四种制备方法的四物汤UPLC指纹图谱对比研究

目的建立四物汤指纹图谱的方法,将传统汤剂、煎药机制、煮散、配方颗粒四种方法进行对比性研究。方法采用Inertsil ODS-3 C_(18)(100 mm×2.1mm,2μm)色谱柱,使用0.1%磷酸:乙腈梯度洗脱,流速为0.2mL/min,在230nm波长下采集白芍对照药材与四物汤传统饮片的共有峰信息,在290nm波长下采集熟地、当归、川芎对照药材与四物汤传统饮片的共有峰;四种方法四物汤相似度评价使用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"。结果 230nm波长下白芍对照药材与四物汤传统饮片有9个的特征共有峰,四种不同制备方法的四物汤相似度良好,在0.988～0.998之间;290nm波长下当归、川芎和熟地对照药材有20个共有峰;四种不同制备方法的四物汤相似度良好,在0.985～0.997之间。结论各组物质成分无显著差异,且煎药组与传统饮片组相似度更好。     

裸花紫珠UPLC指纹图谱的建立

目的建立裸花紫珠UPLC指纹图谱。方法裸花紫珠80%甲醇提取物的分析采用Phenomenex kintex XB-C_(18)色谱柱(2.1 mm×150 mm,1.7μm);流动相0.1%甲酸溶液-乙腈,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;柱温45℃;检测波长332 nm。利用二极管阵列检测器(DAD)和四极杆-飞行时间质谱(Q-TOF-MS)对各指纹峰进行鉴定。结果 15批样品指纹图谱中有19个共有峰,相似度均大于0.960。裸花紫珠与其他紫珠属样品分为2类。结论该方法稳定可靠,可用于裸花紫珠的质量控制。     

水线草UPLC指纹图谱的建立及应用

目的:建立不同产地水线草的超高效液相色谱法(UPLC)指纹图谱,并对其混淆品白花蛇舌草进行鉴别应用。方法:采用UPLC法,色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C18(50 mm×2.1 mm,1.7μm),以甲醇-1%冰醋酸梯度洗脱,柱温30℃,流速0.2 m L/min,检测波长254 nm。指纹图谱采用相似度分析和主成分分析。结果:建立了水线草药材的专属性指纹图谱,确定了15个共有峰。各产地水线草药材指纹图谱相似度均超过0.85。结论:该指纹图谱重复性好,简便可靠,可用于水线草药材的专属性鉴别,有效区别水线草及其混淆品白花蛇舌草。     

艾叶UPLC指纹图谱

目的:建立艾叶的UPLC指纹图谱鉴别方法,为其质量控制提供参考。方法:采用ZORBAX RRHD Eclipse Plus C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),流动相乙腈-0.10%乙酸水梯度洗脱,流速0.20 m L·min-1,290 nm波长下测定艾叶及其混淆品指纹图谱,并作相似度比较分析。结果:建立了艾叶UPLC指纹图谱共有模式,有36个共有指纹峰被标定且相似度较高,而艾叶与非药用部位及混淆品的指纹图谱相似度均0.700,共有峰的个数低于36个,具有明显的差异。结论:HPLC艾叶鉴别方法简便,快速,重复性好,特征性强。艾叶与非药用部位及混淆品的指纹图谱差异提示药材间的化学成分存在差异,相互不能混用。     

淡豆豉UPLC指纹图谱

目的建立淡豆豉UPLC指纹图谱。方法淡豆豉80%甲醇提取液的分析采用ACQUITY UPLCBEH C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm);流动相0.1%冰乙酸-乙腈,梯度洗脱;体积流量0.3 m L/min;检测波长260 nm;柱温25℃;进样量10μL。通过SPSS1 21.0软件进行聚类分析。结果 11批样品的指纹图谱中有10个共有峰,其中6个为大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、黄豆苷元、黄豆黄素、染料木素,相似度均高于0.900,可分为2类。结论该方法简便快速,可用于淡豆豉的质量控制。     

吴茱萸UPLC指纹图谱的建立及质量评价

目的:建立吴茱萸超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱分析方法,对不同品种、不同产地吴茱萸药材的质量进行较全面的评价。方法:采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),以乙腈-0.1%甲酸水为流动相进行梯度洗脱,检测波长300,215 nm,流速0.4 m L·min~(-1),柱温35℃。采用相似度评价、聚类分析及偏最小二乘法判别分析对37批样品的指纹图谱进行分析。结果:建立了吴茱萸药材的UPLC指纹图谱及共有模式,标定了34个共有峰,采用对照品比对,指认出17个共有峰。37批样品的相似度在0.703~0.973。不同来源的吴茱萸药材指纹图谱轮廓基本一致,化学成分的相对含量在较大范围内波动。聚类分析和偏最小二乘判别分析结果表明,化学成分的相对含量与药材品种、产地没有明显的相关性,而与药材的千粒重在一定程度上相关;吴茱萸次碱、吴茱萸碱、新绿原酸、绿原酸、吴茱萸卡品碱、柠檬苦素是差异较大的6个成分。结论:该方法简便、快速,可有效、全面地用于吴茱萸药材的质量评价;控制吴茱萸药材质量的关键是把握"近成熟"这一采收时间环节。     

金花茶UPLC指纹图谱的建立及亲缘关系分析

目的 建立不同种类金花茶UPLC指纹图谱,结合其表型特征和化学成分差异分析其亲缘关系,为金花茶品种分类和应用提供依据。方法 采用UPLC法建立22种金花茶的指纹图谱,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）对金花茶UPLC指纹图谱进行相似度评价,并采用SPSS24.0软件进行主成分分析、聚类分析。结果 选取了3个色谱共有峰,指认了11个已知化学成分。不同种金花茶共有峰相似度在0.247～0.740。主成分分析筛选出弄岗、柠檬黄、龙州、陇瑞、细叶、隆安、顶生、天峨、中东、毛瓣10种金花茶的化学成分含量较高。聚类分析结果显示龙州亚类单独聚为一类;凹脉、顶生、天峨、显脉、弄岗、倒卵叶、柠檬黄、薄叶、中东、东兴、防普金花茶聚为一类;陇瑞、龙州亚种、细叶金花茶为一类;淡黄、扶绥、毛瓣、四季、恩城、隆安、武鸣金花茶聚为一类。结论 金花茶种类繁多,不同种金花茶所含化学成分存在较大差异,结合表型特征,根据成分差异可基本获得种间亲缘关系。     

白芍UPLC指纹图谱研究

目的建立白芍UPLC指纹图谱测定方法,对不同产地白芍的质量进行较全面的评价。方法色谱柱ACQUITY UPLC#174;HSS T3(100 mm×2.1 mm,1.8μm),以乙腈-0.05%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长230 nm,柱温30℃,体积流量0.4 m L/min。采用相似度评价、聚类分析、主成分分析3种方法对23批白芍饮片指纹图谱进行研究。结果建立了白芍饮片的专属性UPLC指纹图谱,确定了8个共有峰;23批白芍样品质量差异较大,不同产地间和同一产地内样品均具有一定差异。结论该方法简便、易行,为白芍饮片的质量控制提供了较为有效的快速评价方法。     

蜘蛛香UPLC指纹图谱研究

目的:建立蜘蛛香UPLC指纹图谱,为其质量控制提供科学依据。方法:采用Ultimate~? UHPLC Polar-RP色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm),以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱;检测波长为327 nm(0～11 min)和256 nm(11～30 min);流速为0.21 mL/min;柱温为30℃。通过相似度评价、聚类分析、主成分分析、偏最小二乘判别分析法对21批蜘蛛香指纹图谱进行分析。结果:建立了蜘蛛香的UPLC指纹图谱,确定了25个共有峰,指认了9个成分,其中16批样品相似度大于0.900,所有样品可分成2类,并发现缬草三酯、绿原酸、异绿原酸A、乙酰缬草三酯、异绿原酸C是样品间差异较大的5个成分。结论:UPLC指纹图谱结合化学模式识别能较好地反映蜘蛛香的整体质量,可为蜘蛛香质量控制和评价提供参考。     

茯苓UPLC特征指纹图谱

建立茯苓的UPLC特征指纹图谱分析方法,为快速评价茯苓的质量,完善茯苓的质量控制方法提供依据。采用ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),流动相乙腈-0.05%磷酸溶液,梯度洗脱,检测波长243 nm。建立了茯苓UPLC特征指纹图谱共有模式,标定了20个共有峰,指认了其中7个共有峰,15批茯苓的相似度在0.787～0.974。该方法快速,可用于评价茯苓的质量。     

补肾强身片UPLC指纹图谱

目的建立补肾强身片(淫羊藿、菟丝子、金樱子等)UPLC指纹图谱。方法该药物50%乙醇提取液的分析采用Agilent SB-C_(18)色谱柱(100 mm×4.6 mm,2.7μm);以乙腈-0.1%磷酸为流动相,梯度洗脱;体积流量0.5 mL/min;检测波长215 nm;柱温40℃。再通过聚类分析、主成分分析、正交偏最小二乘判别分析对指纹图谱进行评价。结果 12批样品的UPLC指纹图谱中有20个共有峰,并鉴定出9个(原儿茶酸、红景天苷、绿原酸、金丝桃苷、特女贞苷、朝藿定C、淫羊藿苷、山柰素、宝霍苷Ⅰ),相似度0.843~0.970。12批样品可分成3类,并找到4个差异标志物,包括特女贞苷和绿原酸。结论该方法简便可靠,可用于补肾强身片的质量控制。     

橘核UPLC指纹图谱研究

目的:建立橘核UPLC指纹图谱,为其质量控制提供依据。方法:采用Ultimate~? AQ-C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm);以乙腈(A)-水(B)为流动相,梯度洗脱;流速:0.21 mL/min;检测波长:283 nm(0～20 min)、210 nm(20～50 min);柱温:30℃。结果:建立了橘核UPLC指纹图谱,确定了17个共有峰,指认了5个成分,15批橘核样品指纹图谱与对照图谱的相似度均大于0.90,所有样品可聚为2类,并确定黄柏酮、柠檬苦素、诺米林3个组间差异较大的成分。结论:该方法简便、快速,可用于橘核的质量评价。     

青蒿UPLC指纹图谱的建立与多种成分含量测定

目的:建立30批青蒿样品的UPLC指纹图谱及有机酸类、黄酮类、香豆素类等成分的含量测定方法。方法:采用Agilent Eclipise Plus C_(18)(50 mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱;以0.1%磷酸溶液-甲醇为流动相,梯度洗脱;建立指纹图谱;并对青蒿中有机酸类、黄酮类、香豆素类等9个成分进行含量测定。结果:建立了青蒿UPLC指纹图谱及同时测定多成分含量的方法。9种成分在测定范围内线性关系良好,不同产地的青蒿药材质量存在一定差异。江苏盱眙的青蒿综合评价质量最优。结论:本实验建立的方法准确可靠,可同时测定青蒿中东莨菪内酯、滨蒿内酯、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、木犀草素、芹菜素、猫眼草黄素、艾黄素的含量。     

天葵子UPLC指纹图谱建立及指标性成分测定

目的:建立天葵子指纹图谱及指标性成分的测定方法,为天葵子质量评价提供参考。方法:采用超高效液相色谱法(UPLC),以甲醇-0.05%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,建立天葵子药材的指纹图谱,并测定天葵子中格列风内酯、木兰花碱含量。结果:建立了天葵子指纹图谱,确定了17个共有峰,指认了3个,其相似度均大于0.9。格列风内酯、木兰花碱分别在质量浓度为0.525～524.770、0.514～514.108μg·mL~(-1)具有良好的线性关系,平均加样回收率为94.73%、92.90%,RSD均小于3.0%。结论:该方法快速准确、专属性强、重复性好、简便高效,可作为天葵子的质量控制方法。     

东北苦菜UPLC指纹图谱建立及化学模式识别

目的建立东北苦菜Ixeris vesicolor DC.UPLC指纹图谱,并进行化学模式识别。方法东北苦菜甲醇提取物的分析采用CORTECS C₁₈色谱柱(2.1 mm×150 mm,1.6μm);流动相0.1%磷酸水-乙腈,梯度洗脱;体积流量0.1 mL/min;检测波长(1～15 min,327 nm;15～50 min,360 nm);柱温35℃;进样量2μL。采用相似度分析和化学模式识别技术相结合的方法对其进行质量评价。结果 10批样品指纹图谱中有19个共有峰,相似度均大于0.953。通过聚类分析将样品分成2类,主成分分析结果支持聚类分析结果,采用正交偏最小二乘法-判别分析筛选出了导致不同批次药材质量差异的3个共有峰,指认出2号峰(绿原酸)和12号峰(木犀草素)。结论该方法稳定可靠,可系统、全面地评价东北苦菜的药材质量。     

五味子的UPLC指纹图谱研究

目的 建立五味子Schisandra chinensis的超高效液相色谱（UPLC）指纹图谱。方法 采用Acquity UPLC HSS T3 色谱柱（100 mm × 2.1 mm,1.8 μm）;以乙腈-水为流动相梯度洗脱;体积流量0.5 mL/min;柱温30 ℃;检测波长216 nm;进样量2 μL。结果 首次建立了五味子的UPLC特征指纹图谱共有模式,标定了21个共有峰,结合保留时间和紫外光谱分析,指认了五味子醇甲、五味子醇乙、当归酰戈米辛H、五味子酯甲、五味子酯乙、五味子甲素、五味子γ-乙素、五味子乙素和五味子丙素的峰位。19批五味子的相似度均在0.970以上。结论 该方法快速、高效,可用于五味子的质量评价。     

益智仁的UPLC指纹图谱研究

目的建立益智仁Alpiniae Oxyphyllae Fructus的超高效液相(UPLC)指纹图谱。方法采用ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm);以乙腈-甲酸水溶液为流动相梯度洗脱;体积流量0.5 m L/min;样品室温度10℃;柱温30℃;检测波长254 nm;进样量2μL。结果首次建立了益智仁的UPLC特征指纹图谱共有模式,标定了20个共有峰,结合保留时间和紫外光谱分析,确定了原儿茶酸、α-羟甲基糠醛、oxyphyllenodiol A、teuhetenone A、teuhetenone B、白杨素、山柰素、杨芽黄素、圆柚酮共9个化合物。19批益智仁,其中15批的相似度在0.970以上。结论该方法快速、高效,可用于益智仁的质量评价。     

野菊花的UPLC指纹图谱研究

目的： 建立不同产地野菊花药材的超高效液相特征性指纹图谱,为全面有效控制和科学评价野菊花药材整体质量提供科学依据。 方法： 采用Agilent C₁₈色谱柱（2.1 mm×50 mm,1.8 μm）,流动相乙腈-0.1%磷酸水溶液,0.4 mL·min^-1梯度洗脱,进样量1.0 μL,检测波长326 nm,柱温25 ℃。 结果： 在12 min内得到野菊花药材的指纹图谱,对其中5个色谱峰进行了初步归属,并对15批药材样品进行了分析,其相似度为0.871~0.985。 结论： 相对于HPLC指纹图谱,UPLC指纹图谱方法具有更好分离效率、更高灵敏度,并大大缩短了分析时间,可用于野菊花药材的质量控制。     

桂葛颗粒UPLC指纹图谱的建立及含量测定

目的：建立桂葛颗粒指纹图谱及7个成分的定量分析方法,为其质量控制研究提供参考。方法：采用UPLC法,色谱柱为Waters ACQUITY UPLC HSS T3(150 mm×2.1 mm, 1.6μm)柱;流动相为乙腈-0.1%甲酸溶液,梯度洗脱;流速为0.2 mL/min;检测波长为245 nm;柱温为30℃;进样量为1μL。建立14批桂葛颗粒指纹图谱;并测定其中7个成分的含量。结果：建立了桂葛颗粒UPLC指纹图谱,共确定21个共有峰,指认出其中11个成分。7个成分在一定的浓度范围内与峰面积的线性关系良好,方法学考察RSD均<3.50%。结论：该研究建立的桂葛颗粒指纹图谱及含量测定方法可用于该制剂的质量控制。     

四物汤的HPLC指纹图谱研究

目的:建立四物汤(熟地黄,当归,白芍和川芎)HPLC指纹图谱分析方法.方法:采用Zorbax SB-Aq色谱柱;流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液(梯度洗脱);白芍特征峰的检测波长为230 nm,熟地黄、当归与川芎特征峰的检测波长为290nm;流速为1 mL/min;柱温为35℃.结果:在230 nm条件下,四物汤中共标示出白芍的10个共有峰;在290 nm条件下,共标示出熟地黄、当归与川芎的17个共有峰.结论:方法准确可靠,重复性好,为四物汤物质基础研究提供了一定参考.