血管生成素样蛋白2在糖尿病大鼠肾脏中的表达及其干预研究

目的观察厄贝沙坦对血管生成素样蛋白2(ANGPTL2)在糖尿病大鼠肾脏中表达的影响及作用机制。方法 50只SD雄性大鼠随机分为正常对照(NC)组10只和实验组40只。实验组给予高糖高脂喂养联合小剂量链脲佐菌素建立T2DM大鼠模型,最终建模成功30只,随机分为糖尿病(DM)组15只和厄贝沙坦(DI)组15只。分别检测8周和12周时体重(BW)、BP、肾重(KW)、血糖、血肌酐(Scr)、BUN、24hUAlb水平。镜下观察肾组织病理改变,免疫组织化学染色法、RT-PCR检测肾组织ANGPTL2mRNA及蛋白表达的变化。结果 DM组24hUAlb水平高于DI组和NC组[8周:(7.43±0.36)vs(5.27±0.22)vs(0.74±0.06)mg/24h;12周:(7.84±0.32)vs(5.11±0.14)vs(0.74±0.08)mg/24h,P<0.05];DM组8周和12周ANGPTL2mRNA的表达水平较NC和DI组升高(P<0.05)。结论 ANGPTL2在糖尿病大鼠肾脏的表达量逐渐升高,而厄贝沙坦可降低其表达。     

血管生成素样蛋白2在2型糖尿病中的研究进展

血管生成素样蛋白2(ANGPTL2)是一种结构类似于血管生成素的分泌型循环糖蛋白,属于血管生成素样蛋白家族,其表达与肥胖症、胰岛素抵抗、2型糖尿病及其并发症等疾病密切相关。因此,ANGPTL2是糖尿病领域新的研究热点。本文就ANGPTL2的生物学特性、其在2型糖尿病及并发症中的研究进展进行综述。     

血管生成素样蛋白2在动脉粥样硬化疾病中的作用

血管生成素样蛋白2(Angptl2)属于血管生成素样蛋白家族成员,其表达或分泌的节律性有助于维护组织内稳态,并且与冠心病、腹主动脉瘤、血管炎症和下肢动脉硬化性闭塞症密切相关。因此,对Angptl2的相关研究具有重要意义。本文对Angptl2在动脉粥样硬化疾病中的作用作一综述。     

血清血管生成素样蛋白2水平与2型糖尿病大血管并发症的相关性研究

[提要]本文主要探讨人血清血管生成素样蛋白2(Angptl 2)是否与2型糖尿病大血管并发症相关.研究发现对照组、2型糖尿病有或无颈动脉粥样硬化组的血清Angptl 2浓度有统计学差异[0.98(0.82～1.22)、3.70(2.69 ～4.85)、1.17(0.76～ 2.47) ng/ml].Logistic回归显示血清Angptl 2作为独立因素影响2型糖尿病患者大血管并发症的发生发展.     

血管生成素样蛋白-2与冠心病的研究进展

血管生成素样蛋白2是近年来发现的一种新兴分泌性蛋白,主要由内脏脂肪组织分泌,调节血管生成及各种抗炎、促炎因子的表达,参与慢性炎症反应和胰岛素抵抗过程,研究发现,血管生成素样蛋白2可影响冠状动脉局部血管的重建,促进动脉粥样硬化斑块内膜钙化的形成,对冠心病的发生发展其重要作用。现对血管生成素样蛋白2与冠心病的关系做一综述。     

血管生成素样蛋白3与胰岛素抵抗相关性研究进展

血管生成素是最近被发现的一类与血管新生密切相关的生长因子家族,目前已知的该家族成员包括血管生成因子和一组血管生成素样蛋白(angiopoietin-like protein,ANGPTL)[1],其中ANGPTL3是该家族成员之一,具有血管生成素家庭成员相似的结构特征[2].ANGPTL3是一种分泌性蛋白因子[3],能够促进血管生成,并对脂质代谢的调节具有重要作用[4,5].ANGPTL3可能在动脉粥样硬化、2型糖尿病、代谢综合征等的发生和发展中有重要作用.     

血管生成素样蛋白2纤维蛋白原样功能域多克隆抗体制备及分析

目的：克隆血管生成素样蛋白2（angiopoietin like protein 2,ANGPTL 2）cDNA;构建ANGPTL 2纤维蛋白原样功能域原核表达载体;表达得到ANGPTL 2纤维蛋白原样功能域融合蛋白;制备针对ANGPTL 2纤维蛋白原样功能域的多克隆抗体,为全面分析研究ANGPTL 2的功能及其与糖尿病肾病微血管病变的关系创造条件. 方法：利用RT-PCR方法从肾脏总RNA中扩增ANGPTL 2全长cDNA;以其为模板扩增编码ANGPTL 2纤维蛋白原样功能域的cDNA 片段,并进而将其克隆至原核表达载体pET-15b上, 构建成ANGPTL 2纤维蛋白原样功能域的原核表达载体pET-ANGPTL 2; 将pET-ANGPTL 2导入BL21（DE3）菌内,通过IPTG诱导表达重组蛋白;利用重组蛋白5＇端带有His tag的特点,采用含Ni的树脂进行亲和吸附纯化,获取高纯度的重组蛋白;将重组蛋白免疫新西兰大白兔,制备兔抗ANGPTL 2多克隆抗体;利用ELISA法测定和免疫组化分析对此多抗的效价和特异性进行分析. 结果：取得了带有完整阅读框的ANGPTL 2全长cDNA ;构建成与预先设计完全一致的原核表达载体pET-ANGPTL 2;成功地在大肠杆菌中进行了ANGPTL 2纤维蛋白原样功能域融合蛋白的表达,纯化获取纯度很高的重组蛋白;经免疫兔获取高效价的针对ANGPTL 2纤维蛋白原样功能域的多克隆抗体;ELISA检测和免疫组化分析表明,此抗体不仅具有很高的效价,而且具有很好的特异性. 结论：我们成功地克隆了ANGPTL 2 cDNA ,构建了其原核表达载体,进行了原核表达,成功取得高纯度的重组蛋白,并得到了高效价、高特异性针对ANGPTL 2纤维蛋白原样功能域的多克隆抗体,为全面分析研究ANGPTL 2功能及其与糖尿病肾病微血管病变的关系创造条件.     

血管生成素样蛋白-2在急性冠脉综合征患者中的表达及其临床意义

目的:探讨急性冠脉综合征(ACS)患者血清中促炎性因子血管生成素样蛋白-2(Angptl-2)的表达及其临床意义。方法:采用酶联免疫吸附方法(ELISA)检测182例ACS患者和30例对照组血清中Angptl-2、白细胞介素-6(IL-6)及可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)水平,通过受试者工作特征曲线(ROC)分析血清Angptl-2水平对ACS的诊断价值。人重组Angptl-2蛋白干预人冠状动脉内皮细胞(HCAEC)后,采用蛋白印迹法检测内皮细胞IL-6及ICAM-1的表达。结果:ACS患者血清中Angptl-2、IL-6及sICAM-1水平均明显高于对照组(P<0.001),且急性心肌梗死患者显著高于不稳定型心绞痛患者(P<0.05)。ROC曲线分析提示Angptl-2水平对ACS具有良好的诊断价值(曲线下面积为0.970),最佳诊断界值为5.77 ng/mL(敏感度为91.8%,特异度为93.3%,P<0.001)。人重组Angptl-2蛋白干预HCAEC后,内皮细胞IL-6及ICAM-1蛋白表达均上调(P<0.05)。结论:Angptl-2促进...     

血管生成素样蛋白2与心血管疾病的研究进展

血管生成素样蛋白2是近年来发现的一种分泌型糖蛋白,属于血管生成素样蛋白家族,主要由内脏脂肪细胞分泌,调节血管生成及各种抗炎、促炎因子的表达,参与慢性炎症反应和全身胰岛素抵抗过程,与代谢综合征及心血管疾病密切相关。现对血管生成素样蛋白2与心血管疾病的关系做一综述。     

血管生成素样蛋白3抑制剂研究进展

家族性高胆固醇血症是一种常染色体显性遗传病,传统调脂药物对于这类患者的效果非常不理想.血管生成素样蛋白3单克隆抗体的出现为这些患者带来了希望.现综述血管生成素样蛋白3相关研究进展.     

Higher levels of circulating ANGPTL2 are associated with macular edema in patients with type 2 diabetes

Macular edema (ME) is an inflammatory disease characterized by increased microvascular permeability. Here, we proposed that plasma angiopoietin-like protein 2 (ANGPTL2) level may be related to the severity of ME patients with type 2 diabetes mellitus (T2DM). In this cross-sectional study, 172 T2DM patients were recruited and divided into clinically significant macular edema (CSME), non-CSME (nCSME), and control groups. Serum ANGPTL2 level was quantified by ELISA and best corrected vision acuity (BCVA) was detected. After adjust age, sex, body mass index (BMI), and duration of diabetes variables, ANGPTL2 performed statistics difference among CSME-, nCSME-groups, and control group (4.46 [3.97, 4.96, 95%CI] ng/mL in CSME group, 3.80 [3.42, 4.18, 95%CI] ng/mL in nCSME-group, 3.33 [3.03, 3.63, 95%CI] ng/mL in control, P < .01). After adjustment of confounding factors, high levels of circulating ANGPTL2 were related with the diagnosis of ME, BCVA, and C reactive protein (CRP) through univariate regression analysis (P < .05). Meanwhile, in the multiple regression model, ANGPTL2 took the mainly effect proportion for the diagnosis of diabetic macular edema (DME), with a LogWorth value 3.559 (P < .001). Our study suggested that elevated circulating ANGPTL2 may be associated with the development of DME and the severity of visual impairment in patients with type 2 diabetes.     

糖尿病肾病患者肾小球基因表达谱及其与病情进展的关系

目的 :研究糖尿病肾病 (diabeticnephropathy ,DN)患者肾小球基因表达谱与正常人之间的差异 ,及其在DN病程进展中的变化。　 方法 :选择分别处于微量白蛋白尿期 ,临床蛋白尿期及伴有肾功能损害期的 3例DN患者 ,并以性别、年龄与患者匹配的 2例正常供肾组织作为对照。首次应用显微微分离法获取肾活检标本中的肾小球 ,进行肾小球细胞数目扩增 ,利用AffymetrixU133A基因芯片技术检测其基因表达谱的变化 ,以生物信息学工具作聚类分析。　 结果 :与正常对照组相比 ,DN患者肾小球内表达水平显著上升或下降的基因共有 182条(P <0 0 1)。聚类分析将显著差异表达基因群分为表达水平显著升高、表达水平下降和持续性显著下降三个特殊亚群。功能分析发现 ,DN患者肾小球基因表达谱的变化突出表现在某些与细胞内异常糖和脂质代谢、细胞增殖、细胞外基质合成和细胞因子相关基因上 ,特别是脂质代谢相关基因。部分基因的表达变化与DN病情进展有一定相关性 ,存在随病情进展表达水平逐渐增加、在DN病程早期应答和随病情进展表达水平逐渐下降的三组基因。未发现转化生长因子 β1在DN患者肾小球细胞内mRNA表达水平呈现显著变化。　 结论 :与正常人相比 ,DN患者肾小球基因表达谱的变化突出表现在某些与细胞内异常糖和脂质代谢     

糖尿病肾病肾组织胰淀素沉积及其致病意义

目的观察胰淀素(amylin)在糖尿病肾病(DN)患者肾组织的沉积和分布特征,探讨肾脏Amylin沉积的致病意义及其影响因素。方法149例经肾活检证实的2型DN患者,免疫组化方法检测肾组织Amylin的沉积,同时行肾组织ApoE检测及电镜观察。竞争性ELISA方法检测血浆Amylin水平,结合患者肾脏病理和临床相关指标进行分析。选择同期经肾活检确诊的肾淀粉样变性、肥胖相关性肾病、轻链沉积病和原发性肾小球肾炎(系膜增生性病变)患者作为相关疾病对照组。结果72例DN患者(48.3%)肾组织Amylin染色阳性,Amylin主要沉积在肾小球系膜基质增多而扩张的系膜区、K-W结节内、增厚的球囊壁和病变的血管壁。肾组织电镜可见无分支、长直线形丝状结构,随意分布于肾小球系膜区、内皮下或基膜内,直径(10.30±1.77)nm。DN患者肾组织Amylin沉积者其肾小球系膜增生,结节病变及肾小球硬化的发生率较无Amylin沉积患者明显增高而小管间质病变程度亦较无Amylin沉积患者重(P<0.05)。肾脏Amylin沉积DN患者24h尿蛋白定量、高血压、肾小管功能受损以及肾功能损伤的程度和贫血均较无Amylin肾组织沉积组更加严重(P<0.05)。DN患者血浆Amylin水平均显著增高(P<0.01),但Amylin肾组织染色阳性和阴性组二者之间并无明显差异(P>0.05)。结论DN患者血浆Amylin水平较正常人明显升高,肾脏可发生Amylin沉积。肾组织Amylin沉积不仅可加重肾组织损伤,而且还与疾病临床表现的严重程度有一定的联系。Amylin在肾脏的沉积参与了DN组织损伤的发生和发展。     

老年2型糖尿病肾病病人血脂与肾功能指标的变化

目的 探讨老年2型糖尿病肾病病人血脂与肾功能指标变化的关系.方法 选取2018年1月至2019年12月在我科门诊及住院接受治疗的≥60岁的老年糖尿病病人100例.按照尿蛋白排泄率(UAER)不同,将其划分为正常蛋白尿组、微量蛋白尿组以及大量蛋白尿组,同时选取40例老年健康体检者作为对照组.检测各组的TC、TG、HDL-...     

糖尿病肾病大鼠肾组织中神经胶质瘤相关蛋白-2表达及意义的观察

目的 观察神经胶质瘤相关蛋白-2(GLIPR-2)在DN大鼠肾组织中的表达及意义. 方法 将Wistar大鼠30只分为正常对照(NC)组和DN组.造模成功16周末检测两组血肌酐(Scr)、24 hUAlb水平.HE染色观察肾组织病理变化.采用免疫组织化学方法检测肾间质小管GLIPR-2表达水平.结果 DN组Scr、24 hUAlb较NC组升高[(37.05±1.41) vs (1.22±0.83)μmol/L;(13.31±0.67)vs(3.10±0.49)mg/24 h,P＜0.05].GLIPR-2主要表达在DN组肾间质小管上皮细胞中,GLIPR-2蛋白表达水平与Scr、24 hUAlb呈正相关(r=0.905、0.913,P＜0.05). 结论 DN大鼠肾间质小管GLIPR-2蛋白表达水平升高,与Scr、24 hUAlb呈正相关.     

2型糖尿病肾病患者心脏病变与肾脏损害的相关分析

目的:了解2型糖尿病肾病(type 2 diabetic nephropathy,T2DN)患者心脏结构改变的影响因素及其与肾损害的相天性. 方法:分析254例T2DN的患者(肾活检181例)彩色多谱勒超声心动图图像及同期血生化、尿液检测等资料,分析心脏超声改变的相关影响因素及其与肾损害的关系. 结果:(1)左房舒张末内径增大的发生率为70.86%,左室舒张末内径增大占20.86%,左室重量指数平均为(121.3±36.9)g/m~2,左室肥厚发生率42.51%,收缩功能不全占23.6%,舒张功能不全占86.6%;(2)左房内径(LAD)、左室重量指数、室间隔厚度、左室后壁厚度均与血压密切相父,LAD还与体重指数、性别、年龄、尿蛋白定量显著相关,左室重量指数也与性别、尿蛋白定量显著相关;(3)LAD、左室重量指数、室间隔、左室后壁与血肌酐呈正相关,与eGFR、血红蛋白呈负相关;伴离心性左室肥厚的患者血肌酐、尿蛋白定量及RBP、NAG显著增加,尿渗量显著降低. 结论:多种因素影响糖尿病肾病患者心脏超声结果,并与肾损害临床表现密切相关,随着肾损害的加重危房扩大更明显,左室呈现离心性左室肥厚趋势,表现为收缩与舒张功能障碍同时存在,伴离心性左室肥厚的患者肾损害更严重.     

糖尿病患者经皮肾穿刺活检术的安全性评估及其临床意义

目的:动态监测糖尿病(DM)患者行经皮肾穿刺活检术后并发症的发生率及其特点,结合肾活检病理检查结果,阐述糖尿病肾病(DN)患者肾活检的意义。方法:观察行肾活检穿刺的DM患者111例。肾活检采用实时B超引导下斜角进针负压吸引法。术后进行B超动态监测,分别观察肾活检术后第4h、8h、24h、48h、72h肾周血肿、肉眼血尿、严重腹痛、低血压、血红蛋白下降等并发症的发生情况。结果:(1)本研究观察到的并发症主要包括肾周血肿、肉眼血尿。其中,单纯肾周血肿24例,单纯肉眼血尿7例,4例既有肉眼血尿又有肾周血肿,肾周血肿总发生率为25.23%,肉眼血尿总发生率为9.91%,均无需特殊处理可自行缓解。28例中8例肾周血肿(7.21%)面积大于4cm2,20例(18.02%)为面积2～4cm2的小血肿。其中症状性血肿3例,发生率为2.7%。8例大血肿患者中5例为DN(3例肾功能不全,SCr114.9～152.9μmol/L),2例合并IgA肾病(IgAN),1例合并膜增生性肾小球肾炎。大血肿集中发生在4h内。发生肉眼血尿的11例患者中,6例为DN(4例为肾功能不全患者),4例合并IgAN,1例合并微型多动脉炎。患者肾活检针数有5例超过2针。发生时间集中在8h内。(2)111例患者肾活检病理结果示DN占72.07%,非糖尿病肾病占27.93%,其中IgAN占18.02%,膜性肾病占7.21%,其他类肾脏疾病类型占2.7%。结论:DM患者肾活检术后常见并发症为肾周血肿、肉眼血尿,主要发生在8h内,尤以4h内多见。这些并发症无需特殊处理,均可自行缓解。患者SCr升高,穿刺针数增加及合并IgAN和系统性血管炎者出血风险增加。DM患者肾活检术后并发症的发生率并不高于其他慢性肾脏疾病。正确掌握肾活检适应证,强调术前全面检查和提高肾活检操作技术水平,是保证肾活检安全性的关键,也是提高DN诊治水平必不可少的检查。     

血清胱抑素C在2型糖尿病不同肾损害期的变化及其临床意义

目的探讨血清胱抑素C在2型糖尿病不同肾损害期的变化及其临床意义,比较血清胱抑素C与肾小球滤过率、尿微量白蛋白排泄率间的相关性。方法采用颗粒增强散射免疫比浊法测定102例2型糖尿病患者(其中并糖尿病肾病66例)血清胱抑素水平,同时测定肾小球滤过率和尿微量白蛋白排泄率。结果2型糖尿病正常白蛋白尿组,2型糖尿病微量白蛋白尿组及2型糖尿病大量白蛋白尿组间血清胱抑素C水平均有显著差异(P<0.01),2型糖尿病微量白蛋白尿组和2型糖尿病大量白蛋白尿组血清胱抑素C测值与肾小球滤过率有良好的相关性(P<0.05)。结论血清胱抑素C在临床上可作为肾小球滤过率的判断指标,且有助于2型糖尿病肾病的早期诊断。