骨碎补影响模型兔膝骨关节炎关节滑膜炎性改变实验研究

目的：采用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）的检测方法观察细胞因子白介素-1（IL—1mRNA）的含量,同时配合光镜下显微观察炎性细胞的改变,探讨膝骨关节炎的发病机制,研究单味中药骨碎补对膝骨关节炎的干预效应及作用机理,并加以讨论、分析。材料与方法：将24只成年新西兰大耳白兔,随机分为4组,空白组6只、模型组6只、治疗组（骨碎补组）6只、对照组（维固力组）6只。、兔左后肢伸直位管型石膏固定6周后得到兔膝骨性关节炎的模型。通过灌胃给药单味中药骨碎的补水煎浓缩液以及西药维固力的浓缩液4周。采用耳缘静脉空气栓塞方法处死各组动物,通过外科手术取下其患肢股骨髁（大小约1cm×1cm）,并分离关节软骨,保留其滑膜,用Trizol液浸泡,4qC冷藏保存,用于RT—PCR的检测;另一部分关节滑膜应用HE染色方法,光镜观察关节滑膜炎性细胞。该实验结果采用SPSS13．0软件包进行相关分析。P〈0．05有统计学意义。结果：单味中药骨碎补能够影响兔膝骨关节炎模型关节滑膜中的炎性细胞因子的表达,给药组软骨中IL-1的表达明显低于模型组,差异有统计学意义（P〈0．05）;并且单味中药骨碎补还对关节滑膜中的炎性细胞有影响,治疗组（骨碎补组）以及对照组（维固力组）炎性细胞明显减少。结论：单味中药骨碎补可通过降低关节滑膜中IL-1的表达,从而保护关节滑膜免受损伤以及破坏,并且能够有效降低关节滑膜中炎性细胞的数量,说明骨碎补对膝骨关节炎有比较显著的防治效果。     

口服骨碎补总黄酮治疗膝骨关节炎患者的临床观察

目的：研究中药骨碎补总黄酮对骨关节炎患者的疗效,并初步探讨其作用机制。方法：膝骨性关节炎患者22例,口服骨碎补总黄酮12周,比较患者用药前后膝关节的HSS评分和血清中IL-1β和PGE2含量。结果：口服骨碎补总黄酮12周后中,22例患者HSS功能评分较用药前明显改善（P〈0.05）,患者血清中炎性因子IL-1β和PGE2水平较用药前明显下降（P〈0.01）。结论：口服中药骨碎补总黄酮后可改善膝骨性关节炎患者的临床症状。其作用机制可能与血清中IL-1β和PGE2水平降低有关。     

骨碎补对兔膝骨关节炎关节软骨细胞凋亡相关因子作用实验研究

目的：采用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测方法,观察骨碎补对实验性兔膝骨关节炎软骨细胞凋亡的影响并进行理论分析。方法：将24只成年新西兰大耳白兔,随机分为6组,空白组6只。模型组6只,治疗组（骨碎补组）6只,对照组（维固力组）6只。兔左后肢伸直位管型石膏固定6周得到兔膝OA的模型。用药4周后,以耳缘静脉空气栓塞法处死各组动物取下每只家兔左后肢股骨髁,取下的关节软骨用于RT—PCR检测。采用SPSS13．0软件包对RT-PCR结果进行方差分析和Pearson相关分析,P〈0．05有统计学意义。结果：MMP3mRNA、BAXmRNA：模型组较空白组的表达水平明显上升,差异有显著性（P〈0．05）;对照组较模型组的表达水平有所下降,差异有显著性（P〈0．05）;治疗组较模型组的表达水平明显下降,差异有显著性（P〈0．05）;治疗组较对照组的表达差异无显著性。bcl-2mRNA：模型组较空白组的表达水平明显下降,差异有显著性（P〈0．05）;对照组较模型组的表达水平有所上升,差异有显著性（P〈0．05）;治疗组较模型组的表达水平明显上升,差异有显著性（P〈0．05）;治疗组较对照组的表达差异无显著性。结论：单味中药骨碎补对防治OA有重要作用。     

骨碎补总黄酮对实验性兔膝骨性关节炎软骨及滑膜的影响

目的研究骨碎补总黄酮对兔膝骨性关节炎的治疗效果,探讨其防治骨性关节炎的可行性。方法32只新西兰大白兔随机分为正常对照组、模型对照组、骨碎补总黄酮组和维固力组。以关节制动法建立兔膝骨性关节炎模型。成模后灌胃给药,8周后镜下观察骨碎补总黄酮对动物模型关节软骨、滑膜组织形态学及基质金属蛋白酶-3表达的影响。结果骨碎补总黄酮组与模型对照组比较滑膜及软骨组织形态学改变明显较轻（P〈0.01）,滑膜、软骨组织中基质金属蛋白酶-3表达减少（P〈0.01）;骨碎补总黄酮组与维固力组相比,各指标间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论骨碎补总黄酮能够减轻兔膝骨性关节炎的软骨退行性变和滑膜炎症,其作用机制可能与调节基质金属蛋白酶-3表达有关。     

骨关节炎的实验研究现况与进展

骨关节炎(Osteoanhritis，简称OA)是我国四大老年病之一，是一种严重影响病人生活质量和社会生产力的慢性病。随着我国人口的老龄化，OA的患病率高达总人口的8．3％。该病是以关节软骨退变为核心，累及骨质，并包括滑膜、关节囊及关节囊外其它结构的不同程度的炎性病变。对其研究已涉及细胞水平及分子水平。本文对相关的实验研究现况及进展做一综述。     

睾酮对雄兔膝骨关节炎预防作用的实验研究

目的：探讨睾酮对雄兔膝骨关节炎（Osteoarthritis,OA）预防的作用。方法：将18只雄性家兔随机分为去势组、未去势组和睾酮补充组,每组6只,未去势组切除右膝关节前交叉韧带和内侧半月板,去势组和睾酮补充组在切除右膝关节前交叉韧带和内侧半月板同时切除双侧睾丸,睾酮补充组于术后第3周开始肌注十一酸睾酮,6 mg/kg,每2周1次,共3次,正常喂养8周后处死所有家兔取右股骨内侧髁行大体评估、切片用免疫组织化学法分析测定软骨细胞类胰岛素1号增长因子（Insulin-like growth factors,IGF-1）表达和关节软骨 Mankin评分,测定不同时期血清总睾酮。结果：未去势组和睾酮补充组软骨细胞中IGF-1的表达高于去势组（P<0.05）、Mankin评分明显低于去势组（P<0.05）,未去势组和睾酮补充组4周和8周时血清总睾酮明显高于去势组（P<0.05）,差异有统计学意义。结论：睾酮对雄兔膝OA有预防作用。     

骨碎补提取工艺的实验研究

目的：优选骨碎补提取的最佳工艺条件。方法：以骨碎补中柚皮苷及骨碎补总黄酮的含量为指标,采用L^9（3^4）正交设计法对骨碎补的提取条件进行研究。结果：提取次数是骨碎补有效成分提取的关键因素,其次是溶媒用量,提取时间和乙醇浓度为最次要因素。结论：最佳提取工艺条件是14倍量55%乙醇回流提取3次,2h/次。     

兔膝骨关节炎关节软骨细胞凋亡的实验研究——超微结构观察

目的 为探讨骨关节炎关节软骨退变的发生机理。方法 按照Hulth法建立兔膝关节炎模型实验组，12只实验兔随机分为2组，每组6只，自身健侧做实验对照组，分别为建模后2周组和4周组后取材，分别制作光镜电镜标本进行系统观察研究。结果 不同时期的骨关节炎关节软骨有程度不一的软骨细胞凋亡，以4周组最为显著，特别是在电镜下软骨细胞凋亡的形态学改变更具特征、更为典型。结论 (1)膝骨关节炎的关节软骨细胞退变时，软骨细胞数目的减少有软骨细胞凋亡的参与。(2)关节软骨退变的程度与软骨细胞数目的减少即与软骨细胞凋亡的程度有关。(3)形态学的特征性表现可作为判断软骨细胞是否发生凋亡的“金指标”。     

大孔树脂分离骨碎补总黄酮工艺优化

目的优选分离纯化骨碎补总黄酮的最佳大孔树脂,建立质量和收率稳定的骨碎补总黄酮制备工艺。方法以骨碎补总黄酮的含量和收率为指标,从大孔树脂的种类和用量、药液的吸附流速、洗脱用乙醇的浓度和流速、洗脱液收集点、洗脱乙醇用量等七方面设计优选骨碎补总黄酮的制备工艺。结果HPD-D大孔树脂分离效果最好,其最佳工艺为煎煮液过滤离心后,以吸附流速10mL/min.100g-1树脂进行吸附,用70%乙醇、4mL/min.100g-1树脂的洗脱流速进行洗脱效果最佳。结论HPD-D大孔树脂分离纯化骨碎补总黄酮制备工艺可行,收率和质量稳定,能够满足工业化生产需求。     

人工膝关节置换术治疗重度膝骨性关节炎的临床疗效

目的:探讨人工全膝关节置换治疗骨性关节炎的临床效果。方法:对2008年1月～2011年5月施行的15例人工膝关节置换临床资料进行回顾性总结和分析。结果:15例(16膝)中,优10膝(62.5%),良5膝(31.3%),可1膝(0.63%),优良率93.8%。结论:人工全膝置换术应用于严重骨性关节炎的治疗,能显著提高临床效果,改善患者生活质量,值得在临床上应用和推广。     

单纯腓骨截断术治疗膝骨关节炎临床研究

目的探讨腓骨截断术治疗膝关节骨性关节炎膝内侧疼痛的适应证,手术方法及治疗效果。方法对30例膝关节骨性关节炎膝内侧疼痛患者实行腓骨截断术。结果术后随访1～3年,膝关节JOA评分,术前平均(75.5±5)分,术后平均(85.5±5)分,术后评分与术前有显著性差异,22例感到满意,6例较满意,较不满意2例。结论腓骨截断术减除了腓骨对胫骨平台的支撑作用,能起到平衡胫骨平台的负重的作用,从而减轻膝关节内侧压力,对减轻膝关节骨性关节炎膝内侧疼痛有良好的疗效。     

应用PNF技术改善本体感觉治疗原发性膝骨性关节炎的临床研究

目的通过应用神经肌肉本体促进技术(proprioceptive neuromuscular facilitation,PNF)治疗膝骨性关节炎,探讨患者本体感觉的改善对膝骨性关节炎症状的治疗作用。方法自2017年4月～2018年4月,以60例原发性KOA患者为研究对象,设计单一肌力训练(对照组)和PNF训练(试验组)两种运动处方,观察训练前后Lysholm膝关节功能评分标准(Lysholm knee score scale,LKSS)、疼痛VAS评分(Visual analogue scale,VAS)、股四头肌和腘绳肌肌肉功能(峰力矩、相对峰力矩)和膝关节本体感觉评定的变化,观察本体感觉及肌肉功能的变化对膝关节功能改善的影响。结果两组间治疗前关节功能、疼痛程度、股四头肌峰力矩及相对峰力矩、腘绳肌峰力矩及相对峰力矩、本体感觉均未见显著性差异(P0.05),治疗后试验组关节功能优于对照组,差异具有统计学意义(P0.05);治疗后试验组疼痛程度低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05);治疗后试验组股四头肌峰力矩、相对峰力矩高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05);治疗前及治疗后腘绳肌相对峰力矩未见显著性差异(P0.05);治疗后试验组本体感觉优于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。经过spearman相关分析,关节功能变化与本体感觉变化呈正相关,随着本体感觉变化越大,关节功能变化越大(P0.05)。试验组通过PNF训练,不仅本体感觉增强,关节功能评分也随之增高。结论 PNF训练可以有效刺激膝关节本体信息向中枢部位的传导。这些神经肌肉反馈的信息在大脑皮层储存加工后,下行反馈增强本体感受器的灵敏度,对KOA患者进行PNF训练很有必要,而且本试验采用的训练方法不受场地和器材的限制,方便实施。     

金骨莲胶囊对兔膝骨关节炎软骨保护作用的研究

目的 研究中药金骨莲胶囊对兔膝骨关节炎(OA)关节软骨中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平的影响,探讨其可能作用机制.方法 40只家兔分为4组:空白对照组(10只)、模型对照组(10只)、金骨莲胶囊组(10只,74.4 mg·kg-1·d-1)、氨基葡萄糖组(10只,150mg·kg-1·d-1).除空白对照组外其余均按改良Hulth法复制OA模型,术后当天开始药物灌胃,对照组仅灌服等量生理盐水,1次/天,连用8周.8周后处死家兔取右膝股骨髁及胫骨平台大体观察.采用Mankin评分评价关节软骨退变情况;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测股骨内侧髁负重区关节软骨IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA相对表达量.结果 空白对照组、金骨莲胶囊组、氨基葡萄糖组和模型对照组Mankin评分分别为(1.380±0.183)、(2.580±0.464)、(5.250±0.143)、(10.380±0.183)分,Mankin评分依次升高,组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05).金骨莲胶囊组和氨基葡萄糖组3种炎性因子mRNA表达量均明显低于模型对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05);中药金骨莲胶囊在下调IL-1βmRNA方面与氨基葡萄糖作用相当,差异无统计学意义(P=0.271).金骨莲胶囊在降低IL-6和TNF-α mRNA方面优于氨基葡萄糖作用,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 中药金骨莲胶囊可不同程度下调关节软骨中IL-1β、IL-6和TNF-α炎症因子的表达,使软骨退变的部分因素得到控制,从而起到保护关节软骨的作用.     

全膝关节表面置换术治疗膝骨关节炎体会

目的讨论全膝关节表面置换术治疗重度膝骨关节炎的作用及影响疗效的因素并加以分析.方法自1993年1月～1998年6月采用全膝关节表面置换术治疗重度膝骨关节炎患者22例(24膝).结果随访82个月(56～120个月),采用HSS膝关节评分系统,优良率为87.5%.结论全膝关节表面置换术对重度膝骨关节炎治疗效果满意.病人的选择、手术技术和假体安装的精确度及术后的功能锻炼均影响其疗效.     

新生血管生成抑制剂治疗膝骨性关节炎大鼠的疗效研究

目的探讨新生血管生成抑制剂舒尼替尼治疗膝骨性关节炎（KOA）大鼠的疗效,为防治KOA新类药物的研发提供实验基础。方法将32只SD大鼠随机分成4组,即空白组（不造模,不给药）、治疗4周组（KOA造模后灌胃舒尼替尼1mg·kg-1·d-1,持续4周）、治疗8周组（KOA造模后灌胃舒尼替尼1mg·kg-1·d-1,持续8周）及对照组（KOA造模后灌胃同等体积的0.9%氯化钠溶液）,每组8只。实验结束后处死大鼠,收集关节液标本,采用ELISA法检测并比较4组大鼠关节液中血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶13（MMP-13）的表达水平。结果对照组、治疗4周组、治疗8周组大鼠关节液中VEGF、MMP-13表达水平分别为（237.95±69.1）、（168.43±47.47）、（136.75±27.48）pg·ml-1和（94.98±37.63）、（75.43±20.23）、（68.54±19.82）pg·ml-1;2个治疗组与对照组比较,关节液中VEGF、MMP-13表达水平均明显降低（均P＜0.01）;治疗4周组与治疗8周组比较,差异均无统计学意义（均P＞0.05）。结论新生血管生成抑制剂舒尼替尼能有效降低关节液中VEGF、MMP-13表达水平,长期用药可将VEGF和MMP-13的表达维持在较低水平,从而达到防治KOA的作用。