三种荧光Ca~(2+)指示剂用于血小板胞浆游离钙浓度测定的原理及应用比较

应用荧光Ca~(2+)指示剂研究活细胞中钙的变化是近年兴起的一门新技术。由于此技术可直接地测定胞浆内游离钙浓度(〔ca~(2+)〕i),从而使人们对细胞Ca~(2+)的转运及其与某些疾病发生,发展的关系有了进一步的认识。本文就目前应用的三种荧光Ca~(2+)指示剂在血小板〔Ca~(2+)〕i测定中的原理及应用比较作如下介绍。     

原发性高血压患者红细胞膜Ca~(2+)—ATP酶活性的初步观察

细胞膜 Ca~(2+)—ATP 酶对细胞内 Ca~(2+)转运发挥泵的作用。本文观察了20例原发性高血压患者红细胞膜 Ca~(2+)-ATP 酶活性并与正常人比较,发现该酶话性明显低于正常人,提示高血压患者依赖 ATP 的 Ca~(2+)转运能力降低。并同时观察到高血压患者尿 Ca~(2+)排出量与正常人比较明显增加。     

钙离子对心脏机能的调控及钙拮抗剂的作用

钙离子(Ca~(2+))的跨膜内流是心肌动作电位形成不可缺少的环节,Ca~(2+)又是一种细胞内信使,能与心肌的肌钙蛋白结合,激活收缩过程。因此,在心肌的兴奋—收缩偶联过程中,Ca~(2+)扮演着极其重要的角色。近年来,在Ca~(2+)的跨膜转运,特别是钙通道的特征,以及Ca~(2+)对心脏机能的调控,尤其是对心肌收缩性的影响等方面的研究已取得长足的进展。本文仅就上述方面的研究进展作一概括性的叙述。     

用荧光染料fura-2法测定心室肌细胞内游离钙离子浓度

用fura-2荧光染料测定了静息时的酶解分离心室肌细胞内游离Ca~(2+)浓度,40mMKCI和5mM咖啡因都能使心室肌细胞内游离Ca~(2+)浓度增加,但KCI增加游离Ca~(2+)浓度需要细胞外液中存在Ca~(2+),而咖啡因则否,提示KCl增加细胞内游离Ca~(2+)浓度可能是通过细胞外Ca~(2+)内流,咖啡因则使细胞内贮存Ca~(2+)释放。     

针灸对运动性疲劳的能量代谢调节作用述评

综述近年来针灸干预运动性疲劳能量代谢的相关文献。结果显示针灸疗法可通过调节供能化合物、血糖和糖原代谢、氨基酸代谢、脂质代谢,从而延缓运动性疲劳。针灸调节能量代谢以治疗运动性疲劳可能途径如下:(1)提高肌糖原、肝糖原含量,增强机体糖储备;(2)提高肌酸激酶的活性,增加磷酸肌酸向三磷酸腺苷的转化,从而改善骨骼肌能量供应;(3)降低游离色氨酸与支链氨基酸的比值,减少脑内5-羟色胺的生成和积聚,进而延缓中枢疲劳;(4)抑制血浆游离脂肪酸含量的升高,提高骨骼肌肌质网的Na~+-K~+-ATP酶含量及Ca~(2+)-ATP酶的活性,调节肌质网Ca~(2+)循环,从而延缓急性运动性疲劳。有关针灸治疗运动性疲劳的机制研究亟待从分子水平、中枢整合机制、信号通路等方面继续深入探索。     

钙调素拮抗剂和药物研究

1883年英国生理学家Sidney Ringer在离体蛙心实验中发现Ca~(2+)与肌肉收缩有关。此后许多研究证明:Ca~(2+)参与多方面的代谢调节,神经递质的释放、血液凝固、分泌和转运、许多细胞过程(如胞吐和胞饮作用、细胞分化、细胞移动、受精和细胞增殖)等。Ca~(2+)被确认为胞内第二信使。而上述过程都要通过专一的细胞内钙结合蛋白介导来完成。     

刺激型血小板McAb对人血小板胞浆内钙离子浓度的影响

McAb APt_4、HIP_2、HI117和SJ-9A_4的结合位点分别在血小板膜GPⅡb/Ⅲa、GPⅡb和CD9抗原上,其均能引起血小板聚集,但其作用机理尚不清楚.据报道许多血小板诱聚剂可使血小板胞浆内Ca~(2+)浓度升高,本实验观察这4种McAb对人血小板胞浆内Ca~(2+)浓度的影响。 取正常人全血,ACD抗凝,分离血小板,与Ca~(2+)荧光指示剂fura2-AM共同温育45min,使fura2载入血小板,然后用Hepes液洗3遍.采用单激发光源的日立F-3010型荧光分光光度计测量载有fura2     

肌醇磷脂第二信使系统

<正> 1 引言最先发现的第二信使(ⅡM)是cAMP,近几年来又发现了新的第二信使系统一肌醇磷脂系统. 通常胞外界质中Ca~(2+)浓度约10~(-3)M,胞内Ca~(2+)总浓度也大约10~(-3)M,但大多数胞内游离Ca~(2+)浓度极低,仅有10~(-3)M.这是由于胞内Ca~(2+)一部分和蛋白质分子结合,另有一大部分贮存在细胞器内(内质网和线粒体为主).在相当多的细胞识别系统中,配体(基)和受体相互作用,首先     

原发性高血压红细胞钙代谢的初步探讨

原发性高血压钙恒稳异常不仅表现在血管平滑肌,也见于其它组织细胞,尤其是血液的有形成分。本文观察了原发性高血压患者红细胞的某些钙恒稳指标,并与正常人进行了比较。结果表明:高血压患者红细胞总钙浓度较正常人明显增加,红细胞膜Ca~(2+)-ATP酶活性明显降低,胞浆钙调素含量显著降低。结果提示:高血压患者红细胞Ca~(2+)-ATP酶活性下降导致胞内Ca~(2+)浓度升高,从而增加外周血管阻力,而CaM可能是通过调节Ca~(2+)-ATP酶活性间接影响血压的。     

调整细胞浆Ca~(2+)控制嗜铬细胞瘤

嗜铬细胞瘤的许多病理生理反应均与细胞浆内升高的Ca~(2+)有关,调整细胞浆Ca~(2+)浓度将比单独应用肾上腺素能α受体阻断剂更为有效。我们曾对4例通过症状分析、生化检查、B超检查、CT定位及术后病理证实的肾上腺嗜铬细胞瘤患者,除采用酚苄明治疗外,同时应用钙阻断剂,以阻止细胞外Ca~(2+)流入细胞,取得了较好的疗效。     

坎离颗粒对慢性心力衰竭大鼠骨骼肌乳酸与葡萄糖水平及Ca~(2+)-ATP酶活性的影响

目的:观察坎离颗粒对慢性心力衰竭大鼠骨骼肌乳酸、葡萄糖水平及Ca~(2+)-ATP酶活性的影响。方法:以腹主动脉缩窄法复制慢性心力衰竭大鼠模型。32只大鼠随机分为假手术组、模型组、开搏通组、坎离颗粒组,每组8只。予相应的药物干预32周,观察各组大鼠骨骼肌组织乳酸、葡萄糖水平及Ca~(2+)-ATP酶活性变化。结果:慢性心力衰竭大鼠骨骼肌组织Ca~(2+)-ATP酶活性和葡萄糖水平降低,乳酸水平升高(P0.05,P0.01);中西药物均能不同程度地改善上述病理状况,但坎离颗粒在改善骨骼肌葡萄糖水平方面优于开搏通(P0.01)。结论:坎离颗粒能改善慢性心力衰竭大鼠骨骼肌组织的糖代谢。     

苯二氮受体调控醛固酮分泌机制中Ca~(2+)和cAMP的作用

外周型苯二氮受体的配体PK11195增强大鼠肾上腺皮质球状带细胞醛固酮分泌的效应可被主要作用于胞浆膜Ca~(2+)通道的阻断剂硝苯啶所取消,而不被选择性作用于线粒体Ca~(2+)通道的阻断剂硝苯啶呋海因(Da—ntrolene)所取消。PK11195在其增强醛固酮分泌的最大效应条件下并不影响球状带细胞内cAMP水平。本文的结果表明苯二氮(?)受体调控醛固酮分泌的机制中,细胞内信使物质不是cAMP,也不是来自线粒体的Ca~(2+),而是来自胞浆膜外的Ca~(2+)。     

缺血及再灌注损伤中心肌组织钙调蛋白及环磷酸腺苷的变化

心肌细胞内大量Ca~(2+)聚集是心肌缺血及再灌注损伤的共同途径,是造成细胞不可逆性损伤的主要原因。钙调蛋白(CaM)和环磷酸腺苷(cAMP)均可通过增强肌浆网(SR)的Ca~(2+)摄取及加强肌膜的Ca~(2+)内流等方式调节     

家兔血小板内钙离子的测定

ADP、花生四烯酸、凝血酶、血栓素A_2(T×A_2)及Ca~(2+)等对血小板的聚集功能都有影响。Ca~(2+)是血小板的成分之一,血小板内Ca~(2+)含量的增减必然会影响血小板的功能,所以,测定血小板内Ca~(2+)含量也越来越被重视。国内尚未见此类报道。我们测定了家兔血小板内Ca~(2+)的含量,以供国内广大研究者参考。     

依脉特灵对Ca^2＋所致小鼠离体子宫平滑肌收缩的拮抗作用

本文观察到IT对小鼠离体子宫平滑肌高K~+去极化后Ca~(2+)所致的收缩有显著抑制作用。CaCl_2量效曲线IT对其呈非竞争性拮抗。在无Ca~(2+)高K~+溶液中,IT10μM抑制OXY依赖细胞内Ca~(2+)引起的收缩,而IT50μM对依赖细胞内外Ca~(2+)所致子宫肌收缩均有抑制作用。Ver对小鼠离体子宫的作用,远较IT的强。但Ver较高浓度(59nM)只抑制依赖细胞内Ca~(2+)的收缩,对依赖细胞外Ca~(2+)的收缩影响甚少。IT与Vcr拮抗ca~(2+)的作用相似。IT为Ca~(2+)拮抗剂。     

钙离子与变力性药物(讲座)

<正> 许多生理过程如肌肉收缩、腺体分泌、递质释放、骨骼代谢、血液凝固以及许多酶的催化反应都必须有钙离子(Ca~(2+))参加,在心血管系统 Ca~(2+)的重要作用更为人们所重视;但对于 Ca~(2+)在心动周期的转运和调节机制的认识,只是近十年才日渐深入。应     

血浆中分子物质对人红细胞膜Ca~(2+)-ATP酶活力的影响

本文初步观察了正常人中分子物质(N-MMS)和烧伤病人中分子物质(B-MMS)对正常人红细胞膜Ca~(2+)-ATP酶活力的影响。结果表明,不同保温时间N-MMS对红细胞膜Ca~(2+)-ATP酶活力有明显影响,保温时间越长酶活力抑制越显著(p<0.01),对照组变化不明显;不同浓度N-MMS和B-MMS对红细胞膜Ca~(2+)-ATP酶活力均有影响,浓度越高酶活力抑制越明显(P<0.01)。MMS对质膜Ca~(2+)-ATP酶的抑制作用可能是MMS导致细胞病理变化的一个重要环节。     

醋氨酚大鼠肝细胞损伤及其机制的研究

醋氨酚(AAP)引起大鼠肝细胞膜损伤发生在肝细胞还原型谷胱甘肽(GSH)明显下降之后,提示GSH下降是AAP损伤肝细胞的原因之一。同步测定培养大鼠肝细胞GSH和胞浆自由钙离子浓度([Ca~(2+)f]c)的结果证明:加10mmol/L AAP培养2.5小时可引起GSH显著降低,[Ca~(2+)f]c明显升高。二巯基苏糖醇(DTT)5mmol/L可使加AAP后,细胞内GSH仍维持较高水平,[Ca~(2+)f]c升高几乎被完全拮抗。首次直接证明AAP所致的[Ca~(2+)f]c升高与GSH等巯基物质被消耗有关。     

钙离子拮抗剂用于降血压治疗的新进展

钙离子拮抗剂是20世纪末最重要的心血管病治疗学进展成果之一,现就其降压作用、对危险因子及并发症控制的新进展作一综述。1.钙离子拮抗剂作用机理 高血压病人细胞膜对Ca~(2+)通透性增高,膜电位敏感性钙通道和受体敏感性钙通道大量开放,细胞内钙离子浓度升高,最终导致血管平滑肌功能异常是血压升高的主要原因。钙离子拮抗剂的降压作用就是通过阻滞钙通道,影响Ca~(2+)内流和细胞内Ca~(2+)移动从而影响心肌和平滑肌细胞兴奋-收缩耦连,使心肌收缩性降低,外周血管扩张,阻力降低来实现的。目前人们发现在细胞膜表面存在通过介导胞浆游离钙升高而起作用的钙动员受体,钙离子拮抗剂可与此受体结合而降低胞浆游离钙。现有临床研究提示钙离子拮抗剂的降压机制除了钙通道阻滞以外,还可能与细胞膜钙泵活性下降使胞浆内钙离子浓度增高有关。高血压病发生机制复杂,神经末梢分泌的激素与旁分泌因子也有重要作用。其中血     

用电镜X射线显微分析法研究梗塞样心肌细胞内钙的分布

用电子显微镜X射线显微分析技术,结合用新鲜组织的快速冷冻固定及冷冻超薄切片技术,对新鲜大鼠心房细胞肌原纤维内Ca~(2+)进行定量分析。大鼠经30mg/kg异丙基肾上腺素(ISO)皮下注射后6G,发现肌原纤维Ca~(2+)浓度明显升高,达每kg(干重)361mmol/L,正常对照组的Ca~(2+)浓度小于1mmol/L,每kg(干重),而ISO与异搏定同时使用时Ca~(2+)浓度与对照组近似。结果证明,ISO引起的心肌细胞缺血损伤与肌原纤维内Ca~(2+)浓度升高有关,而异搏定能阻止Ca~(2+)内流,有对抗ISO的心肌毒作用。