小鼠月经生理模型的探讨

目的 根据衰老的自由基理论，建立一种简便易行的脑老化模型。方法 以^60Co照射大鼠建立急性脑老化模型、D-半乳糖注射大鼠建立亚急性脑老化模型，5月龄大鼠作为青年对照组：通过Y型迷宫测定大鼠的学习与记忆能力：外周血SOD和MDA检测大鼠的抗氧化能力及脂质过氧化情况；通过光镜观察脑组织神经细胞的丢失、坏死及退行性变。结果 Y型迷宫测定表明，两个模型组大鼠的学习和记忆能力比对照组明显下降；与对照组相比，外周血中SOD明显降低，而MDA则明显升高；光镜下，在模型组不同脑区均能观察到神经元的丢失和坏死，以海马和皮质最明显。结论 成功建立了一种简便易行的急性脑老化模型：为脑老化机制的研究提供了新的实验手段。     

实验性颅脑伤大鼠脑组织SOD和MDA的变化

目的：观察实验性颅脑伤大鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的动态变化，探讨SOD和MDA在颅脑伤病理损伤机制中的作用。方法：采用自由落体致伤方法制备大鼠颅脑伤模型(模型组)，并以正常大鼠作对照(对照组)，分别于造模后3、5和7d处死动物取脑，测定海马和皮质中SOD活力和MDA含量。结果：模型组大鼠海马SOD活力在3个时间点均显著低于对照组，而MDA含量均显著高于对照组；模型组大鼠皮质SOD活力在造模后3、5d时显著低于对照组，而MDA含量则显著高于对照组，到7d时二者与对照组均无明显差异。结论：大鼠颅脑伤时脑组织SOD活力显著降低，而MDA含量则显著增高，提示SOD和MDA可能参与颅脑伤病理损伤机制并在其中发挥重要作用。     

巴戟天多糖对抑郁症大鼠氧化应激及认知行为的影响

目的探讨巴戟天多糖对实验性抑郁症大鼠模型氧化应激损伤及认知行为的影响。方法采用水沉纯提法提取巴戟天多糖，选择24只SD大鼠随机分为对照组、模型组及干预组，模型组及干预组建立实验性抑郁症大鼠模型，干预组给予巴戟天多糖干预，采用T迷宫实验观察三组大鼠认知行为变化，采用比色法检测三组大鼠血清MDA及SOD水平，采用荧光免疫法检测三组大鼠脑组织海马区神经元数目，比较三纽大鼠T迷宫实验错误次数、血清MDA及SOD水平以及海马区神经元数目差异。结果干预组T迷宫错误次数低于模型组、高于对照组，海马区神经元数目低于模型组，高于对照组，血清MDA水平低于模型组，高于对照组，血清SOD水平高于模型组及对照组。结论巴戟天多糖能够减轻抑郁症大鼠体内氧化应激反应，减轻海马区神经元损伤，改善实验性抑郁症大鼠认知行为障碍。     

何首乌水提液对老化模型大鼠脑组织内抗氧化酶表达的影响

目的 观察何首乌水提液对老化模型大鼠海马、皮质超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和丙二醛(MDA)含量的影响.方法 采用氟派啶醇致大鼠获得性老化动物模型,用盐酸丁咔地尔腹腔注射作阳性对照,测定空白对照组、模型组、阳性对照组、何首乌大、小剂量组海马和皮质SOD、GSH-PX和MDA含量.结果 模型组SOD、GSH-PXH量较空白对照组均显著降低(P＜0.01),MDA含量均显著升高(P＜0.01);与阳性对照组比较,何首乌大、小剂量组可显著提高大鼠海马、皮质SOD、GSH-PX含量(P＜0.01),同时何首乌大剂量组MDA含量较阳性对照组显著降低(P＜0.01),何首乌小剂量组MDA含量较阳性对照组明显升高(P＜0.05).结论 何首乌是通过上调抗氧化酶SOD和GSH-PX、下调过氧化物MDA表达起到延缓衰老的作用.     

益气聪明汤及其加减方对D-半乳糖致衰老模型大鼠cAMP/PKA/CREB信号转导通路的影响

目的:观察补肾益气方药益气聪明汤、加减益气聪明汤对D-半乳糖致衰老模型大鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量及海马PKA、CREB、c-fos蛋白表达的影响。方法:雄性SD大鼠随机分为青年对照组、D-半乳糖致衰老组(简称衰老组)、益气聪明汤组及加减益气聪明汤组。除青年对照组大鼠外,其余各组大鼠以大剂量D-半乳糖腹腔注射制造衰老模型。Morris水迷宫法观察大鼠空间学习记忆能力;分光光度法检测大鼠脑组织SOD活性以及MDA含量;Western-blot法检测大鼠海马PKA、CREB、c-fos蛋白表达的变化;同时观察补肾益气方药对衰老模型大鼠上述指标的影响。结果:与青年对照组相比,衰老组大鼠脑SOD活力明显降低(P0.05),MDA含量显著升高(P0.05),PKA、CREB、c-fos的蛋白表达水平明显降低(P0.05)。与衰老组大鼠相比,益气聪明汤组和加减益气聪明汤组可改善衰老模型大鼠退化的空间学习记忆能力(P0.05);提高大脑SOD活力,降低MDA含量(P0.05);显著上调衰老模型大鼠海马组织PKA、CREB、c-fos的蛋白表达水平(P0.05)。结论:补肾益气方药益气聪明汤、加减益气聪明汤可能是通过调节与学习记忆相关的cAMP/PKA/CREB信号转导通路关键分子(PKA、CREB、c-fos)的表达,从而改善衰老大鼠空间学习记忆能力,延缓衰老。     

血根碱调节SphK1/S1P信号通路对缺血性脑卒中大鼠的神经保护作用

目的：探讨血根碱调节SphK1/S1P信号通路对缺血性脑卒中大鼠的神经保护作用。方法：将75只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、血根碱组、PF543组（SphK1抑制剂）、血根碱+PMA(SphK1激活剂)组，每组15只。除假手术组外，其余各组均建立缺血性脑卒大鼠模型。造模后评估各组大鼠神经功能，苏木精—伊红（HE）染色法观察大鼠海马组织病理形态变化。检测大鼠脑组织含水量和脑组织丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）水平。采用TTC法检测脑梗死面积，TUNEL法检测神经元凋亡率，蛋白质免疫印迹（western blotting）法检测Bax、Bcl-2、SphK1蛋白表达。结果：模型组大鼠海马神经元严重损伤，大鼠神经功能缺损评分、脑组织含水量、MDA水平、Bax、SphK1蛋白表达水平、脑梗死面积、神经元凋亡率显著升高，脑组织SOD、CAT活性、Bcl-2蛋白表达水平显著降低（P<0.05）；血根碱组和PF543组大鼠神经功能缺损评分、脑组织含水量、MDA水平、Bax、SphK1蛋白表达水平、脑梗死面积、神经元凋亡率显著降低，脑组织SOD、CAT活性、B...     

参附注射液对β淀粉样蛋白所致阿尔茨海默病大鼠认知行为和脑组织氧化应激的影响

目的观察参附注射液(SF)对β淀粉样蛋白(amyloid beta,Aβ)所致阿尔茨海默病大鼠认知行为和脑组织氧化应激的影响,探讨SF对阿尔茨海默病的可能治疗作用及其机制。方法30只健康SD大鼠,经过水迷宫训练后随机分为3个组(10只/组)。正常对照组:侧脑室注入蒸馏水(distilled water,DW)5μL;模型对照组:侧脑室注入Aβ5μL;Aβ+SF组:侧脑室注入Aβ5μL,腹腔注射SF(10mL/kg,每日1次)。正常对照组和模型对照组腹腔注射等量生理盐水(NS),连续14d,每日1次。2周后观察各组大鼠水迷宫潜伏期值及海马、皮质区超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活力以及丙二醛(MDA)的表达水平。结果Aβ+SF组大鼠水迷宫潜伏期明显缩短,与模型对照组比较海马及皮质SOD、GSH-PX活力明显升高(P<0.05),MDA水平明显降低(P<0.05)。结论SF能明显增加脑组织中SOD和GSH-PX的活力,减少脑组织MDA蓄积,从而改善阿尔茨海默病大鼠认知行为。     

文冠果果壳乙醇提取物对大鼠学习记忆障碍的改善作用

目的研究文冠果果壳乙醇提取物（EEHXS）对双侧颈总动脉结扎大鼠学习记忆障碍的改善作用及其作用机制。方法用DigBehv动物行为分析系统分析大鼠的自发活动，Y迷宫法及Morris水迷宫法测试大鼠的学习记忆能力，比色法检测大脑组织中超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）、乙酰胆碱酯酶（AchE）的水平，尼氏染色观察海马组织形态学改变。结果模型组大鼠自发交替反应正确率、空间记忆能力和工作记忆能力显著降低，SOD活性显著下降，MDA和AchE水平显著升高，海马神经元变性、脱落；EEHXS显著改善大鼠的学习记忆能力、提高SOD活性、降低MDA和AchE水平，显著抑制海马神经元的变性及脱落。结论EEHXS对双侧颈总动脉结扎大鼠的学习障碍有显著的改善作用，其作用机制可能与改善胆碱能神经功能及降低自由基水平有关。     

跑台运动对D-半乳糖致阿尔茨海默病模型大鼠干预的实验研究

目的:探讨8周跑台运动对D-半乳糖致阿尔茨海默病(AD)模型大鼠空间学习记忆能力的影响及其相关机制。方法:40只雄性SD大鼠随机分为正常对照(NC)组、运动对照(EC)组、AD模型对照(AC)组、AD模型训练(AE)组,每组10只。AC组与AE组每日腹腔注射1次D-半乳糖(150mg/kg),共8周。同时AE组和EC组进行连续8周、每周6d的中等强度的跑台训练。8周后,采用Morris水迷宫测试大鼠学习记忆能力,HE染色检测海马CA1区神经元形态,化学比色法测定海马组织超氧化物歧化酶(SOD)活性,丙二醛(MDA)含量和谷胱甘肽过氧化氢酶(GSH)活性。结果:与AC组相比,AE组大鼠在Morris水迷宫实验中的逃避潜伏期明显缩短,120s内在平台所放置的目标象限停留时间和穿越平台区域次数明显增多(P<0.01);AE组海马神经元病理损伤形态明显改善;AE组海马组织SOD活性明显提高(P<0.01),MDA含量显著降低(P<0.01),但GSH活性表达无明显差异(P>0.05)。结论:8周跑台训练可以改善AD大鼠的学习记忆能力,减少海马神经元凋亡,其机制可能是上调海马组织的SOD活性,降低MDA含量,进而促进神经元存活。     

Nrf2通路活化在胆红素脑病新生大鼠海马神经元损伤中的作用

  目的   探讨核因子NF-E2相关因子（nuclear factor-erythroid 2-related factor, Nrf2）通路活化对胆红素脑病新生大鼠海马神经元损伤的影响。   方法   将新生SD大鼠随机分为对照组、模型组和Nrf2激活剂特丁基对苯二酚（tert-Butylhydroquinone, TBHQ）组,每组20只。经小脑延髓池注射胆红素溶液,建立新生大鼠胆红素脑病模型,观察大鼠神经行为变化,并测定脑组织含水量;采用尼式（Nissl）染色观察海马神经元损伤;TUNEL染色观察海马神经元凋亡情况;比色法检测海马组织Caspase-3活性;化学法检测海马组织丙二醛（MDA）、还原型谷胱甘肽（GSH）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性;qRT-PCR和Western blot检测海马组织Nrf2和血红素氧合酶1（heme oxygenase-l, HO-1）mRNA和蛋白表达水平。   结果   小脑延髓池注射胆红素后模型组和TBHQ组幼鼠出现不同程度神经异常行为表现,而对照组幼鼠无明显神经异常行为。与对照组比较,模型组幼鼠神经元损伤严重,脑组织含水量以及海马神经元凋亡水平、Caspase-3活性以及MDA含量升高（P<0.01）,而SOD活性、GSH含量以及Nrf2 和HO-1 mRNA和蛋白表达水平降低（P<0.05）;与模型组比较,TBHQ组幼鼠神经元损伤得到改善,脑组织含水量、海马神经元凋亡水平、Caspase-3活性以及MDA含量均降低（P<0.01）,而SOD活性、GSH含量以及Nrf2 和HO-1 mRNA和蛋白表达水平升高（P<0.05）。   结论   Nrf2通路活化能改善胆红素脑病新生大鼠海马神经元损伤,抑制神经元凋亡和机体氧化反应。      

腺病毒介导p21WAF-1联合GM-CSF基因对胃癌荷瘤裸鼠的抑瘤作用的研究

目的探讨腺病毒介导p21^WAF-1联合GM-CSF基因对胃癌荷瘤裸鼠的抑瘤作用。方法将32只裸鼠建立人胃癌MKN-45细胞移植瘤动物模型。成瘤后动物随机平均分为4组：对照组、p21^WAF-1基因治疗组、GM-CSF基因治疗组、p21^WAF-1＋GM-CSF联合基因治疗组;分别由皮下瘤体内注射重组体腺病毒0．1mL Ad-LacZ、Ad-p21、Ad,GM、Ad-p21＋GM,每周1次,共3次。3个月后观察肿瘤抑制率、肿瘤体积和动物存活情况以及肿瘤组织病理切片。结果（1）联合基因治疗组动物的肿瘤生长受到明显抑制。与单独给予p21^WAF-1和GM-CSF基因治疗动物相比。抑制作用显著提高（P〈0．05）;（2）荷瘤小鼠生存期观察,与对照组相比,p21^WAF-1基因组和GM-CSF基因组有所延长,联合基因治疗组显著延长（P〈0．01）;（3）病理切片示各基因治疗组肿瘤组织均有出血、坏死和炎性细胞浸润,联合基因治疗组有片状坏死。结论p21^WAF-1和GM-CSF两种基因联合治疗胃癌,可以有效抑制肿瘤生长、延长生存期,为胃癌的治疗提供新的思路。     

何首乌饮对衰老大鼠脑组织细胞Rb/p53信号转导通路影响

目的：检测Rb、p16、p53、p19、p21在衰老大鼠脑组织中的表达,探讨何首乌饮抗大鼠脑组织衰老的机制。方法：选用8周龄SD大鼠84只,体重180-220g,随机分为正常组、模型组、何首乌饮高、中、低剂量组、何首乌丸组、自然恢复组,每组12只,采用D-半乳糖连续腹腔注射建立亚急性衰老大鼠模型。免疫组织化学、W estern blotting和RT-PCR法检测pRb、p16、p53、p19、p21在大鼠脑组织的表达差异。结果：模型组大鼠脑组织Rb、p53、p16、p19、p2 l表达明显增加,pRb表达明显减少（P〈0.05）;何首乌饮、何首乌丸组能显著提高pRb的表达,降低Rb、p53、p16、p19、p2 l表达（P〈0.05）,何首乌饮高剂量组调节作用大于其他各组（P〈0.05）。结论：何首乌饮调节脑组织Rb/p53信号转导通路相关基因和蛋白表达起到延缓衰老的作用。     

In vitro effect of p21WAF-1/CIP1 gene on growth of human glioma cells mediated by EGFR targeted non-viral vector GE7 system

Objective: To construct the EGFR targeted non-viral vector GE7 system and explore the in vitro effect of p21WAF-1/CIP1 gene on growth of human glioma cells mediated by the GE7 system. Methods: The EGFR targeted non-viral vector GE7 gene delivery system was constructed. The malignant human glioma cell line U251MG was transfected in vitro with β-galactosidase gene(reporter gene) and p21WAF-1/CIP1 gene (therapeutic gene) using the GE7 system. By means of X-gal staining, MTS and FACS, the transfection efficiency of exogenous gene and apoptosis rate of tumor cells were examined. The expression of p21WAF-1/CIP1 gene in transfected U251MG cell was examined by immunohistochemistry staining. Results: The highest transfer rate of exogenous gene was 70%. After transfection with p21WAF-1/CIP1 gene, the expression of WAF-1 increased remarkably and steadily; the growth of U251MG cells were inhibited evidently. FACS examination showed G1 arrest. The average apoptosis rate was 25.2%. Conclusion: GE7 system has the ability to transfer exogenous gene to targeted cells efficiently, and expression of p21WAF-1/CIP1 gene can induce apoptosis of glioma cell and inhibit its growth.     

葛根素对急性乙醇中毒大鼠脑内阿片肽和多巴胺的调控作用

目的： 检测葛根素对急性乙醇中毒大鼠皮层、小脑、海马和纹状体内阿片肽和多巴胺（DA）表达水平的调控作用,为临床防治乙醇中毒和开发中药葛根提供依据。方法： 雄性SD大鼠24只随机分为对照组、乙醇中毒组和葛根素组,每组8只,采用放射免疫法检测各组大鼠皮层、小脑、海马和纹状体内β-内啡肽（β-EP）、强啡肽（DnyA）和亮脑啡肽（L-EK）表达水平,采用高效液相色谱法检测各组大鼠各脑区DA、多巴克（DOPAC）和高香草酸（HVA）的表达水平,并计算（DOPAC+HVA）/DA的比值。结果：与对照组比较,乙醇中毒组和葛根素组大鼠皮层内β-EP、DnyA和L-EK表达水平降低(P<0.01),皮层、小脑、海马和纹状体内 DA、DOPAC和HVA表达水平均升高 (P<0.01);与乙醇中毒组比较,葛根素组大鼠皮层内β-EP、DnyA和L-EK表达水平升高(P<0.05,P<0.01),DA(P<0.01)、DOPAC(P<0.01)和HVA表达水平均降低,小脑、海马和纹状体内所有指标表达水平均降低(P<0.05,P<0.01),皮层、小脑和海马内（DOPAC+HVA）/DA 比值升高,纹状体内该比值降低（P>0.05）。结论：葛根素对急性乙醇中毒造成的脑组织损伤有保护作用,其机制可能与葛根素对脑内阿片肽和DA的调控有关。     

脑衰老大鼠游泳运动后行为能力及海马结构、抗氧化能力的观察

目的观察脑衰老大鼠游泳运动后海马的形态结构、抗氧化能力及行为能力,探讨运动延缓脑衰老的效果及其机制。方法健康雄性SD大鼠30只,分为对照组、模型组和游泳组,第9周进行学习记忆能力及运动协调能力测试,第10周测定海马丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性,透射电镜观察海马神经细胞超微结构。结果游泳组大鼠海马神经元仅有少量核轻度固缩;学习记忆错误次数显著减少（P〈0.01）,悬吊时间明显增加（P〈0.05）;海马SOD活性有增高趋势,MDA含量显著降低（P〈0.01）,GSH-Px活性显著增高（P〈0.01）。结论游泳运动对大鼠海马神经细胞结构具有良好的影响,能显著改善脑衰老引起的学习记忆和协调肌肉活动等行为能力的下降。     

老年大鼠大脑皮质、海马和小脑的线粒体DNA缺失突变

目的】测定老年大鼠脑缺失型mtDNA比例,探讨mtDNA缺失与脑衰老的关系,为研究其分子机制提供基础资料。【方法】用碱裂解法抽提青年(3个月)SD大鼠10只和老年(24个月)SD大鼠17只的大鼠皮质、海马和小脑的mtDNA。稀释PCR法测mtDNA的缺失比例。【结果】青年鼠和老年鼠大脑皮质、海马和小脑均存在缺失型mtDNA,缺失片段为4834bp。青年鼠各脑区缺失型mtDNA比例分别为0000156%、0000148%、0000152%;老年鼠上述3个脑区缺失型mtDNA比例分别是0001446%、0001484%、0000987%,是青年鼠的9、10和65倍。【结论】衰老时脑缺失型mtDNA比例增多,以海马的mtDNA缺失增多最为显著。提示mtDNA缺失可能是神经元衰老性退变的主要因素之一。     

当归多糖对造血干细胞SIRT1、p53和p21表达的影响

目的 研究当归多糖（ASP）基于辐射所致小鼠衰老造血干细胞（HSCs） SIRT1、p53和p21蛋白表达的影响,探讨ASP基于调控HSCs衰老的可能机制。方法72只SPF级C57BL/6J小鼠随机纳入对照组、模型组和ASP组。模型组通过X线3.0G y/8F全身照射建立小鼠HSCs衰老模型;ASP组在照射期间给予ASP灌胃;对照组与模型组予生理盐水。经免疫磁珠法分选小鼠HSCs,采用流式细胞术检测细胞周期,通过β-半乳糖苷酶（SA-β-Gal）染色观察衰老细胞;经混合集落培养（CFU-Mix）观察HSCs自我更新及定向分化潜能;Western blot检测SIRT1、p53、p21蛋白表达。结果与对照组比较,X线照射可能显著增加模型组HSCs G1期细胞比例、SA-β-Gal染色阳性细胞率、p53及p21蛋白表达（P<0.05）,降低SIRT1表达和CFU-Mix形成能力（P<0.05）。与模型组比较,ASP会抑制衰老HSCs G1期细胞比例、SA-β-Gal染色阳性细胞率、p53及p21蛋白表达增加（P<0.05）,同时SIRT1表达增加、CFU-Mix能力增强（P<0.05）。结论ASP可能上调SIRT1表达、下调p53及p21表达,从而可能延缓小鼠HSCs衰老。     

重组人促红细胞生成素对衰老大鼠脑组织不同部位BDNF表达的影响

目的 探讨重组人促红细胞生成素(rhEPO)对衰老大鼠脑组织内不同部位脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响.方法 40只2月龄雄性SD大鼠,随机分为4组:阴性对照组(N),D-半乳糖组(D),EPO干预组(E),阳性对照组(P),每组10只.应用免疫组化染色对比观察外源性rhEPO干预后D-半乳糖衰老大鼠脑组织不同部位BDNF表达的变化.结果 不同组大鼠比较发现相同部位BDNF表达存在显著差异:D组大鼠海马CA1、CA3、DG及额叶皮质区BDNF阳性细胞计数较N组相同部位明显减少(P<0.05),而应用rhEPO干预后的E组和P组大鼠海马CA1、CA3、DG及大脑皮质运动区BDNF阳性细胞计数较D组及N组相同部位显著增加(P<0.05);但E组和P组比较无差异.同组大鼠不同部位BDNF阳性细胞比较发现:同组大鼠不同部位BDNF阳性细胞个数存在显著不同(P<0.05),其中额叶皮质区阳性细胞数最多,其次是海马CA3区,海马DG区,海马CA1区.结论 rhEPO对增强大鼠神经细胞BDNF的表达具有普遍性,提示rhEPO可能能够通过增强内源性BDNF对神经系统衰老发挥保护作用.     

Expression of thrombin and its associated protein in cerebellum of human and rat after intracerebral hemorrhage

Background Intracerebral hemorrhage （ICH） can cause brain damage through a number of pathways.The purpose of the study was to explore the effect of thrombin, protease nexin-1 （PN-1） and protease activated receptor-1 （PAR-1） in rat and human cerebellum after ICH.Methods A model of ICH was produced in adult Sprague-Dawley rats by direct injection of autologous blood （50 μl） into caudate nucleus.Patients with injured hemorrhage were also enrolled in this study.Different expressions of thrombin,PAR-1, PN-1 were detected in rat and human cerebellum by immunohistochemistry and in situ hybridization.Results In rat cerebellum, thrombin protein significantly increased at 6 hours and reached the maximum 2 days afterICH.The expression of PAR-1 protein reached the maximum at 24-48 hours, and then began to decrease.The expression of PN-1 protein reached the maximum at 3 hours, decreased somewhat after that and increased a little at 5days after ICH.While in human cerebellum, the changing tendency of thrombin, PAR-1 and PN-1 was almost conform to the rat.Conclusion In cerebellum, thrombin can activate PAR-1 expression after ICH, and PN-1 appears quickly after ICH in order to control the deleterious effect of thrombin.