贵州省2006-2011年炭疽芽胞杆菌检出情况与致病性研究

目的了解贵州省2006—2011年炭疽芽胞杆菌感染和分布情况,为贵州省炭疽疫情的预防控制和炭疽病09分子流行病学研究提供科学依据。方法对来自贵州省2006—2011年不同地区09830份疑似炭疽标本（外环境标本667份、患者标本151份和牲畜标本12份）,采用传统的革兰染色镜检、普通营养琼脂平板和血琼脂平板培养基分离培养炭疽芽胞杆菌,运用青霉素抑制试验和噬菌体裂解试验对可疑炭疽芽胞杆菌菌落进行鉴定。采用Real—time PCR技术检测88株经传统细菌学方法鉴定为炭疽芽胞杆菌菌株pX01质粒上的PA基因和pX02质粒上的CAP基因。结果从830份标本中分离出88株炭疽芽胞杆菌,总检出率为10．60％。2007年分离出炭疽杆菌的阳性标本最多,占36．36％;其次为2009年,占29．55％。阳性标本主要分布在黔西南州,其次为毕节地区和黔南州;册亨县、织金县和望谟县为炭疽杆菌检出数较多的监测县。88株炭疽芽胞杆菌CAP基因均为阳性。除2007年2株炭疽菌株PA基因为阴性外,其余86株PA基因均为阳性。结论贵州省炭疽疫源地面积广大,污染严重;检出的88株炭疽芽胞杆菌中97．73％的菌株同时具有两种毒力质粒,具有强致病性;该研究结果对贵州省炭疽疫情的预防控制及分子流行病学研究具有重要意义。     

AP631炭疽噬菌体裂解蜡样芽胞杆菌的发现和鉴定

目的 AP631炭疽噬菌体裂解蜡样芽胞杆菌的发现和鉴定。方法通过革兰氏染色、菌落形态特征、噬菌体裂解试验、青霉素敏感试验、溶血试验、生化试验和蛋白质毒素结晶试验对炭疽疫点现场分离的5株菌进行蜡样芽胞杆菌的鉴定,通过PCR扩增、小白鼠毒力测定试验和MLST基因检测等方法对该5株菌和本实验室保存的3株被AP631炭疽噬菌体裂解的蜡样芽胞杆菌进行毒力和基因测定。结果确定了8株可被AP631炭疽噬菌体不完全裂解的蜡样芽胞杆菌。从疫点采集分离的5株菌青霉素敏感试验阴性,炭疽毒力基因PCR扩增阴性,排除了炭疽芽胞杆菌;蛋白质毒素结晶试验染色试验为阴性,排除了苏云金芽胞杆菌;根据溶血试验和生化反应等一系列鉴别实验鉴定为蜡样芽胞杆菌。8株菌的MLST基因检测发现5株菌有新的等位基因位点或ST型。结论本研究首次证明我国使用的炭疽芽胞杆菌诊断AP631噬菌体可以不完全裂解部分蜡样芽胞杆菌,存在非特异性裂解现象,提示在今后使用噬菌体鉴定炭疽杆菌时,对于外环境分离到的可疑芽胞杆菌,特别要注意关于噬菌体不完全裂解的问题,这将为炭疽诊断标准的正确制订提供新的认识并具有重要的指导意义。     

2019-2020年宁夏炭疽芽胞杆菌毒力鉴定及基因分型研究

目的 了解宁夏2019-2020年分离的炭疽芽胞杆菌菌株致病力及基因分型特征,为宁夏皮肤炭疽疫情判定与分子溯源提供实验室依据。方法 收集2019-2020年宁夏各地区分离的炭疽芽胞杆菌,对其进行毒力鉴定,并运用MLVA-15和canSNP分型技术进行基因分型研究。结果 2019-2020年宁夏分离到的炭疽芽胞杆菌均为强毒株,MLVA-15分型为同一种群,canSNP分型为A.Br.001/002组。结论 2019-2020年宁夏分离到的炭疽芽胞杆菌致病力较强,且菌株呈现相同的基因分型特征,提示菌株间存在流行病学关联。此研究结果填补了宁夏炭疽芽胞杆菌实验室检测中菌株致病力及基因分型的空白。     

2012-2015年贵州省炭疽芽胞杆菌分离鉴定及MLVA分型分析

目的 了解菌株的分子流行病学特征,为贵州省炭疽疫情的预防控制提供科学依据。方法 对2012-2015年贵州省间不同地区的409份标本(外环境388份、患者19份和牲畜2份)进行炭疽芽胞杆菌分离培养,采用革兰染色镜检、青霉素抑制试验和噬菌体裂解试验对可疑炭疽菌落进行鉴定,分析菌株检出情况。运用MLVA-15技术对炭疽芽胞杆菌分离株进行基因分型获得各VNTR位点的扩增长度并计算重复单元的重复数目。结合各VNTR位点重复数目,利用NTsys 2.10e软件对不同地区菌株进行聚类分析。结果 从409份标本中分离出34株炭疽芽胞杆菌,检出率为8.31%。其中341份土壤检出33株,检出率为9.68%;17份患者皮肤病灶渗出液检出1株,检出率为5.88%。2015年分离出炭疽杆菌的阳性率最高,占48.72% (19/39)。MLVA-15分析显示,34株菌株被分为3个MLVA型;聚类分析显示,34株菌株被分为A和B两簇,其中A簇又被进一步分为A1和A2分支。来自相同地区或年份的多数菌株聚类关系相对较近。结论 2012-2015年贵州省间各种疑似炭疽送检标本中,土壤的检出阳性率最高,贵州省炭疽芽胞杆菌菌株具有MLVA型别多样性,型别分布和聚类关系具有明显的地域性。     

山东省一起皮肤炭疽疫情来源炭疽芽胞杆菌的分子分型及基因溯源分析

目的 对一起皮肤炭疽暴发疫情来源炭疽芽胞杆菌开展分子分型及基因溯源分析，为炭疽的有效防控提供重要的基础性数据。方法 本研究对2021年山东省曹县一起炭疽疫情样本中分离的8株炭疽芽胞杆菌进行药物敏感性实验、MLVA-15和canSNP分型、全基因组测序(WGS)和SNPs分析。结果 药敏结果显示，所有分离株耐药性一致。8株菌MLVA-15分型为同一基因型，该基因型在国内首次发现，命名为MLVA15-CHN77型；canSNP分型均为A.Br.001/002型。WGS结果分析显示，8株菌具有相同的耐药基因和毒力基因谱。SNPs分析显示，8株暴发菌株聚成一簇。结论 基于全基因组序列的分型和溯源策略，是炭疽芽胞杆菌传统分型方法的必要补充。     

2006-2016年贵州省炭疽芽胞杆菌SNR分型分析

目的 对贵州省2006-2016年分离的炭疽芽胞杆菌进行单核苷酸重复序列分型分析(SNR),了解菌株SNR型别特征,为炭疽疫情监测、调查与溯源提供技术手段和科学依据.方法 提取贵州省2006-2016年间不同地区的炭疽芽胞杆菌菌株基因组DNA,应用SNR各位点引物进行PCR扩增,将扩增产物进行毛细管电泳分析获得各位点序...     

一株炭疽杆菌无毒株的建立

目的 建立无毒炭疽菌株，为炭疽疫苗研究和免疫检测打基础。方法 用传统的高温减毒法，将当前用于生产炭疽疫苗的减毒菌株进一步减毒。结果 对筛选的一株炭疽杆菌AAT121株进行全面检定，证实它已失去其亲代株A16R所具有的pXO1质粒，并因此失去了产生毒素的能力，成为炭疽杆菌“无毒株”；同时也几乎完全失去了生成芽胞的能力；其它的生物和生化学性质未发现变化。结论 炭疽减毒株也可用高温减毒法进一步减毒为无毒株，以便有关研究中应用。     

辽宁省炭疽芽胞杆菌MLVA分型研究

目的 了解辽宁地区炭疽芽胞杆菌的流行特征及菌型基因特征。方法 通过多位点可变数目串联重复序列(Multiple locus variable numbers of tandem repeats analysis,MLVA)分型实验,对2001—2011年辽宁省分离到的6株炭疽芽胞杆菌分离株DNA进行检测,DNA指纹图谱使用BioNumerics 4.0 软件进行统计分析,得出聚类分析结果。结果 聚类分析发现,6株炭疽芽胞杆菌株可分为2个基因型。对于炭疽暴发而言,其可变数目串联重复序列遗传标记具有高度相似性。结论 炭疽芽胞杆菌基因组中的串联重复序列可作为炭疽芽胞杆菌基因分型的指标,在炭疽暴发事件中的病原体溯源上具有重要的意义。     

中国炭疽芽胞杆菌中11个串联重复序列位点的特征和分布

目的检测炭疽芽胞杆菌中可变数量串联重复序列(VNTR)的变化,分析我国菌株中VNTR的特征和分布规律。方法 PCR扩增,琼脂糖电泳和毛细管电泳,测序验证,BLAST比对等。结果 11个VNTR位点中有4个在所有菌株中没有差别,另外7个位点只在个别菌株中检测到差别,有差别的菌株多分布在新疆;11个VNTR位点均位于基因编码区内,编码对细菌生存重要的蛋白和一些功能不明蛋白。结论结果提示新疆的菌株类型较复杂;本研究中的VNTR位点比较保守,可能不能用于区别不同的炭疽芽胞杆菌,但对于了解炭疽芽胞杆菌的基因组特征以及鉴定炭疽芽胞杆菌具有一定的作用。     

炭疽杆菌细菌学研究

本文研究了炭疽细菌学的下列问题:(1)准确求出该菌增代时间,有利于研究其早期生长规律;(2)发现炭疽芽胞出芽时先有一个生理学出芽阶段,要比形态学出芽早得多;(3)炭疽荚膜抗原性特异,以此建立试验常有较好结果;(4)炭疽菌体抗原非特异性问题较大,判断由它建立的试验结果要慎重;(5)炭疽杆菌受β-内酰胺类抗生素作用形成的串珠,经改进为平板纸片法和肉汤法后,扩大了它的应用范围;(6)炭疽噬菌体及其快速裂解法已成为鉴定该菌不可缺少的武器;(7)卵黄液腹腔注射确能增强炭疽芽胞的毒力;(8)炭疽杆菌和蜡样杆菌仍然是二个独立的种。应用这些基础研究原理于实际工作,大多取得了较好的结果。随着炭疽杆菌质粒的发现,将进一步推动炭疽理论和应用课题的研究和发展。     

2例炭疽芽胞杆菌感染的实验室诊断

炭疽芽胞杆菌实验室检查是确认炭疽感染的主要依据,能否快速、准确的检出炭疽芽胞杆菌,对病人的确诊和治疗极为重要,兹将检验经过报告如下,供基层检验工作者参考。1 病例情况 2002年12月5日,青海省海北州海晏县青海湖乡莫乡滩村2名牧民(男32岁,女33岁),因剥食病死牛而引起炭疽菌     

内蒙古炭疽芽胞杆菌多位点串联重复序列分型分析

炭疽芽胞杆菌是引起人和动物炭疽的病原菌,牛、羊等食草动物为主要传染源,人类主要通过接触炭疽病畜毛皮和食肉而感染,也可以通过吸入含有炭疽芽孢的粉尘或气溶胶而感染.我国炭疽自然疫源地分布广泛,炭疽病例时有发生.内蒙古地区是主要的炭疽自然疫源地,每年都有病例发生.炭疽杆菌是一种相对保守的细菌,很多基因分型方法都不能对其分型,Keim等[1]首次将MLVA8方法用于炭疽芽抱杆菌基因分子分型中,其选择6个染色体上VNTR多态性位点和2个质粒上VNTR多态性位点联合建立了MLVA8分析方法,是比较有效的区别不同炭疽芽胞杆菌的方法.     

液相中炭疽杆菌形貌的原子力显微镜观测

目的利用原子力显微镜液相模式观测炭疽杆菌形态,获得液相中炭疽杆菌芽胞和繁殖体对于溶菌酶的形态学抗性变化数据。方法应用原子力显微镜液相模式观察炭疽杆菌繁殖体及芽胞的超微结构,并对其主要指标进行测量比较。结果1×PBS溶液中的炭疽杆菌繁殖体,菌体杆状,竹节样排列,菌体间连接致密,长度为2,757.30±1227.086nm,宽度为1,710.90±226.10nm,Rq为15.447±3.418nm,Ra为13.239±2.733nm;炭疽杆菌芽胞椭圆形,多散在分布,表面平滑,长度为2,014.00±227.155nm,宽度为1,264.10±132.180nm,Rq为22.803±5.660nm,Ra为18.010±4.568nm。0.01 mg/mL溶菌酶溶液中的炭疽杆菌繁殖体形态不规则,表面凹凸起伏,边缘粗糙,有囊状突起,长度为2,836.00±1025.137nm,宽度为2,449.00±212.78nm,Rq为17.068±4.427nm,Ra为14.776±3.746nm;0.01 mg/mL溶菌酶溶液中的炭疽杆菌芽胞,形态规则,边缘平滑,未见凹凸起伏和囊状突起,而1 mg/mL溶菌酶溶液环境中的炭疽杆菌芽胞形态不规则,表面起伏,变化较大,其长度为2,155.00±202.663nm,宽度为1,344.00±162.631nm,Rq为24.849±3.427nm,Ra为20.869±2.550nm。结论通过原子力显微镜液相模式下的观察和测量,清楚地显示了溶液中炭疽杆菌的微观形貌及其变化,0.01 mg/mL的溶菌酶就能使炭疽杆菌繁殖体发生形态学变化,而炭疽杆菌芽胞形貌发生变化则需要1 mg/mL的高浓度溶菌酶的作用。     

警惕炭疽邮件

2001年9月11日美国纽约的世贸大厦被劫持的航班飞机撞毁,举世震惊.继之,美国的邮件中,有的混有炭疽杆菌芽胞,导致与此种邮件接触的人员中有感染及死亡.其中头10个病例的病史、检验情况、治疗及结果,以科学论文方式发布,题名<与生物恐怖主义有关的吸入性炭疽:美国头10例的报道>,(载于Emerging Infectious Diseases,2001年第7卷,第933～945页).     

2018-2019年宁夏皮肤炭疽流行特征及实验室检出情况分析

目的 了解2018-2019年宁夏皮肤炭疽疫情的流行特征及炭疽芽胞杆菌检出情况,为宁夏皮肤炭疽防控工作提供科学依据.方法 使用描述性流行病学方法分析2018-2019年宁夏皮肤炭疽疫情的三间分布规律,采集疑似病例样本进行炭疽芽胞杆菌分离培养及Real-time PCR检测.结果 2018-2019年共报告皮肤炭疽病例4...     

应用免疫荧光法检测炭疽荚膜抗体的探讨

炭疽是由炭疽杆菌引起的一种人兽共患传染病。1876年Koch和Pasteur证明了病原,1934年Sterne研制出畜用高效疫苗,40年代抗生素得到很好的应用,80年代国外学者在炭疽毒力因子、致病机理、疫苗研制等方面取得了重大突破。动物因食入炭疽芽胞杆菌污染的饲料(草)、土地、畜产品而感染,人类则因食病畜肉类经口感染。为了解广西2001～2003年炭疽流行特征,掌握广西近年炭疽血清流行病学规律,本文收集2001～2003年广西炭疽疫点病人血清进行回顾性分析,为防治炭疽疫情的发生提供科学依据。现将结果报道如下。1　材料与方法1.1　被检血清　收集广西20…     

从臀部脓疱中分离出短芽胞杆菌

从臀部脓疱中分离出短芽胞杆菌秦庆学，徐保红，谭勤立，王海燕，张顺州，徐伟芽胞杆菌属中，有些种能使人和动物感染发病，尤其近１０年来国内外文献报告［１］腊样芽胞杆菌，巨大芽胞杆菌，短小芽胞杆菌，能引起成人和儿童败血症和脑膜炎。我们于１９９４年１月１５日，...     

炭疽感染与治疗研究进展

炭疽（anthrax）是由炭疽杆菌（bacillus anthracis）引起的人畜共患的急性传染病。炭疽杆菌在自然环境中以芽孢的形式存在于土壤和水中，食草动物如马、牛、羊等因在食草过程中摄入含炭疽芽孢的土壤而感染。人类感染炭疽，主要是由于皮肤接触感染动物或感染动物制品如皮、毛、骨、肉等制品而经破损的皮肤而患皮肤炭疽；或食用含炭疽芽孢的动物肉而患胃肠型炭疽；或吸入含有炭疽芽孢的尘埃而患肺炭疽（又称吸入型炭疽）。在亚洲、非洲、南美洲及东、南欧以及我国等发展中国家，野生动物和家畜感染炭疽并导致人感染炭疽的病例每年有数千例…。2001年国际恐怖分子利用邮件向美国播散炭疽芽孢并造成22例感染、11例患吸人性炭疽（inhaled an-thrax），5例因吸人性炭疽死亡的恐怖事件。     

鉴别炭疽杆菌的新特征

武汉肉联厂生产的503型胨是我们实验室常用的蛋白胨,用此胨组成的营养琼脂培养炭疽杆菌,可使培养基发生轻度的粉红变色,此变色和阴性对照,和细菌色素引起的改变有明显的区别。我们用82株炭疽杆菌,12种15株芽胞杆菌的参考菌株;14种51株新分离的芽胞杆菌,观察了此现象的特异性和稳定性,证明这种交色是炭疽杆菌种的特性,可以用它和被试的芽胞杆菌,包括蜡样杆菌、苏云金杆菌相鉴别。此特点用该厂1971～1982年生产的8批同型胨得到重现。     

广西柳州地区炭疽流行情况和防治对策

炭疽是由炭疽杆菌引起的人兽共患的一种急性、热性、败血性传染病。家畜中以草食动物 ,特别是牛、马易感性较强。人在接触患畜、处理患畜尸体等过程中 ,可造成感染发病。炭疽杆菌在空气中能形成芽胞。它对各种不良环境具有顽强的抵抗力 ,在干燥的条件下保存其生命力达数十年之外 ,短时煮沸不死 ,可在水、粪尿和土壤中长期保持其生活力 ,遇到适宜条件就可发芽繁殖 ,长期危害人畜。所以调查炭疽疫情 ,了解其发病规律 ,对预防、控制、扑灭其疫情是非常有意义的。我地区是炭疽流行的重疫区 ,常发生较为严重的人畜感染发病、死亡现象。为了全面详…