酪氨酸激酶抑制剂抑制骨髓瘤细胞的增殖及黏附

目的 观察酪氨酸激酶抑制剂ST1571对骨髓瘤细胞系RPM18226细胞增殖、黏附以及黏附诱导耐药的影响。方法该试验采用MTT法检测ST1571对骨髓瘤细胞增殖的影响；流式细胞仪检测对细胞周期的影响；结晶紫染色法分析RPM18226细胞与纤连蛋白（fibronectin，FN）的黏附率；MTT法检测ST1571对瘤细胞耐药的影响；结果ST1571明显抑制KPM18226细胞的增殖，24、48和72hIC50值分别为（34．52±2．31）、（28．46±1．58）和（25．74±2．44）μmol／L。25μmol／L ST1571处理24h，G1期细胞由55．8％增加至72．4‰S期细胞由34．8％减至15．6％。KPM18226细胞与FN黏附1、6和12h，其黏附率分别为（43．71％±2．18％）、（55．63％±1．56％）和（63．42％±2．46％）；非抑制浓度ST1571（20μmol／L）处理1、6和12h后黏附率分别降为（15．12±1．04）％、（17．58±1．32）％和（17．24±1．59）％；组间差异有显著性（P〈0．05）；阿霉毒作用后，FN黏附组细胞IC50值[（1．46±O．04）μmol／L]显著高于BSA组[（0．78±0．03）μmol／L]（P〈0．05）；FN联合ST1571组IC50值[（0．81±0．05）μmol／L]与BSA联合ST1571组[（0．74±0．02）μmol／L]相比差异无显著性（P〉0．05），但却低于FN组（P〈0．05）。结论ST1571能抑制KPM18226细胞的增殖、并可降低KPM18226细胞与FN的黏附率及逆转黏附介导的阿霉素耐药。     

紫杉醇脂质体对子宫内膜癌HEC-1A细胞体外杀伤作用的研究

目的探讨注射用紫杉醇脂质体对人子宫内膜癌细胞系的体外杀伤作用。方法以0．01μmol／L、0．1μmol／L、1μmol／L、10μmol／L、100μmol／L浓度梯度的合注射用紫杉醇脂质体培养基作用于人子宫内膜癌细胞系HEC-1A细胞，并设对照（普通培养基），通过MTT、显微镜观察细胞形态、流式细胞分析技术检测该药对细胞生长的影响。结果经上述浓度紫杉醇脂质体作用48h后，细胞存活率下降；镜下观察显示部分细胞皱缩变形，崩解坏死，细胞脱壁悬浮；流式细胞结果显示细胞凋亡率逐渐增加，分别为（2．44±0．98）％、（7．30±2．11）％、（13．64±5．46）％、（15．26±9．73）％、（16．46±11．20）％、（25．61±12．32）％；细胞周期各时相中，S期比例减少。结论紫杉醇脂质体可抑制子宫内膜癌HEC-1A细胞的生长。     

外源性一氧化氮对新生大鼠神经干细胞/前体细胞分化的影响

目的探讨外源性一氧化氮（NO）对培养状态下的新生大鼠神经干细胞／前体细胞（NSCs／NPs）分化的影响。方法采用常规方法分离新生大鼠脑室下带（SVZ）组织，进行NSCs／NPs体外培养。用二乙烯三胺／一氧化氮聚合物（DETA／NO）作为外源性NO供体培养NSCs／NPs。用免疫细胞化学方法检测NSCs／NPs标记巢蛋白（nestin）、神经元标记神经元特异性微管相关蛋13（Tuj-1）和星型胶质细胞标记胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）。同时用Greiss还原法检测培养液中总NO的浓度。结果原代或次代培养的神经球均为nestin阳性；DETA/NO对体外培养的NSCs／NPs作用5d后，40μmol／L、50μmol/L、60μmol／L DETA／NO实验组分别释放出（62．0±6．4）μmol／L、（64．8±15．7）μmol／L、（68．5±11．6）μmol／L的NO，相应实验组分化的神经元数分别为（53．1±4．7）％、（54．1±6．9）％、（63．8±9．5）％，较对照组[（38．8±7．2）％]，显著增加，差异有高度统计学意义（P〈0．01）；50μmol／L、60μmol／L DETA/NO实验组分化的星型胶质细胞数分别为（38．2±6．7）％、（41±10．5）％，较对照组[（32．8±5．5）％]，有所增加，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论外源性NO主要促进体外培养的NSCs／NPs向神经元方向分化。     

三七总皂苷部分逆转黏附诱导的骨髓瘤细胞耐药性

目的：研究三七总皂苷（PNS）对骨髓瘤细胞RPMI8226黏附及黏附诱导耐药的影响．方法：采用MTT法检测PNS和／或阿霉素（Adr）对RPMI8226细胞的毒性作用；荧光染料二醋酸盐琥珀酰亚胺酯（CFSE）标记并流式细胞术检测RPMI8226细胞与纤连蛋白（FN）黏附率．结果：RPMI8226细胞与FN黏附2，12h，其黏附率分别为（55．63±1．56）％，（65．42±2．46）％；经亚细胞毒浓度PNS（50mg／L）预处理后，其黏附率分别降为（33．24±1．29）％，（34．16±1．59）％，处理前后差异有统计学意义（P〈0．05）；FN黏附12h后，瘤细胞对Adr的IC50值为（2．70±0．24）μmol／L，高于BSA对照组（2．03±0．13）μmol／L（P〈0．05），经PNS处理后FN组Adr IC50值降至（1．08±0．09）μmol／L，与BSA对照组（0．82±0．07）μmol／L相比无统计学差异（P〉0．05）．结论：PNS可降低RPMI8226细胞与FN的黏附率，并能部分逆转黏附介导的骨髓瘤耐药．     

冠心病患者妊娠相关血浆蛋白A含量与血管内皮功能关系探讨

【目的】探讨冠心病患者血循环妊娠相关血浆蛋白A（PAPP—A）水平与内皮功能的关系。【方法】64例冠心病患者，其中稳定型心绞痛组34例，急性冠脉综合征组30例，分别检测其相关内皮功能，包括肱动脉血流介导的血管舒张反应（FMD）和高敏C-反应蛋白（hs—CRP）、内皮素（ET）、一氧化氮（NO）水平，并用酶联免疫法检测血清PAPP—A。【结果】稳定型心绞痛组患者同急性冠脉综合征组相比PAPP—A[（6×10^-3±5×10^-1U／L与（19×10^-3±13×10^-3）U／L，P〈0．05]、hs-CRP[（0．5±0．3）mg／L与（3．6±2．2）mg／L，P〈0．01]、NO[（57±4）μmol／L与（45±5）μmol／L，P〈0．05]和FMD（6．0％±0．8％与3-3％±1．2％，P〈0．05）的差异有统计学意义。逐步选择多重回归分析，按α=0．10水准，发现PAPP—A与hs—CRP和FMD存在直线关系，Lnhs—CRP的偏相关系数为0．333（95％置信区间：0．138-0．527，P〈0．01），FMD的偏相关系数为-0．623（95％CI：-1．144—0．102，P〈0．051，其中常数项为5．570。高PAPP—A（〉11．094×10^-3U／L）患者hs—CRP明显增高[（5．3±4．2）mg／L与（1．3±0．6）mg／L，P〈0．01），FMD则降低（3.3％±2．4％与6．2％±3．6％，P〈0．05）。【结论】PAPP-A可作为间接评估冠心病患者血管内皮功能的指标之一。     

重视感染在慢性肾衰竭中的作用

目的：分析感染对慢性肾衰竭的影响，从而重视感染在慢性肾衰竭中的作用。方法：选择的98例患者治疗前均未行血液透析，均行慢性肾衰竭的一体化治疗，感染后均维持原治疗方案，同时联合抗炎治疗，需要透析的患者进行血液透析。同时测定治疗前后及感染前后的血肌酐和血尿素的指标。观察感染对心脏、脑部、血压、血液透析的影响。结果：感染前后患者脑病的发生率由（5．6±2．9）％上升到（10．5±3．4）％，休克的发生率由（3．5±1．9）％上升到（20．5±9．6）％，心力衰竭的发生率由（13．7±6．8）％上升到（46．7±15．8）％，心肌缺血的发生率由（10．3±5．7）％上升到（35．4±16．2）％；尿素由（21．45±11．43）mmol／L上升到（38．76±10．76）mmol／L，肌酐由（426．0±116．5）μmol／L上升到（856．0±178．5）μmol／L。治疗前后相比较，尿素由（38．16±10．76）mmol／L降至（28．72±10．35）mmol／L，肌酐由（856．0±178．5）μmol／L降至（587．0±156．8）μmo／L。治疗后与感染前的尿素和肌酐相比有差异性。结论：感染可加重肾功能损害并增加慢性肾衰竭的并发症。慢性肾衰竭合并感觉染的炎症因子所致的肾损害有不可逆转的趋势。所以要重视感染在慢性肾衰竭中的作用。     

辛基酚影响MCF-7细胞凋亡及bcl_2、caspase3表达

目的观察辛基酚（0P）对乳腺癌MCF-7乳腺癌细胞凋亡的影响。方法以流式细胞分析、DNA断端末端标记（TUNEL）试验、DNA片断率分析、流式细胞仪免疫荧光和荧光定量PCK等方法观察OP对MCF-7细胞凋亡、bcl2、bax、caspase3表达的影响。结果8、16μmol／LOP作用MCF-7细胞，TUNEL细胞阳性率和DNA片断百分率增加，48h时的凋亡率分别为（6．6±1．32），（16，3±3.48）『对照（43±1．18）]；bcl2荧光量分别为（63．5±5．84），（30．3±2．49）[对照（57．2±4．07）]。4μmol／LOP明显上调MCF-7细胞中bcl2 mRNA表达；16μmol／L OP则明显降低细胞中bcl2 mRNA表达，且bax、caspase3 mRNA表达明显增加。结论8、16μmol／L OP能明显诱导MCF-7乳腺癌细胞的凋亡，增加DNA片断百分率，其机制可能是通过下调细胞中bcl2的表达、上调bax、caspase3的表达来实现。     

过敏性紫癜患儿血清中血管内皮生长因子与一氧化氮水平变化及意义

目的探讨过敏性紫癜（HSP）患儿血清中血管内皮生长因子（VEGF）及一氧化氮（NO）的变化及其临床意义。方法采用酶联免疫吸附法（ELISA）、硝酸酶还原法检测38例HSP患儿急性期、恢复期及24例正常健康儿（对照组）血清中VEGF及NO活性水平。结果对照组、HSP急性期组、恢复期组儿童血清VEGF与NO水平分别为（129．4±39．1）ng／L与（80．5±15．7）μmol／L、（429．0±109．2）ng／L与（124．9±22．8）μmol／L、（252．3±63．8）ng／L与（78．0±12．4）p,mol／L,3组VEGF、NO水平间差异均有统计学意义（P〈0．01）。伴或不伴早期肾损害的HSP患儿血清VEGF与NO水平分别为（497．5±112．5）ng／L与（160.4±27．7）μmol／L、（393．4±95．6）ng／L与（106．5±21．1）μmol／L,2组VEGF、NO水平间差异有统计学意义（P〈0．01）。HSP急性期血清VEGF与NO水平间呈直线正相关（r=0．653,P〈0．01）。结论VEGF与NO在过敏性紫癜、紫癜性肾炎（HSPN）的发生、发展中发挥一定作用。监测HSP患儿血清VEGF及NO水平对判定其病情、病程、预后和指导治疗均有一定意义。     

心力衰竭患者尿酸及尿素氮检测的临床意义

目的：探讨心力衰竭与血尿酸、尿素氮之间的关系。方法：全自动生化分析仪检测血清中尿酸和尿素氮并进行分析。结果：心力衰竭患者治疗前尿酸（415±112）μmol／L、（486±123）μmol／L,尿素氮（5．7±3．7）mmoL/L、（7．8±4．7）mmol／L。治疗后尿酸（335±82）μmol／L、（367±68）μmol／L,尿素氮（4．3±2．8）mmol／L、（5．6±3．5）mmol／L。治疗后明显低于治疗前,差异具有统计学意义（P〈O．05,0．01）。结论：检测尿酸和尿素氮有助于判断心力衰竭的严重程度。     

慢性乙型重肝病人免疫与肝生化指标变化的意义

目的探讨慢性乙型重型肝炎早期、中期、晚期病人的免疫和肝生化指标变化与预后的关系。方法检测120例慢性重型肝炎病人（早期60例,中期40例,晚期20例）和120例慢性乙型肝炎病人的T细胞亚群、HBV DNA载量、免疫学及肝功能指标,并总结分析其临床意义。结果晚期慢性乙型重型肝炎病人细胞免疫状态最差,与慢性乙型肝炎病人相比差异显著,NK细胞分别为（7．47±4．19）％vs（13．29±4．68）％,P〈0．05;CD4／CD8比值为（0．39±0．16）vs（1．12±0．26）,P〈0．05;CD3^＋（73．11±13．16）％vs（56．12±9．54）％;P〈0．05;CD8^＋（56．74±13．91）％vs（34．26±10．58）％,P〈0．05;晚期慢性乙型重型肝炎的肝功能损害与慢性乙型肝炎相比同样有显著性差异：白蛋白分别为（20．82±3．46）g／L vs（43．11±5．74）g／L,P〈0．05;血清总胆红质（TB）（519．42±156．18）μmol／Lvs（25．91±17．38）μmol／L,P〈0．05;凝血酶元活动度（PTA）（15．21±6．38）％vs（92．45±10．56）％,P〈0．05。结论慢性乙型重型肝炎晚期病人的CD4／CD8、NK细胞显著下降,病人淋巴细胞亚群的失衡可加重肝脏的损伤。     

羊膜对体外培养的兔视网膜Müller细胞增殖影响的实验研究

目的观察羊膜对体外培养的兔视网膜Müller细胞增殖能力的影响。方法（1）取第四代兔视网膜Müller细胞以3×10^4个／ml接种于96孔板,200μl／孔,24h后加入不同浓度羊膜匀浆条件培养基（800、400、200、100μg／ml）,培养24、48、96h后,用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测Müller细胞增殖率。（2）第四代兔视网膜Müller细胞以4×10^4个／ml密度接种于预置有盖玻片的6孔板中,24h后加入不同浓度的羊膜条件培养基,继续培养48h后,免疫组化细胞核增殖抗原（PCNA）检测。（3）4代兔视网膜Müller细胞以4×10^4个／ml接种于6孔板中,24h后加入不同浓度的羊膜条件培养基,继续培养48h,流式细胞仪观察细胞周期变化。结果随着条件培养基中羊膜匀浆浓度的增加,对兔视网膜Müller细胞的增殖效应逐渐增强,800μg／ml时获得最大增殖效应,细胞增殖率为62．5％;细胞周期分析显示：进入S期的细胞数明显增加（56．49％）。在羊膜匀浆浓度恒定条件下,随着时间延长,其对视网膜Müller细胞的增殖效应逐渐加强,在48h即达到较高的增殖效应,96与48h相比差异无统计学意义（F=0．233、0．007,P=0．492、0．729）。800μg／ml组和400μg／ml组PCNA阳性表达率（0．84±0．07;0．79±0．06）与对照组（0．54±0．12）相比差异具有统计学意义（x^2=-0．182、-0．151,P=0．002、0．015）。结论羊膜对体外培养的兔视网膜Müller细胞具有促进增殖作用,且呈浓度和时间依赖性。     

NK细胞联合西妥昔单抗对大肠癌细胞ADCC作用的研究

目的比较3株肠癌细胞株(LOVO、SW480、SW620)与自然杀伤(natural killer,NK)细胞、西妥昔单抗(Cetuximab)混合作用之后,NK细胞抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用(antibody dependent cell cytotoxicity,ADCC),探讨Cetuximab抗肿瘤过程中ADCC的作用。方法免疫组织化学方法检测3种不同肠癌细胞系(LOVO、SW480、SW620)的EGFR表达水平;MTT法检测6种不同浓度Cetuximab作用48h后肿瘤细胞的生长抑制情况;NK细胞与Cetuximab包被的肿瘤细胞共孵育,LDH法检测NK细胞的ADCC功能变化。结果免疫组织化学结果显示,3株细胞EGFR表达:LOVO(),SW480(+),SW620(-);Cetuximab对LOVO细胞和SW480细胞的生长抑制呈剂量依赖,对SW620细胞无抑制作用;LOVO细胞和SW480细胞经Cetuximab处理后,NK细胞的ADCC作用均增强且有统计学意义(P<0.05)。结论单独的Cetuximab可抑制EGFR阳性的LOVO细胞和SW480细胞,而对EGFR阴性的SW620细胞生长抑制作用不明显,所选的2株EGFR阳性肿瘤细胞都可被Cetuximab所介导ADCC作用所抑制,高EGFR表达的肿瘤细胞更加敏感。     

Inhibitive effect of 3-bromopyruvic acid on human breast cancer MCF-7 cells involves cell cycle arrest and apoptotic induction

Background Breast cancer is one of the most common malignancies in women and is highly resistant to chemotherapy Due to its high tumour selectivity, 3-bromopyruvic acid （3-BrPA）, a well-known inhibitor of energy metabolism has been proposed as a specific anticancer agent. The present study determined the effect of 3-BrPA on proliferation, cell cycle and apoptosis in the human breast cancer MCF-7 cell line and other antitumour mechanisms. Methods MCF-7 cells were treated with various concentrations of 3-BrPA for 1-4 days, and cell growth was measured by 3-（4, 5-dimethylthiazol-2-yl）-2, 5-diphenyl tetrazolium bromide assay. Marked morphological changes in MCF-7 cells after treatment with 3-BrPA were observed using transmission electron microscopy. The distributions of the cell cycle and apoptosis were analyzed by flow cytometry. Immunohistochemistry was used to indicate the changes in the expression of Bcl-2, c-Myc, and mutant p53. Results 3-BrPA （25 μg/ml） significantly inhibited the proliferation of MCF-7 cells in a time-dependent manner. The MCF-7 cells exposed to 3-BrPA showed the typical morphological characteristics of apoptosis, including karyopycnosis, nuclear condensation and oversize cytoplasmic particles. In addition, flow cytometric assay also showed more apoptotic cells after 3-BrPA stimulation. The cells at the GO and G1 phases were dramatically decreased while cells at the S and G2/M phases were increased in response to 3-BrPA treatment after 48 hours. Furthermore, 3-BrPA stimulation decreased the expressions of Bcl-2, c-Myc and mutant p53, which were strongly associated with the programmed cell death signal transduction pathway. Conclusion 3-BrPA inhibits proliferation, induces S phase and G2/M phase arrest, and promotes apoptosis in MCF-7 cells, which processes might be mediated by the downregulation of the expressions of Bcl-2, c-Myc and mutant p53.     

曲古菌素A对人肺癌细胞的诱导分化及其机制的实验研究

目的通过应用组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古菌素A（TSA）调节人肺腺癌细胞A549中组蛋白去乙酰化酶3的表达,观察肺腺癌细胞A549生长抑制、细胞周期阻滞以及对抑癌基因表达的变化。方法培养人肺腺癌细胞A549,应用MTT比色法观察TSA对A549细胞的生长抑制作用,流式细胞术分析细胞周期,以RT—PCR、Western印迹分别检测A549细胞中组蛋白去乙酰化酶3、P^21WAFL/CIPt和蛋白的表达水平。结果TSA处理后A549细胞的生长受到抑制（24h时对照组和各处理组细胞抑制率分别为6．2％±1．1％、18．5％±2．3％、28．9％±3．6％、39．4％±3．7％、45．6％±2．7％,P〈0．05;48h时分别为8．1％±2．3％、26．9％±4．2％、35．6％±3．8％、56．5％±6．1％、69．8％±5．3％,P〈0．05;72h时分别为10．5％±1．3％、28．4％±3．2％、50．5％±5．8％、70．5％±6．9％、78．6％±4．5％,P〈o．05）,细胞阻滞于G1期（对照组和各处理组细胞G1期分布：56．5％±8．1％、70．5％±6．7％、78,6％±4．6％、82．4％±3．7％、85．6％±7．5％,P〈0．05）,P^21WAFL/CIPt基因表达水平增强（对照组和各处理组RT—PCR吸光度分别为o．09、0．17、0．20、0．27、0．35,P〈0．05）。同时TSA处理A549细胞中组蛋白去乙酰化酶3的基因表达水平明显降低。结论TSA可能通过抑制组蛋白去乙酰化酶3,提高组蛋白的乙酰化水平诱导P^21WAFL/CIPt基因表达。     

视黄酸对肿瘤坏死因子α诱导肺泡上皮细胞损伤的保护作用

目的探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)对肺泡Ⅱ型上皮细胞株A549增殖凋亡的影响与视黄酸(RA)对其调控作用。方法用不同浓度的TNF-α、1μmol/LRA和10μg/LTNF-α+1μmol/LRA处理肺泡Ⅱ型上皮细胞株A549细胞24h和48h后MTT法测定细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡。用10μg/LTNF-α处理24h或48h后继续培养,用台盼蓝染色计算24、48和72h活细胞数。结果分别用0、0.1、1、5、10μg/L浓度的TNF-α培养A549细胞24h和48h测定细胞增殖数(%):24h分别为95.0%、90.0%、79.6%、72.4%和59.6%,方差分析结果F值为18.04,P<0.01;48h分别为93.2%、82.7%、61.5%、50.3%和44.7%,F值为40.61,P<0.01。用10μg/LTNF-α处理A549细胞24h,其对细胞的增殖抑制作用可逆转,但处理48h后的A549细胞增殖抑制作用不能逆转。用TNF-α和视黄酸培养A549细胞12、24与48h后,凋亡的细胞数(%)TNF-α组分别为14.3%±3.2%、18.6%±2.9%和43.4%±3.5%,与对照组(6.3%±1.2%,8.2%±1.3%和26.1%±2.5%)比较差异有统计学意义;视黄酸加TNF-α组为4.8%±1.1%,5.2%±1.3%和16.4%±2.3%,明显少于TNF-α组。结论视黄酸通过抑制TNF-α对肺泡Ⅱ型上皮细胞的破坏,可以达到减轻肺泡上皮细胞损伤,保护肺表面活性物质的作用。     

Antagonistic effects of tranilast on proliferation and collagen synthesis induced by TGF-beta2 in cultured human trabecular meshwork cells.

Whether tranilast had antagonistic effect on proliferation inhibition and collagen synthesis promotion induced by TGF-beta2 in cultured human trabecular meshwork cells was investigated. Suspension of 1 x 10(4) cultured human trabecular meshwork cells of 3-5 passage was distributed in each well of a 96-well disk and divided into control group and experimental group. After 24 h, 0 microg/ml (control), 12.5 microg/ml, 25 microg/ml, 50 microg/ml tranilast with 3.2 ng/ml TGF-beta2 were added into the incubation medium. Another 24 h later, proliferation and collagen synthesis in cultured human trabecular meshwork cells were examined respectively by using tetrazolium-based semiautomated colormetric (MTT) assay and 3H-proline incorporation with liquid scintillation technique. The results showed absorbance (A) values of the experimental groups were 0.9036 +/- 0.3017, 1.1361 +/-0.1352, 1.2457 +/- 0.1524 according to the different concentrations of tranilast, and 0.8956 +/-0.1903 of the control group. In comparison with the control group, 25 microg/ml (q'= 3.23, P< 0.05), 50 microg/ml (q'=4.70, P<0.01) tranilast significantly antagonized the decrease of the A values induced by TGF-beta2 in the cultured human trabecular meshwork cells. In comparison with the control group [817.37+/-124.21 cpm/10(4) cells], 12.5 microg/ml (620.33+/-80.46 cpm/10(4) cells, q'= 4.26, P<0.05), 25 microg/ml (594.58+/-88.13 cpm/10(4) cells, q'=4.81, P<0.01), 50 microg/ml (418.64+/-67.90 cpm/10(4) cells, q'=8.62, P<0.01) tranilast significantly inhibited the incorporation of 3H-proline into the cultured human trabecular meshwork cells promoted by TGF-beta2 in a dose-dependent manner. It was concluded that tranilast had the antagonistic effect on the proliferation inhibition and collagen synthesis promotion induced by TGF-alpha2 in the cultured human trabecular meshwork cells.     

3-溴丙酮酸联合阿霉素对乳腺癌细胞增殖及凋亡的影响

目的:研究3-溴丙酮酸(3-BRPA)联合阿霉素(ADM)对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖及凋亡的影响。方法:采用3-BRPA 80、160、320mol/L作用于MDA-MB-231乳腺癌细胞18 h后,测定其对细胞内ATP的影响;分别用3-BRPA 10、20、40、80、160mol/L和ADM 0.75、1.5、3、6、12mol/L,以及3-BRPA 80mol/L与ADM 0.75、1.5、3、6、12mol/L合用作用于MDA-MB-231乳腺癌细胞24、48和72 h后,MTT法检测乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖情况;3-BRPA 80mol/L组、ADM0.75mol/L组以及3-BRPA 80mol/L与ADM 0.75mol/L合用组作用于乳腺癌细胞MDA-Mb-231 24 h后,利用碘化丙啶染色,流式细胞仪检测其诱导乳腺癌细胞凋亡的影响;采用3-BRPA 16mol/L、ADM 0.2mol/L以及3-BRPA 16mol/L与ADM0.2mol/L合用作用于乳腺癌细胞MDA-MB-231,5 d后观察对集落克隆形成的影响。结果:3-BRPA对乳腺癌细胞MDA-MB-231 ATP的生成有抑制作用;3-BRPA联合ADM后可明显增强ADM的细胞毒性作用;3-BRPA 80mol/L与ADM 0.75mol/L合用组诱导乳腺癌细胞MDA-MB-231 24 h凋亡率为39.6%,均显著高于对照组、3-BRPA单用组和ADM单用组(P0.01);3-BRPA增强ADM对乳腺癌细胞MDA-MB-231集落克隆形成的抑制作用。结论:3-BRPA可以增强ADM对乳腺癌细胞MDAMB-231增殖的抑制作用以及增强ADM诱导乳腺癌细胞凋亡的作用。     

重组海葵溶细胞素及平颏海蛇磷脂酶A2对血管外膜成纤维细胞增殖的影响

OBJECTIVE: To observe the effects of recombinant Sagartia rosea cytolysin (rSrc) and Lapemis hardwickii phospholipase A2(rPLA2) on adventitial fibroblasts proliferation. METHODS: NIH-3T3 cells were cultured and treated with rSrc and rPLA2 at different concentrations for observation of cell proliferation using non-radioactive MTS/PES assay in comparison with the control group. RESULTS: The ratio of cell proliferation was 0.840+/-0.061 in the control group, and was 0.263+/-0.044, 0.418+/-0.054, 0.605+/-0.063, 0.772+/-0.054 and 0.906+/-0.072 in rSrc groups corresponding to rSrc concentrations of 100, 10, 1 microg/ml and 100, 10 ng/ml respectively. rSrc was found to significantly inhibit fibroblast proliferation in a dose-dependent manner when the concentration used was above 1 microg/ml (P<0.05), as compared with the control group (P<0.05). The ratio of cell proliferation was 0.498+/-0.076, 0.937+/-0.112 and 0.978+/-0.145 in rPLA2 groups corresponding to rPLA2 concentrations of 100, 10, 1 microg/ml respectively, indicating that rPLA2 also significantly inhibited fibroblast proliferation at the concentration of 100 microg/ml (P<0.05). CONCLUSION: rSrc and rPLA2 can both significantly inhibit adventitial fibroblast proliferation.     

金钱鱼凋亡相关基因SaAR对NIH-3T3细胞凋亡的影响

OBJECTIVE: To observe the effects of Scatophagus argus apoptosis-related (SaAR) gene transfer on the apoptosis of NIH-3T3 cells. METHODS: A controlled observation of SaAR gene transfer (at different concentrations) into cultured NIH-3T3 cells via lipofectin was performed, and the rate of cell apoptosis was analyzed by flow cytometry. RESULTS: The rate of cell apoptosis was (6.37+/-0.0.56)% in the control group, and was (11.89+/-1.13) %, (18.25+/-1.86) % and (22.34+/-1.08) % respectively in pcDNA3-SaAR gene groups corresponding to pcDNA3-SaAR gene concentrations of 2, 3 and 4 microg/ml respectively. It was shown that SaAR gene significantly induced fibroblast apoptosis when the concentration was above 2 microg/ml (P<0.05), in a dose-dependent manner as compared with the control group (P<0.05). CONCLUSION: Transient transfection of SaAR gene can significantly induce apoptosis in NIH-3T3 cells.     

雌马酚对大肠癌细胞增殖的影响

目的：检测大豆异黄酮代谢产物雌马酚对大肠癌细胞增殖的影响,并探讨其分子作用机制。方法：培养大肠癌细胞 DLD1、HCT15、COLO205、LOVO和SW480,用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐［3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT］法检测雌马酚对大肠癌细胞增殖的影响,用逆转录PCR和蛋白免疫印迹法分别检测雌激素受体和核因子红系2相关因子2［nuclear factor (erythroid derived 2)-like 2,Nrf2］表达状况。用MTT法检测雌激素受体抑制剂和激动剂对大肠癌细胞增殖的影响。结果：DLD1、HCT15、COLO205、LOVO和SW480均表达雌激素受体（estrogen receptor, ER）β,但只有DLD1和HCT15有ERα弱表达。MTT试验显示不同剂量雌马酚（0、0.5、1、5、10 μmol/L）不仅能够显著抑制ERα和ERβ均表达的大肠癌细胞HCT-15的增生,且呈现明显的剂量效应关系,而且能够抑制只有ERβ表达的大肠癌细胞LOVO和SW480的增生,且呈现明显的剂量效应关系。此外,逆转录PCR发现不同剂量雌马酚刺激后,HCT-15的雌激素受体ERα和ERβ表达明显增加,呈剂量效应关系。蛋白免疫印迹法进一步证实雌激素受体ERα和ERβ蛋白表达随雌马酚剂量的增加而增加,蛋白免疫印迹法发现Nrf2随干预剂量的增加而表达明显增加。采用ERβ激动剂、雌激素受体抑制剂和特异性雌激素受体ERα激动剂对SW480、LOVO、HCT-15细胞刺激后,只发现不同剂量ERβ激动剂能够显著抑制大肠癌细胞SW480、LOVO、HCT-15的增生,且呈明显的剂量效应关系,但是,雌激素受体抑制剂和特异性雌激素受体ERα激动剂对SW480、LOVO和HCT-15细胞没有呈现显著的影响。结论：雌马酚能够通过雌激素样作用和抗氧化活性抑制大肠癌细胞的增殖。