胎儿游离DNA浓度低相关因素分析及其对不良妊娠结局的影响

无创产前筛查(non-invasive prenatal screening, NIPS)通过对母体血浆中胎儿游离DNA(cell-free fetal DNA, cffDNA)的分析,广泛用于常见胎儿染色体非整倍体的筛查。胎儿游离DNA在母体血浆游离DNA总量中的比例(即cffDNA浓度)会影响NIPS的准确性,cffDNA浓度低(<4%)可导致NIPS检测失败。目前已知多种因素会影响cffDNA浓度,但对影响因素还没有广泛的共识。此外,cffDNA浓度低可能反映早期胎盘异常并与不良妊娠结局相关。因此,分析cffDNA浓度低相关因素及其对不良妊娠结局的影响可以为NIPS结果的解释和遗传咨询提供指导。     

孕妇外周血中低胎儿游离DNA浓度及处理方案

无创产前检测(non-invasive prenatal testing, NIPT)技术因其高灵敏度和特异度的特点已广泛应用于胎儿染色体异常的产前筛查之中。胎儿游离DNA浓度(fetal fraction, FF)是影响NIPT结果准确性的关键因素之一。不同检测平台对FF的最低阈值设定不同,FF达不到检测最低阈值是导致NIPT检测失败的重要原因之一。影响FF的因素众多,主要可分为生物学因素和实验相关因素。低FF也与妊娠期并发症或异常妊娠有一定相关性,其后续处理需引起重视。本文将从可能引起FF降低的因素及后续如何进行妊娠期管理等方面进行综述。     

双胎妊娠中无创产前检测的胎儿游离DNA浓度特征及检测失败原因分析

目的 分析双胎妊娠中无创产前筛查检测的胎儿游离DNA浓度及检测失败原因,探讨无创产前基因检测(noninvasive prenatal testing, NIPT)在双胎妊娠中的筛查效果和临床价值。方法 选择2017年11月至2023年6月接受NIPT产前筛查的1685例双胎孕妇和109784例单胎孕妇作为研究对象,对行NIPT检测孕妇的血浆中胎儿游离DNA(cell free fetal DNA,cffDNA)浓度情况和检测失败原因及双胎妊娠对三大目标染色体的筛查效果进行分析。结果 1685例双胎妊娠孕妇中NIPT检测成功1669例,检测成功率为99.05%,检测失败16例,检测失败率为0.95%,cffDNA浓度均在0.84%～41.22%,平均循环游离DNA(cffDNA)浓度为(10.30±4.75)%。109784单胎妊娠孕妇NIPT检测成功109335例,检测成功率为99.59%,检测失败总计有449例,检测失败率为0.41%,cffDNA浓度均在0.94%～49.83%,平均cffDNA浓度为(9.52±3.92)%。双胎妊娠孕妇中有11例检测结果提示高风险,筛查阳性率为...     

基于二代测序的染色体非整倍体无创产前筛查孕妇血浆中胎儿DNA比例的检测和计算方法

孕妇血浆中胎儿游离DNA的发现已对胎儿染色体非整倍体异常的无创产前检测产生了巨大的变革,母体血浆中的游离DNA越来越被认为是非侵入性检测胎儿发育异常的重要指标。二代测序技术的发展也使染色体非整倍体无创产前筛查(noninvasive prenatal test, NIPT)在临床实践中得到了迅速的开展和推广应用。在NIPT筛查中,血浆中胎儿游离DNA比例是整体检测性能的关键参数,在一定程度上确保对检测结果作出正确的临床解释。本综述中,我们对目前NIPT中胎儿游离DNA比例的检测方法和生物信息学算法进行介绍,并简单讨论各个方法的优缺点。     

孕妇血中胎儿游离DNA是双胎妊娠无创DNA筛查的关键

越来越多的数据显示无创DNA筛查技术在双胎中具有良好的应用效果,并且被一些指南和文献推荐为双胎妊娠胎儿染色体非整倍体的一线检测方案。无创DNA筛查的关键是胎儿游离DNA浓度,如果浓度达不到检测阈值,将出现假阴性的结果。双胎妊娠孕妇血中的胎儿游离DNA虽然总体比单胎高,但是每个胎儿的DNA比单胎低,因此双胎妊娠的无创DNA筛查更容易出现检测失败和假阴性的结果。另外,临床上双胎一胎消失的情况又增加了假阳性的结果,这些都导致无创DNA筛查在双胎妊娠的筛查中效果不如单胎。基于SNP的无创DNA筛查技术可以准确评估孕妇和每个胎儿的游离DNA浓度,可以有效地保证无创DNA检测的效果,也可以解决消失胎儿对存活胎儿游离DNA干扰的问题。本文将对双胎妊娠胎儿游离DNA在无创DNA筛查中的关键作用进行阐述,以期为双胎的无创DNA筛查在临床上的应用和遗传咨询提供理论依据。     

孕妇血浆游离DNA无创产前筛查检测失败及相关妊娠结局

孕妇血浆游离DNA(cell-free DNA, cfDNA)无创产前筛查(noninvasive prenatal screening, NIPS)是胎儿常见染色体非整倍体最有效的一种产前筛查方法,国内外已广泛开展。值得注意的是,该技术存在无法避免的检测失败,且近几年的一些研究报道发现,这种检测失败可能与胎儿染色体非整倍体和妊娠相关并发症发生存在一定相关性。目前,这方面的报道文献还相对有限,临床意义尚未完全明确。本文将回顾研究报道,探讨无创产前筛查检测失败原因及与胎儿染色体非整倍体、妊娠并发症相关性,探索在检测失败后对孕妇进行临床咨询和妊娠管理指导的理论依据。     

胎儿游离DNA浓度的影响因素及相关产前筛查/诊断策略探讨

自1997年在孕妇血浆中发现了胎儿游离DNA后,无创产前筛查(non-invasive prenatal screening, NIPS)便应运而生,并迅速在全球临床开展。NIPS检测失败率约1%～3%,胎儿游离DNA浓度(fetal fraction, FF)低是其中一个重要的原因。本文主要对影响FF的胎儿因素、母体因素、实验室因素进行探讨,并结合孕妇相关临床特征、妊娠结局等,对进一步产前检查的选择进行探讨,以期为产前遗传咨询提供参考。     

210923例孕妇外周血胎儿游离DNA无创产前筛查研究

目的 评价孕妇外周血胎儿游离DNA无创产前筛查(non-invasive prenatal testing, NIPT)对胎儿染色体异常产前筛查与产前诊断的临床应用价值。方法 收集2017年1月至2020年12月上海市所有产前诊断中心孕妇外周血胎儿游离DNA产前筛查210 923例,进行研究分析。结果 NIPT筛查出染色体高风险异常孕妇2225例,检出率1.05%;其中850例行羊膜腔穿刺染色体核型产前诊断,确诊506例染色体异常,确诊率59.53%,其中21三体综合征284例、18三体综合征65例、13三体综合征17例、性染色体异常104例、其他染色体异常36例。NIPT筛查中自愿要求检测占51.56%;行羊膜腔穿刺孕妇中,高龄妊娠(≥35岁)占39.85%。经统计分析,高龄妊娠在不同分型染色体异常中有差异(P<0.05)。NIPT实验室检测失败占0.15%,其中主要原因为质控标准未达标。结论 对于无明确筛查指征的孕妇,NIPT是优选有效筛查方法;NIPT染色体疾病筛查中,21三体综合征检出率高;NIPT实验室检测失败原因亦值得关注。     

高通量测序和数字PCR应用于无创产前检测胎儿非整倍体研究进展

母体血浆中胎儿游离DNA的发现使无创产前检测成为可能.基于高通量测序的无创产前检测已用于临床筛查常见的胎儿染色体非整倍体疾病.测序流程复杂,质量控制有助于提高高通量测序无创产前检测的准确性和可靠性.数字PCR作为核酸定量检测的新技术,具有快速准确,流程简单的优势,有望成为无创产前检测胎儿染色体非整倍体更具成本优势的新方...     

低胎儿DNA浓度样本重采血行无创产前检测成功的相关因素分析

目的 探讨影响低胎儿DNA浓度样本重采血复测成功的相关因素。方法 回顾性收集2018年1月至2020年12月期间在南京医科大学附属苏州医院做NIPT检测,且首次检测因胎儿DNA浓度低检测失败的单胎孕妇的临床资料,根据重采血复测后是否获得有效结果分为成功组和失败组,分析其母体特征、NIPT检测结果,采用多因素Logistics回归分析影响重采血复测成功的因素。结果 因胎儿DNA浓度低首次NIPT检测失败的的样本157例,重采血复测后有94例(59.87%)样本检测成功获得结果,63例(40.13%)仍因胎儿DNA浓度低检测失败,最终检测失败率0.138%(63/45500)。比较重采血后成功组和失败组样本信息发现：两组样本的重采血孕周和首次检测的胎儿DNA浓度有显著性差异(P<0.05),孕周>19周或首次检测胎儿DNA浓度>3%的样本重采血再检测获得有效NIPT结果的成功率更高。结论 重采血可以降低NIPT检测失败率。重采血孕周和首次检测的胎儿DNA浓度是影响重采复测成功的主要因素。临床医生可以结合这两个参数,给孕妇咨询时选择重采血NIPT检测、其他筛查还是介入性产前...     

嵌合体形成及其对产前筛查及诊断结果的影响

随着细胞分子生物学时代的来临,产前筛查和诊断方法也随之发生改变,更多的数据需要正确解读,这对产前诊断医生无疑是一项挑战。其中,染色体嵌合是影响产前筛查与诊断准确性的重要因素之一,受母亲、父亲以及胎盘等多种因素影响,人类普遍存在染色体嵌合,嵌合形成的主要原因是有丝分裂期染色体错误分离。受多种因素的影响,嵌合的临床表现对每个个体都具有唯一性。嵌合对产前筛查和诊断的影响主要为2个方面:(1)母血中胎儿游离细胞DNA(cell-free fetal DNA,cf DNA)筛查(无创产前筛查)。虽然大量文献报道无创产前筛查对于21,18,13三体有较高的检出率,但由于其检测的母血中cf DNA来源于胎盘,并非真正的胎儿自身DNA,因此当发生胎盘局限性嵌合时会严重影响无创产前筛查结果的准确性。(2)绒毛染色体核型分析提示存在嵌合时需要行羊膜腔穿刺进行验证。总之,正确认识染色体嵌合的起源、机制和临床结果,可以为病人提供更多有价值的遗传信息,是做好产前筛查与诊断工作并提供遗传咨询的重要前提。     

嵌合体形成及其对产前筛查及诊断结果的影响

随着细胞分子生物学时代的来临,产前筛查和诊断方法也随之发生改变,更多的数据需要正确解读,这对产前诊断医生无疑是一项挑战。其中,染色体嵌合是影响产前筛查与诊断准确性的重要因素之一,受母亲、父亲以及胎盘等多种因素影响,人类普遍存在染色体嵌合,嵌合形成的主要原因是有丝分裂期染色体错误分离。受多种因素的影响,嵌合的临床表现对每个个体都具有唯一性。嵌合对产前筛查和诊断的影响主要为2个方面：①母血中胎儿游离细胞DNA（cell-free fetal DNA,cfDNA）筛查（无创产前筛查）。虽然大量文献报道无创产前筛查对于２１,１８,１３三体有较高的检出率,但由于其检测的母血中cfDNA来源于胎盘,并非真正的胎儿自身DNA,因此当发生胎盘局限性嵌合时会严重影响无创产前筛查结果的准确性。②绒毛染色体核型分析提示存在嵌合时需要行羊膜腔穿刺进行验证。总之,正确认识染色体嵌合的起源、机制和临床结果,可以为病人提供更多有价值的遗传信息,是做好产前筛查与诊断工作并提供遗传咨询的重要前提。     

胎儿游离DNA用于无创产前检测21、18、13三体综合征的临床研究

目的探讨孕妇外周血中胎儿游离DNA在无创产前诊断21、18、13三体综合征的临床意义。方法收集2012年1月至2013年12月在广州医科大学附属第二医院妊娠11~32周进行无创产前检测的单活胎孕妇433例,提取胎儿游离DNA,制备测序文库,应用大规模平行测序技术,获得胎儿患染色体三体综合征的风险,并将无创结果与核型分析及分娩结局进行分析。结果 433例无创产前检测孕妇中,胎儿游离DNA高风险9例,其中21三体6例,18三体1例,13三体1例,Turner综合征1例,均与羊水/脐血培养细胞染色体核型分析结果相符;成功随访374例,5例因非染色体原因终止妊娠,369例成功分娩,新生儿外貌及智力发育未发现明显异常,其中6例新生儿外周血细胞染色体核型分析与无创结果相符。结论在孕妇中采用无创产前检测21、18、13三体综合征是可行的,可有效降低后续的侵入性产前诊断的数量,值得临床推广应用。     

cffDNA浓度低NIPT检测失败样本的相关因素和妊娠结局分析

目的 探讨分析胎儿游离DNA(cffDNA)浓度低无创产前基因检测(NIPT)检测失败样本的相关因素和妊娠结局。方法 回顾性收集在2017年至2022年期间在广东省妇幼保健院接受NIPT检测,经两次采集外周血均因cffDNA浓度低NIPT检测失败的样本信息,包括孕妇的临床资料、产前诊断结果、超声结果以及妊娠结局。评估导致cffDNA浓度低相关因素以及后续残余风险。结果 两次采血因cffDNA浓度低NIPT检测失败标本39例,其中双胎10例(25.64%),双胎之一停育/减胎7例(17.95%)。接受介入性产前诊断13例(33.33%),均未检出胎儿染色体异常。孕期超声发现胎儿发育异常9例(23.08%),胎儿宫内发育迟缓6例(15.38%)。所有孕妇均追踪到妊娠结局,其中早产10例(25.64%),自然流产2例(5.13%)。结论 对于NIPT检测失败的病例,应明确原因,孕期出现并发症和不良妊娠结局风险增加,应建议接受进一步的遗传咨询、产前诊断和定期超声监测胎儿生长发育。     

双胎妊娠的产前筛查、诊断与干预：转诊是关键

双胎妊娠产前筛查和诊断具有极强的专业性和复杂性,颈项透明层（NT）厚度联合外周血游离DNA［无创产前检测（NIPT）］检测可提高非整倍体筛查的检出率,减少不必要的介入性产前诊断。双胎之一胎儿异常后的宫内干预需建立在精准的产前诊断基础之上。双胎妊娠的特殊并发症的诊治应转至专业的产前诊断中心或区域性的胎儿医学中心进行。     

孕妇外周血胎儿游离DNA的检测及应用研究

从1997年首次在孕妇外周血中发现胎儿DNA以来,众多学者致力于将其应用于无创性的产前诊断。荧光定量PCR实现了胎儿游离DNA浓度的检测,目前研究发现,正常孕妇血浆胎儿DNA浓度稳定于某一水平,有望成为产前诊断和孕期检测的一项新指标。有学者认为,子痫前期母循环中胎儿DNA可有异常增高,而且子痫前期的孕妇在有临床症状前,孕妇血浆胎儿DNA水平异常增高,这与较多胎儿DNA释放到母血中,和肝肾功能异常导致胎儿DNA在母血中清除紊乱有关。此外许多妊娠合并症和并发症都伴有母外周血DNA水平的异常增高,例如:性连锁疾病、Rh血型不合、父系遗传性疾病、染色体非整倍体胎儿、早产等。现就孕妇外周血胎儿游离DNA的检测及临床应用作一综述。     

NIPT用于产前胎儿常见染色体非整倍体筛查的相关问题

正非侵入性(或无创)产前检测(non-invasive prenatal test,NIPT)是基于对于孕期母亲外周血游离DNA进行平行测序,即将母体游离DNA与胎儿游离DNA(cf-DNA)共同检测以判断常见胎儿染色体非整倍体异常的一种产前筛查技术。基于其较高的检出率以及与传统的血清学筛查相比极低的假阳性率和假阴性率,越来越被广大的临床医生和孕妇所接受,近年来在世界范围内也得到越来越广泛的应用。国际上许多学术组织相继发表了委员会意见和指南并不断     

无创产前检测假阴性3例及遗传咨询

<正>胎儿染色体非整倍体的无创产前检测(non-invasive prenatal testing, NIPT)与传统的血清学筛查相比,具有更高的敏感性和特异性。2016年国家关于规范有序开展孕妇外周血胎儿游离DNA产前筛查与诊断工作的通知中指出21三体检出率不低于95%,但仍存在假阳性及假阴性可能。对于假阳性病例可进一步侵入性产前诊断,而假阴性病例往往出生后发现,仅部分可通过产前超声异常发现;做好检测前及检测后的遗传咨询非常重要。     

无创产前检测国际指南与中国规范

随着二代测序技术在产前筛查临床应用的开展,国际上一些有影响力的学术组织相继发表和不断更新了关于该技术的应用指南和共识。国家卫生计生委组织专家总结我国的无创产前检测(NIPT)试点工作经验,结合国际国内的临床研究成果制定了我国《孕妇外周血胎儿游离DNA产前筛查与诊断技术规范》。该技术规范主要包括开展孕妇外周血胎儿游离DNA产前筛查与诊断技术的基本要求、适用范围、临床服务流程、检测技术流程以及质量控制指标等内容。为规范、有序地在我国开展该技术进行产前筛查和产前诊断提供了依据。     

产前超声筛查胎儿畸形的临床效果评估

产前诊断包括超声检查，孕妇血清学检查估计胎儿染色体异常风险度、染色体核型检查、DNA分析、实验室特殊抗体、激素的测定等。在这些检查方法中，超声检查由于直观、方便，对孕妇无损伤，是产前诊断的主要检查手段。近年来，我国开始重视产前超声筛查，产前诊断法中特别强调超声筛查胎儿大畸形。但同世界上发达国家相比，我国产前筛查起步较晚，大畸形筛查缺乏统一标准，临床效果尚无定论。