小鼠肾集合管发育中主细胞的形态学变化及水通道蛋白-2和-3的表达

目的 观察小鼠肾集合管发育过程中主细胞的形态学变化及水通道蛋白(AQP)-2、-3的表达,探讨AQP-2、-3与小鼠肾集合管主细胞发育的关系及作用.方法 应用透射电镜、免疫组织化学、免疫印迹技术并结合体视学方法,观察并检测胚龄16、18 d 胎鼠及生后1、3、7、14、21 d仔鼠肾集合管发育过程中主细胞的形态学变化及...     

水通道蛋白-2、4在小鼠肾发育过程中的表达

目的观察水通道蛋白-2（AQP-2）和水通道蛋白-4（AQP-4）在小鼠肾脏发育过程中的表达位置,探讨其与肾脏发生发育的关系及作用。方法免疫组织化学SABC法染色和体视学半定量检测AQP-2、AQP-4的表达。结果AQP-2在胚龄17d的胎鼠可以明确检测到,其表达部位为集合管主细胞的管腔膜和胞浆内。体视学测量发现,从胚龄17d开始表达到生后1d的小鼠其管腔膜的面密度值逐渐增加,此后面密度值基本上没有变化。AQP-4在胚龄14d的胎鼠可见到微弱的表达,随着胚龄的增长其表达逐渐增加,到生后1d达到最大水平,以后随着13龄的增加表达量无明显变化,并且在每一个时期的表达量都远远小于AQP-2的表达量。AQP-4的表达部位为集合管的侧基底细胞膜。结论推测AQP-2对小鼠出生后肾脏水平衡的调节作用比较重要,而AQP-4对出生前水平衡的调节作用比较重要。     

水通道蛋白2、 3、 4在小鼠肾集合管发育中的表达

目的:观察水通道蛋白(AQP)-2、 3、 4在小鼠肾集合管发育中的表达,探讨其与集合管发育的关系及作用.方法:免疫组织化学技术结合体视学方法半定量检测AQP-2、 AQP-3及AQP-4的表达.结果:AQP-2从胚龄17d开始表达在集合管主细胞游离面细胞膜,到生后1d其阳性表达的游离面细胞膜面密度值逐渐增加,此后无明显变化;AQP-3、 AQP-4在胚龄14d集合管侧基底细胞膜(基底膜和侧膜)可见微弱表达,并随胚龄的增长而增加,到生后1d达最高,以后无明显变化.结论:AQP对小鼠出生前后肾水平衡具有重要的调节作用,其AQP-2的作用发生在出生后,而AQP-3、 AQP-4的作用发生在出生前.     

血管生成素-1及其受体Tie-2在小鼠肾发育中的表达

目的:观察血管生成素-1(Ang-1)及其受体Tie-2在小鼠肾发育过程中的表达特征、作用及相互关系.方法:采用免疫组织化学和免疫印迹技术检测胚龄14、16、18 d胎鼠和生后1、3、7、14、21、42 d仔鼠Ang-1和Tie-2的表达.结果:Ang-1在胚龄14 d胎鼠肾的未分化间充质细胞中呈微弱表达,随着胚(日)龄的增加,表达逐渐增强,主要分布在肾小体,间质血管以及肾小管中.Tie-2于胚龄14 d首先出现在肾间质,以后随着肾的发育,出现在肾小体以及间质血管中.结论:Ang-1和Tie-2在小鼠肾发育过程中,对肾小体毛细血管的形成、间质血管的发育及血管稳定性的维持均发挥着重要作用.     

层黏连蛋白和Ⅳ型胶原在小鼠肾发育中的表达

目的:观察层黏连蛋白(LN)和Ⅳ型胶原(CoⅣ)在小鼠肾发育中的时空性表达,探讨其与肾发育的关系.方法:采用免疫组织化学结合免疫印迹,检测不同胚龄及生后日龄小鼠肾组织LN和CoⅣ的表达及其含量变化.结果:LN在输尿管芽、各期肾小体、肾小管及集合管的基底膜处均有表达,并随肾的发育其表达量逐渐增加;CoⅣ在胚龄12 d时,在输尿管芽周围没有表达,以后,在各期肾小体、肾小管和集合管的基底膜处均有表达,随肾的发育其表达量逐渐增加.结论:推测LN和CoⅣ可能对小鼠肾发育以及成熟肾各结构的维持起重要作用.     

肝细胞生长因子受体在小鼠肾发育中的表达

目的:观察肝细胞生长因子受体(c-Met)在小鼠肾发育中的时空性表达,探讨c-Met与肾发育的关系.方法:采用免疫组织化学技术结合体视学方法和免疫印迹法,测定不同胚龄(E)11、14、16d和18d及生后日龄(P)1、3、7、14、21d和40d小鼠肾组织内c-Met的表达及其含量变化.结果:免疫组织化学结果显示c-Met的表达在各期集合管较强,皮质肾小管内次之,肾小体表达较弱.体视学测量和免疫印迹法结果均显示随着胚日龄的增加,c-Met在各期肾小体、皮质肾小管及集合管的表达是先增后减.结论:c-Met可能对肾各结构的发育以及成熟肾的形态维持起重要作用.     

整合素α2、α3在小鼠肾发育过程中的表达

目的:观察细胞外基质(ECM)受体一整合素α2、α3在小鼠肾发育过程中的时空性表达,探讨其与肾发育的关系.方法:应用免疫组织化学、图像分析、体视学及免疫印迹技术对不同胚龄及生后日龄小鼠肾组织中整合素α2、α3表达进行定位观察、定性分析和定量检测.结果:胚龄12 d整合素α2、α3即开始表达,整合素α2在肾小体表达微弱,在肾小管和集合管表达较强;整合素α3在发育各个时期肾小体都有较强表达,在肾小管偶见微弱表达.图像分析、体视学及免疫印迹检测结果显示它们的含量都随着肾的发育逐渐增加.结论:整合素α2、α3在小鼠肾发育中起一定作用,α2主要与肾小管和集合管发育相关,α3主要与肾小体发育相关.     

转化生长因子βⅡ型受体在小鼠肾发育中的表达

目的:观察转化生长因子βⅡ型受体(TβRⅡ)在小鼠肾发育中的时空性表达,探讨转化生长因子β(TGF-β)与肾发育的关系。方法:采用免疫组织化学法、体视学和免疫印迹法测定不同胚龄(E)12、14、16和18d及生后日龄(P)1、3、7、14、21、28和42d小鼠肾内TβRⅡ的表达及其含量变化。结果:免疫组织化学结果显示TβRⅡ在各期肾小体、肾小管及集合管内均有表达,但在各期近端小管强烈表达,各期集合管表达较强,而各期肾小体、远端小管内表达较弱。体视学测量结果显示TβRⅡ在各期肾小体、肾小管及集合管的表达量均逐渐增加。免疫印迹结果显示TGF-βRⅡ随着肾的发育其表达量逐渐增加。结论:TGF-β可能对肾各结构的发育以及成熟肾各结构的维持起重要作用,尤其在近端小管的发育方面作用更为显著。     

Slit2在小鼠肾脏发育过程中的表达

目的观察并检测Slit2在小鼠肾脏发生发育过程中的定位和表达变化,探索Slit2对肾脏发生发育的调节作用。方法分别选取胚龄(E)12、14、16、18天胎鼠和生后(N)1、7、14、21、40天仔鼠,每组随机选取10只。胚龄12天取全胚,其余各组胎鼠或小鼠剖腹取肾脏,制备石蜡切片和提取蛋白。通过免疫组织化学技术系统观察小鼠肾脏Slit2的表达和定位;通过蛋白印迹技术检测各组小鼠肾脏Slit2的表达变化。结果Slit2在胚龄12天肾脏的生肾区即开始表达。其中,Slit2在输尿管芽明显表达,在生后肾组织中仅在输尿管芽周围的间充质聚集部位表达,其余部位并无广泛表达。随着肾脏的发育,Slit2在肾小体发育的逗号小体阶段、S小体阶段有较强的表达,在Ⅲ期肾小体阶段,Ⅳ期肾小体阶段及成熟肾小体阶段有微弱的表达。在肾脏早期髓质出现后,Slit2在近端小管、远端小管和集合管均有表达。Slit2表达量从胚龄14天到胚龄16天轻度增加,从胚龄16天到生后40天逐渐减少。结论 Slit2在发育各阶段的肾小体、发育及成熟期的泌尿小管中均有表达,提示其对肾小体和泌尿小管的发育可能具有重要的作用。     

转化生长因子βⅡ型受体与纤维连接蛋白在小鼠肾发育中的表达

目的 观察转化生长因子βⅡ型受体（TGF-βRⅡ）及纤维连接蛋白(Fn)在小鼠肾发育中的时空性表达,探讨TGF-βRⅡ和Fn与肾发育的关系。 方法 采用免疫组织化学技术,结合免疫印迹法,检测不同胚龄及生后日龄小鼠肾组织TGF-βRⅡ和Fn的表达及其含量变化。 结果 TGF-βRⅡ在各期肾小体、肾小管及集合管内均有表达,并随肾的发育其表达量逐渐增加(P ﹤0.05);Fn在除逗号小体以外的各期肾小体、肾小管及集合管的基底膜处均有表达,随着肾的发育其表达量逐渐增加(P ﹤0.05)。 结论 TGF-β和Fn可能对小鼠肾发育以及成熟肾脏各结构的维持起重要作用。