淫羊藿苷对兔心室肌细胞L-型钙电流的影响

目的:利用膜片钳技术研究淫羊藿苷(ICA)对兔单个心室肌细胞L-型钙电流(ICa,L)的影响。方法:采用酶解法分离兔单个心室肌细胞,应用全细胞膜片钳技术观察10,20,40μmol/L的ICA对心室肌细胞ICa,L的作用。结果:①10,20,40μmol/L的ICA使兔心室肌细胞ICa,L最大峰电流密度从(15.81±1.23)pA/pF分别降至(11.27±0.89)pA/pF,(9.48±0.85)pA/pF和(6.87±0.81)pA/pF(n=6,P<0.05),抑制率分别为28.7%,40.0%和56.5%;ICA使ICa,L的电流-电压曲线上移,但不改变其基本形状;②20μmol/L ICA可以使钙通道稳态失活曲线左移并可减慢L-型钙通道失活后的恢复过程。结论:ICA对ICa,L具有浓度依赖性阻滞作用,这可能是其抗心律失常的重要机制之一。     

血管紧张素Ⅱ1型受体经蛋白激酶C调节L型钙流

目的　以往的研究表明血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )对心室肌细胞L型钙流 (ICa,L)的影响及作用机制尚有争议。本文应用AngⅡ 1型受体 (AT1)阻滞剂Losartan和蛋白激酶C(PKC)抑制剂H 7来研究AngⅡ对单个豚鼠心室肌细胞ICa ,L的作用及机制。方法　应用膜片钳技术研究AngⅡ对单个豚鼠心室肌细胞ICa ,L影响的细胞机制。结果　结果表明 ,在膜片钳全细胞记录模式 ,AngⅡ刺激ICa ,L,呈浓度依赖性 ,最大作用浓度为 10 0nmol/L (n =9)。30nmol/L的AngⅡ使ICa ,L峰电流由 11 3± 0 6pA/pF增大为 15 3± 0 6pA/pF( 10mV ,n =9,P <0 0 5)。 10 0nmol/L的Losartan本身对ICa ,L无影响 ,但可抑制AngⅡ对ICa,L的作用。AngⅡ对ICa,L的作用也能被 2 0nmol/L的H 7所抑制 ,而H 7本身对ICa,L无影响。结论　以上结果提示AngⅡ经AngⅡ 1型受体刺激ICa,L,这一作用经由PKC介导而实现。     

藻酸双酯钠对豚鼠心室肌细胞离子电流的作用

目的:观察藻酸双酯钠(Polysaccharide sulfate,PSS)对豚鼠单个心室肌细胞离子流的影响。方法:采用Ⅰ型胶原酶分离单个豚鼠心室肌细胞的方法,利用全细胞膜片箝记录技术,在不同箝制条件下,记录并分析了PSS对L-型Ca2+电流(ICa,L)、内向整流K+电流(IK1)的影响。结果:①PSS使ICa,L的激活时间常数变大,电流幅度减小,Ⅰ-Ⅴ曲线上移。在箝制电位为+10 mV时,PSS在6-9 min内使ICa,L的激活时间常数从(0.92±0.10)ms增加到了(1.15±0.11)ms(n=5,P<0.052);ICa,L的电流幅度从(16.80±1.71)pA/pF下降至(13.86±1.67)pA/pF(n=5,P<0.01)。②PSS可使IK1的内向成分和外向成分均增加。当箝制电位在-170 mV时,PSS能使IK1内向电流幅度从(224±16.17)pA／pF增加至(257±17.36)pA／pF(n=7,P<0.01);箝制电位在-50 mV时,PSS使IK1的外向电流幅度从(8.89±0.86)pA／pF增加至(10.38±1.18)pA／pF(n=7,P<0.05)。在反转电位附近时(-70--120 mV),PSS的作用不明显。PSS能使IK1的激活时间常数减小,当箝制电位在-160 mV时,激活时间常数从加药前的(1.05±0.11)ms减小到了加药后的(0.78±0.90)ms(n=7,P<0.01);同时,IK1的电导值变大,从(2.53±0.17)nS／pF增加到了(2.82 ±0.20)nS／pF(n=7,P<0.05)。结论:PSS对L-型Ca2+电流有抑制作用,对内向整?     

自发性高血压大鼠左心室肌细胞电生理研究

目的　研究自发性高血压大鼠 (SHR)左心室肌细胞的电生理特性。方法　以正常血压Wistar大鼠左心室肌细胞作为对照 ,采用玻璃微电极技术记录动作电位 ,应用膜片钳全细胞技术记录膜离子流 ,观察SHR左心室肌细胞动作电位及膜离子流的改变。结果　①SHR和Wisar大鼠的心脏 /体重比分别为 5 .6 6± 0 .46mg/g(n =2 0 )和 3.7± 0 .2 9mg/g(n =2 8) (P <0 .0 0 1) ,平均细胞膜电容分别为 2 80 .6 8± 6 7.98pF(n =91)和 189.94± 5 6 .5 9pF(n =137) (P <0 .0 5 )。②SHR左心室肌细胞动作电位时程较Wistar大鼠明显延长 [APD50 :2 1.33± 1.5 6ms(n =6 ) ,vs 14.91± 2 .95ms(n =11) ,P <0 .0 0 1;APD90 :16 4.6 7± 4ms ,vs 93.2 7± 10 .5 9ms ,P <0 .0 0 1]。③内向电流 :SHR左心室肌细胞的ICa -L密度与Wistar大鼠间无差异 [6 .93± 1.71pA/pF(n =2 0 ) ,vs 6 .19± 2 .85pA/pF(n =37) ],但前者的慢失活时间常数显著延长 (5 6 .0 1± 13.36ms,vs 43.6 3± 17.89ms,P <0 .0 0 1)。SHR左心室肌细胞的INa密度与Wistar大鼠间无差异 [2 4.6 1± 6 .72 pA/pF(n =16 ) ,vs 2 4.95± 6 .99pA/pF(n =18) ]。④外向电流 :SHR左心室肌细胞IK1内向电流密度显著小于Wistar大鼠 [- 12 0mV时 ,11.3± 2 .2 6 pA/pF(n =17) ,v     

M_3R介导的cAMP-PKA信号途径对L-型钙通道的调控作用研究

目的研究M3受体激动剂通过cAMP-PKA信号途径对L-型钙通道的影响。方法应用全细胞膜片钳技术记录M3受体激动剂胆碱对大鼠单个心室肌细胞L-型钙通道电流(ICa-L)的影响;采用激光扫描共聚焦技术观察细胞内钙离子的变化。结果胆碱使大鼠心室肌细胞ICa-L密度从(9.07±0.68)pA/pF减少至(5.58±0.62)pA/pF(n=4,与对照组相比,P<0.01),H89加胆碱组使ICa-L电流密度减少至(7.68±0.75),幅度明显高于胆碱组(n=4,与胆碱组相比,P<0.01)。胆碱抑制KCl除极诱导的心肌细胞[Ca2+]i的升高,从(2.83±0.08)降至(1.17±0.09)FI/FI0(n=30,与KCl组相比,P<0.01),胆碱与H89组可使[Ca2+]i降至(1.65±0.17)FI/FI0,幅度高于胆碱组(n=30,与胆碱组相比,P<0.05)。结论 M3受体激动剂胆碱通过抑制PKA活性调控L-型钙通道,使外钙内流减少,降低细胞[Ca2+]i,从而发挥抗心肌保护作用。     

丹参对缺血心肌细胞L-型钙电流的影响

目的 :观察丹参对缺血心肌细胞L 型钙电流 (ICa L)的影响。方法 :应用膜片钳全细胞记录技术。结果 :5 0 ,10 0 ,2 0 0mg/L丹参分别将缺血心肌细胞ICa L 的峰值从 (6 5 9.7± 14 8.5 ) pA降至 (5 31.9± 113.2 ) pA、(492 .4± 4 9.3) pA、(341.8± 72 .6 )pA(n =8,P <0 .0 5或P <0 .0 1)。结论 :丹参能有效地减少缺血心室肌细胞的ICa L ,这种作用可能是其抗心肌缺血以及缺血性心律失常的机制之一     

槲寄生黄酮苷对大鼠心室肌细胞钾离子通道的作用

目的观察槲寄生黄酮苷对大鼠心室肌细胞钾离子通道的作用,探讨槲寄生黄酮苷抗心律失常作用机制。方法应用全细胞膜片钳技术记录槲寄生黄酮苷对大鼠单个心室肌细胞内向整流钾电流(IK1)、瞬时外向钾电流(Ito)的影响。结果应用50μg/ml和250μg/ml两种浓度的槲寄生黄酮苷分别使大鼠单个心室肌细胞内向整流钾电流(IK1)在实验电压-120mV时从给药前(-26.23±9.52)pA/pF减少到(-20.82±7.88)pA/pF,(-18.11±7.89)pA/pF(n=7,P<0.05);使大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流(Ito)在实验电压+50mV时,从给药前(26.14±6.67)pA/pF减少到(16.41±6.23)pA/pF,(13.25±3.78)pA/pF(n=4,P<0.05)。结论槲寄生黄酮苷抑制大鼠心室肌细胞IK1,Ito可能是其抗心律失常作用的一个机制。     

通络药物对心肌细胞钠钙离子通道的影响

目的观察通络药物参松养心胶囊提取干粉溶液对单个豚鼠J0室肌细胞膜钠通道电流（INa）、L型钙通道电流（ICa,L）的影响。方法用钙外液将参松养心胶囊干粉配制成不同浓度（1％、0．5％、0．25％）。用酶解法分离单个心室肌细胞,并用全细胞膜片钳记录技术记录电流。结果当药物浓度0．5％时,可以使INA峰值电流密度从（27．2±5．4）pA／pF降至（14．9±2．8）pA／pF,平均抑制率为44．8％±7．7％（n=5,P〈0．05）;药物浓度为1％,0．5％,0．25％时,分别对ICa,L的峰值电流密度的抑制率为50．7％±5．6％,44．8％±6．5％,和19．2％±1．1％,（n=5,P〈0．05）。药物可以使INA、ICa,L的电流密度-电压曲线上移,但均不改变其激活、峰值和反转电位。结论参松养心胶囊提取干粉溶液对,INA、ICa,L具有阻滞作用,这可能是其抗心律失常和心肌保护作用药理机制的一部分。     

慢性低氧对大鼠膈肌细胞L型钙通道电流的影响

目的　研究慢性低氧对急性分离的大鼠膈肌细胞L型钙通道电流的影响。方法　采用标准的全细胞膜片钳 (wholecellpatchclamp)技术 ,记录并比较正常对照组与慢性低氧组大鼠单个膈肌细胞的膜电容 ,L型钙电流的峰值和电流 电压关系曲线。结果　正常对照组与慢性低氧组大鼠单个膈肌细胞的膜电容分别为 (15 0 0± 12 6 )pF和(174 0± 13 3)pF ,低氧组显著大于正常对照组 (P <0 0 5 ,n =6 ) ;L型钙电流的峰值分别为 (- 1 0 5± 0 19)nA和(- 0 97± 0 16 )nA ,两组之间无显著差异。当膜电位处于 - 2 0～ +40mV时 ,慢性低氧组大鼠单个膈肌细胞的L型钙电流密度 [(- 5 6± 0 8)pA/pF]较正常对照组 [(- 7 0± 1 4 )pA/pF]显著下降 (P <0 0 5 ,n =6 )。结论　慢性低氧能使大鼠单个膈肌细胞的膜电容增加 ,L型钙电流的幅度不变 ,因此L型钙电流密度下降。L型钙电流密度下降可能是慢性缺氧时膈肌发生疲劳的重要机制之一     

鹌鹑心室肌细胞电生理特性的研究

目的　建立鹌鹑单个心室肌细胞的分离方法 ,观察鹌鹑心室肌细胞的电生理特性 ,并探讨不同离子通道在鹌鹑心肌电活动中的作用。方法　采用酶解法分离单个心室肌细胞 ,应用全细胞膜片钳技术记录心室肌细胞动作电位和L型钙电流。结果　鹌鹑单个心室肌细胞的静息电位 (RP)为 ( 6 2 .2 8± 2 .6 4 )mV ,超射值 (OS)为 (5 9.38±3.81 )mV ,5 0 %复极时间 (APD50 )和 90 %复极时间 (APD90 )分别为 (80 .4 0± 1 9.1 0 )ms和 (1 2 1 .95± 38.72 )ms。在实验电压 +1 0mV时 ,L型钙电流的峰值为 ( 1 3.2 7± 3.70 )pA pF(n =4 )。结论　鹌鹑心室肌细胞上存在着L型钙电流 ,此电流为构成鹌鹑心室肌细胞动作电位的重要电流之一     

灯盏花素海藻酸钙凝胶小球的制备

目的考察灯盏花素海藻酸钙凝胶小球的制备工艺和最优处方。方法利用滴加法制备凝胶小球,在单因素考察的基础上采用正交设计筛选最优处方。结果最优处方为海藻酸钠质量分数为2.5%,海藻酸钠与药物的比例为1∶1,氯化钙浓度为0.3mol/L。优化处方制备的凝胶小球大小均匀,载药量均匀,包封率和体外释放度具有良好的重现性。结论利用滴加法制备灯盏花素海藻酸钙凝胶小球方法简单。     

阿托伐他汀对急性冠脉综合征患者PCI术后心肌保护作用的研究

目的:探讨阿托伐他汀对急性冠脉综合征(ACS)患者冠脉介入治疗(PCI)后的心肌保护作用。方法:选取我院ACS择期PCI术患者156例,随机分为治疗组与对照组,两组患者入院后均经常规治疗。治疗组采用大剂量阿托伐他汀钙强化治疗,对照组采用阿托伐他汀钙标准剂量治疗。观察两组患者术前、术后3h、术后7d肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白I(cTnI)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)水平变化情况。结果:两组患者术后3hCK-MB、cTnI水平较术前升高(P<0.05),治疗组术后CK-MB、cTnI水平低于对照组(P<0.05),CKMB、cTnI两组患者术后7d比较无统计学差异(P>0.05);术后7d两组患者TC、TG、LDL水平均较术前降低(P<0.05),治疗组TC、TG、LDL水平低于对照组(P<0.05)。结论:PCI术前早期给予强化阿托伐他汀钙治疗,能有效降低PCI术后CK-MB、cTnI水平,对患者预后改善起积极作用。     

高效液相色谱法同时测定3种补钙剂的含量

目的建立同时测定乳酸钙、葡萄糖酸钙和柠檬酸钙3种补钙剂的方法。方法以C18色谱柱、0.025mol·L-1NaH2PO4(pH=2.50)溶液为流动相分离、210nm紫外检测、外标法定量。结果乳酸、柠檬酸、葡萄糖酸钙的线性范围分别为0.9592～46.04、0.4302～20.65、0.2404～11.54mmol·L-1;方法回收率>98.0%;日内及日间精密度<2.0%。结论该方法快速、简便、准确,可用于乳酸钙、葡萄糖酸钙、柠檬酸钙的质量控制。     

高糖对H9C2心肌细胞系和乳大鼠心室肌细胞钙库操纵性钙内流及相关蛋白的影响

目的 探究高糖环境对大鼠胚胎心肌细胞系（H9C2）和乳大鼠心室肌细胞（neonatal rat ventricular myocytes,NRVMs）钙库操纵性钙内流（store operated calcium entry,SOCE）功能的影响,对基质相互作用分子1（stromal interaction molecule 1,STIM1）蛋白表达及其激活结构的作用,完善SOCE在糖尿病心肌病（diabetic cardiomyopathy,DCM）中的潜在致病机制。方法 将H9C2和NRVMs细胞分为2组,对照组（5.5 mmol/L葡萄糖）和高糖组（25 mmol/L葡萄糖）,分别培养48 h后用激光共聚焦显微镜实时观察各组心肌细胞在毒胡萝卜素（thapsigargin,TG）刺激后Ca²⁺荧光强度值的变化;采用Western blotting技术检测各组细胞STIM1和钙释放激活钙通道调节分子1（calcium release-activated calcium channel modulator 1,Orai1）蛋白表达的变化;借助化学交联技术和免疫荧光法检测NRVMs的STIM1蛋白的聚集变化;免疫共沉淀技术观察NRVMs心肌细胞内源性STIM1和Orai1蛋白的直接相互作用。结果 与对照组相比,高糖组H9C2和NRVMs心肌细胞钙内流（Ca²⁺ influx）显著增加（P<0.05）;高糖组H9C2和NRVMs心肌细胞STIM1以及Orai1蛋白表达上调（P<0.01）;钙库排空后,高糖组NRVMs心肌细胞STIM1蛋白聚集体显著增多（P<0.01）。结论 体外高糖能诱导大鼠胚胎心肌细胞系H9C2及乳大鼠原代培养心室肌细胞NRVMs的STIM1和Orai1蛋白表达上调,促进STIM1蛋白激活形成聚集体和SOCE激活,Ca²⁺内流增多。该作用提示高糖增加的心肌细胞SOCE可能与糖尿病心肌肥大有关。     

能谱CT定量钙（水）密度技术对腰椎椎体内及椎体间骨密度差异的研究

目的：探讨受检者腰椎椎体内不同感兴趣区（ROI）的骨密度差异和L1～3椎体在不同年龄段间的骨密度差异,来完善能谱CT定量钙（水）密度技术在腰椎测量方面的方法,并了解各腰椎椎体骨密度随年龄变化的差异。方法筛选2013年1月—2014年12月期间行腰椎CT能谱GSI扫描的男性237例,按10岁为一个年龄段分为6组。由两位放射医师分别测量L1～3椎体上中下3个层面的钙（水）密度,应用方差分析组内差异;同时分别计算L1～3椎在不同年龄段的平均值,应用方差分析每个年龄段各椎体骨密度的组间差异。结果 L1～3椎体上中下3个层面骨密度分别为（mg／mL）：L1：54．94±8．82,58．22±6．19,59．92±5．78;L2：55．38±7．67,56．66±8．48,60．23±6．80;L3：54．67±7．69,55．89±5．78,58．75±4．83;每个椎体内3个层面间比较,差异均有显著性意义,腰椎最上层面密度最低。50～59岁和60～69岁年龄段L3椎体骨密度（54．26±6．14） mg／mL,（45．2±9．88） mg／mL低于L1、2椎体骨密度为（57．24±6．93）mg／mL,（48．16±10．36）mg／mL,L2为（55．82±7．65）mg／mL,（47．81±10．23）mg／mL,70～79岁L1～3椎各椎体骨密度均略有回升。结论腰椎椎体内骨密度存在区域性差异,L3椎体可以作为老年骨质疏松筛查的首选椎体。     

氨基酸聚合物/硫酸钙生物工程骨的生物相容性研究

目的 评价氨基酸聚合物[poly(amino acid),PAA]/硫酸钙(calcium sulfate,CaSO4)生物工程骨的生物相容性.方法 制备PAA/CaSO4.通过急性毒性实验、溶血实验、微核实验、热原实验、皮内刺激实验、细胞毒性实验研究该复合材料的生物相容性.结果 急性毒性实验中各组小鼠活动正常,7 d内小鼠无死亡,各组动物未见中毒症状或不良反应,7 d 后各组小鼠体质量日平均增加差异无统计学意义(P>0.05).材料浸提液的溶血率为2.01%,符合<5%的国家标准.微核实验中3个实验组与阴性对照组微核率无明显差异(各组的微核率均介于0.4～0.6之间),材料无潜在致突变性.热原实验中3只动物中体温升高最高为0.4℃,体温升高的总数为1.1℃,符合热源实验国家标准.皮内刺激实验观察显示,注射材料生理盐水浸提液和生理盐水处无明显红斑、水肿和皮肤坏死,PII 为0.01～0.02,属极轻微刺激.细胞毒性实验中A、B、C组的BMSC的相对增殖率均>90%,细胞毒性为0～1级,材料无细胞毒性.结论 PAA/CaSO4具有良好的生物相容性.     

地塞米松氢氧化钙糊剂根管内封药的疗效观察

目的：观察地塞米松氢氧化钙糊剂在坏死性牙髓根管内封药的临床疗效。方法：选择死髓牙根管治疗156个患牙,根管治疗过程中分别采用地塞米松氢氧化钙糊剂与传统的根管消毒药物甲醛甲酚(FC)根管内封药,对治疗结果进行比较。结果：实验组的各病种疼痛指数和治疗效果均优于对照组,统计学处理结果呈显著差异;并减少了复诊次数。结论：地塞米松氢氧化钙糊剂根管内封药可减少根管治疗期间痛的发生,提高疗效并缩短疗程。     

羟苯磺酸钙联合依帕司他治疗单纯型糖尿病视网膜病变的疗效观察

目的探讨羟苯磺酸钙联合依帕司他治疗单纯型糖尿病视网膜病变(DR)的疗效。方法选择2015年1月～2017年8月单纯型DR患者72例(120眼),随机分为观察组36例(62眼)和对照组36例(58眼)。两组患者均继续予以饮食控制、适当运动及口服降糖药或胰岛素注射治疗控制血糖等。对照组患者给予羟苯磺酸钙片0.5 g/次,2次/d,口服。观察组患者在对照组基础上加用依帕司他片50 mg/次,3次/d,口服。两组疗程均为12周。观察治疗前与治疗12周后两组患者的视力和视网膜黄斑区平均厚度变化,并比较其临床效果及不良反应。结果治疗12周后,两组患者的视力较治疗前明显好转,视网膜黄斑区平均厚度较治疗前明显变薄(P0.05或P0.01),观察组患者的变化幅度较对照组更显著(P0.05);观察组临床总有效率高于对照组(P0.05)。对照组和观察组分别出现不良反应3例和5例,症状较轻,两组比较差异无统计学意义(χ~2=0.05,P0.05)。结论羟苯磺酸钙联合依帕司他治疗单纯型DR的疗效肯定,安全性较好,能改善其视力,减少视网膜黄斑区厚度。     

女贞子对去卵巢大鼠钙代谢及维生素D依赖型基因表达的影响

目的研究补肾中药女贞子对去卵巢大鼠钙代谢及维生素D依赖型基因表达的影响。方法大鼠去卵巢手术处理4周后,ig给药治疗14周。血清、尿液及粪便中钙水平采用比色法测定。RT-PCR技术分析小肠及肾脏基因表达。结果大鼠去卵巢后体内钙流失显著增加,表现在血钙下降,尿钙及粪钙排泄增加。女贞子可以有效防止尿钙及粪钙排泄增加,并恢复血钙水平。RT-PCR分析表明雌二醇和女贞子都可以抑制去卵巢引起的小肠维生素D受体(VDR)mRNA表达下降。女贞子对肾脏25-羟基维生素D 1-羟化酶(1-OH ase)及25-羟基维生素D 24-羟化酶(24-OH ase)mRNA无明显作用,但却可以提高肾脏钙结合蛋白-9k(C aBP-9k)及钙结合蛋白-28 k(C aBP-28k)的基因表达。结论女贞子能够改善雌激素缺乏所引起的钙失衡状态,主要是通过提高小肠对活性维生素D的敏感性及加强肾脏对钙的重吸收而发挥作用的。     

羟苯磺酸钙联合甲钴胺治疗糖尿病周围神经病变的疗效观察

目的 评价羟苯磺酸钙联合甲钴胺治疗糖尿病周围神经病变（DPN）的疗效。方法 将60例DPN患者随机分为羟苯磺酸钙联合甲钴胺治疗组（n=30）和甲钴胺对照组（n=30）,联合治疗组口服羟苯磺酸钙胶囊0.5 g、甲钴胺片0.5 mg;对照组口服甲钴胺片0.5 mg;均每日3次,疗程12周。观察治疗前后患者的腓神经传导速度、神经系统症状及体征变化。结果 治疗组总有效率为93.3%,对照组为63.3%,治疗组在改善运动神经与感觉神经的传导速度、神经系统症状评分及体征评分方面均优于对照组（P＜0.05）。结论 羟苯磺酸钙联合甲钴胺治疗DPN疗效优于甲钴胺单一治疗。