血必净注射液对烧伤延迟复苏大鼠器官功能及死亡率的影响

目的 观察血必净注射液对烧伤延迟复苏大鼠多器官功能损害和死亡率的影响。方法 采用大鼠30％总体表面积Ⅲ度烫伤模型。130只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为假伤组（n=10）、烫伤组（n=60，伤后6h腹腔内注射40ml／kg生理盐水）和血必净组（n=60，血必净注射液4ml／kg，每日2次）。除假伤组外，各组再根据不同给药时间点分为伤前2h（n=20）、伤后2h（n=20）和伤后12h（n=20）给药组。分别观察不同时间点各组动物7d的死亡率及伤后12h多器官功能改变。结果 与烫伤组相比，伤后12h血必净组动物死亡率显著降低（75．0％比40．0％。P〈0．05）；同时，血必净组伤后12h血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）及肌酸激酶（CK）水平均明显降低（P〈0．05或P〈0．01）。结论 血必净注射液能够明显降低严重烧伤延迟复苏大鼠的死亡率，并对重要器官具有保护作用。     

血必净注射液对烫伤大鼠高迁移率族蛋白B1的影响

目的：观察血必净注射液对烫伤大鼠高迁移率族蛋白B1（HMGB1）变化规律的影响。方法：采用大鼠30％总体表面积Ⅲ度烫伤模型。将112只大鼠随机分为假伤组（n=24）、烫伤组（n=44）和血必净治疗组（n=44）。血必净治疗组于烫伤后0．5h腹腔注射血必净注射液4ml／kg，每日2次，连用3d。3组各选择24只大鼠分别于伤后1、3和7d活杀，采用蛋白质免疫印迹法（Western blotting）检测血浆HMGB1水平；同时取烫伤组和血必净治疗组余下的20只大鼠用于观察死亡率。结果：与假伤组比较，大鼠烫伤后1、3和7d血浆HMGBl水平均显著升高（P〈0．05或P〈0．01）；与烫伤组比较，血必净注射液治疗后不同时间点血浆HMGB1表达显著下调（P〈0．05或P〈0．01），但仍稍高于假伤组。早期给予血必净注射液治疗。大鼠3d和7dN死亡率显著低于未治疗的烫伤组（P均〈0．05）。结论：血必净注射液能显著抑制晚期致炎因子HMGB1，对严重烫伤具有潜在的治疗作用。     

烫伤后高迁移率族蛋白B1对树突状细胞分泌细胞因子的影响

目的观察烫伤后大鼠高迁移率族蛋白B1（HMGBl）对树突状细胞（DC）分泌肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-12（IL-12）的影响及意义。方法将104只大鼠随机分为正常对照组（n=8）、假烫伤组（n=32）、烫伤组（n=32）和丙酮酸乙酯（EP）干预组（n=32），后3组实验动物按观察时间再分为4个亚组，分别于烫伤后1、3、5和7d分别处死各组动物留取脾脏。分离DC后培养24h，收集孵育液，采用酶联免疫吸附试验检测TNF-α和IL-12水平；采用荧光定量聚合酶链反应（PCR）方法检测脾脏组织TNF-α、IL-12和HMGBl的基因表达。结果与相同时间点假烫伤组比较，伤后不同时间点烫伤组HMGBl mRNA表达显著升高（P均〈0．01），DC孵育液中TNF-α产生减少、IL-12的产生变化不明显，脾脏TNF-α mRNA于伤后1d显著升高，5～7d迅速降至假烫伤组水平，IL-12mRNA表达在伤后1d和3d显著下调，5d和7d则迅速增强（P〈0．05或P〈O．01）；与烫伤组比较，EP干预组HMGBl mRNA表达均明显受抑，脾脏DC分泌TNF-α和IL-12的能力以及脾脏IL-12mRNA表达均显著增强（P均〈O．01）。结论严重烫伤后HMGBl的表达异常升高，可导致脾脏DC分泌TNF-α和IL-12的能力下降，从而介导机体的免疫功能抑制。     

丙酮酸乙酯对烫伤延迟复苏大鼠细胞免疫功能的影响

目的观察丙酮酸乙酯(EP)对烫伤延迟复苏大鼠细胞免疫功能的影响,并探讨其作用机制。 方法采用大鼠30％总体表面积Ⅲ度烫伤模型.103只大鼠随机分为正常对照组(n=7)、假烫伤组(n=32)、 烫伤组(n=32,伤后6 h腹腔内注入40 ml／kg生理盐水)和EP(3.23 mg／ml)干预组(n=32.伤后6 h腹腔内 注入40 ml／kg EP液),分别于伤后1、3、5和7 d活杀,检测脾淋巴细胞增殖能力、白细胞介素-2(IL-2)生成 及白细胞介素-2受体(IL-2R)表达。结果烫伤延迟复苏后1~7 d,脾淋巴细胞丝裂原刺激的增殖反应明显 受抑制(P均<0.05)。烫伤后1~5 d IL-2生成明显减少(P均<0.05),且烫伤后1和3 d IL-2R的表达显 著降低(P均<0.05)。EP干预能够明显恢复烫伤后1~7 d脾淋巴细胞的增殖能力(P均<0.05),伤后1、3 和5 d,IL-2的生成显著增加,但对IL-2R的表达无影响(P均>0.05)。结论 EP能显著增加脾淋巴细胞的 增殖能力和IL-2的产生,从而有效改善烫伤延迟复苏后细胞免疫功能障碍。     

丙酮酸乙酯对烫伤大鼠肝组织高迁移率族蛋白B1表达和肝功能的影响

目的探讨烫伤大鼠肝组织高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达的变化规律,观察丙酮酸乙酯(EP)对烫伤后肝组织HMGB1表达及肝功能的影响。方法采用大鼠30%总体表面积Ⅲ度烫伤模型,78只雄性Wistar大鼠随机分为假伤组(n=18)、烫伤组(n=30,烫伤后2h腹腔给予林格液3ml)、丙酮酸乙酯(EP)治疗组(n=30,烫伤后2h腹腔给予EP3ml)。3组动物分别于伤后第8、24、72h时点活杀,留取肝组织检测其HMGB1基因/蛋白表达,留取血标本检测肝功能指标。采用逆转录聚合酶链反应及蛋白免疫印记法检测肝组织HMGB1基因/蛋白表达,应用全自动生化分析仪测定血清天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)水平。结果与假伤组比较,严重烫伤组大鼠肝组织HMGB1 mRNA表达及蛋白水平均显著增高(P<0.05或P<0.01),同时血清AST和ALT水平亦显著升高(P<0.05或P<0.01)。EP治疗组大鼠肝组织HMGB1表达显著下调,血清AST和ALT水平不同程度地明显下降(P<0.01或P<0.05)。结论HMGB1参与了烫伤大鼠的炎症反应过程,应用EP治疗可有效抑制烫伤后肝组织HMGB1的表达,并显著减轻烫伤延迟复苏所致肝功能障碍。     

三七总皂甙对烫伤大鼠平均动脉压的影响

目的观察三七总皂甙对烫伤大鼠平均动脉压（MAP）的影响。方法成年SD大鼠，雄性，分为4组：正常组，烫伤组、烫伤给药组（即刻或伤后1h给药），每组各9只，造成30％TBSA Ⅲ°创面烫伤模型。颈动脉插管，检测平均动脉压的变化。烫伤给药组分别于伤后即刻和伤后Ih腹腔注射给予三七总皂甙（100mg／kg体重）。结果正常大鼠的MAP在检测过程中没有显著性的波动；在烫伤后，MAP即显著低于正常组，伤后2h开始逐渐降低，动物逐渐进入休克状态，与对照组相比，各时间点均有显著性差异（P〈0．05）；烫伤大鼠腹腔注射即刻给予三七总皂甙后，MAP显著升高，并保持在较高水平（P〈0．05）：伤后1h给药也具有明显的升压作用（P〈0．05）。结论MAP可以作为延缓休克发生药物筛选的指标。三七总皂甙可以在伤后有效维持动脉血压，延缓休克发生，为成批烧伤临床救治赢得时间。     

拮抗晚期糖基化终末产物受体对烫伤延迟复苏大鼠多器官功能及死亡率的影响

目的 观察拮抗晚期糖基化终末产物受体(RAGE)对烫伤延迟复苏动物多器官功能及死亡率的影响,并探讨其作用机制.方法 选取雄性Wistar大鼠,采用重度烫伤延迟复苏模型(30%总体表面积Ⅲ度烫伤).实验分为两部分.死亡率观察:130只大鼠被随机分为假手术组(n=10)、烫伤组(n=60)及RAGE抗体治疗组(n=60),观察伤后7 d内每日动物的存活率.器官功能观察:72只大鼠被随机分为假手术组(n=24)、烫伤组(n=24)及RAGE抗体治疗组(n=24),于伤后1、3、5和7 d各活杀6只动物,取血,用全自动生化分析仪测定肝、肾和心脏器官功能指标.结果 烫伤组伤后1～7 d,大鼠血中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、肌酐(cr)、尿素氮(BUN)及肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平均显著高于假手术组(P<0.05或P<0.01),其中ALT、AST、Cr及BUN水平均于伤后3 d达峰值;给予RAGE抗体治疗可不同程度降低烫伤动物血中各指标水平,其中AST在伤后1～7 d显著下降,余指标在伤后1～5 d均明显改善(P<0.05或P<0.01).RAGE抗体治疗组伤后7 d内每日大鼠存活率显著高于烫伤组(P<0.05或P<0.01).结论 RAGE抗体干预能明显改善重度烫伤延迟复苏大鼠的预后,并对重要器官功能具有显著保护作用.     

氢化可的松-异丙嗪对烫伤大鼠平均动脉压的影响

目的 观察氢化可的松和异丙嗪对烫伤大鼠平均动脉压（MAP）的影响。方法 SD大鼠，分为3组：正常组、烫伤组、烫伤给药组，每组各9只，造成30％TBSA创面烫伤模型。动脉插管，检测平均动脉压的变化。烫伤给药组在伤后即刻腹腔注射给予氢化可的松（10mg／kg）和异丙嗪（20mg／kg）。结果 正常大鼠的MAP在检测过程中没有显著性的波动；在烫伤后，MAP即显著低于正常组，伤后2h开始逐渐降低，动物进入休克状态，与对照组相比，各时间点均有显著性差异（P〈0．05）；烫伤大鼠腹腔注射给予氢化可的松和异丙嗪后，MAP缓慢升高，伤后3h后显著高于烫伤组（P〈0．05）。结论 MAP可以作为延缓休克发生药物筛选的指标。氢化可的松和异丙嗪可以在一定程度上维持动脉血压，为，临床救治赢得时间。     

脂多糖性肺损伤大鼠血清白细胞介素1β和白细胞介素8的变化及低剂量环磷酰胺的干预作用

目的：观察低剂量环磷酰胺对脂多糖性肺损伤模型大鼠血白细胞介素1β和白细胞介素8的影响，并与地塞米松进行阳性对照。 方法：实验于2003—03／12在遵义医学院外科动物实验室、中心实验、病理实验室进行。取160只SD大鼠随机分为4组（n=40）：环磷酰胺组、模型组、地塞米松组和生理盐水组。除生理盐水组外，其他3组大鼠采用腹腔注射内毒素脂多糖5mg／kg制作肺损伤模型。注射脂多糖后，环磷酰胺组立即腹腔注射1mL环磷酰胺（4mg／kg）；地塞米松组腹腔注射1mL地塞米松（5mg／kg）；模型组腹腔注射1mL生理盐水。生理盐水组腹腔注射生理盐水2mL。各组于模型制作后第1，4，6，8小时分别取lO只采血，以ELISA法测血清中自细胞介素1β和白细胞介素8水平，且于第6小时留取肺组织进行肺组织的病理学光镜检查。 结果：160只大鼠全部进入结果分析。①肺组织的病理学变化：模型组大鼠肺泡腔见大量出血及炎性细胞浸润，支气管上皮剥脱、水肿等，环磷酰胺组和地塞米松组也可见炎细胞浸润、肺萎陷现象，与模型组比较，明显减轻（P〈0．05）。②白细胞介素1β水平：模型组、环磷酰胺组和地塞米松组脂多糖腹腔注射后1h已显著高于生理盐水组，6h达到峰值（P〈0．05）；环磷酰胺组和地塞米松组各时间点均低于模型组（P〈0．05），但两组间差异不显著（P〉0．05）。③白细胞介素8水平：模型组、环磷酰胺组和地塞米松组脂多糖腹腔注射后1h已显著高于生理盐水组，8h达到峰值（P〈0．05）；环磷酰胺组和地塞米松组各时间点均低于模型组（P〈0．05），但两组间差异不显著（P〉0．05）。 结论：低剂量环磷酰胺与地塞米松一样具有明显的抗炎作用，能降低肺损伤大鼠血清白细胞介素1β和白细胞介素8水平，减轻其肺组织损害。     

葛根素对烫伤大鼠早期心肌组织丙二醛、髓过氧化物酶的影响

目的观察葛根素对严重烫伤大鼠早期心肌组织丙二醛(MDA)、髓过氧化物酶(MPO)变化的影响。方法Wistar大鼠88只随机分为正常对照组(n=8)、复苏组(n=40)、治疗组(n=40),并在后两组中复制30%体表面积Ⅲ度烫伤动物模型。在烫伤后1、3、6、12和24h分别在各组中观察心肌组织MDA及MPO含量。电镜下观察组织学形态变化。结果(1)在复苏组中,心肌组织MDA及MPO含量在伤后1h著显升高(P＜0．01),均在伤后12 h达高峰。(2)在治疗组中,上述指标变化与复苏组趋势相同。但与复苏组相比在伤后1、3、6、12 h显著降低(P＜0．05或P＜0．01)。(3)电镜显示,伤后24 h,治疗组心肌组织损伤程度较复苏组减轻。结论葛根素能抑制严重烫伤大鼠心肌组织MDA及MPO的生成,对烫伤早期心肌损伤有保护作用。     

丙酮酸乙酯对烫伤延迟复苏大鼠脾淋巴细胞增殖及凋亡影响

目的观察丙酮酸乙酯对烫伤延迟复苏大鼠脾淋巴细胞增殖及凋亡的影响,并对其机制进行初步探讨。方法72只Wistar大鼠随机分为假烫伤组(n=24)、烫伤组(n=24)和丙酮酸乙酯(3.23mg/ml)治疗组(n=24),分别于伤后1、3和5d活杀大鼠,检测脾淋巴细胞增殖能力及凋亡情况。结果烫伤延迟复苏后1～5d,脾淋巴细胞对丝裂原刺激的增殖反应明显受抑制(P均<0.05);在烫伤后第1d,脾CD3+CD4+T细胞凋亡显著增加(P<0.05)。应用丙酮酸乙酯治疗能够明显恢复烫伤后1～5d脾淋巴细胞的增殖反应(P<0.05),同时烫伤后第1d的凋亡明显下降(P<0.05)。结论丙酮酸乙酯能够有效恢复烫伤延迟复苏后脾淋巴细胞的增殖能力,并减轻脾淋巴细胞凋亡。     

氧自由基对烫伤大鼠延迟复苏后肠上皮细胞凋亡的影响

目的：观察烧伤延迟复苏后肠粘膜上皮细胞凋亡的发生规律及与氧自由基损伤的关系。方法：１５０只雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为Ａ组（烫伤立即复苏组,ｎ＝６０）、Ｂ组（烫伤延迟复苏组,ｎ＝５０）、Ｃ组（Ｎ－乙酰半胱氨酸（ＮＡＣ）治疗组,ｎ＝２０）和Ｄ组（别嘌呤醇治疗组,ｎ＝２０）。３０％总体表面积（ＴＢＳＡ）Ⅲ度烫伤大鼠伤后６小时进行复苏。观察伤后肠粘膜上皮细胞凋亡发生规律,测定Ａ、Ｂ组伤后３、６、１２、２     

烫伤延迟复苏后小肠固有层和上皮内淋巴细胞凋亡率及凋亡相关基因表达的变化

目的：探讨延迟复苏对烫伤大鼠小肠固有层淋巴细胞(LPL)和上皮间质淋巴细胞(IEL)凋亡率及凋亡相关基因表达的影响。方法：Wistar大鼠30只,单盲法随机分为立即复苏组(ER,n＝12)和延迟复苏组(DR,n＝12),30％体表面积Ⅲ度烫伤合并延迟复苏模型;6只作为假伤对照。采用DNA电泳、片段百分率测定及逆转录—聚合酶链反应(RT—PCR)观察伤后LPL、IEL凋亡百分率(ap％)及ICE、bcl—2基因mRNA表达变化。结果：伤后LPL、IEL的ap％均显著高于伤前(P均＜0．01);伤后12hDR组LPL、IEL的ap％显著高于ER组(P均＜0．01)。伤后6h LPL、IEL基因组DNA电泳均可见凋亡特征性梯形条带。烫伤后LPL、IEL ICE基因表达均明显增强,且DR组显著高于ER组(P＜0．05或P＜0．01)。LPL、IEL伤前bcl—2mRNA强表达,伤后极弱表达;DR组相同时问点表达显著弱于ER组(P＜0．05或P＜0．01)。结论：促凋亡基因ICE表达增强而抑凋亡基因bcl—2表达减弱,可能是烫伤延迟复苏后LPL、IEL凋亡剧增的重要原因之一。     

烫伤延迟复苏后肠上皮细胞凋亡诱导肠道内毒素和细菌移位

目的 :探讨烫伤延迟复苏后肠上皮细胞凋亡对肠道内毒素和细菌移位的影响。方法 :Wistar大鼠 110只 ,30 %总体表面积 ( STBA) 度烫伤 ,立即或伤后 6 h进行复苏。观察伤后肠上皮细胞凋亡率 ( ap% )变化 ,并测定了门静脉和体循环内毒素及肠系膜淋巴结 ( ML N)细菌移位率和移位量变化。结果 :电泳、原位末端标记( TU NEL )法和电镜均观察到伤后肠上皮凋亡梯形带和凋亡阳性细胞增多。延迟复苏组肠上皮细胞凋亡发生早且更严重 ;其门静脉内毒素水平及 ML N细菌移位量均显著高于立即复苏组 ( P<0 .0 1) ;门静脉内毒素变化与肠黏膜 ap%成显著正相关 (烫伤后立即复苏组 r=0 .936 ,P<0 .0 1;烫伤后延迟复苏组 r=0 .899,P<0 .0 5 )。结论 :烫伤后延迟复苏使肠黏膜上皮发生病理性凋亡 ,可能导致肠道细菌和内毒素移位增加。     

Reperfusion injury in burned rats after delayed fluid resuscitation.

Organ failure from ischemic injury is common in deaths that are due to burn when fluid resuscitation is not performed. Organ perfusion after a delay in resuscitation, however, may induce or even accelerate ischemic organ damage. To study this phenomenon, 40 rats were classified (n = 10) to serve as normal control, burn with no resuscitation, burn with early fluid resuscitation, and burn with delayed resuscitation groups. A modified Walker burn model was used to inflict 50% total body surface area scald burns on the rats. Cellular energy metabolism and tissue water content of several vital organs were measured at 8 hours after burn injury. Adenosine triphosphate, total adenine nucleotides, and energy charge in liver, heart, and kidney tissues were significantly lower (p less than 0.05) with delayed fluid resuscitation compared with early resuscitation. Furthermore, in heart and kidney tissues adenosine triphosphate, total adenine nucleotides, and energy charge were significantly lower in the delayed resuscitation group compared with the group that received no fluid resuscitation. This indicates that heart and kidney tissue are more viable at 8 hours after burn injury, with no fluid resuscitation compared with delayed resuscitation. Water content of lung and muscle tissue were significantly lower (p less than 0.05) in the burn group that received no fluid resuscitation compared with that in early and delayed resuscitation groups. Water content of muscle was significantly greater with delayed resuscitation compared with the early resuscitation group. Results indicate that delayed fluid resuscitation in cases of burn shock may disrupt the cellular energy metabolism in some vital organs and cause skeletal muscle edema.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)     

Efficacy of leupeptin, superoxide dismutase, and verapamil in modulating delayed reperfusion damage after burn injury.

Reperfusion damage has been identified as an important factor in multiorgan failure after severe burn injury. We wondered if leupeptin, a protease inhibitor, superoxide dismutase (SOD), a scavenger of free oxygen radicals, or verapamil, a calcium antagonist, would protect the cellular energy metabolism when they were given with fluid resuscitation that was delayed 6 hours after a severe burn injury. Fifty male rats weighing 280 to 300 gm received a 50% third-degree scald burn. Ten of these received fluid resuscitation at 30 minutes and 1 1/2 hours after injury, and 40 received delayed fluid resuscitation at 6 and 7 hours after injury. Thirty of these 40 rats were given leupeptin (n = 10), SOD (n = 10), or verapamil (n = 10). Heart, liver, and kidney tissue samples were obtained 8 hours after injury; adenosine triphosphate, adenosine diphosphate, and adenosine monophosphate were measured; and the energy charge potential was calculated. Tissue water content (TWC) in lung and skeletal muscle was also determined. The adenine nucleotide pool and the energy charge potential in heart, liver, and kidney tissue were all significantly decreased (p < 0.01) in rats receiving delayed fluid resuscitation compared with those receiving early resuscitation. Leupeptin was effective in protecting the heart against reperfusion damage, and verapamil and leupeptin showed some efficacy in protecting kidney tissue. Liver tissue, however, showed no protective response with therapy. TWC was significantly decreased (p < 0.01) in skeletal muscle with SOD treatment, and though all treatments appeared to keep lung water content reduced, none was significant at p < 0.01. We thus conclude that both the decreases in heart and kidney adenine nucleotides and the increase in TWC that are caused by delayed fluid resuscitation can be attenuated with appropriate pharmacologic agents.     

褪黑激素对严重烧伤早期肾功能损害的保护作用

目的观察褪黑激素（MLT）对严重烧伤大鼠肾组织氧化应激损伤和肾功能不全的保护作用及机制。方法将70只SD大鼠随机分为假手术组（10只）、烫伤组（用背部浸入沸水中30S造成30％总体表面积Ⅲ度烫伤模型，30只）和MLT治疗组（伤后立即腹腔注射MLT 10mg／kg，每12h补充注射1次，30只）。检测各组伤后6、24和72h肾组织丙二醛（MDA）和还原型谷胱甘肽（GSH）含量、血浆肌酐（BCr）及尿素氮（BUN）水平，以及伤后6h肾组织谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和髓过氧化物酶（MPO）活性。结果烫伤后各时间点肾组织MDA水平明显升高，而GSH含量则显著下降，二者变化均以伤后6h最明显（P均〈0．01）。BCr及BUN水平在烧伤后6h达高峰（P均〈0．01），然后呈进行性下降。单次MLT治疗使伤后6h肾组织MDA水平降低27．8％（P〈0．01），使GSH含量提高44．4％（P〈0．05），并抑制BCr及BUN水平（P〈0．05和P〈0．01）。连续注射MLT对以上各指标均无明显影响。此外，MLT使烧伤后6h肾组织MPO水平降低30．2％（P〈0．05），但对GSH-Px活性无明显影响。结论30％Ⅲ度烫伤可导致大鼠肾脏发生明显的氧化应激损伤（伤后72h内）及急性肾功能不全（伤后24h内），单次MLT治疗对二者均具有一定的保护作用，可能与MLT具有强大的自由基清除能力及抑制中性粒细胞聚集有关。