子宫内膜异位症病人雌激素受体亚型和VEGF表达

目的 探讨雌激素受体亚型、血管内皮生长因子(VEGF)的表达与子宫内膜异位症(EMs)的相关性及其预后的关系.方法 采用免疫组化法检测79例EMs病人异位内膜组织及20例正常子宫内膜标本中的雌激素受体亚型-α(ER-α)、雌激素受体亚型-β(ER-β)及VEGF的表达情况,并分析其与EMs预后的关系.结果 异位内膜组ER-α、ER-β阳性表达率及表达强度均低于正常子宫内膜组(χ2=9.98、4.23,P<0.01、0.05),VEGF阳性表达率高于正常子宫内膜组(χ2=4.11,P<0.05).异位内膜VEGF高表达的EMs病人复发率明显高于低表达者(χ2=6.39,P<0.05); 异位内膜中ER-α高表达者VEGF表达率亦相应较高,ER-α低表达者其VEGF表达率亦相应较低(r=0.93,P<0.01).结论 ER-α、ER-β可能参与了EMs发生发展的病理过程及异位内膜血管生成的调节,检测VEGF的表达对于估计EMs的预后可能有重要临床价值.     

子宫内膜息肉组织Erα、Erβ、PR及Bcl-2表达及意义

目的 探讨生育期妇女子宫内膜息肉组织中雌激素受体α(Erα)、雌激素受体β(Erβ)、孕激素受体(PR)及Bcl-2的表达及意义.方法 用免疫组织化学PV 6000法,检测110例子宫内膜息肉组织Erα、Erβ、PR及Bcl-2的表达,并采用Image Pro Plus 6.0图像分析软件进行分析.以45 例正常子宫内膜作对照.结果 在增殖期,内膜息肉组织中Erα及Erβ的表达水平与正常子宫内膜比较差异无统计学意义(P＞0.05),而PR的表达水平低于正常内膜(t=2.589,P＜0.05),Bcl-2的表达水平高于正常内膜(t=2.716,P＜0.01).在分泌期,内膜息肉组织中 ER-α及Bcl-2表达水平高于正常子宫内膜,PR的表达水平低于正常子宫内膜,差异均有显著性(t=2.574、2.581、2.579,P＜0.05),Erβ的表达水平与正常内膜比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 Erα、Bcl-2的高表达和PR相应的低表达可能是子宫内膜息肉形成的病因, Erα可能是在子宫内膜息肉形成过程中发挥主要作用的雌激素受体亚型.     

ER-β在子宫内膜异位症和腺肌症患者在位内膜中的表达

目的 探讨子宫内膜异位症(内异症)和腺肌症患者的在位内膜中雌激素受体β(ER-β)的含量及其在子宫内膜异位症和腺肌症发病中的机制及意义.方法 采用免疫组织化学PV两步法,分析12例腺肌症患者在位内膜及5例内异症患者的在位内膜标本中ER-β的含量,并以10例正常子宫内膜做对照.结果 3组在位内膜上皮细胞中均有ER-β的表达,而在基质细胞中未检测到其表达.正常子宫内膜上皮细胞中ER-β的表达高于其在内异症在位内膜上皮细胞中的表达,差异有显著性(P＜0.05).结论 ER-β在子宫内膜异位症和腺肌症的在位内膜中的表达量不同,对选择药物治疗具有临床意义.     

Wistar大鼠内异症窗口期对α_vβ_3及VEGF基因表达的影响

目的研究子宫内膜异位症对Wistar大鼠胚胎种植期子宫内膜整合素α_vβ_3、血管内皮生长因子(VEGF)基因的表达及雌、孕激素水平与不孕的关系。方法采用同种异体移植方法建立Wistar大鼠子宫直肠陷凹、腹壁外子宫内膜异位症动物模型36只,空白对照20只,建模成功后投放雄鼠,受孕4.5 d后麻醉采血,取模型大鼠在位子宫内膜组织,进行透射电镜观察,ELISA检测血清中雌激素、孕激素的含量,同时运用荧光定量PCR技术,定量分析整合素α_vβ_3以及VEGF基因在其子宫内膜中的表达。结果早孕各组大鼠子宫内膜α_vβ_3、VEGF基因的表达水平均高于模型组和空白未孕组;早孕能提高模型组α_vβ_3、VEGF基因的表达但均低于空白受孕组(P0.05),且子宫直肠凹陷子宫内膜异位症模型大鼠的表达水平较腹壁外子宫内膜异位症模型大鼠低(P0.05);子宫直肠凹陷子宫内膜异位症模型大鼠血清雌激素水平低于空白受孕组(P0.05),但孕激素较空白受孕组高(P0.05)。结论不同程度的子宫内膜异位症均能降低Wistar大鼠窗口期整合素α_vβ_3、VEGF基因的表达,使其达不到正常胚胎种植期的水平是导致不孕的重要原因。     

逆灸对自然更年期大鼠子宫组织形态及E2、P和ER-α影响的实验研究

目的 探讨逆灸关元穴对自然更年期大鼠子宫结构、子宫内激素和受体的影响及保护机制.方法 将128只SD雌性大鼠随机分8组,采用免疫组化、放射免疫、HE染色等方法,观察在10月龄逆灸对随后12、14、16月龄大鼠子宫的组织形态及激素和受体的影响.结果 随增龄,模型对照各组大鼠子宫的结构出现明显退化,同时子宫内激素雌二醇(E2)、孕激素(P)的含量同步下降.而从10月龄介入逆灸关元方法后,各组子宫与同期对照组比较,情况明显好转;逆灸还可提高子宫内E2及受体表达, E2含量的提高主要在14、16月龄(均P＜0.05); 雌激素受体(ER-α)表达的加强则主要在12、14月龄组(P＜0.01,P＜0.05);逆灸还可调节子宫内P的含量,其效应主要体现在16月龄(P＜0.05).结论 逆灸关元穴对更年期大鼠子宫退行性改变具有延缓作用,这种保护作用可能与逆灸调节子宫局部E2、P及ER-α表达有关.     

慢性盆腔炎性不孕患者子宫内膜整合素αvβ3表达及与甾体激素关系的研究

[目的]研究慢性盆腔炎性不孕患者子宫内膜整合素αvβ3的表达,并分析其体内甾体激素与整合素αvβ3表达的相关性.[方法]选取25例慢性盆腔炎性不孕症患者,同时选择15例具有正常生育能力的育龄妇女,分别设为实验组和对照组,采用流式细胞荧光标记测量技术对子宫内膜中整合素αvβ3的表达进行定量检测.在同期内取血清检测实验组及对照组体内雌孕激素水平,分析甾体激素与子宫内膜整合素αvβ3表达在植入窗口期(种植期)的相关性.[结果](1)两组黄体中期血清雌二醇(E2)水平及雌二醇/孕酮(E2/P)比值比较均无显著性差异(P>0.05),而血清P水平比较有显著性差异(P<0.05).(2)两组黄体中期(分泌中期)子宫内膜整合素αvβ3表达比较差异有显著性意义(P<0.05).(3)雌激素与子宫内膜整合素αvβ3无相关性,而孕激素与整合素αvβ3显示正相关性,孕激素的表达水平越高,整合素αvβ3表达水平相应也越高.[结论]整合素αvβ3在正常育龄妇女子宫内膜种植窗期的表达高于慢性盆腔炎性不孕患者;整合素的表达水平与卵巢分泌的甾体激素孕激素的表达呈一致性,孕激素影响着整合素αvβ3表达的水平.     

海马区雌激素受体表达与妊娠期抑郁倾向的关系

目的 探讨妊娠期抑郁倾向与脑内海马区两种雌激素受体亚型(ER-α,ER-β)表达的关系.方法 选择各项指标相近的雌鼠40只,分别在妊娠前及妊娠15 d进行行为学评分,根据行为学评分将大鼠分成实验组及对照组,采用免疫组化S-P法观察2组大鼠脑内海马区ER-α、ER-β的表达有无统计学差异.结果 与妊娠前比较,全部40只大鼠妊娠后行为学评分下降明显(P<0.01),且其下降水平与脑内ER水平相关(ER-α,r=-0.37,P=0.019;ER-β,r=-0.60,P=0.0004),实验组大鼠大脑海马区两种雌激素受体亚型表达与对照组有明显统计学差异(ER-α,P<0.05,ER-β,P<0.01).结论 妊娠期大脑海马区雌激素受体表达下降可能是妊娠期抑郁发病率增加的原因之一.     

他莫西芬对大鼠血清雌孕激素及子宫雌孕激素受体的影响

目的 探讨他莫西芬(tamoxifen,TAM)对大鼠血清雌、孕激素分泌水平以及对大鼠子宫雌、孕激素受体(ERα、ERβ、PR)表达状况的影响.方法 40只成年雌性SD大鼠随机分为4组:假手术组(SHAM组)、假手术+TAM组(SHAM+ TAM组)、去势手术组(OVX组)、去势手术+TAM组(OVX+ TAM组),每组10只.假手术组在找到卵巢后即分层缝合,关闭腹腔;去势手术组切除双侧卵巢建立OVX动物模型.SHAM+ TAM和OVX+ TAM组每日灌胃TAM;SHAM和OVX组给予等量蒸馏水,连续给药28 d.给药前后应用放射免疫分析法检测血清雌、孕激素分泌水平,实验结束处死大鼠取子宫,称量子宫重量,计算子宫系数,Western blot方法检测子宫的ERα,ERβ和PR的表达水平.结果 与SHAM组相比,SHAM+ TAM组大鼠子宫湿重显著降低(P＜0.01),子宫系数降低了47％.与OVX组相比,OVX +TAM组大鼠子宫湿重显著增加(P＜0.05),子宫系数是OVX组的1.87倍.SHAM+TAM组雌激素和孕激素水平均显著低于SHAM组,P＜0.05.OVX+ TAM组雌激素水平显著高于OVX组,而孕激素水平则极显著低于OVX组.与OVX组相比,OVX+ TAM组ERβ的表达显著降低(P＜0.05),SHAM组PR的表达量显著降低(P＜0.05).OVX +TAM组的PR水平显著高于OVX组(P＜0.05),并与SHAM组水平相当(P＞0.05).结论 TAM在不同雌激素水平条件下,对性激素分泌的影响是不同的.TAM在大鼠子宫内膜有雌激素样作用.TAM导致子宫内膜病变的机制可能与其雌激素样作用以及对性激素受体的调节有关.     

葛根素对小鼠子宫ERα、ERβ蛋白表达的影响

【目的】研究葛根素对小鼠子宫ERα、ERβ蛋白表达的影响。【方法】成年雌性小鼠腹腔注射给予葛根素500mg／ks和50mg／kg7d后，采用免疫组织化学染色结合图像分析手段检测子宫组织ERα、ERβ蛋白免疫反应阳性细胞数及其面积。【结果】与对照组相比，葛根素500mg／kg组E邴阳性细胞数和阳性细胞面积显著高于对照组（P〈0．01），ERα则无差异；葛根素50mg／kg组ERa和E邸阳性细胞数及阳性细胞面积均无差异（P〉0．05）。己烯雌酚组ERα和ERβ阳性细胞数和阳性细胞面积均显著高于对照组（P〈O．01）。【结论】500mg／kg葛根素明显增强子宫组织ERβ蛋白表达，而对ERα蛋白无明显影响，己烯雌酚则对两种ER亚型的表达均有显著上调作用，提示葛根素对子宫内膜的刺激增殖作用远低于雌激素的原因可能与其对ERβ的选择性上调有关。     

金雀黄素对HEC-1B细胞增殖及荧光素酶报告基因表达影响的研究

目的 探讨金雀黄素对子宫内膜癌雌、孕激素受体阴性细胞系(HEC-lB细胞)增殖的影响及其受体作用机制,为临床运用金雀黄素抗肿瘤治疗提供理论依据.方法 体外培养子宫内膜癌HEC-lB细胞,金雀黄素作用浓度分别为10×10-6、20×l0-6、40× 10-6、80×l0-6、160×l0-6mol/L,作用时间分别为24、48、72、96 h.采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测金雀黄素对子宫内膜癌细胞增值的影响;同时采用荧光素酶报告基因的方法,检测不同浓度金雀黄素对雌激素应答原件(ERE)调控的雌激素受体α(ER-α)和雌激素受体β(ER-β)报告基因表达的影响,并比较其对ER-α和ER-β作用的差异性.结果 金雀黄素对HEC-1B细胞体外增殖有明显抑制作用,差异有统计学意义(P＜0.01),其抑制作用随药物作用浓度增加和作用时间的延长而逐渐增强,呈剂量及时间依赖性.在金雀黄素浓度为20×10-6、40×10-6mol/L的作用下,报告基因的表达较空白对照组明显提高,差异有统计学意义(P＜0.01),且呈浓度依赖性;金雀黄素通过ER-β介导的报告基因表达水平的升高程度强于ER-α,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 金雀黄素可抑制子宫内膜癌细胞的增殖,这种抑制作用可能通过调节子宫内膜癌细胞ER-α和ER-β的表达,调整ER-β/ER-α比例而实现.     

补肾活血方对去卵巢大鼠子宫ER及Cyclin B表达影响的实验研究

目的观察补肾活血方对去卵巢大鼠子宫的雌激素受体及周期蛋白(Cyclin)B表达的影响,探讨其治疗围绝经期综合征的作用机制。方法选择SD雌性大鼠54只,随机分为假手术组、模型组、雌二醇组、补肾活血方组、联合用药组、补肾活血方+假手术组,每组9只。以双侧卵巢切除法建立大鼠围绝经期模型。各组灌胃给药40 d后取血清和子宫称重;酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清中雌二醇(E2)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)浓度;HE染色观察子宫组织病理改变并测定子宫内膜厚度;免疫组化法观察雌激素受体(ER)α、ERβ在子宫组织中分布与表达情况;蛋白质印迹法(Western blot)法检测子宫组织中周期蛋白(Cyclin B)蛋白表达。结果补肾活血方治疗40 d后,与模型组比较,血清LH、FSH明显降低(P0.05或P0.01),血清E2水平升高(P0.05);同时,子宫脏器指数、子宫内膜厚度、子宫组织中ERα、ERβ和Cyclin B蛋白表达均明显升高(P0.05),与雌激素组呈现相似的作用,但作用强度均低于雌激素;补肾活血方+假手术组大鼠各项指标与假手术组比较无明显差异。结论补肾活血方具有雌激素样作用,但作用强度弱于雌激素,对正常大鼠子宫组织无显著影响。     

人类子宫内膜种植窗期激素受体表达研究

目的:研究人类生理情况下种植窗期子宫内膜上皮细胞雌激素受体、孕激素受体表达与在控制性超促排卵周期激素表达的比较,探讨激素受体表达与外周血激素浓度的关系。方法:实验组:30例超促排卵周期患者,对照组:48名健康育龄已生育妇女。子宫内膜连续取材,运用免疫组织化学行雌、孕激素受体测定,取外周血进行雌激素(estro-gen,E)、孕激素(progesterone,P)浓度检测,计算E2/P比值。结果:在控制性超促排卵周期子宫内膜雌激素受体及孕激素受体的表达较自然周期提前降低。外周血E2/P促排卵周期升高与自然周期比较有极其显著差异。结论:控制性超排卵周期与自然周期比较子宫内膜种植窗提前2d开放。     

乳癖安消胶囊对实验乳腺增生大鼠性激素及其受体的影响

目的观察乳癖安消胶囊对实验性乳腺增生大鼠的雌激素、孕激素及其相应受体的影响,为乳癖安消胶囊的临床运用提供依据。方法SD大鼠90只,随机分为6组:正常组、模型组、三苯氧胺组和乳癖安消胶囊大、中、小剂量组,每组15只。以肌注外源性苯甲酸雌二醇及黄体酮的方法复制大鼠乳腺增生模型,用放射免疫方法测定各组实验性大鼠模型血浆中雌二醇(E2)、孕酮(P)的含量,免疫组化方法观察乳腺组织中雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)的变化。结果乳癖安消胶囊能降低实验性乳腺增生大鼠的血清E2水平;也能降低乳腺组织ER、PR含量,使乳腺组织对雌激素的敏感性下降。结论乳癖安消胶囊通过降低实验大鼠血清E2水平和乳腺组织ER、PR含量而起到抑制乳腺增生的作用。     

雌激素联合孕激素间断应用对去卵巢大鼠的影响

目的　观察雌激素苯甲酸雌二醇 (E)联合间断应用孕激素黄体酮 (P)对双侧卵巢切除 (OVX)大鼠的影响。方法　 35只雌性大鼠随机分成 5组 ,每组 7只。①假手术 (Sham)组、②卵巢切除 (OVX)组、③卵巢切除加雌激素 (OVX E)组、④卵巢切除加孕激素(OVX P)组、⑤卵巢切除加雌激素和孕激素 (OVX E P)组。实验 1 0周后处死大鼠 ,称取大鼠子宫和股骨湿重量 ,并测定子宫内膜厚度、骨密度和血清脂蛋白。结果　与Sham组相比 :OVX组和OVX P组子宫重量、股骨重量和BMD减少 ,子宫内膜变薄 ,体重、血总胆固醇 (TC)和低密度脂蛋白 (LDL)增加 ,差异有显著性 (P <0 .0 5) ;OVX E组体重、股骨重量、BMD、TC和LDL差异无显著性 (P>0 .0 5) ,子宫重量增加、子宫内膜增厚、血HDL增高 ,差异有显著性 (P <0 .0 5) ;OVX E P组股骨重量、BMD、子宫重量、子宫内膜厚度和血脂均差异无显著性 (P >0 .0 5)。结论　单纯使用孕激素不能阻止OVX导致的骨丢失 ;单纯使用雌激素导致OVX鼠子宫重量增加和子宫内膜增厚 ;雌激素联合间断应用孕激素能阻止OVX导致的骨丢失和体重增加 ,并可避免OVX和雌激素对子宫内膜的不良作用 ;间断加入孕激素没有影响雌激素对OVX大鼠脂代谢的有利作用     

雌激素、孕激素对去卵巢大鼠子宫内膜血管内皮生长因子及基质金属蛋白酶表达的研究

目的:探讨雌、孕激素对去卵巢大鼠子宫内膜血管内皮生长因子及基质金属蛋白酶表达的影响.方法:建立卵巢去势大鼠模型,分别给予雌激素(E)、孕激素(P)、雌激素(E) 孕激素(P)肌肉注射,对照组(C)未注射任何药物,植物油组(O)注射助溶剂植物油,通过免疫组化法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组大鼠子宫内膜微血管密度,血管内皮生长因子(VEGF)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平.结果:非去势组(N)相比,E组及E P组微血管密度、VEGFmRNA及MMP-9mRNA水平均明显升高(P<0.05) ,O组、C组及P组各指标明显下降(P<0.01) .结论:子宫内膜周期性变化主要受卵巢激素的影响,同时子宫内膜微环境中的细胞因子和酶等通过自分泌和旁分泌方式参与调节子宫内膜复杂的生理和病理过程.     

异位子宫内膜细胞中整合素α5的表达及其性激素调控

目的:探讨异位子宫内膜细胞中整合素α5的表达及性激素对其的影响。方法:对18例卵巢子宫内膜异位症(EM)患者的异位子宫内膜组织行体外细胞培养并传代。传代培养中细胞分为非药物干预组(对照组)、雌二醇(E2)组、安宫黄体酮(P)组、米非司酮(RU486)组、三苯氧胺(TAM)组5组,细胞收获后用逆转录-聚合酶链反应技术检测各细胞组中整合素α5mRNA的表达。结果:整合素α5在E2组及P组的表达水平分别为1.415±0.286及1.304±0.170,与对照组的1.082±0.069相比,差异具有统计学意义(P<0.05),而TAM组及RU486组中整合素α5表达水平(分别为0.882±0.013及1.304±0.170)明显低于对照组(P<0.05)。结论:整合素α5表达受雌、孕激素调控,E2、P可能通过上调整合素α5的表达而促进EM粘附的发生,TAM、RU486可能通过拮抗E2、P或抑制异位内膜细胞分泌整合素5α分子而延缓EM的发展,从而起到治疗作用。     

ER-β、MEK-2、p-ERK在子宫内膜异位症组织中的表达及意义

目的:探讨雌激素受体ER-β与细胞信号传导通路丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)上游激活酶MEK-2和下游激活酶pERK在子宫内膜异位症(EMs)发病机制中的作用.方法:采用免疫组化S-P法检测46例EMs患者在位及异位内膜、40例正常内膜组织中ER-13、MEK-2和p-ERK的蛋白表达.结果:ER-β、MEK-2和p-ERK在异位内膜和在位内膜中表达高于正常内膜,差异有显著性意义(P＜0.01),异位内膜表达高于在位内膜,差异具有显著意义(P＜0.01);ER-β和MEK-2、p-ERK在正常子宫内膜、在位内膜和异位内膜中表达呈正相关( r=0.628,P＜0.01;r=0.559,P＜0.01).MEK-2和p-ERK在正常子宫内膜、在位内膜和异位内膜中表达呈正相关(r=0.699,P＜0.01).结论:ER-β、MEK-2和p-ERK在EMs组织中高表达并呈正相关,MAPK信号通路可能与ER-β相互作用,在EMs的发生发展中起着重要作用.     

新生鼠实验性缺氧缺血性脑损伤ER-α、IGF-1R的表达及双重表达

目的 了解胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R),雌激素受体-α(ER-α)在新生雌性SD大鼠脑中的分布和共表达,以及在缺氧缺血性脑损伤(HIBD)时的变化。方法 采用右侧颈总动脉结扎加缺氧处理的7日龄SD雌性大鼠,建立HIBD模型。用免疫组织化学和免疫组化双重染色法,检测IGF-1R、ER-α在新生雌性大鼠大脑的表达及共表达。结果 ①新生雌性SD大鼠脑中有广泛的ER-α和IGF-1R及IGF-1R、ER-α双阳性细胞分布;②大鼠HIBD急性期大脑皮层IGF-1R、ER-α及IGF-1R、ER-α双阳性细胞的表达无变化,在恢复期表达均增加。结论 IGF-1R、ER-α可能共同参与了HIBD后脑损伤的修复过程。     

雄性大鼠肺组织中雌激素受体的研究

目的:研究雌激素受体(ER)在雄性大鼠肺组织的表达和定位。方法:采用RT-PCR方法检测大鼠肺组织ER-α、ER-βmRNA的表达,用免疫组织化学方法检测大鼠肺中ER-β蛋白表达定位。结果:RT-PCR结果显示,在大鼠肺组织中ER以ER-βmRNA的表达为主,ER-αmRNA几乎不表达。免疫组织化学检测结果显示ER-β存在于柱状上皮细胞、平滑肌细胞和间质细胞上,血管壁上内皮细胞和平滑肌细胞中也有表达。结论:ER-β在大鼠肺组织中有广泛的分布。     

异位子宫内膜17β-羟基类固醇脱氢酶2缺乏的分子机制

正常子宫内膜凋亡受雌激素的影响,17β-羟基类固醇脱氢酶2(17β-HSD2)在调控雌激素生物活性中起主要作用,其量和活性依赖孕激素的调控,孕激素通过与孕激素受体结合起作用.在子宫内膜异位症患者的异位内膜中,17β-HSD2表达下降.文章综述17β-HSD2对雌激素活性的调控及对子宫内膜生长的调节,以及17β-HSD2的表达与孕激素及其相应受体结构、基因、亚型、功能的相关性,并探讨17β-HSD2在子宫内膜异位症的发生、发展、治疗、预后中的作用.