,分为深低温冷冻同种异体肌腱移植组(深低温异体组)、未经处理同种异体肌腱移植组(未处理异体组)和自体肌腱移植组(自体组)。在移植后3周对肌腱进行组织形态学观察。结果光镜、电镜下未处理异体组肌腱腱束变性、坏死,而深低温异体组与自体组则无明显差别。结论深低温冷冻同种异体肌腱移植在形态学方面的表现与自体肌腱移植结果基本相同。     

小剂量FK506作用下同种脾组织移植诱导大鼠原位肝移植术后免疫耐受的机制

目的:观察小剂量FK506作用下同种脾组织移植对大鼠肝移植术后免疫耐受的影响,探讨其可能的机制.方法:实验分5组(每组大鼠8只),同种肝移植组(A组)以纯系雄性Lewis大鼠为供体、雌性BN大鼠为受体进行同种原位肝移植;同种肝移植 小剂量FK506治疗组(B组)于肝移植术后口服途径给予小剂量FK506(0.25 mg/kg);同种肝脾联合移植组(C组)于肝移植同时移植供体脾脏;同种肝脾联合移植 小剂量FK506治疗组(D组)于肝脾联合移植后口服途径给予小剂量FK506;异体脾组织移植组(E组)于同种原位肝移植同时移植第三品系大鼠脾脏组织,术后进行小剂量FK506治疗.观察各组的存活期,并分析受体脾脏T淋巴细胞对同种抗原的反应性、嵌合体的形成情况以及肝脏病理变化.结果:与其他各组相比,C组大鼠的存活期明显延长;其受体T细胞同种抗原反应性明显降低;受体脾脏中供体阳性细胞明显升高(P＜0.01),且在60 d后受体脾脏中供体阳性细胞仍然较高;肝脏病理分析也未见明显排斥反应.结论:小剂量FK506作用下同种脾脏移植能明显诱导受体大鼠原位肝移植术后嵌合体的形成,降低受体T细胞对同种抗原的反应性,促进免疫耐受.     

人类血小板同种特异性抗原系统

在血小板同种抗原中,有些是其他细胞或组织共有的,如ABO血型抗原、HLA-Ⅰ类抗原;另外一些则仅表达或主要表达于血小板,由血小板特有的抗原决定簇组成,表现血小板独特的遗传多态性,被称为血小板同种特异性抗原(human plateletaloantigens,HPAs)。因其能够介导同种抗体的产生,引发同种免疫性血小板减少,如:新生儿同种免疫血小板减少症(neonatalalloimmune thrombocytopenia,NATP)、输血后紫癜(post-transfusionpurpura,PTP)以及血小板输注无效(post-transfusion refractoriness,PTR)。因此,研究HPAs具有重要的临床意义。     

同种异体肢体移植的免疫排斥反应

目的:通过4例(6个肢体)同种异体肢体移植,探讨免疫排斥反应的相关问题。方法:在联合应用新型高效的免疫抑制剂和较满意的组织配型的情况下,实施同种异体肢体移植。结果:4例(6个肢体)全部成活,功能恢复较满意,其中1例曾出现中度急性排斥反应,经治疗排斥反应消退。结论:在良好的组织配型及理想的免疫抑制剂的治疗下,同种异体肢体移植可以不出现排斥反应。     

同种异体骨髓基质细胞移植修复兔膝关节骨软骨缺损

目的 探讨同种异体骨髓基质细胞(BMSCs)作为种子细胞在软骨组织工程中的应用.方法 同种异体BMSCs与丝素蛋白-异体松质骨共培养构建组织工程化骨软骨复合体,移植修复兔膝关节骨软骨缺损,术后2、4、12周取材,行组织学观察及Ⅱ型胶原、Brdu免疫组化染色.结果 BMSCs能在丝素蛋白和松质骨支架上较好的黏附、生长,共培养后成功地构建了组织工程化骨软骨复合体;体内移植后生成透明软骨样组织并修复了骨软骨缺损.结论 同种异体BMSCs可作为软骨组织工程的种子细胞,丝素蛋白-松质骨双相支架负载同种异体BMSCs可用于骨软骨缺损的修复.     

多形性HLAMcAbs与常规同种HLA分型血清的比较研究

本文用HLA单克隆抗体(HLAMcAbs)与常规同种HLA分型血清进行了比较研究。结果表明HLAMcAbs效价高(1∶1000000),特异性强(γ>0.93),在一定稀释度下使用可替代常规同种HLA抗血清,用于HLA分型及组织配型。     

活性生物瓣膜和血管冻贮技术的初步研究

用改良的方法建立了活性同种瓣膜和血管库,观察了用三抗培养液37℃消毒24h和低温保护剂(CPM)在室温条件下对组织的影响。结果表明,冻存复温的组织培养24h后,糖利用率和谷-草转氨酶(AST)明显降低,72h后乳酸脱氢酶(LDH)则明显升高,此后与新鲜组织趋于一致;三抗培养液消毒和CPM对组织均无明显影响;组织学观察发现冻存复温组织生长较新鲜组织稍晚。用该技术低温保存的活性同种瓣膜和血管进行10例临床移植,获得满意的效果。提示改良法低温冻贮活性生物瓣膜和血管技术已初步成功。     

中国人白细胞抗原系统的研究——Ⅰ.淋巴细胞毒抗血清的筛选

随着免疫学的进展,人们认识到同种异体组织和器官移植被排斥的根本原因是由于高等动物和人体不同个体的组织细胞有一些特异的同种异体抗原,称为组织相容性抗原或移植抗原。组织和器官移植时,如果供体和受体的组织相容性抗原不相同或不配合,就会引起一系列植抗受(graft versus host,GVH)和受抗植(host versus graft,HVG)反应,其反应的强弱取决于有关组织相容性抗味的免疫性强弱。人体红细胞ABO系统和人体白细胞抗原系统(HLA)是人体两大组织相容性系统。1958年Dausset利用输血病人血清鉴定了第一个白细胞抗原Mac(即HLA-A_2)。同年,Payne等和Van Rood等分别在经产妇血清中检出了白细胞凝集抗体。此后,产妇血清成为白细胞分型试剂的     

人类组织相容性抗原(HLA)和器官移植

人类组织相容性抗原系统(HLA) 人类组织相容性抗原也称白细胞抗原,与器官移植有密切关系,是移植抗原中主要(major)组织相容性抗原系统。1.HLA系统的概念HLA是人的一种同种异体抗原。存在于人组织细胞(脾、肾、皮肤等)、白细胞(淋巴细胞、有核细胞和血小板)的细胞浆膜上或     

去细胞组织工程同种心脏瓣膜的构建

目的 全面评价去细胞组织工程同种心脏瓣膜的生物学、生物力学及免疫学特性。方法采用低渗液-去污剂[0.5％去氧胆酸(DOA),1％DOA,1％Triton]-核酸酶去细胞法,测定了,47例去细胞同种心脏瓣膜去细胞前后组织学、免疫学、组织厚度、组织含水量、热皱缩温度、组织基因组DNA含量、胶原蛋白含量、应力应变曲线、破坏强度及组织伸长比变化。结果组织学检查1％DOA 24 h组完整地去除了同种心脏瓣膜、管壁及肌肉组织中所有的细胞成分,保留了完整的细胞外基质;免疫组织化学证实白细胞DR(HLA-DR)抗原表达明显下降;组织基因组DNA含量显著下降(瓣叶下降91.14％,管壁下降91.53％);与去细胞前相比,只有管壁组织的含水量(去细胞前75.4±1.8,去细胞后82.0±0.7,P<0.05)明显增加,组织厚度、瓣叶组织含水量、热皱缩温度、应力应变曲线、破坏强度及组织伸长比差异无显著意义。结论低渗液-去污剂(1％DOA)-核酸酶去细胞法方便有效,去细胞组织工程同种心脏瓣膜的生物学及生物力学特性稳定,免疫性显著下降,符合机体的要求,为受体细胞化组织工程心脏瓣膜的研制提供了可靠的天然的纤维支架材料。     

供体骨髓来源的未成熟树突状细胞抑制小鼠同种异体牙移植后排斥反应的效果研究

目的:研究供体小鼠骨髓来源的未成熟树突状细胞(Immature dendritic cell, imDC)对小鼠同种异体牙移植后排斥反应的抑制效果.方法:运用50 U/ml粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor, GM-CSF)诱导出小鼠骨髓来源imDC,流式细胞术鉴定细胞表型,并于同种异体牙移植前1周以2×106个/只回输入受者体内,组织病理切片观察imDC对小鼠同种异体牙移植后排斥反应的抑制效果.结果:imDC回输组与未回输imDC的同种异体牙移植组相比,淋巴细胞浸润减少、炎症反应减轻.结论:imDC可以减轻同种异体牙移植后的排斥反应.     

异体肢体移植进展

异体肢体移植治疗肢体缺失一直是各国医生多年探索的课题与梦想．近年来。随着器官移植的成功开展，自体肢体离断再植技术的不断成熟。免疫抑制剂品种的不断发展和更新，许多学者对同种异体肢体移植进行了较为深入的实验研究，目前同种异体肢体(复合组织)移植的临床应用已成为现实。本文就同种异体肢体移植的研究进展进行综述。     

同种异体移植大鼠耳廓组织中RANTES表达的实验研究

目的　探讨趋化因子RANTES在同种异体移植的大鼠耳廓组织中的表达与相关免疫细胞的浸润。方法　使用Lewis大鼠 8只作为供体 ,BN大鼠 8只作为受体 ,进行异体耳廓移植 (LewisBN) ;使用BN大鼠 16只进行自体移植 (BNBN)。观察移植耳廓的生存时间及病理改变 ,并采用免疫组织化学技术检测RANTES的表达与T淋巴细胞、单核细胞的浸润情况。结果　同种异体移植耳廓平均生存 (7 3± 0 2 5 )d ,移植耳廓组织中RANTES的表达于术后 3d达到高峰 ,并与组织中T淋巴细胞的浸润有明显的关系 ,同时可见大量单核细胞的浸润。结论　同种异体大鼠耳廓移植后 1周左右发生排斥反应 ,并与趋化因子RANTES的表达及进一步T淋巴细胞与单核细胞的浸润有关     

原位同种肝移植术(附一例报告)

组织器官移植是现代医学的发展方向之一。早期的肝组织移植实验始于本世纪初,至五十年代中期才发展成比较成熟的整肝移植技术。临床同种肝移植的发展,可分两个阶段:(1)从1963年3月1日Starzl等首次为一患胆道闭锁的病儿作原位同种肝移植起,在4年另4个多月的时间里,世界上共进行了9例这项手术,但病人均于短期内死亡,存活最长者为23天。(2)从1967年7     

蓖麻毒蛋白偶合物应用于骨髓移植

已证明完整的蓖麻毒蛋白(R)免疫毒素(IT)可以有效地应用于骨髓移植(BMT)的前处理:(1)从同种异体移植物中清除能导致产生移植物抗宿主排斥反应病(GVHD)的供体T细胞;(2)从自体移植物中清除残留的白血病母细胞。我们用三种抗泛T细胞的单克隆抗体(McAb)混合物结合完整的蓖麻毒蛋白,对组织相容的供体骨髓处理,清除其中的T细胞,已完成同种异体骨髓移植Ⅰ期临床试验。参与研究的17例病人中,12例病人完全接     

同种异体组织工程化软骨组织的生化分析

目的以胚胎来源的关节软骨细胞,体内构建同种异体组织工程化软骨组织,分析其与正常关节软骨组织糖胺多糖(GAG)和Ⅱ型胶原含量的差异.方法以酶消化法分离胚胎(100 d)山羊关节软骨细胞,与生物材料聚环氧乙烯复合,并植入异体成年山羊腹部皮下.按不同时间段取材, Western-blot、MTT比色法分析测定其GAG和Ⅱ型胶原含量,并与正常关节软骨组织比较.结果新生软骨中GAG的含量比正常关节软骨显著下降(P<0.01),而II型胶原含量与正常关节软骨无显著性差异.结论胚胎来源的同种异体组织工程化软骨与正常关节软骨有着相同的生化成分,且新生软骨中II型胶原的含量与正常关节软骨接近.     

腹腔注射同种异体粪便滤液建立大鼠脓毒症模型

目的 探讨应用腹腔注射同种异体粪便滤液建立中重度脓毒症大鼠模型的方法。方法 选择健康Wistar大鼠作为研究对象，明确同种异体粪便滤液的制备方法，腹腔注射不同浓度(0.5、1、2 g/kg)的同种异体粪便滤液，观察大鼠一般情况、生存率与脓毒症程度；确定最佳剂量后，观察模型成功率、血清炎性因子、D-乳酸(D-LA)、血清肠型脂肪酸结合蛋白(I-FABP)、活体肺功能以及肺、肝、肾组织损伤等指标。结果 腹腔注射同种异体粪便滤液24 h后，1 g/kg组大鼠出现发热、呼吸急促、低血压，24 h生存率83.3%,48 h生存率16.7%,2 g/kg组大鼠24 h内全部死亡，确定1 g/kg剂量用于后续实验。注射粪便滤液24 h后，模型成功率为77.8%;大鼠血清白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、D-LA、I-FABP水平明显增高；肺组织出现严重水肿和出血等表现，肺功能有功能残气量、动态肺顺应性、前100毫秒用力呼气容积、呼气峰流量下降以及气道阻力、深吸气量增高等呼吸功能不全表现；肝、肾组织也出现不同程度的细胞水肿和炎性细胞浸润，血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸...     

同种异体组织工程化软骨组织的生化分析

目的 以胚胎来源的关节软骨细胞,体内构建同种异体组织工程化软骨组织,分析其与正常关节软骨组织糖胺多糖(GAG)和Ⅱ型胶原含量的差异。方法 以酶消化法分离胚胎(100 d)山羊关节软骨细胞,与生物材料聚环氧乙烯复合,并植入异体成年山羊腹部皮下。按不同时间段取材,Western-blot、MTT比色法分析测定其GAG和Ⅱ型胶原含量,并与正常关节软骨组织比较。结果 新生软骨中GAG的含量比正常关节软骨显著下降(P<0.01),而Ⅱ型胶原含量与正常关节软骨无显著性差异。结论 胚胎来源的同种异体组织工程化软骨与正常关节软骨有着相同的生化成分,且新生软骨中Ⅱ型胶原的含量与正常关节软骨接近。