TGF-β1上调CD4+CD25+调节性T细胞FOXP3的表达

目的 探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)在肺癌患者CD4 CD25 调节性T细胞比例增高中发挥的作用.方法 采用酶消化法培养原代肺癌细胞,将培养的肺癌细胞及肺癌细胞培养上清液分别与自身来源的外周血单个核细胞共培养,不同浓度(2、5、10 ng/ml)的TGF-β1进行干预后,检测各组CD4 CD25 调节性T细胞标志物FOXP3 mRNA的表达.结果 肺癌细胞与外周血单个核细胞共培养组FOXP3 mRNA的表达呈阳性,且随着TGF-β1干预浓度的增加,FOXP3 mRNA的表达强度逐渐增高,两者呈正相关(r=0.663,P＜0.05);外周血单个核细胞经肺癌细胞培养上清液孵育后亦有FOXP3 mRNA的表达,TGF-β1干预后,FOXP3 mRNA的表达虽有上调但与干预前相比,差异无显著性意义(P＞0.05).结论 TGF-β1能上调外周血单个核细胞中FOXP3的表达,即增加CD4 CD25 调节性T细胞的比例,从而参与肺癌免疫逃逸机制.     

溃疡性结肠炎患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的临床意义

目的 研究溃疡性结肠炎(UC)患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞数量、相关细胞因子的水平以及Foxp3的表达,分析它们在UC发病中的作用.方法 收集UC患者及健康对照组外周抗凝静脉血,分离纯化T淋巴细胞.分析UC患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞百分率, RT-PCR检测T细胞Foxp3mRNA的表达.结果 与正常对照组相比,UC患者外周血CD4+T、CD25+T、CD4+CD25+T/CD4+T细胞百分率均显著下降(P﹤0.05),血清中细胞因子IL-10、TGF-β1的水平也明显低于对照组,T细胞Foxp3mRNA的表达也明显降低(P﹤0.05),并且CD4+CD25+T/CD4+T细胞百分率和Foxp3mRNA水平与UC患者疾病的活动指数呈负相关.结论 UC患者外周血存在细胞免疫功能失调,CD4+CD25+调节性T细胞数量与功能状态发生改变,T淋巴细胞耐受机制的破坏可能与UC的疾病活动状态和发病机制有关.     

哮喘小鼠CD4+CD25+调节性T细胞数量及功能的改变

目的观察哮喘小鼠脾脏CD^4＋CD2^4＋5’调节性T细胞（简称Treg细胞）数量及功能的改变。方法以屋尘螨提取液复制小鼠哮喘模型后，分离小鼠脾脏CIM’T细胞，采用流式细胞仪检测Treg细胞占CD^4＋T细胞的比例；分离Treg细胞，与屋尘螨提取液共同培养后测定上清液中白细胞介素-4（IL-4）及IL-10的含量；将Treg细胞与CD^4＋T细胞共同培养，观察其对CD^4＋T细胞增殖及IL4、IL-5、γ-干扰素（IFN-γ）分泌的影响。结果哮喘小鼠脾脏Treg细胞占CD^4＋T细胞比例明显下降；与正常组相比，哮喘小鼠脾脏Treg细胞IL-4、IL-10的分泌无明显差异；Treg细胞可显著抑制哮喘小鼠CD^4＋T细胞的增殖，并降低其IL-4的分泌，对IFN-γ的合成分泌无明显作用；使用anti—CD25mAb后，哮喘和正常小鼠Treg细胞的作用均被显著抑制。结论哮喘小鼠Treg细胞功能与正常对照组小鼠无明显区别，但数量显著下降。哮喘发病过程中Th2型反应占优势，与Treg细胞数量减少，对Th2型反应的抑制作用降低有一定关系。     

急性淋巴细胞白血病患者化疗前后CD4~+CD25~+调节性T细胞变化及相关因素研究

目的观察急性淋巴细胞白血病(ALL)患者化疗前后外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的变化。方法选择26例化疗后完全缓解的ALL患者进行自体对照研究,采用流式细胞术对化疗前后外周血中CD4+CD25+调节性T细胞进行检测,并采用ELISA检测血清中白细胞介素-10(IL-10)、转化生长因子-β(TGF-β)水平,另选择同期体检健康志愿者20例为对照组,进行上述检查。比较对照组与ALL患者化疗前后外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的变化。结果 ALL患者化疗前CD4+CD25+调节性T细胞比例为(5.69±1.39)%,明显高于对照组(P<0.05)。ALL患者化疗后CD4+CD25+调节性T细胞比例明显较化疗前降低(P<0.05)。ALL患者化疗后CD4+CD25+调节性T细胞比例与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。ALL患者化疗前IL-10和TGF-β表达水平与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。ALL患者化疗后IL-10和TGF-β水平与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。相关性分析显示,26例患者化疗前IL-10、TGF-β表达水平与CD4+CD25+调节性T细胞比例均呈正相关(P<0.05)。结论 CD4+CD25+调节性T细胞水平在化疗前后具有显著差异,提示其可能与免疫抑制有关,该指标的检测有助于对ALL患者预后及治疗效果的判断。     

IL-15诱导CD4+CD25- T细胞向CD4+CD25+调节性T细胞转化的机制探讨

目的初步探讨IL-15诱导CD4+CD25-T细胞向CD4+CD25+调节性T细胞(Tregs)转化的机制。方法采用免疫磁性细胞分离法分离人外周血中的CD4+CD25-T细胞,依据加入细胞因子不同分为4组:对照组、IL-15组、拮抗1组、拮抗2组,其中后3组均于培养的第1天加入IL-15,而拮抗1组和拮抗2组分别于培养第1、3天加入STAT5a封闭性肽。流式细胞仪检测细胞表型变化,3H-TdR掺入法检测IL-15诱导产生的Tregs抑制CD4+CD25-效应T细胞(Teff)增殖的免疫功能,Western blot法检测细胞内p-STAT5的变化。结果与对照组比较,IL-15能诱导CD4+CD25-T细胞中CD25和Foxp3表达上调,IL-15诱导生成的Tregs具有较天然Tregs稍弱的免疫抑制功能。Western blot检测结果显示,IL-15组p-STAT5表达较对照组明显上调。加入STAT5a封闭性肽后,拮抗1组和拮抗2组中CD4+CD25-T细胞中CD25和Foxp3表达下调,但拮抗2组[细胞表型分别为(47.9±6.0)%、(20.7±3.4)%]改变较拮抗1组[细胞表型分别为(30.7±8....     

左归丸对小鼠CD4+ CD25+调节性T细胞的影响

目的:观察左归丸制剂对小鼠脾细胞中Treg亚群及其相关细胞因子表达的影响。方法:BALB/c小鼠给予不同剂量左归丸处理后,利用流式细胞术检测小鼠脾细胞中Treg亚群(CD4+/CD25+)的变化;采用RT-PCR法检测小鼠脾细胞中IL-10、TGF-β、IFN-γ及Foxp3的表达水平;采用ELISA法检测小鼠外周血中IFN-γ的分泌水平。结果:小剂量左归丸对小鼠脾脏Treg亚群及相关细胞因子的表达没有显著影响;中剂量左归丸可明显上调小鼠脾脏Treg亚群比例(P<0.05),提高Treg特异性胞内信号Foxp3及相关细胞因子IL-10、TGF-β的转录水平,同时抑制IFN-γ的表达;大剂量左归丸可显著降低Treg细胞亚群比例,对Foxp3I、L-10、TGF-β、IFN-γ的表达均有明显的抑制作用(P<0.05)。随着中、大剂量左归丸处理小鼠IFN-γ的转录下调,血清中IFN-γ的水平也明显下降(P<0.05)。结论:左归丸可上调Treg细胞及相关细胞因子的表达水平,抑制IFN-γ的表达,但这种免疫效应有剂量限制性,大剂量应用时显示抑制作用,提示左归丸对Treg亚群有剂量依赖性的双向调节作用。     

初发系统性红斑狼疮患者外周血CD4+CD25+调节性 T细胞和TGF-β1含量

  【目的】 了解初发系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞和TGF-β1在SLE发病中的作用。 【方法】 流式细胞仪检测25例初发未治疗的SLE患者和15例健康对照者外周血单个核细胞中CD4+CD25+、CD4+CD25+ Foxp3+调节性T细胞占CD4+ T 细胞的百分比,ELISA检测血清中TGF-β1含量。【结果】 SLE患者PBMC中CD4+CD25+ T细胞、CD4+CD25+Foxp3+ T细胞占CD4+ T细胞百分比均较健康对照组明显减少(分别为7.9 ± 2.2 vs 12.5 ± 5.3和2.1 ± 1.1 vs 4.0 ± 1.8,P < 0.05)。SLE患者血清中TGF-β1含量(pg/mL)低于健康对照组(214 ± 48 vs 419 ± 85,P < 0.05)。SLE患者PBMC中CD4+CD25+ T细胞?CD4+CD25+Foxp3+ T细胞占CD4+ T细胞的百分比以及血清TGF-β1的含量均与病情活动指数(DAI)成负相关(r分别 = -0.68?-0.56?-0.53, P < 0.05),但各型T细胞占CD4+ T细胞的百分比与血清TGF-β1的含量之间相关分析均无统计学意义。 【结论】 Treg与TGF-β1参与SLE的发病,两者均可作为病情活动的观察指标。且血清TGF-β1的含量与Treg占CD4+ T细胞的百分比在SLE中的下降趋势一致,提示两者之间存在一定的联系,推测是TGF-β1的不足导致Treg的生成减少。     

哮喘儿童外周血单个核细胞Tim-3 mRNA的表达及其与CD4~+CD25~+调节性T细胞的关系

目的观察哮喘患儿外周血单个核细胞(PBMC)中Tim-3 mRNA的表达及其与CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)的关系,探讨Tim-3在哮喘发生发展中的作用。方法收集哮喘门诊或住院患儿73例,其中哮喘缓解期38例(缓解组),轻至中度急性发作期35例(发作组)。利用RT-PCR检测哮喘患儿PBMC中Tim-3 mRNA的表达并做半定量分析,流式细胞术检测PBMC中的CD4+CD25+Treg的水平(CD4+CD25+Treg占CD4+T细胞的百分比)。利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆中白细胞介素6(IL-6)、转化生长因子β(TGF-β)的水平,并分析Tim-3 mRNA与CD4+CD25+TregI、L-6水平的相关性。结果哮喘发作组PBMC中Tim-3 mRNA吸光度值为(0.86±0.17),与缓解组(0.39±0.11)和正常对照组(0.06±0.03)比较,差异具有统计学意义(均P<0.05),并且缓解组与正常对照组比较差异亦具有统计学意义(P<0.05)。哮喘发作组外周血CD4+CD25+Treg百分率为(8.35±1.67)%,与缓解组[(10.21±2.04)%]和正常对照组[(12.43±2.58)%]比较,差异均具有统计学意义(P<0.05),并且缓解组与正常对照组比较差异亦具有统计学意义(P<0.05);哮喘发作组血浆中IL-6水平为(78.35±14.59)pg/mL,与缓解组[(36.48±9.18)pg/mL]和正常对照组[(10.24±3.57)pg/mL]比较,差异均具有统计学意义(P<0.05),缓解组与正常对照组比较差异亦有统计学意义(P<0.05)。3组血浆中TGF-β水平没有明显差异;哮喘发作组和缓解组PBMC中Tim-3 mRNA的表达水平与CD4+CD25+Treg百分率均呈负相关(r=-0.81,-0.79,均P<0.05),与IL-6的水平呈正相关(r=0.87,0.83,均P<0.01)。结论哮喘患儿PBMC中Tim-3 mRNA表达增高参与哮喘的发生与发展,其机制可能与升高血浆IL-6,抑制CD4+CD25+Treg的生成有关。     

体外培养扩增CD4+CD25+调节性T细胞的实验观察

目的 观察细胞因子体外培养扩增CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)的作用,以便从体外获取大量Treg细胞.方法 将从C57BL/6幼稚小鼠脾脏和淋巴结中提取的Treg与从DBA/2小鼠骨髓中提取的成熟树突细胞(mDC)混合培养,并分别加入白细胞介素-2(IL-2)、IL-4或IL-15,检测Treg增殖和凋亡的情况,与不加入任何细胞因子为对照.分别将培养获得的Treg与C57BL/6幼稚小鼠的效应性T细胞(Teff)混合培养,测定扩增后的Treg对Teff的抑制活性.检测扩增后Treg的Foxp3表达,从而证明培养获得的Treg仍保持其表型.结果 在保持其对Teff抑制活性的同时,IL-2组、IL-4组、IL-15组Treg的增殖细胞前体频率分别为31.3%、28.9%、34.5%,明显高于对照组(14.5%),均P＜0.05;增殖指数分别为1.9、1.7、1.8,明显高于对照组(1.5),均P＜0.05.IL-2组、IL-4组、IL-15组Treg的凋亡细胞比例分别为12.8%、11.4%、12.7%,均明显低于对照组(28.9%),均P＜0.05.扩增后的Treg仍高表达Foxp3(91.75%).结论 IL-4、IL-15和IL-2一样,具有促进Treg增殖、减少其凋亡的作用,并同时保持对Teff的抑制功能.扩增后的Treg仍保持其表型,高表达Foxp3.     

CD_4~+ CD_(25)~+调节性T细胞与动脉粥样硬化

动脉粥样硬化是一种慢性炎症性疾病,而且炎性反应的起始与持续都有先天性和获得性免疫应答的参与。CD4+ CD25+调节性T细胞(CD4+ CD25+ Treg)是一个具有独特免疫调节功能的T细胞亚群,能够抑制效应T细胞的活性。过去许多研究已证实,CD4+ CD25+ Treg在动脉粥样硬化中起着重要作用,本文综述了CD4+ CD25+ Treg与动脉粥样硬化的关系。     

穿龙薯蓣皂苷元对CIA 小鼠CD4+ CD25- T 分化为Treg 细胞的诱导作用

目的：探讨穿龙薯蓣皂苷元诱导胶原性关节炎（collagen induced arthritis,CIA）小鼠CD4+CD25-T 细胞向调节性T 细胞（regulatory T cells,Treg）转化的影响。方法：采用免疫磁性细胞分离法（magnetic activated cell sorting,MACS）分离CIA 小鼠的CD4+CD25-T 细胞。通过不同浓度（25、12.5、6.25 μmol·L-1）的穿龙薯蓣皂苷元诱导CD4+CD25-T 细胞向Treg 细胞分化,用FCM 检测Treg 细胞比率,Real-Time PCR 法检测Foxp3 mRNA的水平,ELISA 法检测培养上清白细胞介素10（interleukin 10,IL-10）的含量。结果：免疫磁性细胞分离法分选出的CD4+CD25-T 细胞纯度达93.89%。与对照组相比,穿龙薯蓣皂苷元给药组Treg 细胞比率明显上调（P<0.05）,Foxp3 mRNA 的表达水平和培养上清中IL-10 的水平均明显增加（P<0.05）。结论：穿龙薯蓣皂苷元可以诱导     

CD_4~+CD_(25)~+调节性T细胞与支气管哮喘

人体内存在多种调节性T细胞,其中CD4+CD2+5调节性T细胞(CD4+CD2+5Treg)具有独特的作用方式和功能特征。CD4+CD2+5Treg在移植耐受、肿瘤免疫、过敏性疾病及微生物感染方面起着重要作用。支气管哮喘作为一种常见的慢性呼吸道疾病,其发病机制极为复杂,与免疫等多种因素有关。本文就CD4+CD2+5Treg的特性及在哮喘的发病和治疗方面研究进展作一综述。     

CD4+CD25+Treg细胞调节T细胞作用机制的实验研究

目的 :通过检测Treg细胞表达介导抑制性共刺激分子CTLA4和分泌抑制性细胞因子 ,并设置Treg细胞与效应性T细胞共培养和分隔培养实验模型 ,分析Treg细胞对效应性T细胞形成抑制作用的可能机制及各机制的主次要关系。方法 :对比分析Treg细胞与效应性T细胞膜分子CTLA4、CD2 8表达和细胞因子IL 10、TGF β1 分泌水平 ;以TransWellMillicell PCF分隔培养槽分隔培养Treg细胞与不同淋巴细胞组成的反应体系 ,采用向共培养及分隔培养体系加入与不加入IL 10、TGF β1 抗体的阻断方法 ,检测Treg细胞对不同组混合淋巴细胞反应的抑制效率。结果 :Treg细胞分泌IL 10和TGF β1 的浓度水平明显高于效应性T细胞 ,Treg细胞培养上清中IL 10和TGF β1 水平分别达到(380 0± 36 3)pg ml和 (790 0± 5 6 8)pg ml,Treg细胞分泌IL 10和TGF β1 的浓度水平与效应性T细胞比较 ,均有显著性差异 (P <0 0 1)。共刺激分子CTLA4、CD2 8在Treg细胞和效应性T细胞膜表面的表达水平存在明显差异 ,Treg细胞以表达CTLA4为主。Treg细胞对共培养体系混合淋巴细胞反应的抑制效率明显高于分隔培养 ,通过分泌IL 10对效应性T细胞的抑制作用亦明显强于通过TGF β1 。结论 :细胞接触机制是Treg细胞抑制效应性T细胞的主要作用机制 ,而细胞因子机制中     

IL-2与CD_4~+CD_(25)~+调节性T细胞的相关研究进展

白细胞介素2(IL-2)最早被称为T细胞生长因子,在体外能够有力地促进T细胞生长和扩增,而在体内IL-2的具体作用尚不清楚。CD4+CD2+5调节性T细胞是调节性T细胞的一个重要亚群,它能够以主动性的方式介导机体对自身抗原的免疫耐受以及抑制抗肿瘤免疫应答,但在体内其具体的免疫抑制机制目前还不清楚。有研究证实IL-2在CD4+CD2+5调节性T细胞胸腺发育和外周维持扩增中发挥重要作用,因此充分了解IL-2与CD4+CD2+5调节性T细胞的关系有助于更好的将其应用到临床的免疫治疗当中。     

CD_4~+CD_(25)~+调节性T细胞在心脏疾病中的研究进展

CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)是体内具有免疫调节功能的一类特殊T细胞亚群。近年来,国内外的大量研究表明Treg与很多种心血管疾病的发生和进展密切相关。因此,认识Treg及其在心脏疾病中免疫抑制的机制,有助于提高心脏疾病的免疫治疗效果。现就CD4+CD25+Treg的产生、特征、作用机制及其与心脏疾病的联系予以综述。     

Lewis肺癌小鼠脾脏CD4~+ CD25~+调节性T细胞和TGF-β1与肺癌的相关性

目的:探讨Lewis肺癌模型小鼠脾脏组织中CD4+CD25+调节性T细胞和TGF-β1的表达水平与肺癌发生的关系。方法:采用流式细胞仪检测CD4+CD25+调节性T细胞的比例,ELISA法检测TGF-β1的表达水平。结果:荷瘤小鼠CD4+CD25+调节性T细胞表达水平为(21.91±12.34)%,高于对照组的(14.39±4.51)%(P<0.05),荷瘤小鼠TGF-β1表达水平(3.39±1.62)μg/L,高于对照组的(2.47±0.35)μg/L(P<0.05)。结论:荷瘤小鼠CD4+CD25+调节性T细胞比例和TGF-β1表达水平增高,提示二者可能参与Lewis肺癌的发生。     

CD_4~+CD_(25)~+调节性T细胞和树突状细胞在HBV感染中的相互作用

CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)是迄今为止所发现的最重要的免疫抑制细胞,几乎抑制所有的免疫反应,在机体免疫系统中发挥负向调节作用。树突状细胞(DC)作为一类专职的抗原递呈细胞,在抗原识别、递呈中发挥重要作用,具有启动免疫应答和诱导免疫耐受的双重特性,对机体抗乙型肝炎病毒(HBV)起关键作用。作为在HBV致病机制中起重要作用的两个免疫细胞群——Treg与DC,探讨二者在慢性乙型肝炎发病机制中的相互作用,必将为进一步探索治疗HBV提供新的思路。     

乙型肝炎患者CD4＋CD25＋调节性T细胞检测及意义

目的探讨CD4＋CD25＋调节性T细胞在乙型肝炎患者发病机制中的作用。方法利用免疫荧光法检测20例携带者、10例慢性乙型肝炎、5例慢性重症乙型肝炎患者的CD4＋CD25＋调节性T细胞水平,分析与HBV基因型的关系。结果（1）重型乙型肝炎组外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞的百分率为（2．52±0．94）％,较慢性乙型肝炎组的（5．25±2．17）％差异有统计学意义（P〈0．05）,比乙肝病毒携带者组及健康对照组则差异有统计学意义（P均〈0．01）;（2）慢性乙型肝炎组外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞的百分率与无症状乙肝病毒携带者组及健康对照组相比,差异具有统计学意义（P〈0．05）;（3）乙肝病毒携带者组外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞的百分率为（8．51±2．82）％,与健康对照组的（8．51±2．82）％比较差异无统计学意义（P〉0．05）。（4）HBV基因型C型组外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞的百分率为（6．42±2．36）％,较HBV基因型B型组的（7．64±2．87）％稍为下降,但差异无统计学意义（P〉0．05）。结论CD4＋CD25＋调节性T细胞能抑制T细胞对乙肝病毒的免疫反应,从而抑制乙型肝炎的发生;CD4＋CD25＋调节性T细胞的水平与病情轻重有一定的关系。     

初发系统性红斑狼疮患者CD4+CD25＋CD127low/-T细胞可能具有效应T细胞特点的研究

目的 检测外周血CD4+ CD25+ CD127low/-T细胞和CD4+ CD25 high CD 127 low/-T细胞,探讨调节性T细胞在系统性红斑狼疮发病中的作用.方法 采用三色直接荧光素标记法和多参数流式细胞仪检测32例SLE患者及24名正常对照者外周血CD4+ CD25+ CD127low/-T细胞、CD4+ CD25highCD127low/-T细胞的比例,同时检测CD4+ CD25+ CD127low/-T细胞的FOXP3表达水平及CD4+ CD25+ CD127low/-T细胞培养上清液IL-17和TGFE-β1的表达水平.结果 SLE患者外周血CD4+ CD25highCD127low/-T细胞与正常对照组比较明显减少,差异有统计学意义(P＜0.001);然而,CD4+ CD25+ CD127low/-T细胞与正常对照组比较无显著性差异(P＞0.05).CD4+ CD25highCD127llow/-T细胞与SLEDAI评分呈负相关(P＜0.001).CD4+ CD25+ CD127llow/-T细胞与SLEDAI评分无相关性(P=1.000).与正常对照相比,初发SLE患者CD4+ CD25+ CD127low/-T细胞培养基产生较多的IL-17(P ＜0.001),而TGF-β1的产生减少(P ＜0.001).与正常对照相比,初发SLE患者CD4+ CD25+ CD127low/-T细胞的FOXP3表达减少(P ＜0.001).结论 初发系统性红斑狼疮患者CD4+ CD25+ CD127low/-T细胞可能具有效应性T细胞特点.