DLGAP5基因突变与甲基化在肾透明细胞癌中的预后及意义

目的 探讨DLGAP5 (discs large homolog associated protein 5)基因在肾透明细胞癌(kidney renal clear cell carcinoma,KIRC)患者中的表达水平、与T细胞免疫的关系、相关临床预后意义、基因突变水平以及甲基化程度(表观遗传学方面),以提供一种更新的肾透明细胞癌的早期诊断方法及相应治疗方案。方法 通过在UCSC Xena数据库下载并分析KIRC相关基因表达样本数据共607例,其中,正常样本72例,肿瘤样本535例,且所有样本表达DLGAP5基因。明确DLGAP5基因在肾透明细胞癌组织与正常肾组织之间的表达差异,探究肾透明细胞癌患者DLGAP5基因表达与T淋巴细胞和T细胞表达基因之间的相关性,研讨DLGAP5基因突变水平以及甲基化水平,探讨DLGAP5基因对于肾透明细胞癌预后的预测能力。结果 DLGAP5基因在肾透明细胞癌细胞中的表达水平明显高于其在正常肾脏组织中的表达水平;DLGAP5低表达组(n=266)总生存数明显优于DLGAP5基因高表达组(n=265)的患者(P=0.001),尤以明确KIRC诊断后的第1...     

肾透明细胞癌中VHL基因突变与缺氧诱导因子-1α表达的研究

目的　探讨肾透明细胞癌VHL基因突变与缺氧诱导因子 1α(HIF 1α)表达的关系及意义。方法　应用聚合酶链反应 (PCR)、变性高效液相色谱 (DHPLC)、基因测序及免疫组织化学方法检测 32例肾透明细胞癌患者手术切除癌组织及远离肿瘤的正常肾脏组织中VHL基因突变及HIF 1α的表达。结果　 32例患者中 17例 (5 3 1% )癌组织术前有VHL基因突变 ,32例远离肿瘤的正常肾脏组织均无HIF 1α表达 ;17例VHL突变的癌组织中 12例 (70 6 % )有HIF 1α表达 ,15例无VHL突变的癌组织中 4例 (2 6 7% )有HIF 1α表达 ,二者相比差异有显著意义 (P <0 0 5 )。结论　VHL基因在肾透明细胞癌中具有高频突变率 ,HIF 1α在癌组织中的表达与VHL基因突变相关     

ASPM基因在肾透明细胞癌中的表达及其诊断预后的价值

目的:探讨人类异常纺锤体样小头畸形相关蛋白(abnormal spindle-like microcephaly-associated protein,ASPM)在肾透明细胞癌中的表达情况以及其诊断预后的价值。方法:利用癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库的RNA-Seq数据和临床数据,分析ASPM基因与肾透明细胞癌患者临床病理特征以及生存预后的关系。结果:总体534例肾透明细胞癌样本的癌和癌旁组织中的ASPM的表达水平分别为6.62±1.34和3.59±1.41,差异有统计学意义(P0.001)。72例配对的肾透明细胞癌和癌旁组织中的ASPM表达水平分别为6.89±1.14和3.59±1.41,差异有统计学意义(P0.001)。ROC曲线分析结果表明,ASPM基因可作为一个灵敏度和特异度较高的肾透明细胞癌诊断指标(敏感性为94.2%,特异性为90.3%,AUC=0.935)。ASPM基因表达与肾透明细胞癌患者临床病理特征的关系显示,ASPM表达与性别、肿瘤分级、T分期、M分期、临床分期均有显著性差异(P0.001)。生存分析发现总体534例样本中ASPM低表达者和高表达者的总体生存时间分别为(1 421.85±984.72) d和(1 279.89±976.68) d,比较差异有统计学意义(Log-rank=14.69,P0.001)。结论:ASPM在肾透明细胞癌中高表达,且临床特征密切相关,其高表达对判断肾透明细胞癌的生存预后及其诊断具有参考价值。     

DNA甲基化转移酶谱表达与肾透明细胞癌病理特征及预后的相关性

目的明确DNA甲基化转移酶家族(DNMTs)表达(DNMT1,DNMT3A及DNMT3B)与肾透明细胞癌患者病理特征及患者预后的相关性。方法收集本院2006-2014年行手术治疗并术后病理证实为透明细胞癌患者肿瘤及对应癌旁标本(90例),术后随访时间为18~90个月,应用免疫组织化学方法检测DNMTs表达状况,分析DNMTs表达与肾透明细胞癌临床病理特征及患者预后的关系。结果 DNMTs在肾透明细胞癌组织中表达强度显著高于正常肾脏组织(P0.001);DNMTs表达强度与肿瘤大小(P0.01)、病理分级(P0.01)、临床分期(P0.05)关系密切,而与患者性别、年龄未见显著性差异(P0.01);DNMTs表达强度与患者总生存时间(OS)呈负相关性(P0.001)。结论 DNMTs表达与透明细胞癌患者病理特征及预后关系密切,其表达异常升高可能是透明细胞癌发生发展的重要原因,并有可能作为透明细胞癌早期监测指标及治疗靶点。     

RASA1在肾透明细胞癌中的表达及临床意义

目的 基于肾透明细胞癌展开研究,明确肾癌组织中RAS p21蛋白激活因子1(RASA1)的表达水平,并探究其与临床病理特征及预后之间的相关性。方法 选取2010年1月1日至2018年12月31日在新疆医科大学第一附属医院进行手术切除的肾透明细胞癌患者,共91例。对其肾癌组织样本中RASA1的表达进行免疫组化检测,并分析其表达量与肾透明细胞癌患者临床病理特征及预后的关联性。结果 91例肾透明细胞癌患者中,T_1～2期患者共51例,T_3～4期患者共40例,临床病理资料统计分析表明,RASA1的表达水平与患者的T分期、M分期相关(P <0.05),T、M分期越高,则RASA1表达水平越低。RASA1表达与患者性别、年龄、民族、肿瘤大小、N分期、淋巴脉管是否受侵及病理分级无相关性(P>0.05)。此外,肾透明细胞癌患者的生存情况也与RASA1的表达水平密切相关,呈正相关。结论 RASA1的表达水平既与肾透明细胞癌的T、M分期相关,也与患者的预后相关。     

肾脏特异性高表达基因SLC12A1在肾透明细胞癌中低表达的研究

目的验证肾脏特异性高表达基因SLC12A1在肾透明细胞癌中的低表达,初步研究该基因的表达与肾透明细胞癌发生发展的相关性并探讨其临床意义。方法临床收集23例肾透明细胞癌患者癌组织和癌旁正常组织样本,采用荧光定量PCR、免疫组织化学和Western blot的方法分别检测肾透明细胞癌组织和癌旁正常组织中的SLC12A1基因mRNA和蛋白质的表达水平差异。结果肾透明细胞癌组织中SLC12A1的mRNA和蛋白质表达水平明显低于癌旁正常组织(P0.01)。结论肾透明细胞癌组织中SLC12A1表达量明显降低。该结果对进一步阐明肾透明细胞癌发生、发展的分子机理具有一定的学术意义,可能为肾透明细胞癌的诊断和治疗提供一种新的思路。     

Notch1和Jagged1表达与肾透明细胞癌发病及预后

目的:探讨肾透明细胞癌Notch1与Jagged1的表达及意义。方法:应用Western blot和免疫组化染色法,检测肾透明细胞癌及正常肾组织中Notch1、Jagged1的蛋白表达,分析两者与临床病理参数的相关性。随访肾透明细胞患者术后情况,分析Notch1、Jagged1蛋白的表达水平与预后的关系。结果:肾透明细胞癌组织中Notch1、Jagged1的阳性表达率高于正常肾组织(分别为95.3%比36.4%,P<0.05;93.0%比42.4%,P<0.05),Notch1和Jagged1的表达水平与肾癌的病理分级、临床分期和肿瘤的大小均有关。结论:Notch1和Jagged1高表达可能在肾透明细胞癌发生发展中发挥作用,Notch1和Jagged1表达水平对肾透明细胞癌预后判断具有一定价值。     

肾透明细胞癌中血管抑制蛋白-1与微血管密度的检测及临床意义

目的:探讨肾透明细胞癌内血管抑制蛋白-1(Vasohibin-1,VASH1)以及微血管密度(microvessel density,MVD)检测与肾透明细胞癌患者预后之间的关系。方法:采用免疫组织化学方法半定量测定肾透明细胞癌标本VASH1染色的平均细胞累积光密度(average optical density,AOD),并测定CD34标记的MVD。用Cox回归模型分析患者的临床和病理因素与生存预后之间的关系。结果:肾癌组织中VASH1的AOD为0.0435±0.0178,MVD均值为55±34,两者的表达均与病理分期和肿瘤内的凝固性坏死有显著相关性(P0.05)。相关性分析显示VASH1与MVD的表达呈负相关(r=-0.641,P0.01)。单因素回归分析证明高VASH1组肾透明细胞癌预后显著差于低VASH1组,差异均有统计学意义(HR=2.96,P0.05)。多因素回归分析显示患者年龄、病理分期以及肿瘤内凝固性坏死与患者的总体生存(HR=4.90,P0.05;HR=3.08,P0.05;HR=3.05,P0.05)和无复发生存(HR=3.91,P0.05;HR=2.85,P0.05;HR=3.24,P0.05)呈显著相关性。结论:在肾透明细胞癌中,低VASH1表达提示较好的预后,而患者年龄、病理分期以及肿瘤内凝固坏死是肾透明细胞癌的独立预后因素。此研究仍待前瞻性大规模临床试验的验证。     

von Hipple-Lindau基因突变与散发性肾透明细胞癌患者预后的关系

目的 探讨von Hippel-Lindau(VHL)抑癌基因突变与散发性肾透明细胞癌患者预后的关系. 方法应用聚合酶链反应(PCR)、PCR产物直接测序分析74例散发性肾透明细胞癌组织标本和相应远离肿瘤的正常组织标本中VHL基因突变情况.74例患者,病理分期为T1 51例(68.9%),T2 9例(12.2%),T3 14例(18.9%);病理分级为G1 15例(20.3%),G2 50例(67.6%),G39例(12.2%).随访其预后并进行统计学分析. 结果 VHL基因突变者40例(54.1%),不同病理分期和分级的肿瘤中VHL基因突变率差异无统计学意义(P值分别为0.915和0.237).随访34~107个月.平均71个月,因肿瘤死亡7例,出现远处肿瘤转移11例,5年无瘤生存率为78%.VHL基因突变组肿瘤死亡或转移等阳性事件发生率(15.0%,6/40)明显低于非突变组(35.3%,12/34,P=0.043).Logistic回归分析表明.患者预后与肿瘤病理分期、分级呈正相关,而与VHL基因是否突变呈负相关,三者的P值分别为0.016、0.024和0.033.对于T3和G3肿瘤患者,VHL基因突变者预后更好.P值分别为0.010和0.048. 结论 散发性肾透明细胞癌患者中VHL基因突变广泛,肾癌的病理分期和分级仍然是评估患者预后的有效指标.VHL基因突变失活可能提示肾透明细胞癌患者预后更好,尤其对于高分期和高分级肿瘤患者.     

肾透明细胞癌基因表达谱分析及预后相关影响因素研究

目的:挖掘肾透明细胞癌(kidney renal clear cell carcinoma,KIRC)的基因表达变化,分析年龄、性别、肿瘤TNM分期及显著性差异表达基因与患者生存时间的相关性。方法:经在线数据平台GEPIA分析KIRC组织的基因表达谱,以|log2FC| 1,P 0. 01筛选组间差异基因;下载肿瘤基因图谱TCGA中KIRC基因表达数据和相应的临床信息,运用R 3. 5. 1中的survival包进行Kaplan-Meier生存曲线的绘制和分析。结果:肾透明细胞癌组织中存在着2 959个差异表达基因,其中上调基因1 635个,下调基因1 324个。不同性别对患者生存率影响不大(P 0. 05),随着年龄增大及TNM分期的进展,患者生存率下降(P 0. 001),ANGPTL4基因表达水平对患者生存率有较大影响(P 0. 05)。结论:分析肾透明细胞癌基因表达能够系统的探索疾病在基因水平的改变,寻找合适的分子标志物,有望成为疾病诊断、治疗及预后判断的新靶点。     

Survivin和PDCD5表达与肾透明细胞癌分期、分级及预后相关性研究

目的 考察survivin和PDCD5表达与肾透明细胞癌分期、分级和预后的相关性.方法 采用免疫组化法检测56例肾透明细胞癌患者癌组织和10例健康肾对照组织中survivin 和PDCD5蛋白的表达.比较不同分期、分级组织中两蛋白表达水平,并比较阴性和阳性患者生存期差异.结果 分期越高癌组织的survivin表达量越高,PDCD5表达量越低(P＜0.01).Survivin阴性患者生存时间显著高于阳性患者(P＜0.05),PDCD5阳性患者生存时间显著高于阴性患者(P＜0.05).不同分级细胞中survivin表达水平存在统计学差异(P＜0.01),分化程度越低的细胞阳性率越高.但不同分级细胞中PDCD5表达无统计学差异(P＞0.05).Survivin蛋白和PDCD5蛋白表达不具有相关性(r=-0.57,P＞0.05).结论 Survivin表达水平与肾透明细胞癌分期、分级和预后均相关,PDCD5表达水平与肾透明细胞癌分期和预后均相关.Survivin的高表达和PDCD5的低表达可能参与了肾透明细胞癌的发生和发展.     

HIF-1α和P53蛋白的表达对肾透明细胞癌预后的影响

目的本研究旨在探讨缺氧诱导因子1α（HIF-1α）和P53蛋白在人肾透明细胞癌组织中的表达及其对患者预后的影响。方法应用免疫组化方法检测65例肾透明细胞癌组织中HIF-1α和P53蛋白的表达情况,通过生存曲线法比较阳性组和阴性组患者的预后情况。结果 HIF-1α和P53蛋白表达的阳性率分别为40.0%（26/65）和52.3%（34/65）;HIF-1α表达与肾透明细胞癌的组织学分级、临床分期和淋巴结转移有关（P〈0.05）;HIF-1α蛋白阳性组患者的生存期明显较阴性组短（P=0.004）;P53蛋白表达与肾透明细胞癌患者性别、年龄、肿瘤大小、组织学分级、临床分期、淋巴结转移及生存期均无关（P〉0.05）;HIF-1α蛋白P53蛋白的表达之间存在相关性（r=0.402,P=0.001）。结论 HIF-1α的表达与肾透明细胞癌患者的预后相关,其阳性表达提示患者预后不良;检测HIF-1α表达水平有助于肾细胞癌预后评估。     

Notch1、Notch2及c-Myc在肾透明细胞癌中的表达及意义

目的:探讨Notch信号受体Notch1、Notch2及c-Myc在肾透明细胞癌中的表达与意义。方法:通过实时定量PCR及western-blot方法检测27例肾透明细胞癌及瘤旁组织中Notch1、Notch2及c-Myc的表达水平,并采用相关性分析检验Notch1、Notch2的表达与c-Myc的表达相关性。结果:Notch1、Notch2及c-Myc在肾癌组织中表达水平明显高于相应的癌旁组织(P<0.001),相关性分析表明在肿瘤组织中c-Myc与Notch2的mR-NA水平呈正相关(r=0.629,P<0.001),而与Notch1的mRNA水平无相关(P=0.389)。结论:Notch信号通路及c-Myc的异常高表达可能与肾透明细胞癌的发生发展有关,而且c-Myc可能作为Notch信号通路的下游靶基因,发挥促癌的作用。     

长链非编码 RNA MIAT 在肾透明细胞癌中的表达情况和预后意义

目的 探讨长链非编码RNAMIAT在肾透明细胞癌中的表达情况及与患者临床指标的相关性,分析其作为肾透明细胞癌分子标记物的可能性。方法 通过荧光定量PCR方法 检测MIAT在40例肾透明细胞癌组织和40例癌旁正常组织中的表达情况,同时结合TCGA数据库分析MIAT表达水平与肾透明细胞癌患者临床指标和预后的关系。结果 MIAT在肾透明细胞癌组织中的表达明显高于癌旁正常组织,在肾癌细胞系中的表达明显高于正常肾小管上皮细胞,差异均具有统计学意义（P<0.05）。TCGA数据库资料分析表明,MIAT表达水平与肾癌患者T分期（P<0.001）、M分期呈正相关（P<0.05）。Kaplan-Meier生存分析表明,高表达MIAT的肾癌患者总体生存时间明显低于低表达MIAT的肾癌患者（Log-rankP<0.05）。结论 MIAT在肾透明细胞癌组织和肾癌细胞系中高表达,有可能成为肾透明细胞癌的分子标记物。     

垂体瘤转化基因在肾透明细胞癌中的表达及意义

目的探讨垂体瘤转化基因(PTTG)在肾透明细胞癌中的表达及其临床意义。方法选取2019年1月至2020年12月在本院诊断为肾透明细胞癌的69例患者为研究对象。对患者手术标本的组织切片进行PTTG染色, 并收集患者的临床资料。根据PTTG在肿瘤组织中是否表达, 将患者分为PTTG阳性组(43例)和PTTG阴性组(26例)。通过GEPIA对癌症基因图谱(TCGA)数据库中肾透明细胞癌的基因表达数据进行分析, 包括PTTG在癌和癌旁组织、不同分期肿瘤中的表达水平, 并进行生存分析。结果 69例肿瘤组织中, 有43例组织的PTTG表达为阳性, 阳性率为62.32%, 26例PTTG表达阴性, 阴性率为37.68%。而69例癌旁组织中, 仅11例组织可见PTTG阳性表达, 阳性率为15.94%。肾透明细胞癌组织中的PTTG表达阳性率显著高于癌旁组织(χ2=29.294, P<0.001)。PTTG阳性组中的Fuhrman 3～4级(χ2=7.057, P=0.008)、TNM Ⅲ～Ⅳ期(χ2=8.918, P=0.003)和肿瘤长径>4 cm(χ2=3.907, P=0.048)的比...     

肾透明细胞癌组织中B7-H3的表达及意义

目的 评价B7-H3在肾透明细胞癌组织中的表达及其与预后的关系.方法 采用免疫组化方法 检测154例肾透明细胞癌患者肿瘤标本中B7-H3的表达,分析其与患者临床病理因素以及术后生存时间之间的关系.结果 154例患者中,B7-H3阳性28例(18.18%),其中无瘤生存6例,复发7例,死亡15例,至最后随访日期,总生存期(OS)为(19.71±20.32)个月;B7-H3阴性126例(81.82%),其中无瘤生存119例,复发3例,死亡4例,OS为(33.47±18.32)个月,两者比较差异有统计学意义(P＜0.05).单因素分析表明,B7-H3阳性表达患者在肿瘤大小、原发肿瘤分期、区域淋巴结转移、远处转移、临床分期等方面较阴性表达患者有明显差异,B7-H3阳性表达患者术后生存时间较阴性表达患者明显缩短.结论 B7-H3的表达可能与肾透明细胞癌的转移和进展有关,可以作为肾透明细胞癌的一个独立预后因素.     

ASS1在肾透明细胞癌中的低表达及临床意义

目的 验证ASS1在肾透明细胞癌中的低表达,阐明其与肾透明细胞癌发生发展的相关性。方法 临床收集肾透明细胞癌患者组织样本23例,采用荧光定量PCR和免疫组织化学的方法分别检测肾透明细胞癌患者癌组织和癌旁正常组织ASS1基因mRNA和蛋白质的表达水平差异,采用ELISA方法检测癌组织和癌旁正常组织瓜氨酸的含量。结果 肾透明细胞癌患者癌组织中ASS1的mRNA和蛋白质的表达水平明显低于癌旁正常组织,ELISA结果显示,在癌组织中有瓜氨酸的含量高于癌旁正常组织。结论 肾透明细胞癌患者癌组织中ASS1表达量明显降低,且在癌组织中发现瓜氨酸的累积。该结果对进一步阐明肾透明细胞癌发生发展的分子机理具有一定的学术意义,为肾透明细胞癌的诊断和治疗提供一种新的思路。     

RASL11B基因在肾透明细胞癌组织中的表达特征及其临床意义

目的 研究RAS样家族成员11B(RASL11B)在肾透明细胞癌中的表达特征及意义.方法 收集36例肾透明细胞癌患者的癌组织和对应癌旁组织,采用实时荧光定量PCR方法,检测RASL11BmRNA的表达差异,并分析RASL11B mRNA的表达水平与临床病理参数的关系;分别采用Western-blot和免疫组化的方法,确定RASL11B蛋白在癌组织和癌旁组织的表达差异及定位.结果 实时荧光定量PCR结果显示,肾透明细胞癌组织和癌旁组织均表达RASL11B mRNA,与癌旁组织(1.93±0.43)比较,其表达量在癌组织(0.28±0.08)中显著降低,两组比较有显著性差异(P＜0.001);RASL11B mRNA的表达水平下调与肿瘤直径大小、T分期、组织学分级、临床分级及有无大血管浸润呈显著负相关性;而与年龄和性别无显著相关性.Western-blot结果显示,癌组织和癌旁组织均表达RASL11B蛋白,癌组织表达量明显低于癌旁组织,Western-blot条带半定量分析结果分别为0.98±0.06、1.43±0.15,有显著性差异(P＜0.05);免疫组化染色结果显示RASL11B蛋白主要定位于正常肾组织肾小管上皮细胞胞浆;癌组织和癌旁组织的免疫组化染色评分结果分别为0.81±0.16、3.00±0.31,两组比较有显著性差异(P＜0.001).结论 RASL11B在肾透明细胞癌组织中的表达较癌旁组织显著降低,提示该基因的低表达在肾透明细胞癌的发生发展过程中具有一定的促进作用.     

肾透明细胞癌中VHL基因失活的检测及意义

目的 探讨肾透明细胞癌中Von Hippel-Lindau(VHL)基因突变和超甲基化情况及其在肾癌发生发展中的作用及临床意义.方法 采用聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCRSSCP)银染法,甲基化特异性PCR(MSP)及测序等方法对33例肾透明细胞癌和相应远离肿瘤正常肾组织VHL基因突变和超甲基化情况进行检测.结果 19/33(57.6%)例肾透明细胞癌中出现VHL基因突变;6/33(18.2%)例肾透明细胞癌中出现VHL基因超甲基化;VHL基因突变和超甲基化与肾癌临床分期和淋巴结转移相关.结论 肾癌中存在VHL基因突变和超甲基化,且与临床分期、淋巴结转移相关;VHL基因失活的检测可作为肾透明细胞癌的诊断指标,VHL基因可望成为肾透明细胞癌基因治疗的重要目的 基因.     

内皮细胞特异性分子在肾透明细胞癌组织中的表达及意义

目的观察不同临床分期肾透明细胞癌的内皮细胞特异性分子(ESM-1)的表达差异,以探讨ESM-1与肿瘤发生及恶性程度的相关性。方法收集肾透明细胞癌组织、正常肾组织以及癌旁组织标本,进行免疫印迹和免疫组化染色,并根据蛋白条带的灰度值和免疫组化结果进行定量评分,同时监测患者血清中ESM-1的表达水平。结果免疫印迹显示肾透明细胞癌标本中ESM-1表达灰度为2.12±0.23,免疫组化显示肾透明细胞癌中ESM-1阳性染色评分为2.1±0.94,相比癌旁组织组和正常肾组织组,差异均有统计学意义(P0.05);且ESM-1血清中表达量较正常组升高。结论检测ESM-1的表达有助于判断肾透明细胞癌的预后。