肺移植供肺保护的研究进展

供肺的保护直接关系到肺移植的成败。目前对供肺保护的研究主要集中在如何改进肺保护液的 成分、灌注方式等方面,本文就这些方面的进展作一简要综述。     

姜黄素对大鼠单肺移植缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察大鼠单肺移植缺血再灌注肺损伤肺功能改变及姜黄素（CUR）干预作用。方法建立大鼠原位异体左单肺移植模型。纯种雄性SD大鼠120只，随机分两组，每组又分三个亚组（n=12）：假手术组、载体组、CUR组，分别在缺血4h、再灌注2h和24h处死大鼠，测量移植肺损伤病理评分、氧合指数、肺湿干重比（W／D）、伊文思篮染料（EBD）含量。结果移植肺组织病理学主要表现为肺水肿，炎症细胞浸润，出血。与假手术组比较，再灌注2h，移植肺氧合指数从358．3下降到153．7，W／D从3．7增加到5．6，EBD含量从381．0μg／g干重增加到1172．3μg／g干重；再灌注24h后，氧合指数从394．2下降到102．3，移植肺W／D从3．8增加到6．6；EBD含量从387．5μg/g干重增加到927．5μg/g干重。供体和受体大鼠经CUR预处理后，明显减少缺血4h，再灌注2和24h的移植肺组织学病理评分，肺泡毛细血管通透性，湿干重比，改善气体交换。结论大鼠单肺移植后缺血再灌注损伤（IRI）肺功能学改变主要表现为肺泡毛细血管内皮损伤导致的通透性肺水肿及由此导致的氧合功能下降。CUR对大鼠单肺移植缺血再灌注肺损伤具有保护作用。     

冷缺血期氢混合气膨肺对大鼠肺移植后的能量代谢保护作用

目的探讨冷缺血期氢混合气膨肺对大鼠肺移植后能量代谢的保护作用。方法健康雄性SD大鼠42只,8～10周龄,体重250～300 g,随机取21只大鼠为供体大鼠,其余21只为受体大鼠,采用随机数字法将两组大鼠进一步分为三个亚组(每组7只):对照组、氧气组和氢气组。冷缺血期对照组不使用气体膨肺,氧气组采用40%O_2+60%N_2膨肺,氢气组采用3%H_2+40%O_2+57%N_2膨肺,2 h后肺移植。受体大鼠于肺移植前、再灌注3 min、1、2 h时行动脉血气分析检测PaO_2、PaCO_2、pH、碱剩余(BE),计算氧合指数(OI),留取血清与移植肺组织,术后2 h采用ELISA法检测血清白介素-8(IL-8)、白介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度。肺组织HE染色,记录肺组织损伤评分(LIS)。采用ELISA法检测肺组织中乳酸(Lac)、丙酮酸(PA)、三磷酸腺苷(ATP)浓度,采用透射电镜观察肺线粒体结构。结果与对照组比较,再灌注2 h氢气组、氧气组pH、BE、OI明显升高(P0.05);与对照组比较,氢气组、氧气组血清IL-8、TNF-α浓度明显降低,IL-10浓度明显升高(P0.05)。与氧气组比较,再灌注2 h氢气组OI、pH、BE明显升高(P0.05);与氧气组比较,氢气组血清IL-8、TNF-α浓度明显降低,IL-10浓度明显升高(P0.05)。LIS评分氢气组明显高于氧气组(P0.05)。对照组移植肺组织肺泡中有大量透明膜形成,肺泡内出血明显,肺泡隔和肺泡重度水肿,大量中性粒细胞浸润;氢气组、氧气组移植肺组织病理损伤程度轻于对照组,氢气组轻于氧气组。与对照组比较,氧气组和氢气组受体大鼠移植肺组织中Lac、PA浓度明显降低(P0.05),ATP浓度明显升高(P0.05),移植肺组织线粒体的面积、周长、费雷特径明显增大(P0.05),线粒体圆度明显降低(P0.05),嵴紊乱比例明显小于氧气组(P0.05)。结论冷缺血期氢混合气膨肺能提高大鼠移植肺氧合功能,降低乳酸/丙酮酸比值,减轻炎症反应,部分改善肺损伤,提高组织ATP含量,保护肺线粒体,对移植肺的能量代谢功能具有保护作用,这种效果可能是通过对线粒体保护作用而产生的。     

过度膨胀性肺损伤与肺移植中肺保护的关系

肺移植后72h内，常发生缺血-再灌注损伤，在研究肺缺血性损伤及再灌注损伤的基础上，形成了肺移植中的肺保护概念，追求理想的肺保护技术是肺移植领域的研究重点与热门。     

参附注射液对兔移植肺缺血-再灌注损伤的保护作用

目的观察参附注射液对供肺缺血-再灌注损伤的保护作用。方法将20只新西兰白兔随机分为实验组和对照组,每组各10只,建立兔左肺自体原位移植模型,分别用参附注射液和生理盐水对兔肺进行预处理和供肺灌注。于主动脉阻断前、再灌注后15min、30min和60min各时点检测左肺静脉血中丙二醛(MDA)含量、总超氧化物歧化酶(SOD)的活力,于再灌注60min后称左肺组织的干湿比重(D/W),并观察其病理变化。结果主动脉阻断前两组MDA含量差异无统计学意义(P0.05);再灌注15min后实验组MDA含量较主动脉阻断前下降;再灌注30min和60min时,两组MDA含量均呈上升趋势,但实验组明显低于对照组(P0.05)。主动脉阻断前实验组SOD活力明显高于对照组(P0.05),再灌注后两组SOD活力均呈下降趋势,以对照组下降幅度明显(P0.05)。实验组的D/W显著高于对照组(0.23±0.01vs.0.19±0.02,P0.05)。对照组肺组织水肿明显,大量的炎性细胞浸润,肺泡腔内有片状渗出;而实验组表现为肺泡间隔水肿轻微,少量炎细胞浸润,渗出不明显。结论参附注射液对供肺的缺血-再灌注损伤有较好的保护作用。     

BQ123对肺移植早期缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的　研究内源性内皮素（ Ｅ Ｔ）１ 对肺移植早期缺血再灌注损伤的影响及 Ｅ Ｔ Ａ 受体阻断剂 Ｂ Ｑ１２３ 对其病理过程的保护作用。方法　以家犬（ 保存８ 小时） 左肺移植模型观察缺血再灌注。损伤过程中内源性 Ｅ Ｔ１ 产生及 Ｂ Ｑ１２３ 对其血流动力学、肺功能的作用。结果　 Ｂ Ｑ１２３ 组和对照组的平均动脉压、左房压、中心静脉压及组织形态学差异无显著性; Ｂ Ｑ１２３ 组平均肺动脉压、肺血管阻力指数及血清 Ｅ Ｔ１ 浓度明显低于对照组（ Ｐ ＜ ０ ．０１） ,心脏指数、动脉血氧分压明显高于对照组（ Ｐ ＜ ０ ．０１） ,而动脉二氧化碳分压明显低于对照组（ Ｐ ＜ ０ ．０１） ; Ｂ Ｑ１２３ 组肺组织含水百分比明显低于对照组（ Ｐ ＜０ ．０１） 。结论　 Ｂ Ｑ１２３ 对肺移植早期出现的缺血再灌注损伤具有保护作用。     

缺血预处理对大鼠胰腺移植的保护作用

目的　探讨缺血预处理对大鼠胰腺移植的远期保护作用。方法　糖尿病大鼠随机分为缺血再灌注组(I/R组, n= 3 0 )和缺血预处理组(IPC组, n= 3 0 ),两组移植前2d,再灌注后3d和7d随机各杀死6只大鼠,取血查血糖及淀粉酶,同时取胰腺组织行HE染色; 6只大鼠用于观测各种代谢指标。其余6只大鼠用来观察大鼠存活率。结果　IPC组1个月存活率高于I/R组( 5 /6∶3 /6, P< 0. 0 1 );再灌注后IPC组各时间点血糖(P< 0. 0 1 )、血淀粉酶(P< 0. 0 1 )、进食量(P< 0. 0 5 )、排尿量(P< 0. 0 1 )和饮水量(P< 0. 0 5 )均低于I/R组;I/R组移植胰的损伤程度大于IPC组。结论　缺血预处理可增加大鼠胰腺移植的存活率,降低血淀粉酶活性,减轻胰腺的再灌注损伤程度,对大鼠胰腺移植具有保护作用。     

缺血预处理对犬肺移植供肺的保护作用

采用犬异体肺移植模型，评价缺血预处理对肺缺血再灌注损伤的保护作用。结果预处理组在移植徨肺静脉血和肺组织中的超氧化物歧化酶，氧自由基最终产物丙二醛的含量发迹与对照组比较，差异有显著性。     

人参皂甙Rb1对肺缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨人参皂甙Ｒｂ１对肺缺血再灌注损伤的保护作用。方法按肺移植供肺获取和保存的方法，对３５只家兔的肺分别获取，保存；然后采用体外装置，建立体外肺缺血再灌注损伤模型。在即将再灌流前，将不同剂量的Ｒｂ１加入到５０ｍｌ再灌流血液中。结果Ｒｂ１可使肺组织中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）含量升高，丙二醛（ＭＤＡ）含量降低；使肺动脉压（ＰＡＰ）降低，湿肺干肺比重降低和改善肺组织病理变化。Ｒｂ１在再灌流血液中浓度为８０ｍｇ／Ｌ时，已有明显效果。结论Ｒｂ１对肺缺血再灌注损伤具有明显的保护作用。     

内皮素受体拮抗剂PD142893对大鼠肺移植早期缺血再灌注损伤的影响

目的探讨PD142893对大鼠肺移植早期缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法大鼠行原位左肺移植,随机分成两组,移植前实验组尾静脉注入PD142893(0．1 mg/kg·ml~(-1)) 1 ml,移植后0、1、2、6、12及24 h,采集标本,各5只大鼠。检测动脉血气、血浆内皮素(ET)-1和白细胞介素(IL)-6水平,左肺常规病理切片并用脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法检测凋亡细胞并计数,检测肺湿/干重比。结果两组对比,肺静脉血氧分压,除0、24 h外各时间点实验组较高,差异有统计学意义(P＜0．05)；血浆IL-6水平,除0 h外各时间点对照组较高(P＜0．05)；ET-1水平实验组较高(P＜0．05)。光镜下对照组肺组织严重的白细胞浸润及肺间质高度淤血水肿,肺泡腔内渗出明显,实验组病变程度轻微,细胞凋亡指数和肺湿/干重比低于对照组(P＜0．05)。结论PD142893能减轻大鼠肺移植早期缺血再灌注损伤,机制与减轻肺间质水肿及炎症反应有关。     

静脉应用抑肽酶对大鼠肺移植模型缺血再灌注损伤的作用

目的 探讨静脉应用抑肽酶对肺移植后肺缺血再灌注损伤的作用和机制.方法 利用移植肺冷缺血14 h建立的大鼠肺移植缺血再灌注损伤模型,考察抑肽酶对缺血再灌注损伤的影响,并检测细胞因子等指标探讨机制.结果 抑肽酶组较对照组移植肺氧合好、湿干比小,同时支气管肺泡灌洗液中白细胞介素(IL)-2[(113±32)μg/L和(162±43)μg/L,P＜0.05]、血清中IL-8[(7.26±1.01)ng/L和(9.43±0.97)ng/L,P＜0.05]和肿瘤坏死因子(TNF)-α[(152.3±36.4)ng/L和(211.6±52.7)ng/L,P＜0.05]、肺组织中髓过氧化物酶活性[(2.36±0.62)U/g和(3.98±0.36)U/g,P＜0.05]都显著降低.结论 静脉应用抑肽酶能够减轻缺血再灌注损伤,机制可能包括:减少IL-2的释放、抑制TNF-α活化和IL-8产生,抑制中性粒细胞的聚集、激活和脱颗粒.     

缓激肽β2受体拮抗剂在大鼠肺移植缺血再灌注损伤中的保护作用

目的 探讨缓激肽β2受体拮抗剂（HOE-140）对大鼠移植肺功能的影响以及作用.方法 将纯系SD大鼠随机分为3组,即实验组1、实验组2、对照组.对照组的供肺用低钾右旋糖苷液（LPD液）灌洗,并保存18h,然后行左肺移植,于移植后1d测定对照组的气道峰压（PAP）、静脉血氧分压（PO2）、移植肺湿干重比（W/D）、髓过氧化物酶（MPO）活性.实验组1以及实验组2（加HOE-140干预）的供肺用含特异性不可逆DPPⅣ酶抑制剂（AB192）的LPD液灌洗,并保存18h,然后行左肺移植,分别于移植后1d测定受者的各项肺功能指标,并取相同受体肺部组织做病理学检查. 结果 与对照组比较,各实验组的PAP值降低（P＜0.05）,PO2值升高（P＜0.05）,W/D值降低（P＜0.05）,MPO活性降低（P＜0.05）,差异有统计学意义,病理学结果显示实验组2（HOE-140组）均优于对照组及实验组1.结论 缓激肽β2 受体拮抗剂HOE-140能有效降低肺移植肺缺血再灌注损伤,从而改善移植肺功能.     

L-精氨酸对大鼠胰腺移植缺血再灌注损伤的保护作用及其机制

目的探讨L-精氨酸（L-Arginine，L-Arg）对大鼠胰腺移植缺血再灌注（I／R）损伤的影响及其机制。方法SD大鼠作为供、受体行胰腺移植术，给予不同方式处理：假手术组（Sham）：只行开腹术；对照组（Control）：只行胰腺移植术，不行预处理；缺血预处理组（IPC）：在供胰切取前阻断血供10min，然后再灌注10min；L-精氨酸组（L-Arg）：行胰腺移植术，再灌注前先经下腔静脉注射L-Arg 10mg／kg体重；L-硝基精氨酸甲酯组（L-NAME）：供胰切取时阻断血供10min，再灌注10min；然后行移植术，在再灌注前，先经下腔静脉缓慢注射L-NAME 10mg／kg体重。各组手术完成后，于再灌注6h检测血清淀粉酶、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和一氧化氮（NO）水平，胰腺细胞凋亡指数、胰腺细胞bcl-2蛋白表达情况和胰腺组织病理改变。结果L-Arg和IPC都降低TNF-α水平（P〈0．01）和细胞凋亡水平（P〈0．01），NO水平升高（P〈0．01）。而L-NAME可阻断该保护效应。IPC和L-Arg均能激活bcl-2蛋白的表达。结论L-Arg可以模拟IPC对大鼠胰腺移植I／R损伤的保护作用，其机制与合成NO，激活bcl-2基因的表达有关。     

姜黄素和地塞米松对大鼠移植肺缺血再灌注损伤的保护作用

目的：研究姜黄素（CUR）和地塞米松（DXM）对大鼠移植肺缺血再灌注损伤的干预作用。方法：实验分四组进行，CUR组肺移植前3h供、受者腹腔注射CUR溶液；DXM组肺移植前30min受者腹腔注射DXM溶液；载体组肺移植前3h供、受者腹腔注射CUR的溶剂二甲基亚砜；假手术组不进行肺移植。每组分别于恢复血液再灌注2h和24h各处死大鼠6只，采取颈动脉（CA）血和左肺静脉（LPV，移植侧）血，测定血氧合指数（PO2／FiO2）以及血清中丙二醛（MDA）、总抗氧化能力（TAOC）、肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）的含量；同时行肺组织病理学观察，测定肺湿重与干重比（W／D），以及肺组织中髓过氧化物酶活性（MPO）、MDA、TAOC、TNF-α、IL-6的含量。结果：再灌注2h及24h，CUR组及DXM组LPV血的PO2／FiO2明显高于载体组（P〈0．01）。CUR组与DXM组再灌注2h和24h的肺水肿病理评分和总分明显低于载体组（P〈0．017），CUR组与DXM组再灌注24h的W／D明显低于载体组（P〈0．01）。再灌注2h和24h，CUR组与DXM组肺组织中MPO含量明显低于载体组（P〈0．05，P〈0．01）。再灌注2h时，CUR组和DXM组血清和组织中MDA含量明显低于载体组（P〈0．05），再灌注24h时，CUR组血清MDA含量和DXM组组织中MDA含量明显低于载体组（P〈0．05）。再灌注2h和24h，CUR组肺组织和血清中TAOC含量明显高于载体组（P〈0．01，P〈0．05），而DXM组仅再灌注2h的肺组织和再灌注24h的血清中TAOC含量高于载体组（P〈0．01）。再灌注2h和24h，CUR组和DXM组肺组织中TNF-α和IL-6含量低于载体组。结论：CUR和DXM对大鼠移植肺缺血再灌注损伤具有保护作用，其机制可能与二者具有抗氧化和抗炎作用有关。     

西地那非在犬肺移植缺血再灌注损伤中的作用

目的 观察5型磷酸二酯酶抑制剂西地那非在肺移植缺血再灌注损伤中的作用.方法 12对体重匹配杂种犬随机分为对照组(n=6)和实验组(n=6),利用同种异体犬左单肺移植模型,实验组供肺肺动脉阻断前经主肺动脉注射西地那非1.0 mg/kg体重,移植后持续泵入西地那非每小时0.3 mg/kg体重,对照组给予等容量生理盐水.观察移植前及移植后30、60、120、180min移植肺上叶静脉血氧分压(PO2)变化,于移植后120 min取肺组织,测丙二醛(MDA)、髓过氧化物酶(MPO)及组织含水量(H)并观察组织形态学变化.结果 实验组PO2明显高于对照组(293±52比160±45,P＜0.05);供肺组织MDA(0.25±0.09比0.50±0.09)、MPO含量(0.13±0.06比0.25±0.09)及含水量(71.59±4.63比78.04±3.73)明显低于对照组(P＜0.05);组织形态学显示实验组损伤程度较对照组轻.结论 西地那非在供肺保存及再灌注损伤中具有肺保护作用.     

缺血预处理对鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用及其机制

目的探讨缺血预处理（IP）对肺脏缺血再灌注损伤（IRI）的保护机制。方法30只SD大鼠，随机分为预处理组（I组）、对照组（C组）和假手术组（S组），每组10只。I组和C组大鼠常规开胸后建立左上肺缺血再灌注模型，均遭受了IRI，但I组在缺血再灌注前给予IP干预，对以上样本的总蛋白质进行二维凝胶电泳分离，差异表达的蛋白质点进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析鉴定。S组大鼠开胸后不予特殊处理。免疫印迹法比较三组样本中热休克蛋白27（HSP27）的表达差异。结果建立了分辨率较高、重复性较好的鼠肺IRI双向凝胶电泳参考图谱，45个蛋白质点表达存在差异，其中30个得到了鉴定，HSP27在IP的第一窗口期表达上调。结论HSP27在IP对肺脏IRI的保护机制中起重要作用。     

腺苷对犬心肺联合移植供肺缺血-再灌注损伤的保护作用

目的 研究腺苷(ADO)对犬心肺联合移植供肺缺血-再灌注(I/R)损伤的保护作用.方法 建立犬心肺联合移植模型,将实验分为心肺联合移植对照组(对照组)和腺苷组,观察恢复血流灌注后30、60、90和120 min时两组犬动脉血氧分压(PaO2)的变化;测定缺血前10 min、缺血后10 min、120 min、再灌注后10 min、60 min供肺组织一氧化氮(NO)含量;在恢复血流灌注60 min后,取供肺组织为标本,检测肺组织中髓过氧化物酶(MPO)活力、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)含量以及肺组织湿干重比(W/D);HE染色光学显微镜下观察病理变化.结果 (1)在各时间点腺苷组PaO2值较对照组明显升高(P＜0.05);(2)与缺血前比较,缺血后120min、再灌注后10min和60min的肺组织NO含量均显著降低(P＜0.05),而腺苷组缺血后120 min、再灌注后10 min和60 min肺组织NO含量显著高于对照组(P＜0.05);(3)腺苷组肺组织中MPO活力、MDA含量、肺组织W/D显著低于对照组,SOD含量显著高于对照组(P＜0.05);(4)病理切片观察显示对照组的肺组织呈严重的炎性细胞浸润及肺水肿形成,而腺苷组的病变程度较对照组轻微.结论 在心肺联合移植过程中应用ADO,对供肺的缺血-再灌注损伤有保护作用.     

利多卡因对离体肺再灌注损伤保护作用的实验研究

目的通过离体肺再灌注模型观察利多卡因对肺再灌注损伤的保护作用.方法将12只兔随机分为两组Ⅰ组,低钾右旋糖酐(LPD)液灌洗兔肺后10℃保存,18 h后复灌;Ⅱ组,含利多卡因的LPD液灌洗后10℃保存,18 h后复灌.再灌注过程中测定氧分压(PO2)、二氧化碳分压(PCO2),灌注结束后测定肺组织湿干比(W/D)、髓过氧化物酶(MPO)活性以及支气管肺泡灌洗液(BALF)内中性粒细胞(PMN)计数,并观察肺组织形态学改变.结果Ⅱ组肺气体交换功能[PO2为(11.33±1.14)kPa(kPa=7.5 mm Hg)]、W/D(7.31±0.59)及BALF内PMN计数(0.39±0.05)情况显著优于Ⅰ组[(6.64±0.90)kPa、5.79±0.44、6.07±0.71],Ⅱ组MPO活性低于Ⅰ组,形态结构改变则明显优于Ⅰ组.结论灌洗液中加入利多卡因能明显改善肺气体交换功能,减少肺泡腔和间质内中性粒细胞浸润,减轻肺组织形态结构改变.     

氢分子治疗缺血/再灌注损伤的研究进展

背景 活性氧在缺血/再灌注损伤(ischemia/reperfusion,Ⅰ/RI)中发挥重要作用.越来越多的研究表明氢气(hydrogen,H2)通过选择性清除活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)保护各种细胞、组织、器官免受氧化损伤. 目的 分析总结氢对Ⅰ/R损伤的治疗作用及其可能机制,为更好地认识H2并将其应用于临床奠定基础. 内容 H2对Ⅰ/RI的作用机制并不明确,就H2对各器官Ⅰ/RI的治疗及可能机制进行阐述,并对H2作为一种治疗性气体在医学方面的应用前景做出展望.趋向 H2治疗Ⅰ/RI具有广阔的临床应用前景,但为了识别H2作用的确切机制及验证H2在临床上的治疗潜力还有很多工作要做.     

L-精氨酸对肺移植早期再灌注损伤保护作用的实验研究

再灌注损伤是肺移植早期非特异性移植肺功能衰竭的主要原因之一〔１〕。我们实验观察肺保存过程中，肺血管内皮源性一氧化氮（ＮＯ）改变及ＮＯ合成前体Ｌ精氨酸（ＬＡｒｇ）对肺移植早期再灌注损伤的保护作用，并探讨其可能机制。材料和方法　杂种成年犬，雌雄不拘，体重８．０～１５．０ｋｇ，氯胺酮（１０ｍｇｋｇ）麻醉，气管插管呼吸机调节呼吸（呼吸频率２０次分，一次换气量２０ｍｇｋｇ）。开胸后结扎奇静脉，静脉注射肝素（４０ＩＵｋｇ）后结扎上、下腔静脉，切开左心耳，以４０ｃｍ落差，４℃ＥｒｕｏＣｏｌｌｉｎ…