国产与进口重组人胰岛素注射液Beagle犬皮下注射的生物等效性研究

目的：以美国礼来公司重组人胰岛素注射液（优泌林R,Humulin R）为对照品,评价国产重组人胰岛素注射液（Insulin R）的相对生物利用度和生物等效性。方法采用自身随机交叉给药方案,12只健康Beagle犬分别sc同剂量Insulin R和Humulin R,按设计采集6 h内动态血标本。采用罗氏血糖仪与检测血药浓度同步测定动物血糖水平;放射免疫分析（RIA）法检测血药浓度;试验数据采用DAS 3.0药动学程序拟合计算参数,并进行生物等效性分析。结果 Beagle犬自身交叉sc Insulin R和Humulin R 0.5 U/kg后的血浆最低葡萄糖浓度（Cmin）分别为（1.6±0.4）、（1.6±0.2）mmol/L;达到最低浓度所需时间（tmin）分别为（1.0±0.5）、（1.1±0.6）h。Insulin R和Humulin R的主要药动学参数均值分别为：达峰时间（tmax）为（0.43±0.21）、（0.42±0.09）h;峰浓度（Cmax）为（203.2±63.3）、（193.5±63.1）μU/mL;药时曲线下面积（AUC0-6 h）为（281.2±47.5）、（266.6±62.5）μU/(mL·h);受试药Insulin R相对于对照药Humulin R的相对生物利用度为（109.4±25.5）%。结论两种重组人胰岛素注射剂在健康Beagle犬体内具有生物等效性。     

精蛋白重组人胰岛素混合注射液(30/70)与门冬胰岛素30注射液治疗糖尿病临床疗效的比较研究

目的比较精蛋白重组人胰岛素混合注射液(30/70)与门冬胰岛素30注射液治疗糖尿病的临床疗效。方法选取芜湖市第一人民医院2017年2月-2018年8月收治的糖尿病患者120例,随机分为对照组和治疗组,各60例。对照组给予进口门冬胰岛素30注射液,治疗组给予国产精蛋白重组人胰岛素混合注射液(30/70),连续治疗3个月。比较两组每日平均胰岛素使用剂量,治疗前后体质量、空腹血糖、餐后2 h血糖及糖化血红蛋白水平,临床疗效、低血糖发生率。结果两组每日平均胰岛素使用剂量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗前两组体质量比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后治疗组体质量高于对照组(P<0.05)。治疗前两组空腹血糖、餐后2 h血糖、糖化血红蛋白比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后治疗组空腹血糖、餐后2 h血糖、糖化血红蛋白低于对照组(P<0.05)。治疗组总有效率高于对照组,低血糖发生率低于对照组(P<0.05)。结论国产精蛋白重组人胰岛素混合注射液(30/70)治疗糖尿病的临床疗效优于进口门冬胰岛素30注射液,可更有效控制血糖,安全性更高。     

赖脯胰岛素注射液犬生物等效性研究

目的对国产赖脯胰岛素注射液和进口赖脯胰岛素注射液（优泌乐）进行药动学和生物等效性研究。方法Beagle犬头颈部皮下注射交叉给予1IU／kg单一剂量受试制剂和参比制剂,于给药后0、2、5、10、20、30、45、60、90、120、180和240min股静脉取血,全自动免疫分析仪检测血清中药物浓度,绘制药-时曲线。将数据经DAS2．0软件计算药动学参数并进行生物等效性评价。结果赖脯胰岛素受试制剂和参比制剂的药动学参数分别如下：Cmax（932．0±358．2）和（1070．2±335．6）glU／ml,tmax（24．0±5．2）和（21．5±12．7）min,t1/2（51．9±28．4）和（66．6±20．7）min,AUC（0-t）为（84833．2±10512．9）和（98506．4±31324．3）glU·ml-1·min,AUC（0-∞）为（90438．3±10492．9）和（107900．2±34465．1）μIU.ml-1．min。以AUC（0-∞）计算,受试制剂对参比制剂的相对生物利用度为（93．4±35．9）％。结论Beagle犬头颈部皮下注射给予1IU／kg单一剂量受试制剂和参比制剂的体内药动学行为具有生物等效性。     

国产重组人生长激素注射液在健康受试者中的生物等效性

目的:评价单一给药后受试制剂(重组人生长激素注射液)和参比制剂(注射用重组人生长激素)的生物等效性及安全性.方法:研究采用单中心、双周期、随机、盲法、自身交叉对照设计.将48例受试者平均分为2组,每组受试者分别在2个周期交叉皮下注射重组人生长激素(r-hGH)受试制剂或参比制剂0.067 mg·kg-1(0.2 IU·...     

精蛋白锌重组赖脯胰岛素混合注射液(50R)治疗2型糖尿病60例

目的:研究精蛋白锌重组赖脯胰岛素混合注射液(50R)(优泌乐50,LM50)治疗2型糖尿病的临床疗效。方法:选择门诊与病房60例口服降糖药控制不佳的2型糖尿病患者,先进行为期10 d的优泌灵70/30导入期治疗。然后随机将患者分成A,B两组,A组改用优泌乐50,B组继续应用优泌灵70/30,每隔3 d监测血糖谱,并根据血糖调整胰岛素用量。两组患者肥胖者均使用二甲双胍,不用胰岛素促泌剂及其他口服降糖药物。治疗12周后,采用交叉研究,A,B两组互换治疗方案,胰岛素总量等量互换,口服二甲双胍不变,观察并比较12周和24周后两组空腹血糖(FBG),早餐后2 h血糖(2 h-PBG,早),晚餐后2 h的血糖(2 h-PBG,晚),糖化血红蛋白(HbA1C),发生可察觉的低血糖的次数,以及胰岛素总量等各项指标的变化,从而比较两组治疗效果。结果:A,B两组在血糖总体的控制上无显著性差异,即两组治疗后HbA1C比较无显著性差异,但在餐后血糖的控制以及低血糖的发生率上优泌乐50与优泌灵70/30有显著性差异。提示优泌乐50控制餐后2 h血糖效果更好,低血糖发生率更低。结论:优泌乐50治疗2型糖尿病疗效肯定,对餐后血糖的控制与优...     

国产与进口替莫唑胺胶囊在Beagle犬体内的生物等效性研究

目的:研究国产与进口替莫唑胺胶囊在Beagle犬体内的药动学及生物等效性。方法:6只Beagle犬随机交叉单剂量口服进口替莫唑胺胶囊(参比制剂)和国产替莫唑胺胶囊(受试制剂),采用HPLC法测定犬血浆中替莫唑胺的浓度,Bapp 3.0软件计算其主要药动学数据,并进行两种制剂的等效性评价。结果:参比制剂与受试制剂的Cmax分别为(11.35±1.35)和(11.70±2.77)μg·m L-1;Tmax分别为(0.97±0.56)和(1.08±0.49)h;t1/2β分别为(1.44±0.37)和(1.43±0.24)h;AUC0~t分别为(27.34±2.30)和(28.34±7.47)μg·h·m L-1,AUC0~∞分别为(29.85±4.49)和(30.85±8.46)μg·h·m L-1。受试制剂对参比制剂的相对生物利用度为(106.1±36.1)%。结论:本实验结果表明,两种替莫唑胺胶囊在Beagle犬体内具有生物等效性。     

精蛋白锌重组人胰岛素混合注射液治疗2型糖尿病患者31例

目的研究精蛋白锌重组人胰岛素混合注射液对2型糖尿病患者的疗效影响及并发症发生率。方法采用随机数字表法将62例患者随机分为观察组和对照组,各31例。对照组采用降糖药物治疗,观察组采用胰岛素联合降糖药物治疗,比较两组患者血糖控制效果、治疗依从性、药物不良反应发生率和糖尿病并发症发生率。结果观察组患者空腹血糖为（7．07±0．25）mmol／L,餐后2h血糖（8．43±0．37）mmol／L,糖化血红蛋白（6．92±0．44）％,对照组分别为（7．34±0．30）mmol／L,（9．12±0．48）mmol／L,（7．29±0．54）％,组间比较差异具有统计学意义（P〈0．05）。观察组患者糖尿病急性并发症发生率为16．13％,慢性并发症发生率为9．68％;对照组患者分别为38．71％和29．03％,组间比较差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论精蛋白锌重组人胰岛素混合注射液有助于患者血糖控制,可有效降低药物不良反应和糖尿病并发症发生率。     

重组人生长激素2种制剂人体生物等效性研究

目的:评价重组人生长激素(rhGH)注射液(2种规格:T1和T2)与注射用rhGH冻干粉针剂(参比制剂,R)的人体生物等效性。方法:运用随机、单盲、三阶段交叉方法分别对24名健康男性志愿者单次皮下注射0.2IU·kg-1的R,T1和T2。测定不同时间点生长激素血药浓度,并进行相关药动学参数分析。结果:T1,T2的AUC0～24的90%置信区间分别落在R的103.4%～116.5%和105.7%～119.6%范围内,T1的AUC0～24的90%置信区间落在T2的91.9%～103.7%范围内;T1和T2的cmax的90%置信区间分别落在R的91.9%～114.0%和103.7%～127.2%范围内,T1的cmax的90%置信区间亦落在T2的81.6%～97.4%的范围内。tmax在R及T1,T2间无统计学差异(P>0.05)。结论:T1,T2与R具有生物等效性。     

4种盐酸二甲双胍缓释片在Beagle犬体内生物等效性比较

目的比较4种盐酸二甲双胍缓释片在Beagle犬体内的生物等效性。方法采用单剂量随机四周期四交叉试验设计。8只Beagle犬分别灌胃给予4种盐酸二甲双胍缓释片（受试制剂A、B、D,参比制剂C）50mg·kg^-1。于给药前及给药后不同时间点取血,采用HPLC法测定血浆中盐酸二甲双胍浓度,计算主要药动学参数,并评价各受试制剂的相对生物利用度和生物等效性。结果受试制剂D、A、B和参比制剂C的主要药动学参数为：tmax（2．6±1．2）、（2．1±0．9）、（2．1±0．6）和（2．7±0．5）h,ρmax（8881．7±2575．1）、（9587．5±2072．0）、（8189．3±2013．8）和（8579．3±1691．9）μg·L^-1,t1/2（4．4±0．6）、（4．6±0．4）、（4．7±1．3）和（4．2±1．0）h,AUC0→t（61378．8±18731．0）、（56602．8±10737．8）、（46766．1±9515．0）和（56754．2±12384．2）μg·h·L^-1,AUC0→∞（62863．1±19047．8）、（57975．5±11186．1）、（48185．2±9815．1）和（58372．7±13672．0）μg·h·L^-1,MRT（0．16±0．01）、（0．17±0．01）、（0．19±0．05）和（0．17±0．02）h。受试制剂D、A、B的相对生物利用度分别为（118．0±61．4）％、（107．0±42．0）％和（91．4±12．2）％。结论3种受试制剂和参比制剂C生物等效,其中受试制剂D的生物利用度最高,其次是A、B。     

烟酸缓释胶囊在Beagle犬体内的药动学及生物等效性

目的 6只Beagle犬双周期双交叉单剂量口服烟酸受试制剂和参比制剂。方法用LC-MS/MS法检测血浆中药物浓度,计算两种制剂的药动学参数并进行等效性评价。结果受试胶囊和参比片剂的主要药动学参数为:Tmax(3.00±0.80)和(3.08±0.90)h,Cmax(5.13±0.52)和(4.85±0.64)mg·L-1,AUC0-t(43.85±7.41)和(51.30±6.50)mg·L-1.h-1,AUC0-∞(47.25±5.35)和(49.19±4.21)mg·L-1.h-1。受试制剂的相对生物利用度F为(96.0±6.7)%。结论表明两种制剂生物等效。     

硫辛酸联合精蛋白生物合成人胰岛素注射液治疗2型糖尿病的疗效观察

目的研究硫辛酸联合精蛋白生物合成人胰岛素注射液治疗2型糖尿病的临床疗效。方法选取2012年8月—2015年12月上海市闵行区龙柏社区卫生服务中心收治的2型糖尿病患者300例,随机分为对照组和治疗组,每组各150例。对照组患者皮下注射精蛋白生物合成人胰岛素注射液,初次为0.4 U/kg,2次/d分别是每日早晚餐前,以后根据患者的治疗状况确定注射剂量的增减。治疗组在对照组的基础上静脉注射硫辛酸注射液,0.6 g加入生理盐水250 m L,1次/d。两组均连续治疗1个月。观察两组胰岛素用量情况,比较治疗前后两组空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2 h PBG)、糖化血红蛋白(Hb A1c)、生活质量评分的变化。结果治疗组的胰岛素注射剂量在早、晚餐前,全天用量均显著低于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组患者FBG、2 h PBG、Hb A1c均较治疗前显著降低,同组治疗前后差异具有统计学意义(P0.05);治疗后治疗组这些观察指标的改善程度优于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组患者承受压力评分、社会关系评分、营养状况评分、运动状况评分均较治疗前显著增加,同组治疗前后差异具有统计学意义(P0.05);治疗后治疗组这些观察指标的改善程度优于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。结论硫辛酸联合精蛋白生物合成人胰岛素注射液治疗2型糖尿病具有较好的临床疗效,可减少患者注射胰岛素的剂量,能够更好地控制空腹血糖和餐后2 h血糖,提高患者的生活质量,具有一定的临床推广应用价值。     

胰岛素胶囊在Beagle犬体内的药动学和药效学研究

目的研究胰岛素胶囊在Beagle犬体内药动学和药效学特征。方法 4只健康Beagle犬sc重组人胰岛素注射液以及po和内窥镜给予胰岛素胶囊,不同时间经静脉采集血浆标本,同步测定血糖水平,采用放射免疫分析法检测血药浓度。结果 4只Beagle犬自身交叉分别sc胰岛素注射液和po胰岛素胶囊或内窥镜给予内容物后,以血浆外源性胰岛素浓度计算得到的主要药动学参数,t_(1/2)分别为(0.986±0.185)、(0.649±0.508)、(0.518±0.187)h;C_(max)分别为(102.0±45.7)、(625.0±360.0)、(453.0±636.0)μU/mL;tmax分别为(0.375±0.224)、(0.750±0.289)、(0.500±0.601)h;AUC_(0-t)分别为(181.0±42.6)、(414.0±246.0)、(423.0±526.0)μU/(mL·h)。胰岛素胶囊po和内窥镜插管给药的相对生物利用度分别为(5.41±2.26)%、(8.31±9.94)%。po和内窥镜这两种途径的胰岛素胶囊在0.5~1.0 h浓度达到最大,然后在血液中的外源性胰岛素浓度逐渐降低,直至检测不到,波动范围较大;t_(1/2)基本为0.5 h左右,作用时间较短;血糖值降低的维持时间较短,回升速度快,且血糖值的波动较大。结论通过直接po和内窥镜给予胰岛素胶囊内容物,与sc短效胰岛素的结果相比,尽管口服胰岛素胶囊在Beagle犬体内吸收和消除均比较快,动物的个体差异影响较明显;但是仍然具有降糖的作用。     

精蛋白锌重组赖脯胰岛素混合注射液治疗初发2型糖尿病的疗效及安全性观察

摘 要 目的：比较精蛋白锌重组赖脯胰岛素混合注射液与精蛋白锌重组人胰岛素混合注射液治疗初发2型糖尿病的疗效及安全性。方法: 初发2型糖尿病患者49例随机分为观察组和对照组。2组患者均给予常规饮食治疗及健康教育。观察组餐前皮下注射精蛋白锌重组赖脯胰岛素混合注射液 ,对照组餐前皮下注射精蛋白锌重组人胰岛素混合注射液。治疗2周后,比较两组患者的空腹血糖（FBG）、餐后血糖(PBG)、糖化血红蛋白（HbA1c）、血糖达标时间、低血糖发生率。结果: 治疗后,两组患者FBG、PBG 、HbA1c均较治疗前显著降低（P<0.05）,但2组间FBG、PBG、HbA1c比较差异无统计学意义（P>0.05）。观察组低血糖发生率低于对照组,血糖达标时间短于对照组（P<0.05）。结论:精蛋白锌重组赖脯胰岛素混合注射液治疗初发2型糖尿病血糖达标快,安全性高,优于精蛋白锌重组人胰岛素混合注射液。     

聚乙二醇化重组人粒细胞集落刺激因子注射液在健康志愿者中的药动学和药效学研究

目的研究聚乙二醇化重组人粒细胞集落刺激因子(PEG-G-CSF)注射液在健康人体单次给药的药动学(PK)和药效学(PD)特征,评价其PK/PD相关性。方法采用单中心、随机、双盲、安慰剂对照试验设计,36例健康受试者分别单次sc PEG-G-CSF注射液30、60、100、200μg/kg,分别于给药前(0 h),给药后1、3、6、8、10、12、24、48、72、96、120、144、192、240、312、408 h采肘静脉血,双抗体夹心酶联免疫分析(ELISA)法检测血清药物浓度,所有血药浓度–时间数据采用DAS3.2.4药动学程序软件进行处理,用非房室模型拟合计算药动学参数,t_(max)、C_(max)采用实测值;AUC采用梯形法计算。并同步监测血清绝对中性粒细胞计数(ANC)。结果在30~100μg/kg剂量范围内t_(max)较为恒定,为8.0~12.4 h;当给药剂量升至200μg/kg时,t_(max)后移至24.0 h;C_(max)和AUC_(0～408h)随剂量递增而呈更大比例增大,即当剂量增加约7倍时,C_(max)和AUC_(0～408h)分别增大14、26倍。各剂量组t1/2Z较为一致(约61 h)。血清中的ANC水平与给药前比较均有显著升高,ANC的达峰时间(t_(max)(ANC))随着剂量增加而延长,且明显滞后于血药浓度的t_(max);ANC的峰浓度(C_(max)(ANC))和随时间变化曲线下面积(AUC_(0～408h)(ANC))与给药剂量的相关性不甚明显。给药后1周内血液中ANC一直维持在较高水平范围内,而血清中PEG-G-CSF的浓度在8~24 h达到峰值,较PD的达峰时间早。结论健康受试者单次sc PEG-G-CSF注射液30~200μg/kg呈现非线性动力学特征。在血液中的清除主要经嗜中性粒细胞受体介导,并且具有自我调节的清除机制。与非PEG化的rh G-CSF比较,PEG-G-CSF显示了其在体内的长效特性。     

HPLC/MS法研究左旋黄皮酰胺及其代谢物在Beagle犬血浆中的药代动力学HPLC/MS法研究左旋黄皮酰胺及其代谢物在Beagle犬血浆中的药代动力学

目的用HPLC/MS法研究左旋黄皮酰胺［(-)-clau］及其代谢物6-羟基-黄皮酰胺(6-OH-clau)在Beagle犬血浆中的药代动力学过程。方法Beagle犬灌胃左旋黄皮酰胺30 mg·kg^-1，采集静脉血样，血浆经乙酸乙酯萃取分离后，用HPLC/MS选择性正离子检测内标(格列吡嗪，［M+H］⁺，m/z 446)法测定左旋黄皮酰胺(［M+H］⁺，m/z 298)及6-羟基-黄皮酰胺(［M+H-H₂O］⁺，m/z 296)的浓度，以甲醇-水-冰醋酸(60∶40∶0.8)为流动相，流速1.0 mL·min^-1。用3P97软件计算药代动力学参数。结果左旋黄皮酰胺和6-羟基-黄皮酰胺分别在1.0～200 ng·mL^-1和0.2～40.0 ng·mL^-1线性关系良好(r>0.999)，萃取回收率均大于85%。原药及其代谢物的体内过程均符合二室模型；左旋黄皮酰胺及6-羟基-黄皮酰胺的C_max分别为(21±10) ng·mL^-1和(3.9±2.2) ng·mL^-1；T_max分别为(0.8±0.5) h和(1.3±0.5) h；T_1/2α分别为(0.9±0.6) h和(1.4±0.6) h；T_1/2β分别为(19±23) h和(13±12) h；AUC_{0-24 h}分别为(69±14) h·ng·mL^-1和(12±7) h·ng·mL^-1。结论Beagle犬灌胃左旋黄皮酰胺后迅速吸收，血药浓度一相消除很快，但末端消除较慢；其代谢物6-羟基-黄皮酰胺血药浓度经时过程与左旋黄皮酰胺相似，但血药浓度相对较小。     

注射用重组人脑利钠肽对常规治疗无效的心力衰竭伴房颤患者血清Gal-3、CTGF水平的影响及其与房颤复发的相关性研究

目的 探讨常规治疗无效的心力衰竭（心衰）伴心房颤动（房颤）患者应用注射用重组人脑利钠肽（新活素）治疗后血清半乳糖凝集素-3（Gal-3）、结缔组织生长因子（CTGF）水平变化及其与房颤复发的相关性。方法 选取2018年4月—2020年4月邢台市第三医院收治的148例经常规治疗无效的心衰伴房颤患者作为研究对象,所有患者均给予注射用重组人脑利钠肽治疗,具体用法为500 μg注射用重组人脑利钠肽＋50 mL 0.9%氯化钠注射液,先采用负荷剂量1.5～2.0 μg·kg^-1静脉推注3～5 min,之后以0.007 5～0.015 0 μg·kg^-1·min^-1静脉滴注24～72 h,根据患者体质量调节负荷量和静脉滴注速率。评价治疗效果,检测并比较治疗前、用药30 min、用药24 h、用药结束后患者的心率、收缩压、舒张压、血氧饱和度、24 h尿量,检测并比较患者治疗前、治疗后7 d、治疗后30 d的左心室舒张末期内径（LVEDD）、左心室收缩末期内径（LVESD）、左心房内径（LAD）、左室射血分数（LVEF）和血清N-末端脑利钠肽前体（NT-proBNP）、超敏C反应蛋白（hs-CRP）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、Gal-3、CTGF水平,记录患者治疗过程中不良反应发生情况,随访治疗后3个月的房颤复发情况。根据治疗后3个月房颤复发情况将入选患者分为复发组（n=27）和未复发组（n=121）,比较两组患者治疗前血清Gal-3、CTGF水平,应用Pearson相关分析进行线性相关性分析,单因素和多因素Logistic回归分析患者治疗后房颤复发的相关危险因素。结果 148例心衰伴房颤患者中有122例（82.43%）用药24 h内转复为窦性心律。与治疗前比较,患者用药30 min、用药24 h后、用药结束后的心率、收缩压、舒张压均明显降低,血氧饱和度和24 h尿量明显增加,差异有统计学意义（P<0.05）;治疗后7 d、治疗后30 d患者的LVEF明显升高,LAD、LVEDD、LVESD和血清NT-proBNP、hs-CRP、TNF-α、Gal-3、CTGF水平均明显降低,差异有统计学意义（P<0.05）。Pearson相关性分析结果显示,心衰伴房颤患者的血清Gal-3、CTGF水平与NT-proBNP和心功能指标LAD、LVEDD、LVESD、LVEF均有明显相关性（P<0.05）。复发组与未复发组患者年龄、病程、LAD、LVEF及治疗前NT-proBNP、hs-CRP、TNF-α、Gal-3、CTGF水平比较均有显著性差异（P<0.05）,Logistic回归分析显示,LAD、病程时间、NT-proBNP、hs-CRP、TNF-α、Gal-3、CTGF水平均是影响房颤复发的危险因素。结论 应用注射用重组人脑利钠肽治疗心力衰竭伴房颤效果确切,不良反应发生率低,其能及时有效缓解患者呼吸困难症状,降低血清NT-proBNP和炎症因子水平,明显改善心功能指标和全身炎症状态,此外其还能明显降低血清Gal-3、CTGF水平。血清Gal-3、CTGF水平与NT-proBNP和心功能指标呈明显相关性,这2个指标可作为心衰伴房颤患者治疗后房颤复发的预测指标。     

柱前衍生化HPLC法测定复方氨基酸注射液(20AA)中氨基酸含量

目的: 建立柱前衍生高效液相色谱法测定复方氨基酸注射液（20AA）中包括门冬酰胺和盐酸鸟氨酸在内的18种氨基酸含量的方法。方法: 以6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基氨基甲酸酯（AQC）为衍生化试剂,以γ-氨基丁酸为内标,采用Kromasil C18(250 mm × 4.6 mm, 5?m)色谱柱,以140 mmol?L-1醋酸铵缓冲液(pH5.10)和乙腈-水(57∶43)溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长为248 nm,进样量5?L。结果: 18种氨基酸在1.2～108.8 ?g?mL-1范围内浓度与峰面积线性相关,相关系数为0.994 7～0.999 7;在标示浓度的80％、100％、120％三个浓度水平的平均回收率为97.4％～103.1％,RSD为1.3％～3.7％(n=9)。结论: 本法操作简便,结果准确,优于现行标准的方法。     

Hyperhydration Effect on Pharmacokinetic Parameters and Detection Sensitivity of Recombinant Human Erythropoietin in Urine and Serum Doping Control Analysis of Males

Excessive fluid intake, that is, hyperhydration, may be adopted by athletes as a masking method during antidoping sample collection to influence the excretion patterns of doping agents and, therefore, manipulate their detection. The aim of this exploratory study was to assess the hyperhydration effect on the detection sensitivity of recombinant human erythropoietin (rHuEPO) by sodium N-lauroyl sarcosinate (“sarkosyl”) polyacrylamide gel electrophoresis analysis. The influence of hyperhydration on the serum and urinary pharmacokinetic (PK) profiles of rHuEPO was also investigated. Seven healthy physically active nonsmoking Caucasian males participated in a 31-day clinical study comprising a baseline (days 0, 1-3, and 8-10) and a drug phase (days 15-17, 22-24, and 29-31). Epoetin beta was administered subcutaneously at a single dose of 3000 IU on days 15, 22, and 29. Hyperhydration was applied in the morning on 3 consecutive days (days 1-3, 8-10, 22-24, and 29-31), that is, 0, 24, and 48 h after first fluid ingestion. Water and a commercial sports drink were used as hyperhydration agents (20 mL/kg body weight). Serum and urinary concentration-time profiles were best described by a one-compartment PK model with zero-order absorption. Delayed absorption was observed after hyperhydration and, therefore, lag time was introduced in the PK model. Results showed no significant difference (p > 0.05) on serum or urinary erythropoietin concentrations under hyperhydration conditions. A trend for decreasing volume of distribution and increasing clearance after hyperhydration was observed, mainly after sports drink consumption. However, no significant differences (p > 0.05) due to hyperhydration for any of the serum PK parameters calculated by noncompartmental PK analysis were observed. Renal excretion of endogenous erythropoietin and rHuEPO, as reflected on the urinary cumulative amount, was increased approximately twice after hyperhydration and this supports the nonsignificant difference on the urinary concentrations. Analysis of serum and urine samples was able to detect rHuEPO up to 72 h after drug administration. The detection window of rHuEPO remained unaffected after water or sports drink ingestion. Hyperhydration had no effect on the detection sensitivity of EPO either in serum or urine samples.