分子鉴定技术在中药中的应用

对近些年来兴起的分子鉴定技术进行了分析总结,主要包括随机扩增多态性DNA(RAPD)、扩增性简单序列重复(ISSR)、限制性内切酶切片段长度多态性(RFLP)、扩增限制性内切酶片段长度多态性(AFLP)、单核苷酸多态性(SNP)、DNA条形码序列分析等技术。从中药材真伪鉴定、中药材正品与替代品鉴定、中药材多基原鉴定和遗传多样性、中药材产地鉴别、中药材年限鉴别5个方面对分子鉴定技术在中药中的应用进展进行了归纳总结,阐述了分子鉴定技术存在的一些问题及其未来的发展方向。     

DNA条形码等分子鉴定技术与动植物类中药材的鉴定

中药材鉴定是控制中药质量、确保用药安全与效果的首要环节。DNA分子鉴定是从基因层面上进行中药材鉴别的手段,准确率高。DNA分子鉴定包括电泳技术、免疫技术、随机扩增多态性DNA(RAPD)、限制性内切酶片段长度多态性(RFLP)、扩增片段长度多态性(AFLP)、简单重复序列(ISSR)及DNA条形码等,以DNA条形码应用最为广泛。DNA条形码是基因组中相对较短的、可用于物种鉴定的特异性基因片段。植物类中药材的条形码多选用核基因和叶绿体基因DNA片段,如叶绿体psbA-trnH基因、内转录间隔区(ITS)、叶绿体核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶大亚基(rbcL)和RNA转录体Ⅱ型内含子剪切酶基因(matK)等;动物类中药材的条形码多来自核基因和线粒体基因DNA,主要有线粒体细胞色素C氧化酶亚基1(COⅠ)、核糖体RNA(rRNA)和线粒体细胞色素b基因(CytB)等。综述动植物类中药材DNA分子标记与鉴定技术应用进展,并探讨DNA条形码在药用动植物类中药材鉴定中存在的局限性及发展前景,为中药质量控制提供参考。     

中药材DNA分子标记技术的研究进展

近年来,许多新科学理论和技术不断渗透到中药鉴定领域,中药分子鉴定方法得到不断的发展。尤其是中药DNA分子标记鉴定技术得到快速发展,其方法主要是通过直接分析遗传物质的多态性来诊断生物内在基因排布规律及其外在性状表现规律的技术,也称DNA分子诊断技术,在药用植物亲缘与进化关系、分类和鉴定、道地药材等研究领域已广泛应用。本文总结目前常见中药材鉴别的DNA分子标记技术种类及中药材基因组DNA提取方法,展望中药材DNA发展前景,以期为中药材的鉴定发展提供理论。     

随机扩增多态性DNA分子标记研究进展及在中药鉴定中的应用

随机扩增多态性DNA是一种兼稳定性和多态检出率高的DNA分子标记技术之一，本文综述了RAPD技术原理、操作过程、优势、不足和应对措施以及该技术的扩展、在中药分类、鉴定等中的应用。     

我国药用动物分子遗传标记鉴别研究进展

药用动物是中国重要的中药资源,在中药市场、药品及临床上得到广泛的应用。但目前动物类药材鉴定工作尚面临着一定的困难。在生物技术不断进步和日益成熟的今天,利用分子遗传标记鉴定药用动物成为了可能。目前DNA分子标记技术已有数十种,限制性片段长度多态性（RFLP）标记、随机扩增多态性DNA（RAPD）标记、微卫星DNA（SSR）标记、线粒体DNA（mitochondrial DNA,mtDNA）标记等几种是在药用动物鉴别中较常用的DNA分子标记技术,DNA条形码技术在药用动物鉴别中也得到了很好的应用。     

玉竹及其混淆品黄精的RAPD分析

目的 鉴别中药玉竹Polygomatum odoratum及其混淆品，探索药材鉴别的新方法，为玉竹品质评价提供分子依据。方法 用随机扩增多态性DNA（RAPD）技术进行基因组DNA多态性分析，并构建聚类树型图。结果 玉竹、黄精遗传多态性丰富，道地药材玉竹和其他产地的玉竹巳产生遗传分化。结论 RAPD技术可应用于药材玉竹的鉴定，结合药效成分分析。成为玉竹品质评价的有力工具。     

三叶木通AFLP指纹图谱分析

目的构建三叶木通AFLP指纹图谱,为种质资源鉴定、品种选育奠定基础。方法采用扩增酶切片段多态性(AFLP)技术,对10份三叶木通种质进行基因组DNA多态性分析。结果从64对引物中筛选到8对高效扩增引物,获得861个多态性位点,多态性比率达到90.65%。依据多态性位点可将10个三叶木通种质聚类为三类。结论 AFLP技术适于三叶木通种质多态性分析。     

4种紫珠属药用植物RAPD多态性分析

目的:运用随机扩增多态性技术探索4种紫珠属药用植物的遗传多态性,为其种质鉴定提供依据。方法:采用试剂盒提取法提取裸花紫珠、广东紫珠、大叶紫珠与杜虹花4种新鲜植物叶中的总DNA,采用经过筛选的20条随机引物进行PCR扩增。结果:试剂盒可有效获取4种紫珠植物的总DNA,扩增得到条带共152条,多态性条带137条,多态率达到88.2%;聚类分析结果表明,4种紫珠供试材料共分为3类。结论:4种紫珠RAPD扩增后的聚类分析结果与植物形态学观察分类结果相一致,所得RAPD标记可用于紫珠属药用植物的多态性研究,为开发遗传鉴定的分子标记奠定基础。     

RAPD技术在中药鉴定中的研究进展

随着分子生物学和基因工程技术的日趋成熟,通过基因工程分析手段,从遗传物质的DNA分子水平检测生物遗传多样性并进行分类与鉴定成为一个新的便捷、准确的鉴定方法。中药鉴定所需的分子标记技术可分为3大类:①基于传统的Southern杂交技术的分子标记,如限制性内切酶片段长度多态技术(RFLP);②基于多聚酶链反应(PCR)的分子标记(PAPD)、随机扩增多态性DNA(RAPD)、任意引物PCR(AP-PCR)、DNA扩增指纹(DAF)等;③PCR和RFLP技术的结合,即RFLP技术。其中RAPD技术应用最多[1]。现将RAPD技术在中药鉴定中的研究进展综述如下。1技…     

川产青牛胆的RAPD分析

目的:为川产青牛胆的物种鉴定和遗传图谱的构建寻找一种新的途径。方法:采用RAPD(Random Amplified Polymorphic DNA,随机扩增多态性DNA)技术对采自4个地区6个居群的32个DNA样品用筛选的15个引物进行扩增,进而进行聚类分析。结果:RAPD能将6个居群的样品明显区分开,居群内的遗传差异小于居群间差异,野生环境的样品遗传分化较大。结论:RAPD技术在分子水平上对青牛胆进行鉴定是一种行之有效的手段,从而为青牛胆物种鉴定、遗传图谱的构建等研究提供分子水平的方法和依据。     

试论中药材特征性基因研究

本文就研究中药材的特征性基因,建立我国特有的“中药材特征性基因”库,以及在保护中药材种质资源,实现中药现代化质量控制等问题进行了论述,并提出评价道地药材,利用基因工程技术进行活性成份的大规模生产,对于扩大中药新资源方面均有重要意义。     

试论中药材特征性基因研究

本文就研究中药材的特征性基因,建立我国特有的“中药材特征性基因”库,以及在保护中药材种质资源,实现中药现代化质量控制等问题进行了论述,并提出评价道地药材,利用基因工程技术进行活性成份的大规模生产,对于扩大中药新资源方面的均有重要的意义。     

基于COI 条形码的鹿类中药材DNA 条形码分子鉴定

目的：利用COI 序列建立统一的鹿类药材分子鉴定方法。方法：对鹿茸、鹿角、鹿鞭、鹿筋、鹿尾、鹿胎分别进行DNA 提取、COI 序列扩增和序列测定,构建鹿类药材COI 序列数据库,并对市售鹿类药材进行调查分析。结果：所有鹿类药材均可以使用COI 通用引物进行PCR 扩增和测序;鹿类药材COI 序列数据库包含8 个物种101 份样品,物种之间相互区分明显;市售40 份药材中18 种为药典规定物种,22种为非药典规定物种。结论：COI 序列的DNA 条形码分子鉴定方法可以作为鹿类药材的统一鉴定方法,并为市售鹿类药材的鉴定提供科学依据。     

中药材重金属污染现状的统计分析

目的：分析中药材重金属含量及污染现状。方法：以相关文献中提供的铜、铅、砷、镉、汞的含量数据为基础，用SPSS 13.0软件进行统计分析；并以《药用植物及制剂进出口绿色行业标准》为标准，判断各种重金属元素含量超标情况。结果：中药材中存在不同程度的重金属污染。铜、铅、砷、镉、汞超标率分别为21.0%，12.0%，9.7%，28.5%，6.9%；单样本同一批次药材中存在2种、3种、4种重金属同时超标的现象，平均超标率分别为4.6%，1.5%，0.7%；36种常见中药材中桔梗、细辛、黄连等药材重金属含量较高，枸杞子、两头尖、西洋参、枳壳中5种重金属含量均没有超标；不同产地药材重金属污染的种类及程度均存在一定的差别；栽培药材铜和铅的含量高于野生药材，砷的含量则是野生高于栽培。结论：作者较详细、系统的报道了中药材重金属污染现状，为进一步深入开展中药材重金属研究提供了依据。     

我国各省饮片炮制规范中炮制通则内容初探

炮制通则是为了规范饮片炮制工艺,对饮片炮制过程中一些共性技术所做的规定,是饮片炮制规范收载的重要内容,对增强饮片生产实际中的可操作性、规范饮片生产、提高饮片质量、保证用药安全等方面都有重要的意义。该文对各地饮片通用炮制技术的差异进行分析和探讨,为当前国家已启动的编制《全国中药饮片炮制规范》项目提供建议和参考。     

浅谈中药炮制增效原理

中药炮制是我国的一项传统制药技术，中药炮制与临床疗效有着极为密切的联系。本文仅就已取得的炮制研究成果对中药炮制增效的原理进行了探讨。     

对中药质量控制的思考

文章指出目前中药质量方面存在的主要问题是:中药材质量明显下降;饮片炮制研究滞后;中药制剂的质量控制方法落后。提出实现中药质量控制突破的方法是:多环节全程控制;多组分整体研究;化学检测指标应与生物活性相关。     

现代生物技术在天然药、中药药理研究中的应用进展

文章介绍了现代生物技术在中药及天然药的药理研究中的基本概况,着重从现代生物技术在动物模型研究中的运用以及现代生物技术在中药及天然药药效学研究中的应用两大方面进行阐述。     

加快编制《全国中药饮片炮制规范》,规范统一饮片炮制国家标准

近年来,中药饮片的重要性日益彰显,面临着新的发展形势和机遇.笔者结合工作实际,深入分析加快编制《全国中药饮片炮制规范》的重大意义,提出编制总体目标及工作任务,并强调要正确处理好影响编制《全国中药饮片炮制规范》的几个重要关系,统一饮片炮制国家标准,着力解决好当前中药饮片产业发展面临的现实问题.     

关于加强中药外源性残留杂质控制的思考与建议

为促进中药外源性残留杂质控制,确保中药质量,对中药外源性残留杂质控制工作提出建议.对目前中药外源性残留杂质控制情况进行总结,对存在的问题进行分析.应通过加强基础研究,完善检测方法,改进监管模式,推动中药外源性残留杂质控制工作.