Bcl-2反义寡核苷酸对裸鼠人肺癌移植瘤抑制作用的研究

目的探讨Bcl-2反义寡核核苷酸(ASODN)对裸鼠人肺癌移植瘤的成瘤能力和生长的抑制作用。方法将经硫代修饰的Bcl-2ASODN导入非小细胞肺癌。NCI-H460细胞内,然后将这种细胞接种于裸鼠皮下,观察肿瘤出现的时间和肿瘤体积的变化,并计算抑瘤率。同时采用未经处理的NCI-H460细胞接种于裸鼠背部皮下建立裸鼠人肺癌移植瘤模型,待长出瘤结节直径为≥5mm后,分为Bcl-2ASODN实验组、生理盐水对照组和无义寡核苷酸对照组3组。实验组用15mg/kgASODN两天一次直接瘤内注射,连用3周,测肿瘤大小变化和组织形态学改变。结果Bcl-2ASODN作用后的NCI-H460细胞在裸鼠皮下成瘤能力降低,最大抑瘤率达87.5%(P相似文献   

Bcl-2反义寡核苷酸对人肺癌裸鼠移植瘤的抑制作用

背景与目的：研究表明,靶向bcl-2 mRNA的反义寡核苷酸（antisense oligodeoxynuelectide, ASODN）在体内外可产生抗肿瘤效应。我们已经在bcl-2 mRNA蛋白编码区发现了一个新的有效反义作用靶点,同时证实这个靶点的ASODN能增强白血病及肺癌细胞对化疗药物、放射线的敏感性。本研究进一步探讨bcl-2 ASODN对裸鼠非小细胞肺癌NCl—H460细胞移植瘤的成瘤能力和移植瘤的抑制作用。方法：将经硫代修饰的bcl-2ASODN直接加入到培养的NCl—H460细胞内,MTF法检测细胞生长抑制率．然后将这种细胞接种于裸鼠皮下,观察肿瘤出现的时间和肿瘤体积的变化,并计算抑瘤率。同时取未经处理的NCl—H460细胞接种于裸鼠背部皮下建立裸鼠人肺癌移植瘤模型,待瘤结节直径≥5mm后,分为bcl-2ASODN实验组、生理盐水对照组和无义寡核苷酸对照组。实验组用15mg／kgASODN两天一次直接瘤内注射．连用3周,测肿瘤大小和组织形态学改变。结果：bcl-2ASODN显著抑制NCl—H460细胞的生长,并呈时间依赖性,与无义寡核苷酸组相比．有显著性差异（P〈0．05）。bcl-2ASODN作用后的NCl—H460细胞在裸鼠皮下成瘤能力降低。平均成瘤时间延长为12．6天（P〈0．01）,最大抑瘤率达87．5％（P〈0．01）。在处理NCl—H460细胞裸鼠移植瘤过程中．生理盐水对照组和无义寡核苷酸对照组的瘤体进行性增大．而bcl-2ASODN组的瘤块生长缓慢,ASODN处理组与两个对照组相比均有显著性差异（P〈0．05）。处理后第30天剥离瘤块．ASODN处理组分别与两个对照组瘤重相比均有显著性差异（P〈0．01）。bcl-2ASODN处理组裸鼠NCl—H460细胞移植瘤的生长受到明显抑制,抑瘤率为71．0％。病理学检查可见．bcl-2ASODN处理组瘤块内有大片的变性坏死灶．结缔组织增生．炎性细胞浸润：而两个对照组瘤体内癌细胞呈弥漫性密集分布。结论：bcl-2ASODN能降低NCl—H460细胞的成瘤能力．抑制移植瘤生长。     

WT1反义寡核苷酸对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤形成的抑制作用

目的:观察WT1反义寡核苷酸作用后的人卵巢癌细胞株SKOV3在裸鼠皮下的成瘤能力.方法:应用反义寡核苷酸(ASODN)技术,将WT1反义寡核苷酸转染到SKOV3细胞中,然后将这种被转染的细胞接种于裸鼠皮下,观察肿瘤体积的变化,并计算抑瘤率.结果:脂质体介导的WT1反义寡核苷酸作用后的卵巢上皮癌细胞在裸鼠皮下成瘤能力降低...     

C-erbB-2与c-raf-1基因反义寡核苷酸联合对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用

背景与目的：针对c-erbB-2与c-raf-l单基因的反义寡脱氧核苷酸(antisense oligodexynucleotide,ASODN)治疗肿瘤的研究报道很多,这些研究往往局限于单个基因或细胞水平,从肿瘤发生的多基因学说上讲是不恰当的。本研究旨在探讨c—erbB-2与c-raf-1基因联合ASODN对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用。方法：在BALB／c裸鼠上建立卵巢上皮癌模型,然后随机分成阴性对照组和6个实验组(分别为脂质体c—erbB-2 SODN组、脂质体c-raf-l SODN组、脂质体c-erbB-2ASODN组、脂质体c-raf-l ASODN组、全剂量联合反义给药组、半剂量联合反义给药组)。检测裸鼠体重及肿瘤体积变化,计算抑瘤率及肿瘤缩小率。结果：给药后,全剂量联合反义给药组与半剂量联合反义给药组的肿瘤体积抑瘤率分别为72．5％和78．40%,肿瘤重量抑瘤率分别为70．7％和75．3％,肿瘤缩小率分别为29．7%和41．6％。在给药后,各组裸鼠体重变化无明显统计学差别。结论：C—erbB-2与c-raf-l基因联合ASODN在体内能明显地抑制肿瘤生长。     

Bcl-xl反义寡核苷酸对裸鼠人鼻咽癌移植瘤抑制作用的研究

目的　探讨bcl xl反义寡核苷酸 (ASODN)对裸鼠人鼻咽癌移植瘤生长和基因表达的抑制作用。方法　建立裸鼠人鼻咽癌模型 ,接种肿瘤细胞后 2 4h之内将bcl xlASODN、序列对照寡核苷酸 (ODN)皮下注射进行治疗 ,观察肿瘤大小变化和组织形态学改变 ,并检测药物治疗后肿瘤细胞中bcl xlmRNA和蛋白表达情况。结果　Bcl xlASODN治疗组裸鼠鼻咽癌的生长受到明显抑制 ,抑瘤率为 41.7% ,其对应的bcl xlmRNA和蛋白水平明显降低 ,与对照组相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ,而序列对照ODN治疗组抑瘤率仅为 19.0 % ,差异无显著性 ,对基因的表达亦无明显影响。结论　Bcl xlASODN对裸鼠鼻咽癌移植瘤的生长具有一定的抑制作用 ,为鼻咽癌的治疗提供新的方法。     

脂质体-c-raf-1 反义寡核苷酸转染对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤形成的作用

 目的 探讨经脂质体一硫代磷酸化修饰的c-raf-1反义寡脱氧核苷酸(ASODN)作用后的卵巢上皮癌细胞株SKOV3在裸鼠皮下的成瘤能力。方法 利用脂质体将经硫代磷酸化修饰的寡核苷酸导入SKOV3细胞，然后将这种被转染的细胞接种于裸鼠皮下，观察肿瘤体积的变化，并计算抑瘤率。结果 经脂质体c-raf-1 ASODN作用后的卵巢上皮癌细胞在裸鼠皮下成瘤能力降低，最大抑瘤率达35．3％(P<0．05)。首次出现肉眼可见肿瘤的平均时间延长为8．8天(P<0．05)。结论 c-raf-1癌基因的反义调控能降低卵巢上皮癌细胞的成瘤能力，抑制肿瘤生长，在卵巢上皮癌的基因治疗中有一定作用。     

脂质体-c-erbB-2反义寡核苷酸对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用

目的　探讨c erbB 2反义寡脱氧核苷酸 (ASODN )对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用。方法　将 15只裸鼠建立人卵巢癌皮下移植瘤模型 ,然后随机分成 3组予以不同条件处理 :对照组 (腹腔注射转染液和脂质体 ) ,正义治疗组 (腹腔注射脂质体 c erbB 2 -SODN ) ,反义治疗组 (腹腔注射脂质体 c erbB 2 -ASODN )。治疗期间定期观测裸鼠体重和肿瘤体积 ,计算抑瘤率及肿瘤缩小率。利用RT -PCR技术比较治疗后各组肿瘤组织中c erbB 2基因水平。结果　反义治疗组与正义治疗组的抑瘤率分别为 71.2 %和 7.6% ,反义治疗组肿瘤缩小率为 2 2 .7% ,与正义治疗组相比较有显著性差异。各组裸鼠体重变化无明显差异。RT -PCR结果显示反义治疗组c erbB 2表达水平降低约 61.0 %。结论　脂质体 c erbB 2 -ASODN对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤有一定的治疗作用 ,可能成为日后卵巢癌基因治疗的重要途径。     

端粒酶RNA反义寡核苷酸对人绒毛膜癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用

目的探讨端粒酶RNA反义寡聚核苷酸(anti-hTR)对绒癌的治疗作用。方法采用绒癌JAR细胞移植裸鼠成瘤,行anti-hTR的低浓度和高浓度治疗,并设立生理盐水组、随机序列组及药物放线菌素D(Act-D)对照组,动态观察并测定肿瘤的生长。采用TRAP-ELISA方法测定端粒酶活性。采用Western blot法测定hTERT蛋白的表达。结果anti-hTR低浓度组、高浓度组和药物Act-D组的抑瘤率分别为76．6％、93．8％和85．4％,三组对肿瘤生长的抑制,与随机序列组和生理盐水组相比,差异均有统计学意义,而三组之间差异无统计学意义。三组的端粒酶活性及hTERT蛋白表达下降,较随机序列组和生理盐水组相比,差异均有统计学意义,而三组之间差异无统计学意义。结论anti-hTR能够抑制绒癌移植瘤的生长,可能成为肿瘤治疗的新方法。     

脂质体-c-erbB-2反义寡核苷酸转染对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤形成的抑制作用研究

目的　探讨经脂质体—硫代磷酸化修饰的c erbB 2反义寡脱氧核苷酸 (ASODN )作用后的卵巢上皮癌细胞株SKOV3 在裸鼠皮下的成瘤能力。方法　利用脂质体将经硫代磷酸化修饰的寡核苷酸导入SKOV3 细胞内 ,然后将这种被转染的细胞接种于裸鼠皮下 ,观察肿瘤体积的变化 ,并计算抑瘤率。结果　经脂质体 c erbB 2ASODN作用后的卵巢上皮癌细胞在裸鼠皮下成瘤能力降低 ,最大抑瘤率达 4 0 .0 %(P <0 .0 5 )。首次出现目检可见肿瘤的平均时间延长为 9.6天 (P <0 .0 5 )。结论　c erbB 2癌基因的反义调控能降低卵巢上皮癌细胞的成瘤能力 ,抑制肿瘤生长 ,在卵巢上皮癌的基因治疗中有一定价值。     

Bcl-XL反义寡核苷酸转染对食管癌细胞系和裸鼠人食管癌移植瘤增殖、生长抑制作用的实验研究(英文)

Objective:The aim of our study was to investigate the biological effects of Bcl-XL antisense oligodeoxynucleotide(ASODN) transfected into cultured esophageal carcinoma cells and human esophageal carcinoma xenograft in nude mice.Methods:Cationic liposome-mediated ASODN was used to transfect esophageal carcinoma cells.RT-PCR, Western blot, MTT assay, flow cytometry, and in situ apoptosis cells detection(TUNEL detection) were used to systematically study the biological effects of transfected cells both in vitr...     

Bcl-2反义核酸增强三氧化二砷诱导NCI-H69肺癌细胞凋亡

目的 :探讨Bcl 2反义核酸对三氧化二砷 (As2 O3 )诱导NCI H6 9肺癌细胞株凋亡的影响。方法 :合成Bcl 2反义核酸 (ASON) ,导入NCI H6 9肺癌细胞。Western blot法检测Bcl 2蛋白的表达 ;FTIC TUNEL流式细胞仪检测导入ASON的NCI H6 9肺癌细胞凋亡的变化 ;Western blot法检测As2 O3 作用后多聚ADP核糖聚合酶 (PARP)裂解片段。结果 :1)导入Bcl 2反义核酸后NCI H6 9肺癌细胞 (ASON -NCI H6 9)的Bcl 2基因表达受抑制 ,Bcl 2蛋白的合成减少 ;2 )随As2 O3 浓度增加 ,肺癌细胞的凋亡指数逐渐上升 ,ASON NCI H6 9细胞凋亡指数明显高于NCI H6 9细胞 ;3)As2 O3 诱导后ASON NCI H6 9肺癌细胞PARP的89KD裂解片段检测呈强阳性 ,NCI H6 9肺癌细胞则呈弱阳性。结论 :三氧化二砷可诱导肺癌细胞株NCI H6 9凋亡 ;Bcl 2反义核酸通过阻断Bcl 2基因表达 ,增强了As2 O3 诱导NCI H6 9细胞凋亡     

Bcl-2反义核酸对人胆管癌QBC939细胞增殖的影响

目的研究Bcl-2反义核酸（ASODN）对人胆管癌QBC939细胞增殖的影响。方法将Bcl-2ASODN与QBC939细胞共同孵育，采用台盼蓝拒染实验检测细胞存活率，采用克隆形成实验俭测克隆形成率。结果台盼蓝拒染实验和克隆形成实验检均显示Bcl-2ASODN可以部分抑制QBC939细胞增殖，经ASODN作用细胞的存活率和克隆形成率均显著低于对照组（P〈0．05）。结论Bcl-2反义核酸对人胆管癌QBC939细胞增殖有抑制作用。     

用计算机软件辅助设计和实验分析筛选有效的反义核酸(英文)

目的用 RNAstructure 软件设计和实验分析来筛选有效的反义核酸。方法选择 Bcl-2基因为靶基因,利用 RNAstructure 软件,模拟 Bcl-2 mRNA的二级结构,根据自由能不稳定区域或者无折叠的区域,设计5条反义核酸序列,研究它们对白血病细胞的细胞生长作用,用免疫组织化学和流式细胞技术研究蛋白的表达,RT-PCR 检测 mRNA 的含量,有细胞形态学方法、电泳和流式细胞技术检测细胞凋亡。结果 5条中有两条反义核酸能显著抑制白血病细胞的生长,降低 Bcl-2 mRNA 和蛋白水平,显著诱导细胞凋亡。结论计算机软件预测有效反义比其他方法快而有效,这种方法能有效加速研究和临床反义序列的设计。     

用计算机软件辅助设计和实验分析筛选有效的反义核酸

目的用RNAstrueture软件设计和实验分析来筛选有效的反义核酸。方法选择Bel-2基因为靶基因,利用RNAstrueture软件,模拟Bcl-2mRNA的二级结构,根据自由能不稳定区域或者无折叠的区域,设计5条反义核酸序列,研究它们对白血病细胞的细胞生长作用,用免疫组织化学和流式细胞技术研究蛋白的表达,RT-PCR检测mRNA的含量,有细胞形态学方法、电泳和流式细胞技术检测细胞凋亡。结果5条中有两条反义核酸能显著抑制白血病细胞的生长,降低Bcl-2mRNA和蛋白水平,显著诱导细胞凋亡。结论计算机软件预测有效反义比其他方法快而有效,这种方法能有效加速研究和临床反义序列的设计。     

VEGF-C反义寡核苷酸抑制人胃癌裸鼠移植瘤淋巴管生成的实验研究

目的:探讨VEGF-C反义寡核苷酸(VEGF-C-ASODN)对人胃癌裸鼠移植瘤淋巴管生成的影响。方法:构建人胃癌裸鼠移植瘤模型,反义组在接种部位皮下注射VEGF-C-ASODN,正义组和对照组分别注射VEGF-C正义寡核苷酸和生理盐水,观察移植瘤生长变化。半定量RT-PCR检测移植瘤VEGF-CmRNA表达,酶组织化学方法(5'-Nase-ALPase)染色行淋巴管计数。结果:反义组移植瘤生长缓慢,体积和重量分别为(387.57±166.29)mm³、(1.4±0.7)g,较正义组和对照组显著下降(P<0.01)。反义组VEGF-CmRNA表达的相对系数为(0.35±0.12),淋巴管计数为(14.37±4.21),较正义组和对照组均显著降低(P<0.01)。结论:VEGF-C-ASODN可抑制人胃癌裸鼠移植瘤的生长及淋巴管的生成。