硫酸软骨素酶ABC对大鼠脊髓损伤后硫酸软骨素蛋白多糖与生长相关蛋白43表达的影响

目的:探讨硫酸软骨素酶ABC对严重的大鼠脊髓损伤蛋白多糖及生长相关蛋白43(GAP-43)基因表达的影响。方法:制作大鼠脊髓横断伤模型,分为脊髓损伤组和脊髓损伤治疗组,给于治疗组硫酸软骨素酶ABC鞘内注射,用免疫荧光组织化学观察硫酸软骨素蛋白多糖(CSPGs)的表达,半定量RT-PCR、Western印迹法观察GAP-43 mR- NA及蛋白的表达。结果:治疗组与损伤组比较,CSPGs的表达减少,差异具有显著性,而GAP-43mRNA及蛋白表达增多。结论:硫酸软骨素酶ABC能够裂解CSPGs,改善脊髓损伤区的微环境,促进GAP-43 mRNA及蛋白的表达,是修复脊髓损伤和促进神经再生的机制之一。     

硫酸软骨素酶ABC在中枢神经系统中促进神经再生的作用

中枢神经系统(CNS)损伤后因胶质瘢痕形成而导致神经元的轴突不能再生,功能恢复不良.胶质瘢痕的重要组分是硫酸软骨素蛋白聚糖(CSPGs),其单独或与其它细胞外基质结合,导致向损伤部位延伸的轴突在胶质瘢痕处停止,而且CSPGs在神经再生时间窗关键期末可降低轴突生长的可塑性.近年研究发现硫酸软骨素酶ABC(chondroi...     

硫酸软骨素蛋白聚糖与脊髓损伤轴突再生

脊髓损伤后传导束的纤维不能有效再生是脊髓损伤后修复与功能重建的难点之一，其中屏障之一是神经胶质瘢痕，主要由星形胶质细胞和硫酸软骨素蛋白聚糖（chondroitin sulfate proteoglycans，CSPGs）组成，轴突不能穿过神经胶质而再生，屏障导致营养不良，再生受阻。目前有关胶质瘢痕的形成过程与调控、CSPGs参与胶质瘢痕形成的机制、以及如何有效地控制瘢痕的形成从而促进轴突再生，仍存在许多未知领域。     

Chondroitinase对成年大鼠脊髓完全性横断损伤后胶质瘢痕的影响

目的研究Chondroitinase(chABC)对成年大鼠脊髓完全性横断性损伤(spinal cord injury,SCI)后胶质瘢痕及纤维浸润的长期影响。方法 Wistar大鼠24只,在第10胸段脊髓(T10)给予破坏脊膜的完全性横切术,然后随机分为2组,在SCI处分别给予chABC或生理盐水。14周后,脊髓横断从胸9至胸11(10mm组织块)连续切片,首先用Trichrome组织学染色切片确定SCI中心及距中心头侧和尾侧各500μm位置,Trichrome染色和免疫组织化学染色测量损伤脊髓中胶原蛋白浸润的面积,硫酸软骨素蛋白聚糖(CSPGs)的免疫反应强度。免疫荧光共聚焦显微成像检测pCREB(1:25)和GFAP表达,以及测量在SCI处纵向的最短GFAP阴性距离。结果应用chABC治疗可降低脊髓完全性横断后结缔组织的浸润。在SCI处胶原蛋白的纵向最大浸润距离以及在脊髓横断切片上的浸润面积,在chABC组显著减小(p0.05)。在SCI处纵向的最短GFAP平均阴性距离在chABC组中显著低于未治疗组(p0.05),表明更多的剩余正常组织在SCI后得以保留。chABC还能有效地清除轴突再生的抑制因子CSPGs(p0.05)。结论 Chondroitinase通过减少纤维浸润和胶质瘢痕以及清除抑制性细胞外基质分子CSPGs,可为脊髓损伤后神经功能恢复和轴突再生提供有利的局部环境。     

硫酸软骨素酶ABC联合高压氧预处理对脊髓损伤大鼠后肢运动功能的影响

目的探讨硫酸软骨素酶ABC(ChABC)联合高压氧预处理对成年大鼠脊髓损伤后不同时期后肢运动功能及腓肠肌运动终板内乙酰胆碱酯酶(AChE)含量的影响。方法雌性成年Wistar大鼠80只,体重250～300g,随机分为假手术组(Sham组)、脊髓损伤组(SCI组)、高压氧预处理组(HBOP组)、高压氧预处理后硫酸软骨素酶ABC治疗组(HBOP+ChABC组)各20只。采用脊髓半横断法制作模型,分别于伤后3d、7d、14d和28d随机选取5只大鼠,采用BBB评分(Basso,Beattie and Bresnaban score)法进行行为学观察,评分后经灌注固定,取大鼠患侧下肢腓肠肌,进行酶化学染色并应用Image-Pro Plus 6.0图像分析系统测量腓肠肌中AChE染色阳性部位平均光密度值(AOD值)。结果 Sham组大鼠BBB评分及AChE活性明显高于SCI组(P<0.01),HBOP组与HBOP+ChABC组在术后14d之后BBB评分明显高于SCI组(P<0.05),CHABC+HBOP组在术后28天BBB评分高于HBOP组(P<0.05)。HBOP组患侧腓肠肌AchE活性高于SCI组,HBOP+ChABC组高于HBOP组(P<0.05)。结论高压氧预处理可以改善大鼠患肢的运动功能和提高AChE的活性,联合硫酸软骨素酶ABC作用更强。     

硫酸软骨素蛋白多糖对视皮层γ-氨基丁酸能神经元表达及其抑制性突触传递功能的影响

目的:通过体外观察硫酸软骨素蛋白多糖(CSPGs)对γ-氨基丁酸(GABA)能神经元表达及其抑制性突触传递功能的影响,为探索CSPGs抑制视皮层可塑性的机制提供实验依据。方法:运用硫酸软骨素酶(ChABC)处理体外培养的胎鼠视皮层神经元,降解其CSPGs后应用免疫荧光显色检测CSPGs降解情况及GABA能神经元的表达变化,并用膜片钳检测其自发性微小性抑制性突触后电流(mIPSCs)以观察其抑制性突触传递功能变化情况。结果:0.1 U/ml ChABC处理神经元后,CSPGs被成功降解,GABA能神经元细胞密度、mIPSCs幅度和频率均显著低于正常对照组。结论:CSPGs能促进GABA能神经元表达及其抑制性突触传递功能的成熟,这可能是CSPGs抑制视皮层可塑性的作用机制之一。     

大鼠脊髓半横断损伤后硫酸软骨素蛋白多糖Versican的变化

目的观察大鼠脊髓半横断损伤(hSCI)位点头尾段硫酸软骨素蛋白多糖Versican的表达变化,探讨其与脊髓损伤修复的关系。方法20只成年健康SD大鼠随机分为假手术对照组和脊髓半横断损伤3d、7d和14d组。建立成年SD大鼠脊髓半横断(T9～T10)模型。取损伤位点头尾段T9、T10节段制作冰冻切片,运用Versican抗血清进行免疫组化ABC法染色。分别观察并计数各组前角中Versican阳性细胞数,采用计算机图像分析技术测量免疫阳性产物的平均光密度(A)值。结果Versican阳性产物主要分布于细胞外基质中,前角神经元和胶质细胞的胞浆中也有分布;损伤后前角中Versican阳性神经元和胶质细胞数较对照组明显减少(P<0.05),免疫阳性产物平均A值较对照组明显增加(P<0.05)。结论脊髓半横断损伤后,表达增加的Versican很可能参与损伤后轴突生长被抑制的过程。     

硫酸软骨素酶联合脂肪间充质干细胞治疗大鼠视网膜变性北大核心

背景:有研究发现硫酸软骨素酶降解硫酸软骨素蛋白多糖能够促使视网膜上Müller细胞的移行,但硫酸软骨素酶降解硫酸软骨素蛋白多糖是否能促进脂肪间充质干细胞在视网膜变性大鼠视网膜的移行尚不明确。目的:探讨硫酸软骨素酶降解硫酸软骨素蛋白多糖对脂肪间充质干细胞治疗大鼠视网膜变性的影响。方法:分离并培养人脂肪间充质干细胞,建立视网膜变性大鼠模型,向视网膜变性大鼠视网膜下腔注射脂肪间充质干细胞+硫酸软骨素酶,观察移植后大鼠脂肪间充质干细胞迁移率和视网膜细胞凋亡情况。结果与结论:人脂肪间充质干细胞能够成功培养,Brd U对人脂肪间充质干细胞的标记率达90.0%以上。建模后7 d,视网膜外核层塌陷,光感受器细胞大量外节迸解,外核层贴附在Bruch’s膜上,视网膜呈拱桥样,中央视网膜和外周视网膜均受到损伤;正常大鼠视网膜各层清晰,光感受器细胞排列规律,视网膜色素上皮层完整。脂肪间充质干细胞+硫酸软骨素酶组脂肪间充质干细胞迁移率高于脂肪间充质干细胞组,且2组视网膜细胞凋亡率比较差异无显著性意义。表明硫酸软骨素酶降解硫酸软骨素蛋白多糖可提高人脂肪间充质干细胞在视网膜上的迁移能力。     

大鼠脊髓半横断损伤后Versican及其受体CD44的表达变化

目的探讨大鼠脊髓半横断(hemisected spinal cord injury,hSCI)损伤后14d硫酸软骨素蛋白多糖Versi-can及其受体CD44的表达变化。方法10只成年SD大鼠随机分为正常对照组和术后14d组。建立成年SD大鼠脊髓半横断(T9~T10)模型。14d后取损伤位点头尾段T9、T10节段制作冰冻切片,运用Versican、CD44抗血清进行免疫组化ABC法染色。分别观察并计数脊髓腹角和Ⅰ、Ⅱ板层内Versican、CD44的免疫反应阳性细胞数。结果Ver-sican主要分布于正常大鼠脊髓腹角,CD44主要分布于正常大鼠脊髓Ⅰ、Ⅱ板层和腹角。损伤后14d腹角Versican阳性细胞数较正常组明显下降(P<0.05),Ⅰ、Ⅱ板层和腹角的CD44阳性细胞数也较正常组明显下降(P<0.05)。而手术组损伤侧与未损伤侧Versican和CD44表达水平均无明显差异(P>0.05)。结论大鼠脊髓半横断损伤14d后Versican、CD44表达均明显下降,提示脊髓半横断损伤对脊髓灰质内细胞表达Versican、CD44有影响。     

ChABC联合脂肪源性干细胞对大鼠脱细胞异体神经支架移植后功能恢复的影响

目的:探讨硫酸软骨素酶ABC(chondroitinase ABC,ChABC)与脂肪源性干细胞(Adipose-derived stem cell,ADSC)联合应用对脱细胞异体神经支架移植修复坐骨神经缺损后大鼠运动和感觉功能恢复的影响。方法:成年大鼠随机分为脱细胞坐骨神经(acellular rat sciatic nerve,ARSN)组、ChABC组、ADSC组、ChABC+ADSC组;应用坐骨神经功能指数(SFI)、电生理和胫前肌湿重比检测神经再生和运动功能的恢复;脊神经节HRP逆行标记及患侧足掌皮肤触觉小体HE染色检测感觉功能的恢复。结果:与ARSN组比较,ChABC组、ADSC组和ChABC+ADSC组SFI显著增高,神经传导速度显著增高,动作电位波幅增大,胫前肌湿重比率增高,HRP阳性标记感觉神经元和触觉小体的数量增高(P<0.05)。其中ChABC+ADSC组作用显著优于单独治疗组(P<0.05)。结论:ChABC联合ADSC移植对大鼠坐骨神经缺损脱细胞异体神经支架修复后运动和感觉功能恢复的作用优于单独治疗组。     

纤维蛋白支架移植对大鼠脊髓损伤后神经再生和胶质瘢痕形成的影响

观察纤维蛋白-纤粘连蛋白-层粘连蛋白复合支架移植对大鼠脊髓损伤后神经再生和胶质瘢痕形成的影响,评价该支架移植修复脊髓损伤的可行性。本研究将圆柱状复合支架移植入大鼠脊髓完全横断缺损部位,同时以该模型动物作为对照组。分别于术后4w、8w、12w对动物下肢运动功能进行BBB评分。然后取出支架/脊髓组织,用免疫荧光双标和免疫印迹技术分析损伤部位神经纤维再生和胶质细胞增生情况;并用透射电镜观察支架移植部位的组织学结构。结果显示:术后4～12w支架移植组动物BBB评分明显高于对照组(P<0.05)。于术后4w,移植组可见支架内有少量神经纤维,此后神经纤维逐渐增多,而胶质细胞增生不明显;对照组脊髓损伤局部可见坏死空洞,空洞周边胶质细胞增生明显。免疫印迹检测结果表明,移植组神经丝蛋白(NF-200)相对含量高于对照组;对照组胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的相对含量高于实验组。以上结果提示:纤维蛋白支架移植可促进大鼠脊髓损伤后神经再生,并抑制胶质瘢痕形成。纤维蛋白(原)作为生物材料用于构建修复脊髓损伤的组织工程支架具有良好的应用前景。     

嗅鞘细胞移植对大鼠脊髓半横断损伤后轴突再生及后肢功能恢复的作用

为了对嗅鞘细胞移植治疗大鼠脊髓损伤(spinal cord injury, SCI)后轴突再生及后肢功能恢复进行综合性的评价,本实验采用22只雌性成年SD大鼠,并随机分成A、B、C、D 4组。其中A、B、D组行左侧T11 ～T12节段脊髓半横断手术,然后A组移植嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)悬液;B组移植DMEM/F12培养液;D组移植核荧光试剂(Hoechst33342)标记的嗅鞘细胞,用于鉴定嗅鞘细胞在体内的存活情况;C组作为正常对照组。术后6周内,对大鼠进行BBB评分、IP斜板试验并观察皮质体感诱发电位(cortical somatosensory evoked potential, CSEP)、运动诱发电位(motor evoked potential, MEP)的潜伏期。将辣根过氧化物酶(HRP)注射到横断面尾段脊髓,逆行追踪观察横断面头段脊髓及对侧中脑红核内HRP逆标细胞数,并观察左侧后肢小腿三头肌肌细胞横截面积及直径的变化。结果显示:(1)移植后的OECs数量未见明显减少,细胞核形态较好,细胞未向头、尾侧迁移;(2)移植3周后BBB评分及IP斜板,试验A、B组较C组明显低(P<0.05),但A组明显高于B组(P<0.05);(3)A、B组的CSEP及MEP潜伏期较C组明显延长(P<0.05),但A组要比B组明显缩短(P<0.05);(4)HRP逆行追踪观察到对侧中脑红核大细胞区及脊髓T9 ～T11节段逆标细胞的数量,A组明显多于B组,但A、B组均少于C组;(5)左侧后肢小腿三头肌肌细胞的横截面积及直径,A、B组均较C组减少,但A组减小的幅度明显小于B组。以上结果表明OECs移植能促进半横断脊髓轴突的再生及后肢功能的恢复。     

Chondroitinase: A promising therapeutic enzyme

Abstract

Even after 20 years of granting orphan status for chondroitinase by US FDA, there is no visible outcome in terms of clinical use. The reasons are many. One of them could be lack of awareness regarding the biological application of the enzyme. The biological activity of chondroitinase is due to its ability to act on chondroitin sulfate proteoglycans (CSPGs). CSPGs are needed for normal functioning of the body. An increase or decrease in the level of CSPGs results in various pathological conditions. Chondroitinase is useful in conditions where there is an increase in the level of CSPGs, namely spinal cord injury, vitreous attachment and cancer. Over the last decade, various animal studies showed that chondroitinase could be a good drug candidate. Research focusing on developing a suitable carrier system for delivering chondroitinase needs to be carried out so that pharmacological activity observed in vitro and preclinical studies could be translated to clinical use. Further studies on distribution of chondroitinase as well need to be focused so that chondroitinase with desired attributes could be discovered. The present review article discusses about various biological applications of chondroitinase, drug delivery systems to deliver the enzyme and distribution of chondroitinase among microbes.     

嗅鞘细胞与氯化锂联合修复成年大鼠急性脊髓损伤的实验研究

为观察联合应用氯化锂(LiCl)后,嗅鞘细胞(OECs)移植对大鼠急性脊髓损伤修复效果,并探讨二者之间可能的相互作用,本研究利用多中心急性脊髓损伤打击器(MASCIS impactor)制作大鼠脊髓打击伤模型,然后随机分为OECs组、LiCl组、OECs+LiCl组及空白对照组。分期用实验性脊髓损伤运动功能BBB评分法对后肢运动功能评分,并进行组织学检查,评价及比较各组修复效果。结果显示:OECs组与OECs+LiCl组BBB评分较LiCl组与对照组在2周后各时段有显著性差异(P<0.01);OECs+LiCl组BBB评分在4周后显著高于OECs组(P<0.01);组织学检查观察到OECs组与OECs+LiCl组的组织学改变与LiCl组和对照组有显著性差异,而且OECs+LiCl组相对于OECs组表现出更明显的促神经纤维再生。以上结果提示OECs对脊髓损伤的修复作用在联合LiCl后更加显著,表明二者具有良好的协同作用关系。     

电针刺激对脊髓挫伤模型大鼠神经细胞凋亡的影响

BACKGROUND: Electroacupuncture has promoting effects on the functional recovery of the injured spinal cord, can decrease pain, and elevate postoperative effect after acute spinal cord contusion.  OBJECTIVE: To observe the effect of electroacupuncture on apoptosis in the injured site after spinal cord contusion, and analyze its neuroprotective effects on neurological function in rats with spinal cord contusion. METHODS: A total of 66 adult female Sprague-Dawley rats were randomly divided into: sham surgery group (n=20), spinal cord contusion group (n=20), electroacupuncture stimulation group (n=20) because six rats were excluded due to modeling failure and death. Before model establishment, at 1, 3 days, 1, 2, 3 and 4 weeks after model establishment, motor functions were evaluated by BBB score and the inclined plate test. At 3 days after model establishment, apoptosis of nerve cells could be detected in the site of injury in each experimental group using TUNEL assay. mRNA and protein expression of bax, bcl-2 and caspase-3 was detected surrounding the injury site using RT-PCR and western blot assay. Morphological changes in the site of injury could be observed using hematoxylin-eosin staining. The regeneration of nerve fibers was observed using HRP tracing.  RESULTS AND CONCLUSION: (1) Motor function score was significantly increased at various time points in the 2nd week of treatment in the electroacupuncture stimulation group than in the spinal cord contusion group (P < 0.05). (2) Apoptotic index was significantly lower in the electroacupuncture stimulation group than in the spinal cord contusion group at 3 days after model establishment (P < 0.05). (3) mRNA and protein expression of bax and caspase-3 was significantly lower in the electroacupuncture stimulation group than in the spinal cord contusion group at 72 hours (P < 0.05); bcl-2 gene and protein expression was significantly higher (P < 0.05). (4) The number of HRP-positive nerve fibers was highest in the sham surgery group, followed by electroacupuncture stimulation group, and lowest in the spinal cord contusion group at 4 weeks (P < 0.05). Results indicated that electroacupuncture plays a protective role on the spinal cord contusion by reducing apoptosis of nerve cells at the site of injury.      

大鼠脊髓全横断损伤模型标准化的初步探索

目的:对比研究两种脊髓全横断模型大鼠的后肢运动功能评分和病理学特征,探索建立标准化的脊髓全横断模型。方法:成年雌性SD大鼠60只,随机分为A组(n=12)、B组(n=24)和C组(n=24),每组再随机分为术后7、14、28d3小组。以T9椎体为中心,A组行椎板切除,为假手术对照组;B、C两组行脊髓全横断,造成脊髓急性损伤模型,其中B组采用常规外科方法造模,C组采用标准化显微操作技术造模。各小组于术后7、14和28d行后肢运动功能BBB评分,然后采用过量麻醉处死大鼠,经心脏灌注取材,切片行HE染色。观测脊髓横断处瘢痕组织厚度、脊髓残端间距、空洞横径和脑脊液囊腔形成情况,计算瘢痕指数、残端间距指数和空洞指数,并对B、C两组的BBB评分及各项检测指标进行对比研究。结果:A组术前、术后BBB评分和脊髓病理无明显变化。B、C两组大鼠术后后肢完全性瘫痪,其中B组大鼠后肢功能无恢复。术后1～2周,C组大鼠开始出现后肢运动功能自发性恢复,且C组脊髓病理学检测指标值均明显低于B组,差异具有极显著性意义(P<0.01)。各组病理学观测指标与BBB评分之间无相关关系。结论:标准化脊髓全横断造模方法有利于消除个体差异,更有利于对治疗效果的量化分析和研究比较。     

骨髓间充质干细胞移植联合吡拉西坦修复大鼠脊髓损伤

背景：单纯的干细胞移植对脊髓损伤的修复作用并不理想,主要是因为脊髓损伤后损伤区域神经组织的水肿、缺血、缺氧等引起继发性损伤造成的。 目的：在骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠脊髓损伤的同时应用吡拉西坦,观察两者对大鼠脊髓损伤恢复的影响。 方法：雌性Wistar大鼠参照改良Allen打击法制备大鼠脊髓损伤模型。随机分成3组,即单纯损伤组、骨髓间充质干细胞移植组及骨髓间充质干细胞移植联合吡拉西坦组。于伤后1,2,4,6,8周进行BBB评分和斜板实验等运动功能检测。第4周取材行病理切片苏木精-伊红染色,通过SRY-PCR检测雄性大鼠Y染色体上特有的基因SRY,从而得知移植骨髓间充质干细胞是否存活。8周后取材,行辣根过氧化物酶示踪观察,并通过透射电镜观察轴突的再生情况。 结果与结论：伤后4周,骨髓间充质干细胞移植组、联合治疗组大鼠后肢运动功能均有较明显恢复,联合治疗组较骨髓间充质干细胞移植组恢复快(P < 0.05)。单纯损伤组亦有所恢复,但程度较轻。病理切片单纯损伤组未见神经轴索通过;骨髓间充质干细胞移植组可见少量神经轴索样结构;联合治疗组可见较多神经轴索样结构。骨髓间充质干细胞移植组、联合治疗组有SRY基因表达,单纯损伤组未检测到SRY基因。辣根过氧化物酶阳性神经纤维数联合治疗组﹥骨髓间充质干细胞移植组>单纯损伤组,差异具有显著性意义(P < 0.05)。透射电镜下,骨髓间充质干细胞移植组、联合治疗组正中横断面可见新生的无髓及有髓神经纤维。提示骨髓间充质干细胞移植联合吡拉西坦促进大鼠损伤脊髓结构和功能恢复的效果明显优于单纯细胞移植组,两者联用具有协同效应。     

Erythropoietin-mediated preservation of the white matter in rat spinal cord injury

We investigated the effect of a single administration of recombinant human erythropoietin (rhEPO) on the preservation of the ventral white matter of rats at 4 weeks after contusive spinal cord injury (SCI), a time at which functional recovery is significantly improved in comparison to the controls [Gorio A, Necati Gokmen N, Erbayraktar S, Yilmaz O, Madaschi L, Cichetti C, Di Giulio AM, Enver Vardar E, Cerami A, Brines M (2002) Recombinant human erythropoietin counteracts secondary injury and markedly enhances neurological recovery from experimental spinal cord trauma. Proc Natl Acad Sci U S A 99:9450-9455; Gorio A, Madaschi L, Di Stefano B, Carelli S, Di Giulio AM, De Biasi S, Coleman T, Cerami A, Brines M (2005) Methylprednisolone neutralizes the beneficial effects of erythropoietin in experimental spinal cord injury. Proc Natl Acad Sci U S A 102:16379-16384]. Specifically, we examined, by morphological and cytochemical methods combined with light, confocal and electron microscopy, i) myelin preservation, ii) activation of adult oligodendrocyte progenitors (OPCs) identified for the expression of NG2 transmembrane proteoglycan, iii) changes in the amount of the chondroitin sulfate proteoglycans neurocan, versican and phosphacan and of their glycosaminoglycan component labeled with Wisteria floribunda lectin, and iv) ventral horn density of the serotonergic plexus as a marker of descending motor control axons. Injured rats received either saline or a single dose of rhEPO within 30 min after SCI. The results showed that the significant improvement of functional outcome observed in rhEPO-treated rats was associated with a better preservation of myelin in the ventral white matter. Moreover, the significant increase of both the number of NG2-positive OPCs and the labeling for Nogo-A, a marker of differentiated oligodendrocytes, suggested that rhEPO treatment could result in the generation of new myelinating oligodendrocytes. Sparing of fiber tracts in the ventral white matter was confirmed by the increased density of the serotonergic plexus around motor neurons. As for chondroitin sulfate proteoglycans, only phosphacan, increased in saline-treated rats, returned to normal levels in rhEPO group, probably reflecting a better maintenance of glial-axolemmal relationships along nerve fibers. In conclusion, this investigation expands previous studies supporting the pleiotropic neuroprotective effect of rhEPO on secondary degenerative response and its therapeutic potential for the treatment of SCI and confirms that the preservation of the ventral white matter, which contains descending motor pathways, may be critical for limiting functional deficit.