广州地区泌尿系统感染产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的耐药特征和基因分型

目的：了解本地区泌尿系统感染产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯菌耐药特征及其基因型分布。方法：收集广州地区13家医院2001年7月～2003年8月间临床分离的尿培养阳性肺炎克雷伯菌130株,采用NCCLs规定的ESBLs初筛和确证试验方法检测ESBLs,用K-B琼脂扩散法进行药物敏感试验,并应用聚合酶链反应（PCR）方法对所分离的产ESBLs菌株进行SHV、CTX-M基因型检测。结果：产ESBLs肺炎克雷伯菌检出率为41．5％（54株）,其中66．7％（36株）携带CTX-M基因,53．7％（29株）携带SHV型基因,并有20．4％（11株）同时携带CTX-M基因和SHV型基因。产酶株的耐药率明显高于非产酶株,产ESBLs细菌对青霉素类、环丙沙星及头孢菌素类耐药率较高（高达75．9～99．7％1,加酶抑制剂克拉维酸或他唑巴坦后耐药率有明显下降。结论：广州地区泌尿系统感染的产ESBLs肺炎克雷伯菌具有多重耐药的特点。其中CTX-M型是流行的基因型。     

肺炎克雷伯菌临床分离株产广谱和超广谱β-内酰胺酶的基因型研究

目的 了解产ESBLs肺炎克雷伯菌临床分离株的耐药性及其基因型分布特征,指导临床进行抗感染治疗,更好地控制耐药菌株的播散.方法 对38株经双纸片试验确认为ESBLs表型阳性的肺炎克雷伯菌采用纸片扩散法进行药物敏感性试验;采用PCR法对ESBLs阳性株进行TEM型、SHV型、CTX-M型、VEB型和PER型ESBL基因检测,对PCR阳性产物进行测序确定基因型别;同时采用PCR法检测整合酶基因,对PCR产物进行测序确定整合酶类别.结果 38株产ESBLs的肺炎克雷伯菌对青霉素类和头孢菌素类耐药性十分严重,对庆大霉素和复方磺胺甲嚼唑的耐药率也均＞90%,未检测到耐亚胺培南和美罗培南的菌株.38株ESBLs阳性菌株检测到3种ESBLs型,分别为TEM型、SHV型和CTX-M型,VEB型和PER型没有被检出.CTX-M型、TEM型和SHV型阳性率分别为92.1%(35/38)、84.2%(32/38)、76.3%(29/38).整合酶基因阳性率为94.7%(36/38).经测序,所有TEM型均为TEM-1广谱β内酰酶.29株SHV型阳性的PCR产物经测序证实,SHV-12有19株,SHV-11有4株,SHV-2有3株,SHV-28有2株及SHV-1有1株.35株CTX-M型中,CTX-M-14有22株,CTX-M-15有13株.同时检测到3种基因的有22株(57.9%),同时检测到2种基因的有14株(36.8%).整合酶基因PCR产物经测序为Ⅰ类整合子.结论 产ESBLs肺炎克雷伯菌临床分离株的耐药性及多重耐药性严重,Ⅰ类整合子是其多重耐药和耐药性传播的主要原因;CTX-M-14及SHV-12为肺炎克雷伯菌产ESBLs的主要基因型.     

佳木斯地区产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌耐药基因型分析

目的 检测佳木斯地区产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌耐药基因型的流行状况,分析ESBLs的产生情况,为临床的合理用药提供参考.方法 采用全自动微生物鉴定系统对肺炎克雷伯菌进行鉴定和药敏分析;双纸片扩散法对产ESBLs菌株进行确证,应用PCR基因扩增技术及双脱氧DNA测序方法 ,分别对TEM、SHV、CTX-M编码基因进行分析.结果 肺炎克雷伯菌对16种抗生素的耐药性检测结果 显示,对亚胺培南、阿米卡星的耐药率较低,对酶抑制剂类抗生素较敏感,对第一、二代头孢菌素耐药率较高.在67株产ESBLs菌株中有57株为CTX-M型(85.1%),36株为TEM型(53.7%),47株SHV型(70.9%).结论 随着抗菌药物的持续使用,产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药情况日趋严重,主要临床流行基因型是CTX-M型,耐药性基因型监测对临床合理应用抗生素具有指导意义.     

合肥市产超广谱β-内酰胺酶菌株的SHV型耐药基因分布和耐药性分析

目的了解1999～2000年合肥市临床分离的产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中,SHV型β-内酰胺酶基因型分布情况和耐药性分析。方法标本为安徽省细菌耐药性监控中心所留取的1999年9月～2000年9月从合肥市4家大医院临床分离的、已被证实产ESBLs的98株肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌,采用聚合酶链反应(PCR)扩增产SHV型β-内酰胺酶菌株基因片段,克隆入pGEM-Teasy载体,双脱氧链终止法测定核苷酸序列以鉴定基因型。按照2005年CLSI推荐标准,用琼脂稀释法分别测定临床分离菌株和转移结合子对11种不同抗菌药物的MIC值,并比较分析两者的不同结果。结果98株产ESBLs菌株中有29株产SHV型β-内酰胺酶,其中SHV-1型8株,SHV-11型5株,SHV-12型11株,SHV-18型1株,SHV-28型1株,SHV-89型3株[序列号为(DQ193536)]。临床分离株的MIC结果显示对哌拉西林,头孢噻肟,头孢曲松的敏感率低;转移结合子的敏感性较临床分离菌株有所上升。结论合肥市部分医院产SHV型β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌检出率较高,我们在国内外首次报道了SHV-89;并且本地区产SHV型β-内酰胺酶菌株的耐药性较高。     

院内产超广谱β内酰胺酶肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌下呼吸道感染的调查分析

目的 调查分析本院产超广谱β内酰胺酶(ESBL)肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌下呼吸道感染的情况。方法收集院内肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌下呼吸道感染病例共187例，ESBLs采用双纸片扩散法检测．并做抗生素抗菌分析。结果2001年至2003年，产ESBL肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌检出率分别为22．2％、29．6％、38．2％和23．3％、28．1％、32.4％，呈逐年上升趋势。产ESBL菌对多种抗生素的耐药性较非产酶株显升高，对β-内酰胺类、喹诺酮类和氨基糖苷类抗生素的耐药率均较高，但对亚胺培南的敏感性为100％，对哌拉西林，他唑巴坦的敏感性为80％。结论治疗产ESBL肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌下呼吸道感染首选抗生素是碳氢霉烯类。ESBL产生株的分离率和耐药率逐年上升，为了控制其感染和播散，应控制使用广谱β-内酰胺类抗生素和加强院内消毒隔离措施。     

肺炎克雷伯氏菌SHV-28编码基因的克隆、测序及基因定位

以临床分离的一株肺炎克雷伯氏菌99-799株为研究对象，对其所产生的一种β-内酰胺酶编码基因的序列、亚型及基因定位进行研究。采用聚合酶链反应(PCR)，用β-内酰胺酶通用引物、blasHv引物扩增获得β-内酰胺酶及SHV型酶编码基因的片段，将SHV型酶PCR扩增产物克隆入pUCm—T载体，以双脱氧链终止法测定核苷酸序列，再通过GeneBank进行同源性检测确定其亚型和基因所在位置。肺炎克雷伯氏菌99—799株所含的一种β-内酰胺酶基因型为SHV型，与SHV-28编码基因序列完全相同，且位于细菌150bp的大质粒上，说明重庆地区有SHV-28亚型的存在。     

老年人下呼吸道革兰阴性杆菌感染耐药机制研究

目的研究本院老年人下呼吸道感染革兰阴性杆菌产灭活酶耐药机制。包括超广谱β内酰胺酶(ESBLs)、高产头孢菌素酶(AmpC)和金属酶。通过对临床常见致病菌大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、铜绿假单孢菌、不动杆菌和嗜麦芽窄食单胞菌等的检测结果分析,掌握本院老年患者下呼吸道感染主要病原菌的耐药规律及主要基因型,为临床经验治疗提供参考依据。方法单纸片扩散初试产ESBL菌株,用双纸片增效确认试验或自动细菌鉴定和药敏系统(VITEK)确定ESBL 菌株;用改良三维法检测去阻遏头孢菌素酶;Etest金属酶试条测定铜绿假单孢菌产金属酶的情况。用等电聚胶和测序方法对ESBL阳性株作分子基因分型。结果 80株肺炎克雷伯菌及143株大肠埃希菌产ESBL(超广谱β内酰胺酶)频率分别为27.5％和28.7％,CTX-M基因型分别占48％和56％。124株阴沟肠杆菌中有21.8％单独高产AmpC酶,8.1％单独产ESBL,3.2％即产ESBL又高产AmpC酶。71株耐亚胺培南的绿脓假单胞菌中有18.3％产金属β内酰胺酶。结论产ESBL、高产AmpC酶和金属β内酰胺酶是住院老年患者下呼吸道感染难以治愈的重要因素。CTX-M基因型是我院ESBLs流行的主要基因型。     

产超广谱β-内酰胺酶肠杆菌科细菌耐药性及基因型检测

目的 调查我院产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)菌株对临床常用抗生素的耐药情况及其ESBLs比基因型。方法 对2001年4月一2002年5月我院临床分离的40株产ESBL肠杆菌科细菌采用NCCLS推荐的琼脂平皿对倍稀释法测定对不同抗生素的MIC值，用针对TEM、SEV、CTX—M基因的特异性引物进行PCR及扩增确定ESBL基因型。结果 40株产ESBL菌株对第三代头抱菌素耐药率高，对头孢噻肟的耐药程度高于头孢他啶。对头孢哌酮/舒巴坦、头孢毗肟、环丙沙星、阿米卡星的耐药率分别为37．5％、57．5％、90％、52．5％。除2株菌外，其它38株菌对亚胺培南敏感。40株菌中携带SHV、TEM、CTX—M型ESBLs比的比率分别为87．5％、50％、40％。结论 我院产ESBL菌多重耐药现象严重，临床上需慎用酶抑制剂复合物及第四代头孢菌素，亚胺培南仍是治疗产ESBL菌感染的首选药物。我院存在CTX—M酶的流行，产ESBL菌绝大多数产SHV型酶，有24株菌同时产2种或3种酶。     

PICU临床产ESBLs菌耐药特征及基因型分布的研究

目的 对产广谱β-内酰胺酶(ESBLs)细菌进行初步基因分型,了解产ESBLs细菌的耐药基因的型别分布和耐药特征变化情况.方法 收集分离鉴定菌株,通过K-B法药敏实验初筛以确认产ES-BLs菌株,并对ESBLs基因进行初步分型.结果 分离到产ESBLs细菌93株,其中肺炎克雷伯菌为48株,大肠埃希菌为45株,产ESBLs细菌对青霉素类、氨曲南及头孢菌素类耐药率约为51.1％～100％,对美罗培南耐药为4.4％.对2010年检测到的产ESBLs菌株43株进行初步基因分型,PCR初步分型结果表明:43株ESBLs茵检测到CTX、SHV及TEM三种基因型;主要为CTX-M型占27.9％,包括CTX-M-14和CTX-M-3,其次为SHV型占25.6％,TEM型占9.3％.结论 产ESBLs细菌耐药率明显增高,且具有多重耐药的特点;产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯茵基因分型以CTX-M-14为主、其次为SHV型.     

产ESBL肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的分布及耐药分析

目的:了解我院产ESBL肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的分布及耐药性.方法:采用纸片扩散法进行药敏试验并应用WHONET5.2和EXCEL软件分析细菌分布,耐药性.结果:产ESBL肺炎克雷伯菌在外科伤口的分离率最高,其次是腹水和脓液中,血中产ESBL肺炎克雷伯菌为16.7%;产ESBL大肠埃希菌在引流中的分离率最高,次之是腹水标本,血中为19.4%.尿中产ESBL的肺炎克雷伯菌(25.4%)明显高于产ESBL的大肠埃希菌(12.7%),痰中产ESBL的肺炎克雷伯菌(15.9%)明显低产:ESBL的大肠埃希菌(30.9%).产ESBL,肺炎克雷伯菌在0～10岁以下年龄组占16.7,21～31岁年龄组最高占31.6%,81～90岁年龄组占20.7%居第三位;产ESBL大肠埃希菌在10岁以下儿童组占23.1%居第二位,81～90岁年龄组38.4%最高.门诊病人占本次分离率的23.4%,住院病人占76.6%.我院产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌从1999年的14%上升为26.7%,肺炎克雷伯菌从15%上升为19.8%.目前没有耐亚胺培南产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对阿米卡星、头孢西丁和头孢他啶的敏感性分别为91%和75%、61.7%和77.8%、74.1%和67.7%,对其他抗生素的敏感活性均在50%以下.结论:产ESBL肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌在不同来源的标本、不同年龄组发生率不同,总体来说产生超广谱β-内酰胺酶的问题日益严重,临床及时了解它们耐药特点和变化趋势对合理的应用抗生素十分重要.     

产ESBL肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的分布及耐药分析

目的了解我院产ESBL肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的分布及耐药性.方法采用纸片扩散法进行药敏试验并应用WHONET5.2和EXCEL软件分析细菌分布,耐药性.结果产ESBL肺炎克雷伯菌在外科伤口的分离率最高,其次是腹水和脓液中,血中产ESBL肺炎克雷伯菌为16.7%;产ESBL大肠埃希菌在引流中的分离率最高,次之是腹水标本,血中为19.4%.尿中产ESBL的肺炎克雷伯菌(25.4%)明显高于产ESBL的大肠埃希菌(12.7%),痰中产ESBL的肺炎克雷伯菌(15.9%)明显低产ESBL的大肠埃希菌(30.9%).产ESBL,肺炎克雷伯菌在0～10岁以下年龄组占16.7,21～31岁年龄组最高占31.6%,81～90岁年龄组占20.7%居第三位;产ESBL大肠埃希菌在10岁以下儿童组占23.1%居第二位,81～90岁年龄组38.4%最高.门诊病人占本次分离率的23.4%,住院病人占76.6%.我院产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌从1999年的14%上升为26.7%,肺炎克雷伯菌从15%上升为19.8%.目前没有耐亚胺培南产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对阿米卡星、头孢西丁和头孢他啶的敏感性分别为91%和75%、61.7%和77.8%、74.1%和67.7%,对其他抗生素的敏感活性均在50%以下.结论产ESBL肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌在不同来源的标本、不同年龄组发生率不同,总体来说产生超广谱β-内酰胺酶的问题日益严重,临床及时了解它们耐药特点和变化趋势对合理的应用抗生素十分重要.     

机械通气患者下呼吸道感染病原菌分析

目的了解机械通气患者下呼吸道感染的病原菌情况,对临床合理使用抗菌药物提供依据。方法对机械通气后发生下呼吸道感染患者,采集痰标本,进行病菌原检测分析。结果分离出病原菌363株,排列前5位为鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌;肺炎克雷伯菌产ESBL检出率为71.43%,大肠埃希菌产ESBL检出率为70.37%,金黄色葡萄球菌中MRSA(占96.55%),说明病原菌耐药情况严重。大肠埃希菌对哌拉西林/他唑巴坦的敏感率达100%,未检出金黄色葡萄球菌对万古霉素耐药的菌株。结论机械通气患者下呼吸道感染病原菌多重耐药情况严重,应引起高度重视。     

浙江省阴沟肠杆菌超广谱β-内酰胺酶基因型分布

目的　了解浙江省产超广谱 β-内酰胺酶 ( ESBL s)阴沟肠杆菌的基因型分型。方法　根据 Gen-Bank颁布的序列 ,设计 TEM、SHV、CTX- M- 1、CTX- M- 2、CTX- M- 8、CTX- M- 9、OXA- 2和 OXA- 10的通用引物 ,对 5 3株表型筛选为产 ESBL s的阴沟肠杆菌进行 PCR检测 ,并克隆测序。表型与基因型不符的菌株用改良的三维试验法进行检测。结果　结果显示 5 3株阴沟肠杆菌中 34株扩增到 SHV型、CTX- M- 1组、CTX-M- 9组 ESBL s基因型 ,最常见的基因型是 CTX- M型 ,共有 2 9株 ,占 5 4 .72 %。CTX- M- 1组以 CTX- M- 14最多见 ( 2 0株 ) ,其次为 CTX- M- 13( 3株 )和 CTX- M- 2 4 ( 3株 )。CTX- M- 9组均为 CTX- M- 2 2 ( 5株 )。SHV PCR扩增阳性有 6株 ,均为 SHV- 12。有 16株 TEM PCR扩增阳性 ,序列分析证实均为 TEM- 1型广谱酶 ,未发现TEM型 ESBL s。有 2株细菌同时产两种以上 ESBL s。结论　浙江省阴沟肠杆菌中 ESBL s基因型主要是CTX- M型。     

下呼吸道感染肺炎克雷伯菌的产ESBLs情况及耐药性分析

目的 观察下呼吸道感染肺炎克雷伯菌产ESBLS情况及耐药性。方法 应用MicroScan AutoSCAN-4专用NC21鉴定板检测72例克雷伯菌的ESBL产生并研究其对体外抗生素的耐药性。结果肺炎克雷伯菌产ESBLs占52.8%，以重症监护病房和呼吸内科感染为主。产ESBLs肺炎克雷伯菌对头孢菌素类、青霉素类、氨基糖甙类、复方新诺明等抗生素呈现多重耐药，对亚胺培南、哌拉西林／三唑巴坦呈高敏感性，分别为86．8%与605％。结论 本地区下呼吸道感染具有较高的产ESBLs肺炎克雷伯菌流行率，亚胺培南和哌拉西林／三唑巴坦是治疗由产ESBLs菌引起的下呼吸道感染的有效抗生素。     

产超广谱β内酰胺酶细菌分型与第3代头孢菌素治疗的关系分析

目的研究临床分离的30株产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)类型与应用第3代头孢菌素治疗的关系.方法回顾性分析2001-01～2002-07选取的26位产ESBLs细菌感染患者应用第3代头孢菌素治疗情况.用接合试验、聚合酶链反应、PCR产物克隆测序鉴定从上述患者体内分离的产ESBLs细菌的β内酰胺酶类型.结果大多数(86.2%)患者1周内接受了第3代头孢菌素治疗,头孢他啶12例次,头孢曲松12例次.PCR结果显示,肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的CTX-M、TEM、SHV基因阳性分别为4,6,9株和11,15,1株.其中,CTX-M型ESBLs 4种亚型,SHV型ESBLs 2种亚型.SHV型β内酰胺酶主要分布于肺炎克雷伯菌中(P＜0.01),头孢他啶治疗组中CTX-M型ESBLs占58.3%,头孢曲松治疗组占66.6%(P＞0.05).结论质粒介导的CTX-M型ESBLs的传播是影响ESBLs类型分布的主要因素.     

临床分离大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产ESBLs菌株及其耐药基因型研究

目的 研究分离的大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的产ESBLs菌株的耐药情况及耐药基因的表达.方法 选取2014年1月至2015年12月我院的514例感染患者的样本作为研究对象,分离大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌,PCR检测产ESBLs菌株的TEM、SHV、CTX-M-Ga、CTX-M-Gb及CTX-M-Gc的表达情况.结果 所有样本分离出大肠埃希菌198株,其中产ESBLs菌株101株(51.01%):TEM阳性27株(26.73%),SHV阳性32株(31.68%),CTX-M-Ga阳性17株(16.83%),CTX-M-Gb阳性13株(12.87%)及CTX-M-Gc阳性7株(6.93%).肺炎克雷伯菌114株,其中产ESBLs菌株61株(53.51%):TEM阳性11株(18.03%),SHV阳性14株(22.95%),CTX-M-Ga阳性11株(18.03%),CTX-M-Gb阳性13株(21.31%)及CTX-M-Gc阳性7株(11.48%).结论 对大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行ESBLs菌株筛选及耐药基因检测,对指导临床抗菌药物的合理应用具有重要意义.     

肠杆菌科细菌的分布及其产ESBL菌株的耐药性变迁

目的:分析肠杆菌科细菌的分布及其产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)菌株的耐药趋势,为临床合理选择抗菌药物提供依据。方法:对普宁市人民医院2013年临床标本中分离的926株肠杆菌科细菌及其产ESBL情况进行统计、分析。结果:该院肠杆菌科细菌分离率均在50%以上,尤以大肠杆菌和肺炎克雷伯菌感染分离率最高;肺炎克雷伯菌和大肠杆菌是产ESBL的代表菌种;肠杆菌科细菌对氨苄西林及头孢曲松的耐药率普遍保持在较高水平,但对亚胺培南和哌拉西林/他唑巴坦的耐药率较低;应用的抗菌药物主要为加酶抑制剂和第三代头孢菌素。结论:该院肠杆菌科产ESBL菌的耐药性在四个季度间无明显差异;ESBL介导的细菌耐药性复杂而难治,必须长期严密地监测产ESBL菌情况,合理采取干预措施,遏制产ESBL菌的流行。     

肺炎克雷伯菌临床感染分布及耐药性分析

目的了解肺炎克雷伯菌(KPN)临床感染分布和耐药情况,指导临床合理选择抗菌药物。方法采用VITEK-2分析仪进行细菌鉴定,K-B法进行药敏试验,并用纸片扩散法确证试验检测ESBLs。结果检出140株肺炎克雷伯菌,痰标本分离率最高达86.4%,主要引起重症监护病房(ICU)患者的下呼吸道感染。该菌耐药性极其严重,对21种常用抗菌药物(除亚胺培南、美罗培南和阿米卡星外)的耐药率均高于40%。产ESBLs菌株占40.7%,其耐药率明显高于非产ESBLs株。碳青霉烯类可作为肺炎克雷伯菌感染的首选抗菌药物。结论肺炎克雷伯菌耐药严重,产ESBLs菌株阳性率较高,临床应重视其流行情况并合理使用抗菌药物。     

治疗产ESBL肺炎克雷伯菌的抗生素

在一些国家产ESBL肺炎克雷伯菌占分离肺炎克雷伯菌菌株的50％，这些菌株对许多抗生素耐药，因此选择适当的抗生素是关键。根据美国临床感染病杂志报道碳青霉烯类可作为治疗产ESBL肺炎克雷伯菌的首选药物。     

儿科产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌耐药基因型研究

目的对吉林市三级甲等医院儿科呼吸道感染标本分离的58株产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌进行耐药基因型研究。方法采用聚合酶链反应(PCR)扩增对产ESBLs大肠埃希菌的初筛确证实验得到的产ESBLs大肠埃希菌58株,进行耐药基因型研究。结果 58株产ESBLs大肠埃希菌中,β-内酰胺酶基因型分别为blaSHV2a(2/58),blaTEM-1(7/58),blaCTX-M-15(17/58)。结论吉林地区儿科呼吸系统感染住院儿童对β-内酰胺类抗菌药物的耐药机制主要是由于产生TEM-1型广谱β-内酰胺酶,SHV2a型和CTX-M-15型超广谱β-内酰胺酶。