卡维地洛对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的研究卡维地洛对缺氧／复氧损伤心肌细胞的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法新生1-3 d的Sprague-Dawley鼠,原代分离,培养其心肌细胞72 h后,随机分为正常对照组、单纯缺氧／复氧组及卡维地洛 缺氧／复氧组。先将培养板中的心肌细胞缺氧(氧浓度<1％)120 min,再复氧30 min,造成缺氧／复氧损伤模型,测定细胞存活率;抽取细胞培养上清液测定乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸肌酸激酶同工酶(CK-MB);并破碎细胞,测定丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果卡维地洛 缺氧／复氧组的细胞培养液中LDH和CK-MB漏出量分别为(32．32±1．46)和(28．33±2．12)U／L,均显著低于缺氧／复氧组[(50．28±1．22)和(42．45±3．22)U／L,P值均<0．05];卡维地洛 缺氧／复氧组的细胞存活率为(70．21±2．12)％,显著高于缺氧／复氧组[(58．39±3．22)%,P<0．05]。卡维地洛 缺氧／复氧组的细胞内MDA含量为(5．32±0．32)nmol／mL,显著低于缺氧／复氧组[(8．32±0．42)nmol／mL,P<0．05];SOD活性为(10．32±0．42)U／mL,显著高于缺氧／复氧组[(7．42±0．20)U／mL,P<0．05]。结论卡维地洛对心肌细胞缺氧／复氧损伤具有保护作用,能清除氧自由基,提高心肌细胞抗氧化能力。     

冠心病患者妊娠相关血浆蛋白A含量与血管内皮功能关系探讨

【目的】探讨冠心病患者血循环妊娠相关血浆蛋白A（PAPP—A）水平与内皮功能的关系。【方法】64例冠心病患者，其中稳定型心绞痛组34例，急性冠脉综合征组30例，分别检测其相关内皮功能，包括肱动脉血流介导的血管舒张反应（FMD）和高敏C-反应蛋白（hs—CRP）、内皮素（ET）、一氧化氮（NO）水平，并用酶联免疫法检测血清PAPP—A。【结果】稳定型心绞痛组患者同急性冠脉综合征组相比PAPP—A[（6×10^-3±5×10^-1U／L与（19×10^-3±13×10^-3）U／L，P〈0．05]、hs-CRP[（0．5±0．3）mg／L与（3．6±2．2）mg／L，P〈0．01]、NO[（57±4）μmol／L与（45±5）μmol／L，P〈0．05]和FMD（6．0％±0．8％与3-3％±1．2％，P〈0．05）的差异有统计学意义。逐步选择多重回归分析，按α=0．10水准，发现PAPP—A与hs—CRP和FMD存在直线关系，Lnhs—CRP的偏相关系数为0．333（95％置信区间：0．138-0．527，P〈0．01），FMD的偏相关系数为-0．623（95％CI：-1．144—0．102，P〈0．051，其中常数项为5．570。高PAPP—A（〉11．094×10^-3U／L）患者hs—CRP明显增高[（5．3±4．2）mg／L与（1．3±0．6）mg／L，P〈0．01），FMD则降低（3.3％±2．4％与6．2％±3．6％，P〈0．05）。【结论】PAPP-A可作为间接评估冠心病患者血管内皮功能的指标之一。     

无创通气治疗对慢性阻塞性肺病合并睡眠呼吸暂停患者呼吸中枢反应性的影响

目的：了解无创通气治疗对慢性阻塞性肺病（COPD）合并睡眠呼吸暂停（重叠综合征）患者呼吸中枢反应性的变化。方法：选择10例经多导生理记录仪睡眠呼吸监测确诊的睡眠呼吸暂停低通气综合征（SAHS）患者,其中5例合并COPD,平均FEV1／FVC为59％±6％,另5例为伴CO2潴留的SAHS患者,FEV1／FVC正常。两组患者的年龄、体重指数（BMI）及睡眠呼吸暂停低通气指数（AHI）匹配。分别测定10例患者在治疗前及长期家庭应用BiPAP治疗6周后呼吸中枢低氧反应性（AVE／△SaO2）及高CO2反应性（AVE／APaCO2）。结果：重叠综合征（OS）及阻塞性睡眠呼吸暂停（OSA）患者治疗前的呼吸中枢低氧反应性分别为（-0．023．±0．049）L·min^-1·％^-1及（-0.16±0．06）L·min^-1·％^-1,均低于实验室正常值（-0．35．±0．21）L·min^-1·％^-1。OS及OSA患者的高C02反应性分别为（0.54±0．16）L·min^-1·mmHg^-1及（1．3±0．62）L·min^-1·mmHg^-0,前者显著低于实验室正常值（1.26±054）L·min^-1·mmHg^-1,后者尚在正常范围内。应用BiPAP呼吸机家庭治疗6周后,OSA患者的低氧[（-0．16±0．06）L·min^-1·％^-1vs（-0．36±0.14）L·min^-1％^-1及高C02反应性[（1.3±0.62）L·min^-1·mmHg^-1 vs（1．78±0.93）L·min^-1·mmHg^-1]均显著升高,达到正常水平。OS患者的低氧反应性升高[（-0．023±0.049）L·min^-1·％^-1 vs（-0．09±0．007）L·min^-1·％^-1],但仍显著低于正常水平;高CO2反应性[（0.54±0．16）L·min^-1·mmHg^-1 vs（0．51±0.23）L·min^-1·mmHg^-1]则无显著变化。结论：重叠综合征患者呼吸中枢对低氧及高CO2刺激的反应性降低。经正压通气治疗去除睡眠呼吸紊乱后,难以在短期内恢复至正常水平,与单纯SAHS患者的改变不同,这种异常改变可能受遗传因素的影响。     

二氮嗪后处理对缺氧复氧成年大鼠心肌细胞保护作用的体外研究

目的研究线粒体ATP-敏感性钾通道（mitoKTP）开放剂二氮嗪（diazoxide,DZ）后处理对缺氧复氧成年大鼠心肌细胞的影响。方法体外培养原代成年大鼠心肌细胞建立缺氧复氧损伤模型,随机分为5组：Normal组（在CO2培养箱中持续培养6h）;H／R组（缺氧3h复氧3h）;DZ组（缺氧3h复氧3h,在复氧5min时给予100mol／LDZ）;DZ＋5-羟葵酸盐（5-hydmxydecanoate,5-HD）组（缺氧3h复氧3h,在缺氧末给予100mol／L选择性mitoK。通道阻断剂5-HD,然后在复氧5min时给予100mol／LDZ）;5-HD组（缺氧3h复氧3h,在缺氧末给予100mol／L5-HD）。复氧3h末检测各组培养基中乳酸脱氢酶（LDH）漏出量和丙二醛（MDA）含量,TUNEL法测定心肌细胞凋亡指数、测定心肌细胞收缩幅度。结果与Normal组相比,其他4组培养基中LDH漏出量和MDA含量明显升高,心肌细胞凋亡指数也显著增高,心肌细胞收缩幅度降低（P〈0．05）;与H／R组比较,DZ后处理使培养基中LDH漏出量及MDA含量减少、心肌细胞凋亡指数降低,复氧后心肌细胞收缩幅度明显增高（P〈0．05）,但是缺氧末即刻给予5-HD可以逆转DZ的作用（P〈0．05）;5-HD组与H／R组相比各指标差异无统计学意义（P〉0．05）。结论Dz后处理可以通过开放mitoK。通道对缺氧复氧成年大鼠心肌细胞发挥保护作用。     

心肌酶检测在宫内窘迫新生儿心肌损伤诊断中的应用

目的：对有宫内窘迫的新生儿心肌损害作出早期诊断。方法：对117例有胎儿窘迫史的新生儿的AST、LDH、CK、CK—MB血清酶活性进行检测。结果：有胎儿窘迫史组的新生儿血清天门冬氨酸氨基转移酶（AST）66．22&#177;8．28U／L,乳酸脱氢酶（LDH）680．48&#177;72．43U／L,肌酸磷酸激酶（CK）518．69&#177;32．63U／L,肌酸磷酸激酶同工酶（CK—MB）55．76&#177;4．38U／L．心肌酶活性显著高于无胎儿窘迫的对照组（P〈0．01）,有显著性差异。结论：需加强对有宫内窘迫史的新生儿的监护,可将心肌酶检测作为常规生化检查项目,以便对新生儿心肌损害早期及时诊断。     

吡格列酮保护乳鼠心肌细胞与ATP敏感性钾通道表达的关系

目的探讨吡格列酮对缺氧复氧诱导的乳鼠心肌细胞凋亡和心肌细胞ATP敏感性钾通道亚单位表达的影响。方法原代培养的sD乳鼠心肌细胞随机分为6组：溶媒组、缺氧复氧组、0．1μmol／L吡格列酮组、1．0μmol／L吡格列酮组、2．0μmol／L吡格列酮组、2．0μmol／L吡格列酮＋GW9662组（GW9662组）,药物预处理24h后建立缺氧复氧模型,利用膜联蛋白-v与溴化丙啶双染法检测心肌细胞凋亡,利用RT—PCR及Western—blot技术检测心肌细胞ATP敏感性钾通道亚单位的表达。结果0．1、1．0、2．0μmol／L吡格列酮组心肌细胞凋亡率与缺氧复氧组及GW9662组比较差异有统计学意义（P〈0．05）;0．1、1．0、2．0μmol／L吡格列酮组心肌细胞线粒体ATP敏感性钾通道（mitoKATP）亚单位Kir6．1mRNA及蛋白的表达与缺氧复氧组及GW9662组比较差异有统计学意义（P〈0．05）,各组细胞膜ATP敏感性钾通道（sarcKATP）亚单位Kir6．2mRNA表达间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论吡格列酮抑制缺氧复氧诱导的乳鼠心肌细胞凋亡,此保护作用可能与激活PPARγ及上调mitoKATP通道亚单位表达有关,sarcKATP未参与这种保护过程。     

结核性和细菌性胸膜炎患者胸腔积液ALT、AST、LDH检测分析

目的观察结核性和细菌性两种胸膜炎患者胸腔积液酶水平的改变。方法在治疗前采集结核性胸膜炎患者标本胸腔积液20例，细菌性胸膜炎患者组的胸腔积液35例，用酶速率法测定ALT、AST、LDH酶水平。结果结核性胸膜炎组ALT、AST、LDH酶水平分别为（50．16±29．05）U／L、（52．2±15．8）U／L、（212．9±112．2）U／L，显著高于细菌性组（P〈0．01）。结论对胸腔积液进行ALT、AST、LDH检测，有助于诊断和鉴别诊断结核性胸膜炎和细菌性胸膜炎。     

血清蛋白B亚型和神经元特异性烯醇化酶对早期判断体外循环术后脑损伤的意义

目的探讨血清S100蛋白B亚型（S100B）和神经元特异性烯醇化酶（NSE）水平对早期判断体外循环手术后脑损伤的应用价值。方法心脏病手术患者48例,体外循环组（n=40）和非体外循环组（n=8）,于手术前、后24h和48h检测血清S100B和NSE的浓度,术后48h根据“心脏术后神经功能状况评估法”计算脑损伤指数（DQ）。结果在体外循环术后24h和48h血清S100B（0．61μg／L±0．18μg／L,0．37μg／L±0．12μg／L）和NSE（10．14μg／L±3．87μg／L,5．77μg／L±2．31μg／L）的浓度均高于术前水平（0．05±0．03μg／L,2．98±1．49μg／L）（均P〈0．01）,而非体外循环组术后S100B（0．05μg／L±0．03μg／L,0．04μg/L±0．03μg／L）和NSE（2．91μg／L±1．56μg/L,2．87μg/L±1．41μg／L）与术前浓度（0．04μg／L±0．03μg／L,2．76μg/L±1．23μg／L）无差异（均P〉0．05）。体外循环术后24h和血清S100B和NSE的水平与年龄、体外循环时间及主动脉阻断时间相关（均P〈0．05）。血清S100B和NSE的水平与DQ均呈正相关（r=0．739P〈0．01,r=0．371P〈0．05）。结论血清S100B和NSE均为判断体外循环术后脑损伤的特异性指标,但联合检测血清S100B和NSE的特异性最高。     

PTP-1B小干扰RNA对缺氧/复氧诱发的大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的探讨蛋白质酪氨酸磷酸酶-1B（PTP1B）小干扰RNA对缺氧/复氧诱发的大鼠心肌细胞凋亡的影响及其分子机制。方法分离的大鼠心肌细胞在PTP-1B小干扰RNA转染后培养24h，然后缺氧处理4h，再复氧6h（4H／6R）。心肌细胞的凋亡用TUNEL染色法测定；Westernblot检测心肌细胞PTP-1B和磷酸化Akt的表达水平；比色法衡量凋亡酶Caspase3和Caspase8的活性；共免疫沉降法检测与Fas受体结合的PTP-1B的数量。结果缺氧／复氧的处理不仅严重损伤了培养的大鼠心肌细胞，同时也上调了心肌细胞PTP1B蛋白的表达水平；PTP-1B小干扰RNA显著地减少了缺氧／复氧诱发的心肌细胞凋亡，PTP-1B小干扰RNA组与阴性对照组的凋亡指数分别为：（12．1&#177;1．4）％和（23．2&#177;1．6）％，P％0．05；与阴性对照组比较，PTP-1B小干扰RNA显著增加了Akt的磷酸化水平，抑制了Caspase3和Caspase8的酶活性，同时降低了PTP-1B与Fas受体的结合。结论PTP-1B是一个缺氧／复氧（4H／6R）诱发的心肌细胞凋亡的关键调节因子，针对PTP-1B的小于扰RNA可有效地抑制心肌细胞的损伤。其机制可能与增加的Akt磷酸化水平，凋亡酶Caspase3和Caspase8的酶活性被抑制，以及PTP1B与Fas受体结合的减少相关联。     

热卡限制对非酒精性脂肪肝病大鼠肝脏SIRT1表达的影响

目的研究热卡限制（CR）在非酒精性脂肪肝病（NAFLD）治疗中的分子作用机制。方法25只雄性Wistar大鼠分为2组,一组给予正常普通饲料喂养（NC组,7只）,一组给予高脂饲料喂养（HFM组,18只）。喂养2个月后,再将HFM组大鼠随机分为继续高脂饲料喂养组（HF组,9只）和60％热卡限制喂养组（CR组,9只）。1个月后将大鼠处死,观察大鼠体重、内脏脂肪含量、空腹血糖、空腹胰岛素及血脂的改变,电镜下观察各组大鼠肝脏超微结构变化,应用RT-PCR方法检测长寿基因SIRT1mRNA的表达,Westerm印迹法检测SIRT1的蛋白表达。结果HF组大鼠发生明显NAFLD,与正常对照组比较,大鼠内脏脂肪含量（15．1g±4．1g vs 9．0g±0．4g）、血脂（总胆固醇2．61mmol／L±0．29mmol／L vs 1．41mmol／L±0．28mmol／L;甘油三酯1．35mmol／L±0．21mmol／L vs 0．67mmol／L±0．10mmol／L）、血糖（6．2mmol／L±1．46mmol／L vs 4．4mmol／L±0．57mmol／L）,血胰岛素水平（29．22mU／L ± 7．28mU／L vs 13．09mU／L±1．18mU／L）明显增高,其肝脏超微结构亦发生明显异常,SIRTl表达在转录和翻译水平均低于正常组显著（P〈0．01）。相比较HF组,限制热卡后的CR组大鼠体重明显下降,内脏脂肪含量、血脂、血糖、血胰岛素水平显著降低,SIRT1的表达明显增加（P〈0．01）,同时肝细胞的超微病理改变亦显著改善。结论CR对大鼠NAFLD具有显著的逆转效应,其导致的肝脏SIRT1表达增加可能是改善NAFLD的重要分子作用机制。     

热休克蛋白70基因转染抗心肌细胞凋亡对缺氧/复氧损伤的保护作用

目的 观察比较热休克蛋白70对心肌细胞急性实验性缺氧/复氧损伤的保护作用及其与热休克心肌细胞保护模型之间作用的异同.方法 进行大鼠乳鼠原代心肌细胞培养,分为4组:空白组(对照),缺氧/再灌组(A/R),热休克蛋白组(A/R+HS)和pCDNA热休克蛋白质粒组(pCDNA HSP70).用脂质体对pCDNA HSP70质粒包裹,并转导入相关心肌细胞内.RT-PCR检测HSP70 mRNA表达、Western印迹检测HSP70蛋白质表达.检测心肌细胞存活率(四甲基偶氮唑蓝比色法)、培养液中乳酸脱氢酶活性、心肌细胞超微结构改变(透射电镜)及凋亡指数观察心肌细胞损伤程度.结果 A/R+HS组和A/R+pCDNA HSP70组细胞存活率显著提高(71.8±10.3)%、(73.4±12.2)%;(LDH)活性明显降低(14.3±2.6)IU/L、(14.6±2.9)IU/L;细胞超微结构明显改善;A/R组的HSP7o mRNA和蛋白质含量比A/R+HS组和A/R+pCDNA HSP70组,明显偏低(1.87±0.23、2.05±0.34倍P＜0.01).二者的细胞凋亡指数也较A/R组明显降低.结论 HSP70基因高表达能对抗缺氧/复氧对心肌细胞的损伤,其作用与抗细胞凋亡有关.     

ROS-mediated ERK activation in delayed protection from anoxic preconditioning in neonatal rat cardiomyocytes

Background The activation of extracellular signal-regulated kinase1/2 (ERK1/2) has been shown to be important signaling pathway in the ischemic preconditioning (IPC) response. Recently, some studies suggest a key role for the mitochondrial ATP-sensitive potassium channel (mKATP) as both a trigger and an end effector of acute and delayed protection of IPC. Hence, this study was undertaken to elucidate the relationship between mKATP and ERK1/2 in the delayed protection mechanism of anoxic preconditioning (APC). Methods An APC model was established using cultured neonatal rat cardiomyocytes. Pharmacological agents ［diazoxide, 5-hydroxydecanoate (5-HD), 2-mercaptopropionylglycine (MPG), and PD98059］ were used to modulate mKATP and ERK1/2 activation. Cellular injury was evaluated by measuring cellular superoxide dismutase (SOD) activity, cell viability, and lactate dehydrogenase (LDH) release. The generation of cellular reactive oxygen species (ROS) and the activation of ERK1/2 were determined at different time points starting from the beginning of preconditioning with anoxia or diazoxide (an mKATP opener). Results Cell viability and SOD activity in the APC ［(81.9±11.4)%, （13.6 ± 3.7） U/L］ and diazoxide ［(79.2±12.4)%, （16.5±4.6） U/L］ groups were significantly higher than in the anoxia/reoxygenation (A/R) ［(42.2±7.3)%, （8.8±2.8） U/L］ group (all P&lt;0.01). LDH activity in the APC group ［(101.9±18.9) U/L］ and diazoxide group ［(97.5±17.7) U/L］ was significantly lower than in the A/R group ［(250.5±43.6) U/L］ (all P&lt;0.01). Both APC and diazoxide simultaneously facilitated intracellular ROS generation and rapid ERK1/2 activation. But the effects of APC and diazoxide were remarkedly attenuated by 5-HP (an mKATP blocker) and by MPG (a free radical scavenger). In addition, the ERK1/2 inhibitor PD98059 also abolished the cellular protective effects induced by diazoxide. Conclusion mKATP may mediate ERK1/2 activation during anoxia preconditioning by generating ROS, which then triggers the delayed protection of APC in rat cardiomyocytes.     

Anti-apoptotic effect of morphine-induced delayed preconditioning on pulmonary artery endothelial cells with anoxia/reoxygenation injury

Background Opioid preconditioning （PC） reduces anoxia/reoxygenation （A/R） injury to various cells. However, it remains unclear whether opioid-induced delayed PC would show anti-apoptotic effects on pulmonary artery endothelial cells （PAECs） suffering from A/R injury. The present study was conducted to elucidate this issue and to investigate the potential mechanism of opioid-induced delayed PC.
Methods Cultured porcine PAECs underwent 16-hour anoxia followed by 1-hour reoxygenation 24 hours after pretreatment with saline （NaCI; 0.9%） or morphine （1 μmol/L）. To determine the underlying mechanism, a non-selective KATe channel inhibitor glibenclamide （Glib; 10 μmol/L）, a nitric oxide （NO） synthase blocker NG-nitro-L-arginine methyl ester （L-NAME; 100 μmol/L）, and an opioid receptor antagonist naloxone （Nal; 10μmol/L） were given 30 minutes before the A/R load. The percentage of apoptotic cells was assessed by terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end labeling （TUNEL） staining, eNOS mRNA level was measured by real-time polymerase chain reaction （PCR）. NO content of PAECs supernatants was measured with the Griess reagent.
Results Compared to the A/R PAECs, morphine-induced delayed PC significantly reduced PAECs apoptosis （（18.1±1.9）% vs （5.5±0.3）%; P 〈0.05）, increased NO release （（11.4±1.3） μmol/L vs （20.5±2.1） μmol/L, P 〈0.05）, and up-regulated eNOS gene expression nearly 9 times （P 〈0.05）. The anti-apoptosis effect of morphine was abolished by pretreatment with Glib, L-NAME and Nal, but the three agent-selves did not aggravate the A/R injury. Furthermore, L-NAME and Nal offset the enhanced release of NO caused by pretreatment with morphine.
Conclusions Morphine-induced delayed PC prevents A/R injury of PAECs. This effect may be mediated by activation of KATe channel via opioid receptor and NO signaling pathways.     

瑞芬太尼对缺氧复氧损伤人肝L02细胞的保护作用

目的探讨瑞芬太尼（remifentanil,REM）对缺氧复氧损伤人肝L02细胞的作用及机制。方法将培养的人肝L02细胞分为正常对照组（c组）、单纯缺氧复氧组（0组）及瑞芬太尼处理组（R组）;其中R组又根据药物浓度不同分为7个亚组。C组正常培养,0、R两组缺糖缺氧处理5h后恢复正常条件培养12h,分别使用MTT比色法测定细胞活力、流式细胞仪检测细胞凋亡情况、比色法测定细胞培养液LDH活力,激光共聚焦显微镜观察细胞内钙浓度动态变化。结果5～40ng／ml的瑞芬太尼处理使缺氧复氧损伤L02细胞活力上升、细胞凋亡比例下降,5～30ng/ml的瑞芬太尼处理使培养液中LDH活力降低（P〈0．05）;40ng／ml瑞芬太尼处理后L02细胞内钙浓度上升时间延迟（P〈0．05）。结论5—40ng／ml的瑞芬太尼处理对缺氧复氧损伤肝细胞具有保护作用,可能与瑞芬太尼抑制细胞凋亡和减轻钙超载有关。     

The antiapoptotic effect of insulin against anoxia/reoxygenation injury in cultured cardiomyocyte of neonatal rat

Objective： To study protective effect of insulin against cardiomyocyte apoptosis in anoxia/reoxygenation （A/R） injury of neonatal rat. Methods： The model of A/R injury was finished through receiving anoxia for 2h and reoxygenation for 4h in cultured cardiomyocytes of neonatal rat. The cardiomyocytes were divided randomly into 3 groups： control group （CON）, anoxia/reoxygenation group （A/R） and insulin-treated group （INS）. At the end of reoxygenation of 4 hours, activities of lactate dehydrogenase （LDH）, contents of malondiaidehyde （MDA）, were assessed through spectrophotometric procedures, myocyte apoptosis were detected through TUNEL and DNA Ladder. Results： MDA, LDH, and Apoptosis Index were significantly decreased in INS group compared with A/R group （P〈0.01）. Conclusion： Insulin has a protective effect against A/R injury in cultured cardiomyocyte of neonatal rat; the protective mechanism may contribute to antiapoptosis of insulin.     

LPS预处理对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的探讨14-3-3γ基因在LPS预处理对抗心肌细胞缺氧/复氧(A/R)损伤中的作用。方法构建pSU-PER/14-3-3γRNA干扰重组质粒,转染入心肌细胞,分为5组:对照组、A/R组、LPS+A/R组、pSUPER+LPS+A/R组、pSUPER/14-3-3γ+LPS+A/R组。Western blot检测14-3-3γ蛋白表达,生化自动分析仪测定乳酸脱氢酶(LDH)活性,MTT法测定细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡,线粒体肿胀实验检测线粒体通透性转换孔(mPTP)开放。结果 A/R损伤使细胞存活率下降,LDH升高,细胞凋亡增加,mPTP开放;LPS预处理可使14-3-3γ表达明显增加,通过抑制mPTP开放,对A/R损伤的细胞有保护作用;pSUPER/14-3-3γRNA干扰重组质粒通过抑制14-3-3γ蛋白表达,取消LPS预处理的保护作用。结论 LPS预处理可对抗心肌细胞缺氧/复氧损伤,其机制与上调14-3-3γ,从而抑制mPTP开放有关。     

新型人工肝材料--接枝改性聚丙烯膜体外免疫相容性的实验研究

目的通过体外检测改性前、后聚丙烯(PP)膜对健康青年人外周血单个核细胞(PBMC)的激活程度,来评价聚丙烯酰胺接枝改性聚丙烯(PP-g-AAm)膜的免疫相容性。方法用生化法检测2h．6h两种膜材料表面PBMc的乳酸脱氢酶(LDH)值;用流式细胞术检测24h两材料上培养的PBMCCD69的表达;ELISA法检测培养上清中细胞因子TNFα、IL-1β和IL-6的浓度;用扫描电镜(SEM)观察材料上黏附的PBMC。结果2h及6h,两材料组间LDH差异有显著意义(P=0．008,P=0．000);PP-g-AAm膜组CD69活化率显著少于PP膜组(P=0．013);24h两材料组细胞因子的浓度均达到最高峰,且PP-g-AAm膜组TNFα,IL-1β和IL-6的浓度都小于PP膜组(P=0．004,P=0．003,P=0．022);SEM观察到PP-g-AAm膜表面黏附的PBMC较少。结论PP-g-AAm膜对PBMC的激活程度较轻,具有较好的免疫相容性。     

左旋卡尼汀对培养乳鼠心肌细胞模拟缺血再灌注损伤的保护作用

目的: 探讨左旋卡尼汀(L-carnitine)对乳鼠心肌细胞在模拟缺血(缺氧)再灌注(缺氧-复氧)状态下发生损伤的保护作用及其可能的机制. 方法: 培养出生1～3 d的SD乳鼠心肌细胞,建立缺血再灌注损伤(I/R)模型,实验分3组:①正常对照组(Control);② I/R组:缺氧120 min,复氧240 min;③左旋卡尼汀组:I/R之前2 h加入不同浓度左旋卡尼汀,使其终浓度分别为1组20 mg/L, 2组50 mg/L, 3组100 mg/L, 4组200 mg/L. 观察指标包括: ①超氧化物酶(SOD)活性;②丙二醛(MDA)含量;③琥珀酸脱氢酶(SDH)活性;④流式细胞仪(FCM)分析细胞凋亡率. 结果: I/R组心肌细胞内MDA含量明显升高,SOD活性显著下降,琥珀酸脱氢酶(SDH)活性明显变低,而且细胞凋亡率也显著增加,与Control组比较具有显著性差异(P＜0.05);但是在药物治疗组,随给药浓度的增加,MDA含量逐渐恢复正常,SOD活性逐渐回升,SDH活性明显升高,而且细胞凋亡率呈下降趋势,各药物治疗组与I/R组比较各实验指标均具有显著性差异(P＜0.05),表明心肌细胞在经左旋卡尼汀预处理之后,抗损伤能力加强,发生损伤的程度减少. 结论: 左旋卡尼汀对心肌细胞具有保护作用,其作用在一定范围内呈剂量依赖关系.