艾康恶性疟/间日疟免疫层析检测试剂盒效果评价

目的 评价艾康恶性疟／间日疟（P．f／P．v）胶体金免疫层析检测试剂盒诊断疟疾效果。方法 以镜检法为金标准。采用盲法实验室测试疟痰阳性和阴性血样。结果 共测试331例血样，其中疟痰血样121倒。对疟疾的灵敏性和特异性分别为92．56％和98．57％，与镜检符合率为96．38％；其中恶性疟的灵敏性和特异性分别为1130．00％和98．57％，重复性为100．00％；对间日疟的灵敏性和特异性分别为86．96％和100．00％，恶性疟和间日疟之间无交叉反应。结论 艾康P．f．／P．v肢体金免疫层析检测试剂盒诊断疟痰具有快速、简便、准确、直观以及不需要特殊仪器优点，能同时诊断单纯恶性疟和单纯间日疟，但不能鉴别诊断混合感染。     

艾康疟原虫检测试剂盒现场应用效果观察

目的评价国产艾康疟原虫(pf/pv)检测试剂盒现场应用效果。方法以镜检方法作为金标准比较艾康疟原虫检测试剂盒现场应用效果。结果336例样本均用镜检方法和艾康疟原虫试剂盒诊断,镜检阳性155例,阴性181例;试剂盒诊断阳性156例,阴性180例,试剂盒诊断疟疾的灵敏度为99.4%,特异度为98.9%。试剂盒诊断间日疟的灵敏度为98.8%、特异度为100.0%;试剂盒诊断恶性疟的灵敏度为100.0%、特异性为99.3%。未发现交叉反应。结论艾康试剂盒诊断疟原虫敏感性与特异性均高,且一次能测出单纯恶性疟或单纯间日疟的感染,操作简单,结果显示直观、快速,在常温下保存稳定,适合疟疾流行区的基层单位使用。     

自制免疫层析试剂盒检测恶性疟原虫HRP-Ⅱ抗原的评价

目的对自制免疫层析试剂盒检测恶性疟原虫富组氨酸蛋白Ⅱ（HRP—Ⅱ）的敏感性、特异性、稳定性等技术参数进行评价，为试剂盒的临床应用提供科学依据。方法对试剂盒的敏感性、特异性、灵敏度、精密度、稳定性等性能指标进行测定，并与国外的同类试剂盒进行比较研究。结果自制试剂盒操作简便．反应快速；以血涂片显微镜检查为金标准，对49例恶性疟血样、30例间日疟血样、43例正常人血样检测的敏感性为98％，特异性为100％；对恶性疟原虫血样的最小检出量为原虫密度0．01％，对重组HRP—Ⅱ蛋白的最小检出量为10ng／ml；试剂盒精密度和稳定性均较好；各项性能指标相当或优于国外同类试剂盒。结论自行研制的恶性疟原虫免疫层析检测试剂盒测定结果较为准确、稳定和可靠，适用于恶性疟的快速诊断、流行病学筛查、疟区献血员筛查及过境边民筛查。     

BinaxNOW 疟原虫检测试剂卡临床应用效果观察

目的评价美国Inverness medical professional diagnostics公司生产的疟原虫检测试剂卡的临床应用效果。方法以镜检方法作为金标准比较BinaxNOW疟原虫检测试剂卡临床应用效果。结果 400份样本用镜检方法和BinaxNOW疟原虫检测试剂卡诊断,镜检法检出阳性138份,其中恶性疟77份、间日疟61份;疟原虫检测试剂卡检出阳性139例,其中恶性疟71份,间日疟68份。试剂卡检测疟疾的敏感度为98.55%,特异度为98.85%,检测恶性疟的灵敏度为87.01%、特异度为98.76%,检测间日疟的敏感度为93.44%、特异度为96.76%。存在交叉反应。结论BinaxNOW疟原虫检测试剂卡诊断疟疾敏感性与特异性高,操作简单,结果显示直观、快速,适合边远疟区无镜检能力的个体、乡村医生开展疟疾筛查。     

BinaxNOW(R)疟原虫检测试剂卡临床应用效果观察

目的 评价美国Inverness medical professional diagnostics公司生产的疟原虫检测试剂卡的临床应用效果.方法 以镜检方法作为金标准比较BinaxNOV 疟原虫检测试剂卡临床应用效果.结果 400份样本用镜检方法和BinaxNOW 疟原虫检测试剂卡诊断,镜检法检出阳性138份.其中恶性疟77份、间日疟61份;疟原虫检测试剂卡捡出阳性139例,其中恶性疟71份,间日疟68份.试剂卡检测疟疾的敏感度为98.55%,特异度为98.85%,检测恶性疟的灵敏度为87.01%、特异度为98.76%,检测间日疟的敏感度为93.44%、特异度为96.76%.存在交叉反应.结论 BinaxNOW 疟原虫检测试剂卡诊断疟疾敏感性与特异性高,操作简单,结果显示直观、快速,适合边远疟区无镜检能力的个体、乡村医生开展疟疾筛查.     

恶性疟Dipstick-免疫胶体金检测试纸条和ICT测试卡现场实验

目的 现场评价自制的恶性疟Dipstick-免疫胶体金检测试纸条和商品疟疾ICT测试卡的敏感性和特异性及稳定性。方法 以常规镜检法作为标准,用Dipstick条和ICT卡对镜检确认的疟疾和非疟发热病人血样平行检验。结果 Dipstick条恶性疟阳性的符合率为95％,特异性为100％,30％以上活性保持时间为45天左右;ICT卡的恶性疟(含混合感染)阳性符合率为100％,单纯间日疟符合率为97％,特异性为100％,不能区分混分感染,稳定性超过Dipstick条。结论 Dipstick条仍需改进完善。ICT卡敏感特异、简便快速,是替代传统镜检较好的一种方法。     

疟原虫乳酸脱氢酶Mab在疟疾诊断和疗效考核上的应用

目的评估疟疾乳酸脱氢酶单克隆抗体快速检测试剂在疟疾诊断和鉴别诊断上的特异性和敏感性以及考核疟疾治疗效果。方法使用OptiMal—IT金标层析快速检测试剂诊断和鉴别诊断间日疟57例，恶性疟5例；用传统的厚薄血片进行病原学对比诊断。同时用OptiMal—IT金标层析法考核治疗效果。结果OptiMal—IT金标层析法与病原学诊断间日疟和恶性疟原虫虫的符合率为100％，疟原虫患者治疗后3d OptiMal—IT金标层析法检测为阴性。结论OptiMal—IT金标层析法是一种快速、简便、特异性强、敏感性高的疟疾诊断和鉴别诊断试剂，可以用于快速应急检测，同时疟疾患者治疗后，若患者体内无活的疟原虫，OptiMal—IT金标层析为阴性，提示疟疾乳酸脱氢酶单克隆抗体OptiMal—IT金标层析可现场应用于疟疾快速诊断和疟疾治疗效果考核。     

疟疾快速诊断试剂盒的研制及应用

目的：建立一种快速、敏感、简便的疟疾诊断方法。方法：应用快速电泳法和快速薄层色谱法检测疟原虫乳酸脱氢酶（LDH－P）诊断疟疾，并将两检测系统制成试剂盒。检测体外培养的恶性疟原虫不同分离株和疟疾病人全血中的LDH－P，为临床安全用药提供依据。结果：应用快速电泳法和快速薄层色谱法检测体外培养的恶性疟原虫感染红细胞的敏感度分别为10－100个原虫／μl血和25－150个原虫／μl血；检测病人血样的阳性率分别为90．00％和80．00％，检测30份间日疟病人血样的阳性率分别为83．33％和76．67％；检测40份疟区非疟疾血样、非疟区40份健康人及30份其他寄生虫病人血样，仅快速电泳法检测出1份疟区非疟疾血样为阳性。结论：应用快速电泳法试剂盒和快速薄层色谱法试剂盒诊断疟疾，敏感、特异、简便快速，在临床及现场具有很好的应用前景。     

OptiMAL疟疾快速诊断试纸条的现场应用评价

目的 评价检测疟原虫乳酸脱氢酶快速诊断试纸条产品OptiMAL现场应用效果。方法 以疟原虫镜栓诊断为标准，用OptiMAL试纸条检测疟区门诊发热病人中的疟疾病人。结果 检测间日疟的敏感度为59％（95％CI：0．4754—0．6983），特异度为95％（95％CI：0．9268～0．97）；检测恶性疟的敏感度为60％（95％CI：0．2307～0．8824），特异度为99％（95％CI：0．9803—0．9985）。出现1例间日疟交叉反应。结论 快速诊断试纸条能够在基层简易、快捷的用来诊断间日疟和恶性疟。     

自制免疫层析试剂盒检测恶性疟原虫HRP-II抗原的评价

目的对自制免疫层析试剂盒检测恶性疟原虫富组氨酸蛋白II(HRP-II)的敏感性、特异性、稳定性等技术参数进行评价,为试剂盒的临床应用提供科学依据。方法对试剂盒的敏感性、特异性、灵敏度、精密度、稳定性等性能指标进行测定,并与国外的同类试剂盒进行比较研究。结果自制试剂盒操作简便,反应快速;以血涂片显微镜检查为金标准,对49例恶性疟血样、30例间日疟血样、43例正常人血样检测的敏感性为98%,特异性为100%;对恶性疟原虫血样的最小检出量为原虫密度0.01%,对重组HRP-II蛋白的最小检出量为10ng/ml;试剂盒精密度和稳定性均较好;各项性能指标相当或优于国外同类试剂盒。结论自行研制的恶性疟原虫免疫层析检测试剂盒测定结果较为准确、稳定和可靠,适用于恶性疟的快速诊断、流行病学筛查、疟区献血员筛查及过境边民筛查。     

Saving Private Ryan: The Indian Scenario (Rapid Diagnosis of Malaria at Regimental Aid Post)

Immunochromatography test (ICT) (Paracheck Pf) for diagnosis of Plasmodium falciparum (Pf) infection was compared with the conventional smear examination method. A total of 350 specimens of blood from cases of fever were investigated (falciparum malaria 220, vivax malaria 100, controls 30). Paracheck Pf ICT was found to have enormous advantages over smear examination due to its high degree of sensitivity, specificity, speed and ease of performance. Paracheck Pf ICT test kits are stable at room temperature. Regimental medical officers (RMOs) and nursing assistants with minimal training can safely practise Paracheck Pf ICT method. Introduction of this test method in the Armed Forces can facilitate early diagnosis and specific treatment of falciparum malaria even at far flung places. This will have enormous beneficial effect in reducing morbidity due to malaria and saving precious lives. In short as well as long term, it is a viable cost effective option.Key Words: Falciparum malaria, Pf HRP-2 antigen, Paracheck Pf ICT method, Rapid diagnosis of malaria     

动物疟原虫与人疟原虫的交叉反应抗原

目的分析5种疟原虫（间日疟原虫、恶性疟原虫,食蟹猴疟原虫、伯氏症原虫,约氏疟原虫）中,可被间日疟、恶性疟病人血清识别的交及反应抗原。方法用50％、60％Percoll不连续梯度分离疟原虫感染红细胞,20mmolPBS被红细胞后,收集红内期原虫,以1％NP—40提取可溶性抗原。各种抗原经SDS—PAGE电泳后,转移至硝酸纤维膜上,分别用间日疟、恶性疾病人血清进行免疫识别。结果3神动物疟原虫红内期抗原中有多条蛋白区带可被间日疟或恶性疟病人血清识别。其中合蟹报疟原虫有14条蛋白带被间日疟病人血清识别,伯氏疟原虫有16条蛋白区带被恶性疟病人血清识别,分别多于其它疟原虫。间日疟病人血清可识别5种疟原虫共有的72kD蛋白,而恶性疟病人血清不识别该蛋白。结论人疟原虫和动物疟原虫之间有一系列支又反应抗原。会压滤疟原虫与间日疟原虫,伯氏疟原虫与恶性疟原虫之间抗原相似程度高于其它疟原虫。72kD．蛋白在间日疟无疾学诊断方面可能有实用价值。     

间日疟原虫MSP1 C重组蛋白的制备及其在血清学诊断中的应用

目的在大肠埃希菌（E，coli）中表达、纯化间日疟原虫裂殖子表面蛋1C端重组蛋白（rGST—PvMSP1C）作为诊断抗原，评价其在间日疟血清学诊断中的应用价值。方法将含有重组质粒pGEX-4T-2／PvMSP1C的工程菌E．coil BL21（DE3）以IPTG进行诱导表达，表达产物以SDS—PAGE与Western—blot免疫印迹进行鉴定；采用GST融合蛋白层析柱进行分离纯化；以纯化重组蛋白包被酶标板，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测间日疟患者血清中的特异性IgG抗体。结果含有重组质粒pGEX-4T-2／PvMSP1C工程菌经IPTG诱导表达的rGST—PvMSP1C重组蛋白大小约63ku，能够被间日疟患者的血清所识别。纯化的重组蛋白SDS—PAGE电泳显示一条预期大小的蛋白条带；以重组蛋白作诊断抗原，67份镜检阳性的间日患者血清标本ELISA均为阳性。55份健康人血清ELISA均为阴性．5份恶性疟患者血清及7份血吸虫患者血清检测结果亦为阴性。结论在大肠埃希菌中表达纯化的间日疟原虫rGST—PvMSP1C蛋白具有免疫反应性，以其作为诊断抗原建立的血清中特异性IgG抗体ELISA检测方法具有良好敏感性和特异性，在间日疟的免疫学诊断中具有一定的推广使用价值。     

胶体金层析法检测恶性疟原虫HRPII抗原的应用研究

目的 :建立一种简易快速 ,适于基层或流行病学调查的自测式胶体金免疫层析法 (GICA)用于检测恶性疟原虫中 H RPII抗原 ,判定是否现症感染。方法 :用 GICA测试条检测全血及滤纸血样中的 H RPII抗原。结果 :40例恶性疟全血及滤纸血 H RPII抗原阳性检出率均为 1 0 0 ,与镜检结果相符合 ;2 5例间日疟均为阴性。结论 :GICA检测血中恶性疟原虫 H RPII抗原特异性强、灵敏度高、简便快速 ,无需特殊仪器设备 ,滤纸血的应用使样本的采集、保存和运输更为便利 ,适合大规模流行病学调查和基层使用 ,有广泛应用价值。     

武汉市两种输入性卵形疟巢式PCR检测

目的 了解巢式PCR鉴别卵形疟curtisi及变种wallikeri效果。方法 收集武汉市2008—2015年疟疾患者血样和流行病学资料。提取患者血样中的疟原虫DNA,进行巢式 PCR 检测。结果 采用巢式PCR检测疟疾患者282例,其中恶性疟原虫206例、间日疟原虫62例、三日疟原虫6例、卵形疟原虫19例。巢式PCR结果显示,卵形疟原虫经典型curtisi 和变种型wallikeri 分别扩增出800 bp和780 bp目的 条带。2012—2015年卵形疟占当年疟疾患者分别为4.1%（2/49）、12.2%（9/74）、8.2%（4/49）、11.4%（4/35）,卵形疟总数占全部病例的6.74%,其中,经典型curtisi 14例,变种型wallikeri 3例,混合感染2例,变种型wallikeri检出率占卵形疟26.3%。19例卵形疟病例全部为男性,感染输入地主要分布在撒哈拉沙漠以南地区,2例卵形疟混合感染分别来自安哥拉和尼日利亚。其中有2例卵形疟原虫curtisi型镜检 结果分别为间日疟和恶性疟,1例血片重新复核后为卵形疟,另1例巢式PCR检测为间日疟和卵形疟混合感染型。结论 分子生物学技术可以减少卵形疟误诊的情况;加强卵形疟curtisi及变种wallikeri的巢式PCR 检测,避免误诊。     

快速胶体金免疫层析法在疟原虫感染诊断中的应用

目的探讨快速胶体金免疫层析法(GICA)在疟原虫感染诊断中的应用价值。方法以传统的血涂片法为金标准,以抗疟药治疗有效性作为回顾性诊断依据,分析GICA在疟原虫感染诊断中的特异性、敏感性。结果检测发热病人334例,其中间日疟特异性达94.16%,敏感性达75%;恶性疟特异性98%,敏感性81%。结论GICA敏感性、特异性较高,具有较高的可靠性,且方便快捷适于现场应用。     

用乳酸脱氢酶为靶分子的免疫层析技术检测恶性疟原虫

目的 建立一种免疫胶体金层析(GICA)法用于恶性疟原虫的检测。方法 采用杂交瘤技术制备恶性疟原虫乳酸脱氢酶(LDHpf)单抗,利用筛选出来的单抗制成诊断恶性疟原虫的免疫层析条,以镜检和PCR法为对照,用GICA条检测门诊"四热"病人血样,评价其敏感性和特异性,并对其稳定性进行了初步研究。结果 筛选出4株抗LDHpf单抗,间接ELISA表明4株单抗仅与恶性疟原虫发生反应,而与间日疟原虫、红细胞蛋白、刚地弓形虫和日本血吸虫不发生交叉反应。Western-blot结果显示4株单抗能识别恶性疟原虫相对分子质量约为33000处的虫源蛋白。以镜检法和PCR法为标准,GICA条检测恶性疟原虫的敏感性分别为88.37%和86.67%,GICA与镜检法的符合率均为91.55%。结论 GICA检测恶性疟原虫简易快速、灵敏度高,无需特殊仪器设备,有望成为一种恶性疟原虫快速免疫诊断试剂盒。     

用乳酸脱氢酶为靶分子的免疫层析技术检测恶性疟原虫

目的建立一种免疫胶体金层析(GICA)法用于恶性疟原虫的检测。方法采用杂交瘤技术制备恶性疟原虫乳酸脱氢酶(LDHpf)单抗，利用筛选出来的单抗制成诊断恶性疟原虫的免疫层析条，以镜检和PCR法为对照，用GICA条检测门诊“四热”病人血样，评价其敏感性和特异性，并对其稳定性进行了初步研究。结果筛选出4株抗LDHpf单抗．间接ELISA表明4株单抗仅与恶性疟原虫发生反应，而与间日疟原虫、红细胞蛋白、刚地弓形虫和日本血吸虫不发生交叉反应。Western—blot结果显示4株单抗能识别恶性疟原虫相对分子质量约为33000处的虫源蛋白。以镜检法和PCR法为标准，CICA条检测恶性疟原虫的敏感性分别为88.37％和86．67％．DICA与镜检法的符合率均为91．55％。结论GICA检测恶性疟原虫简易快速、灵敏度高，无需特殊仪器设备，有望成为一种恶性疟原虫快速免疫诊断试剂盒。