耐碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌分子流行病学调查

目的对耐碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌之间的同源性进行分子流行病学调查，为防控院内感染提供依据。方法收集河南省人民医院重症监护病房2007年1—12月分离到的21株亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌进行鉴定。用E-test法测定10种抗菌药物的最低抑菌浓度（MIC），脉冲场凝胶电泳（PFGE）分析其耐药株的同源性，对碳青霉烯类基因OXA-23型、OXA-24型、IMP型、VIM型基因进行PCR扩增及序列分析。结果14株鲍曼不动杆菌菌株为同一耐药克隆株，并检出OXA-23型碳青霉烯酶，21株鲍曼不动杆菌菌株均未检出OXA-24、IMP、VIM基因型。结论该院相同耐药克隆株在重症监护病房不同患者身上流行，可能与行气管插管、呼吸机、氧气湿化瓶、护士手操作有关。     

某院2011年12月-2012年12月ICU亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶基因型的研究

目的:对重症监护病房(ICU)临床分离的亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的耐药性及碳青霉烯酶基因型进行研究,为临床防治提供理论依据。方法:收集2011年12月-2012年12月青岛市海慈医疗集团ICU临床分离的亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌65株,采用K-B琼脂纸片扩散法进行药敏试验,聚合酶链反应(PCR)检测OXA-23、OXA-24、OXA-51、OXA-58、IMP、VIM 6种碳青霉烯酶基因,并对PCR产物进行测序。结果:65株亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌除对头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星、多黏菌素B的耐药率较低外,对其他药物的耐药率均在90%以上。65株扩增出OXA-51基因,56株扩增出OXA-23基因,6株扩增出VIM基因,检出率分别为100%、86.15%、9.23%,OXA-24、OXA-58及IMP均未检出;PCR产物测序表明与GenBank相关基因同源性为100%。结论:该单位ICU亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的耐药现象严重;OXA-23型碳青霉烯酶的产生是鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类药物耐药的重要机制之一。     

耐亚胺培南鲍曼不动杆菌耐药机制研究

目的 研究鲍曼不动杆菌对亚胺培南的耐药机制。方法 对临床分离的3株耐亚胺培南的鲍曼不动杆菌，采用KB纸片扩散法（CLSI／NCCLS2004年标准）进行药敏试验，三维试验检测ESBLs和AmpC酶，PCR方法检测TEM、SHV、PER、VEB、AmpC、IMP、VIM、OXA-23和OXA-24等9种耐药基因型，PCR阳性产物进行基因测序，结果在GenBank基因库中比对分析。结果 3株鲍曼不动杆菌为多重耐药菌株，三维试验均产生ESBLs，1株产生AmpC酶，耐药基因型检测3株TEM阳性，2株PER阳性，2株AmpC酶阳性及SHV、VEB和IMP、VIM、OXA-24型等均为阴性；3株OXA-23型均阳性；另外27株对亚胺培南敏感鲍曼不动杆菌IMP、VIM，OXA-23和OXA-24型检测结果均阴性。结论 耐亚胺培南鲍曼不动杆菌携带TEM、PER、非诱导AmpC酶、OXA-23型碳青霉烯酶基因，产生OXA-23型碳青霉烯酶是主要耐药机制。     

耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌流行特征及耐药基因分析

目的调查分析我院2009年医院内获得性鲍曼不动杆菌对各种抗菌药物的耐药性,研究耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌感染的克隆流行情况以及碳青霉烯酶基因型。方法用琼脂稀释法进行药敏试验,按CLSI（2009）标准判断细菌耐药性,并用PFGE法对2009年的102株对碳青霉烯耐药菌进行同源性分析,多重PCR扩增碳青霉烯酶基因bla_OXA-51like,bla_OXA-24like,bla_OXA-58like。结果药敏试验结果显示鲍曼不动杆菌对米诺环素、替加环素、多粘菌素B耐药率较低,对碳青霉烯耐药高。PFGE结果显示我院存在A/B/C克隆株流行,主要分布于呼吸科以及ICU等病房,时间上呈散发流行。102株耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌产OXA-23型碳青霉烯酶率为71.6%,产OXA-51型碳青霉烯酶率为84.3%,另外仅2株检出OXA-24型碳青霉烯酶,3株检出（）XA-58型碳青霉烯酶。结论我院在呼吸科以及ICU等病房存在A/B/C克隆株流行,碳青霉烯酶基因型以OXA-23、OXA-51型为主,由于对多种抗菌药物尤其是碳青霉烯类抗生素耐药性的增强和克隆株的流行,应积极采取有效措施预防和控制鲍曼不动杆菌感染。     

多重耐药不动杆菌碳青霉烯酶耐药基因及Ⅰ类整合子

了解安徽省多重耐药不动杆菌碳青霉烯类耐药的机制.方法 收集安徽省多家医院2006～2007年临床分离非重复的不动杆菌共167株,用琼脂稀释法测定最低抑菌浓度(MICs),用聚合酶链反应(PCR)扩增和克隆测序方法确认碳青霉烯酶基因,用PCR扩增整合酶.结果 34株对包括碳青霉烯类抗菌素在内的多种抗菌药耐药,34株中19株产OXA-23型碳青霉烯酶基因、23株Ⅰ类整合酶阳性,未检测到OXA-24型酶,IMP、VIM、SIM型金属酶基因和Ⅱ,Ⅲ整合酶基因.发现2株新基因取得登录号FJ194460;FJl94494.23株Ⅰ整合酶阳性菌株有21株测出Ⅰ类整合子基因结构.结论 安徽省多重耐药不动杆菌的耐药性与其携带OXA-23型酶和Ⅰ类整合子有关.     

鲍曼不动杆菌耐药性及碳青霉烯酶的研究

目的了解鲍曼不动杆菌耐药谱及碳青霉烯酶的研究。方法用VITEK60型全自动药敏分析系统鉴定药敏系统及纸片扩散法进行药敏实验;PCR扩增和测序分析检测碳青霉烯酶VIM、IMP、OXA-23和OXA-24。结果217株鲍曼不动杆菌中头孢哌酮/舒巴坦耐药率最低,其次是亚胺培南,再者是头孢他啶和哌拉西林/他唑巴坦;头孢哌酮/舒巴坦和头孢他啶的中介率分别是27.6%和19.8%;20株亚胺培南耐药菌中,PCR扩增VIM、IMP和OXA-24均阴性;OXA-23基因扩增显示19株（95%）阳性,PCR产物并经序列分析证实为OXA-23。结论碳青霉烯类抗生素的长期广泛应用使鲍曼不动杆菌的耐药率不断升高;产OXA-23型β-内酰胺酶是本院鲍曼不动杆菌对亚胺培南耐药的重要原因。     

耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌的耐药机制及其同源性分析

目的:分析耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌的耐药机制及其同源性。方法:收集2016年1月—2017年6月间临床分离的耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌感染资料,分析资料中经Vitek-2 Compact型全自动细菌分析系统鉴定和药敏试验并按照CLSI标准判读的结果,其中鲍曼不动杆菌编码的OXA-23型碳青霉烯酶blaOXA-23基因,采用PCR法检测;对分离出的鲍曼不动杆菌采用ERIC-PCR进行同源性分析,以此了解其流行病学特征。结果:共分离出碳青霉烯类抗菌药物耐药鲍曼不动杆菌17株,临床所用抗菌药物对耐药鲍曼不动杆菌具有较差的敏感性;16株碳青霉烯类抗菌药物耐药鲍曼不动杆菌均存在同源性。结论:产OXA-23型碳青霉烯酶在介导鲍曼不动杆菌碳青霉烯类抗生素耐药过程中起着传播机制,医院应加强此菌院内感染防控措施,严防院内感染的发生。     

耐亚胺培南鲍曼不动杆菌耐药性及OXA碳青霉烯酶检测

目的 分析97株临床分离的耐亚胺培南鲍曼不动杆菌的耐药特点及OxA碳青霉烯酶分布.方法 用国际标准平皿二倍稀释法,明确研究菌株的耐药表型;用脉冲场凝胶电泳法,对其进行分型并用PCR的方法,检测OXA碳青霉烯酶.结果 97株耐亚胺培南鲍曼不动杆菌均为多药耐药菌株,其中2株为泛耐药菌株;主要存在7个流行克隆株;有78株菌携带bal-oxa-23基因(80.4%);2株菌携带bal-oxa-58基因(2.1%);未发现携带bal-oxa-24基因的菌株.结论 在我国的亚胺培南耐药的鲍曼不动杆菌中,OXA-23仍为主要分布的碳青霉烯酶.     

鲍曼不动杆菌OXA-23型碳青霉烯酶基因的研究

目的分析鲍曼不动杆菌的耐药性及其产OXA-23型碳青霉烯酶基因的核苷酸序列。方法用自动微生物分析仪测定常用抗菌药的MIC50；对OXA-23型碳青霉烯酶基因进行PCR扩增，产物纯化测序。结果15株产ESBLs鲍曼不动杆菌中有12株携带OXA-23型碳青霉烯酶；PCR产物纯化后测序表明与鲍曼不动杆菌（AY795964．1）blaxxA-23基因序列100％同源。结论携带OXA-23型碳青霉烯酶基因的鲍曼不动杆菌对临床常用抗菌药的耐药率高，其编码基因为blaoxA-23。     

产ESBLs鲍曼不动杆菌的耐药特性、质粒谱及耐药基因型

目的了解并研究产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）鲍曼不动杆菌的流行、耐药特点及质粒图谱，对产ESBLs菌株进行基因分型。方法先后用nitrocefin纸棒、最低抑菌浓度（MIC）初筛法和纸片扩散确认法从临床分离的鲍曼不动杆菌中检测产ESBLs菌株，用凝胶电泳分析其质粒图谱，并用聚合酶链反应（PCR）对产ESBLs基因进行分型。结果93株鲍曼不动杆菌中，对β-内酰胺酶类抗菌药物耐药47株（79．66％），中度敏感12株（20．34％）；产ESBLs菌株有16株，占17．20％。产ESBLs鲍曼不动杆菌对头孢曲松、头孢他啶、头孢唑肟、头孢吡肟、氨曲南、庆大霉素、妥布霉素、磺胺甲曝唑、环丙沙星和阿米卡星的耐药率均显著高于非产ESBLs菌株（P〈0．05）。保留的15株产ESBLs菌具有4种质粒谱，主要为Ⅰ型和Ⅲ型；它们均携带1～2种TEM型或SHV型或PER型β-内酰胺酶基因，且80％携带OXA-23型碳青霉烯酶基因。结论产ESBLs鲍曼不动杆菌常为多重耐药菌，耐药率与产ESBLs密切相关；同一克隆株在同一病房有流行趋势；本院流行株均携带2—3种耐药基因型，主要为TEM型、PER型β-内酰胺酶基因和OXA-23型碳青霉烯酶基因。     

ICU病房鲍曼不动杆菌多重耐药性分析

目的了解收集自ICU病房的鲍曼不动杆菌的多重耐药性,同源性及ESBLs及碳青烯酶的产生状况。方法收集2009年1月～2009年12月我院ICU病房的91株鲍曼不动杆菌,同一患者同类标本多次分离到的菌株不重复计入。采用了琼脂纸片扩散法（K-B）法,及微量肉汤稀释法测定16种抗生素的药物敏感性,按表型确证试验检测ESBLs。结果 19株鲍曼不动杆菌都产生OXA23型碳青霉烯酶。对β-内酰胺类,氦基糖苷类,头孢菌素类,碳青霉烯类全耐药,为泛耐药鲍曼不动杆菌。其余72株对抗生素选择压力相对小。91株鲍曼不动杆菌共检出21株产ESBLs,阳性率为23.08%。结论鲍曼不动杆菌耐药率高,可普遍存在于医院环境中,应加强院内感染控制,防止暴发流行。     

耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌OXA酶基因研究

目的 检测鲍曼不动杆菌对β-内酰胺类抗生素的耐药性,了解耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌OXA酶基因、插入序列和Ⅰ类整合酶基因的分布.方法 采用琼脂二倍稀释法检测90株鲍曼不动杆菌对20种β-内酰胺类抗菌药物的最低抑菌浓度,常规PCR检测耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌的4种OXA酶基因、插入序列和Ⅰ类整合酶基因.结果 90株鲍曼不动杆菌对20种β-内酰胺类抗菌药物的耐药性为5.7%～94.2%; 21株耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌中,8株OXA-23阳性,且ISAbal同为阳性,4株OXA-51阳性,1株Ⅰ类整合酶基因阳性.结论 临床分离的鲍曼不动杆菌对β-内酰胺类抗生素耐药形势严峻,耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌OXA酶基因和ISAbal检出率均很高.     

31例鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素的耐药分析及基因型研究

目的通过对我院住院患者的31株鲍曼不动杆菌对耐碳青霉烯类抗生素的药物敏感试验及对碳青霉烯酶基因的分析研究,为临床用药提供参考依据。方法用梅里埃细菌分析仪对细菌鉴定,并对细菌进行药敏试验,同时用碳青霉烯酶4种基因的特异性引物进行基因扩增和基因型的测序分析,再对基因类型与网上GemBank比对,确定编码酶基因的类型。结果 31株鲍曼不动杆菌对多粘菌素B、丁胺卡那霉素、左旋氧氟沙星的耐药率分别为4%、20%、50%。对哌拉西林/他唑巴坦、庆大霉素的耐药率分别为80%、85%。对本试验研究的其他9种抗菌药物的耐药率均在90%以上。携带OXA-51基因有21株(68%),携带D类碳青霉烯酶OXA-23基因有26株(84%),对OXA-24、OXA-58基因引物PCR扩增结果为阴性,并随机各抽取5株OXA-23基因为阳性菌株进行测序,并通过在网上GemBank对比,结果 OXA-23标准株有99%同源,OXA-51基因阳性的菌株与OXA-51标准株97%同源。结论多粘菌素B、丁胺卡那霉素、左旋氧氟沙星对耐碳青霉烯类抗生素的鲍曼不动杆菌的敏感性较好,对其他抗生素有较强的耐药性。基因类型上以携带OXA-23型碳青霉烯酶基因为主,应合理地选用抗生素,防止多重耐药现象产生,对控制院感和疾病的疗效有极其重要意义。     

重症监护病房耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌6种耐药基因检测

目的 研究医院重症监护病房(intensive care unit,ICU)患者感染鲍曼不动杆菌的耐药性及耐药基因,以指导临床合理用药,控制ICU病房感染暴发流行。方法 采用VITEK2-Compact全自动细菌鉴定药敏系统对细菌进行鉴定及药敏试验,用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)方法检测6种常见碳青霉烯酶耐药基因(blaIMP、blaVIM、blaNDM、blaOXA-23、blaOXA-24和blaOXA-58)。结果 38株耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌对15种临床常用青霉素类、头孢菌素类、氨基糖苷类、喹诺酮类及β-内酰胺酶抑制剂类抗菌药物全部耐药,对头孢哌酮/舒巴坦、米诺环素的耐药率分别为92.1%和81.6%,仅对替加环素保持较高敏感性,敏感率为94.7%。38株CRAB中携带blaOXA-23基因共36株(94.7%),未检出blaIMP、blaVIM、blaNDM、blaOXA-24和blaOXA-58基因。结论 我院ICU分离耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌对临床常用抗菌药物耐药广泛,携带blaOXA-23基因是可能该院ICU耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药的主要原因。临床医生应合理使用抗菌药物,加强细菌耐药性监测,防止耐药菌株的产生和进一步传播。     

碳青霉烯类抗生素体外抗菌活性及其耐药机制研究

目的:研究碳青霉烯类抗生素对临床分离菌的体外抗菌活性,分析其耐药机制。方法:采用平皿二倍稀释法测定4种碳青霉烯类抗生素对352株临床菌株的MIC值,应用PCR方法鉴定铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌的耐药基因。结果:4种药物对除铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌外的其他菌种非常敏感。从两种耐药菌中分别鉴定出VIM-2和OXA-23基因。结论:碳青霉烯类抗生素对大部分临床分离菌株的抗菌活性较好。OXA-23基因为鲍曼不动杆菌耐药的主要机制之一。     

多重耐药鲍曼不动杆菌的β内酰胺酶基因型研究

目的了解临床分离的多重耐药鲍曼不动杆菌β内酰胺酶基因的存在情况。方法采用MicroScan40微生物全自动鉴定系统微量肉汤稀释法测定菌株的耐药性。采用聚合酶链反应(PCR)方法检测β-内酰胺酶基因型。结果 30株鲍曼不动杆菌除对阿米卡星和左氧氟沙星耐药率分别为23.3%和30.0%外,对其他抗菌药物均达80.0%以上。检出β-内酰胺酶基因26株(86.7%),OXA-23样阳性20株(66.7%),OXA-51样阳性18株(60.0%),AMPC酶阳性18株(60.0%),TEM阳性5株(16.6%),SHV阳性4株(13.3%),PER阳性3株(10%),14株(46.6%)同时携带2种以上基因,未检出IMP、VIM、CTX-M-9,DHA、OXA-24、OXA-58。结论我院多重耐药鲍曼不动杆菌携带多种β-内酰胺酶基因,而且同时携带3种以上β-内酰胺酶基因比率高。     

耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌中碳青霉烯酶基因的检测

目的 研究本院耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(CRAB)中碳青霉烯酶基因流行状况,为治疗和控制其感染提供参考依据。方法 收集抚州市第一人民医院2015—2016年间临床分离的CRAB非重复株,Vitek-2 Compact型全自动微生物分析仪进行菌株鉴定和药敏实验,改良Hodge试验进行碳青霉烯酶初筛,EDTA协同试验检测金属β-内酰胺酶,采用聚合酶链反应(PCR)扩增耐药基因。结果 69株CRAB对替加环素耐药率为1.4%,复方磺胺甲噁唑耐药率81.2%,其他抗生素耐药率均在90%以上,全部表现为多重耐药。改良Hodge试验阳性55株(80.0%),EDTA协同试验未检出阳性菌株。基因扩增KPC酶基因38株(55%),OXA-23酶基因68株(98.6%),OXA-51酶基因69株(100%),未检测出IMP-1、VIM-1、NDM-1、SIM-1、OXA-24和OXA-58等酶基因。结论 本院69株CRAB耐药性非常严重,OXA-23和OXA-51型酶基因是其携带的主要碳青霉烯酶基因。     

耐碳氢酶烯类鲍曼不动杆菌的分子流行病学研究

目的：了解某医院临床分离耐碳氢酶烯类鲍曼不动杆菌的菌株同源性及其耐药情况。方法收集2013年1月－2014年12月,某院临床分离到的48株耐碳氢酶烯类鲍曼不动杆菌,采用 K －B 法进行药敏试验,肠杆菌科基因间重复序列聚合酶链反应（ERIC －PCR）试验研究上述菌株的基因同源性和科室分布。结果48株耐碳氢酶烯类鲍曼不动杆菌用 ERIC －PCR 方法可分为三个基因型,A 型2株,B 型43株,C 型3株,其中 B 型为主要的流行株,主要来自于重症监护病房、呼吸科和神经外科。结论耐碳氢酶烯类鲍曼不动杆菌的多重耐药性严重,该医院内存在耐碳氢酶烯类鲍曼不动杆菌的克隆流行,以 ICU 最为严重,应采取有效措施防止和延缓其院内交叉感染的发生和耐药性的进一步增高。     

耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌分子流行病学研究

目的对耐碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌进行基因同源性研究,结合病史资料综合分析其临床流行特点,为加强其医院内感染控制工作提供依据。方法收集该院2008年1月至12月临床分离到的31株耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌,采用肠杆菌基因间保守重复序列(ERIC)-PCR方法对其进行基因多态性分析;并对患者病史资料进行回顾性调查。结果 31株鲍曼不动杆菌ERIC-PCR方法分为3个基因型:A型1株,B型29株,C型1株;其中B型主要集中分离自本院ICU病房(23株)及其相关科室。结论该院有耐流碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌同一克隆株的流行,以ICU最为严重,并有向外扩散的趋势。应及时采取有效的控制措施,杜绝其院内交叉感染的发生。     

青岛地区3家“三甲”医院ICU耐亚胺培南革兰氏阴性杆菌碳青霉烯酶基因型研究

目的:分析青岛地区3家"三甲"医院重症监护病房(ICU)耐亚胺培南革兰氏阴性杆菌碳青霉烯酶的基因型,为临床防控和治疗耐药菌感染提供参考。方法:收集2013年1月-2016年6月青岛地区3家"三甲"综合性医院ICU分离的耐亚胺培南肺炎克雷伯菌(IRKP)、耐亚胺培南铜绿假单胞菌(IRPA)、耐亚胺培南鲍曼不动杆菌(IRAB)各60株,采用纸片扩散法进行药敏试验;采用Carba NP试验确证其碳青霉烯酶表型;采用聚合酶链反应法扩增其碳青霉烯酶基因,应用双脱氧链终止法进行双向测序,并与Gen Bank数据库进行Blast比对。结果:3种耐亚胺培南革兰氏阴性杆菌对哌拉西林、头孢唑林、亚胺培南西司他丁钠、庆大霉素等大部分临床常用抗菌药物的耐药率均较高,但对多黏菌素B敏感(耐药率均为0)。180株耐药菌株中,A、B、D类碳青霉烯酶阳性菌株分别有52、13、39株,检出率分别为28.89%、7.22%、21.67%。检出KPC-2、IMP-1、VIM-2、OXA-23基因的分别有52株(IRKP)、4株(IRPA)、8株(IRPA 7株、IRAB 1株)、39株(IRAB),检出率分别为28.89%、2.22%、4.44%、21.67%;未检出IMP-2、VIM-1、NDM-1、OXA-24、OXA-58基因。Blast比对结果显示,上述检出基因与Gen Bank数据库中的已知基因100%同源。结论:该地区3家"三甲"医院ICU耐亚胺培南革兰氏阴性杆菌的耐药情况严重,对大多数临床常用抗菌药物的敏感度均较低。检出的主要基因型包括KPC-2(肺炎克雷伯菌)、OXA-23(鲍曼不动杆菌)、IMP-1和VIM-2(铜绿假单胞菌)。