大鼠严重烧伤早期大脑皮质损伤机制的实验研究

目的 :探讨大鼠严重烧伤早期大脑皮质的损伤特点及其发生机制。方法 :采用光、电镜观察大鼠 30 %总体表面积 (TBSA) 度烧伤后 2 4小时内大脑皮质的病理形态学改变 ,同时对大脑皮质 ATP酶、一氧化氮(NO)、黄嘌呤氧化酶 (XO)、髓过氧化物酶 (MPO)及丙二醛 (MDA)的含量或活性进行动态观测。结果 :大鼠严重烧伤后 3小时即出现皮质疏松、细胞水肿和血管外间隙增宽 ,其后病变加重并出现神经元灶性溶解。 3种ATP酶活性在伤后呈进行性降低 ;NO和 XO在伤后 1～ 2 4小时、MPO在伤后 6～ 2 4小时、MDA在伤后 3～2 4小时均显著高于正常对照组 ,XO、MPO分别与 MDA呈显著正相关。结论 :严重烧伤早期大脑皮质即可出现一系列显著病理性损害 ,缺血缺氧、NO产生、XO活化、中性粒细胞浸润及脂质过氧化在大脑皮质损伤中发挥着重要作用。     

DC联合CIK细胞对中晚期消化系统肿瘤患者的免疫功能的影响

过继免疫治疗（Adoptive Cellular Immunotherapy）是通过能直接或间接介导抗肿瘤效应的免疫细胞输注肿瘤患者体内的一种肿瘤治疗方法,目前已成为肿瘤治疗的一个全新的领域。其中细胞因子诱导的杀伤（cytokine-induced killer,CIK）细胞是继淋巴因子激活的杀伤（1ymphokine activated killer,LAK）细胞、肿瘤浸润淋巴细胞（tumor-infiltration lympho．cyte,TIL）后的新型细胞,其增殖能力和杀伤活性显著高于LAK细胞,是一种安全的辅助治疗手段。     

脊髓损伤后早期小鼠肠道功能的变化

目的探讨脊髓损伤后短期内小鼠肠道功能的变化。方法将105只昆明种小鼠随机分为正常组(A组,n=30)、假手术组(B组,n=30)和模型组(C组,n=45)。A组不作处理,B组仅暴露脊髓,不夹持。C组采用动脉瘤夹夹持T10处脊髓,复制脊髓损伤模型。分别于术后12 h、24 h、48 h测定小鼠回肠肌电慢波及平滑肌收缩力,并做回肠HE染色。结果脊髓损伤后12 h、24h、48 h,C组小鼠肌电频率和振幅低于A组和B组(P0.05),收缩力振幅低于A组和B组(P0.05),但24 h、48 h后收缩力频率高于A组和B组(P0.05)。C组各时间点肠黏膜评分均较A组和B组高(P0.05)。结论小鼠脊髓损伤后早期,肠道平滑肌肌电活动减弱,收缩力减小,肠黏膜轻度损伤。     

应用体外实验对与人肺癌转移相关基因的研究

目的:应用体外实验研究RAB5A基因过表达与人非小细胞肺癌转移相关,进一步确认该基因在人肺腺癌细胞系侵袭和转移中的作用以期待此研究能对肺癌转移的预防进而减少对肺癌患者造成的肺功能损害及为有效选择有利患者生活质量的治疗手段提供理论基础。方法:采用体外重建基底膜侵袭实验和肿瘤细胞黏附能力的测定,分析RAB5A正义真核表达载体转染后的AGZY83-a和反义RNA转染后的A-nip973细胞的侵袭、转移能力的改变。结果:RAB5A正义表达载体PcDNA3.1-RAB5A转染的AGZY83-a重建基底膜侵袭能力明显增强,t检验P<0.005,差异有显著性意义;对基底膜成分的黏附能力增大;t检验P<0.05。PcDNA3-AntiRAB5A反义RNA表达载体对Anip973重建基底膜侵袭力明显下降,P<0.001;对基底膜成分黏附能力降低。结论:RAB5A在侵袭转移表型形成中发挥重要的作用。反义RNA可阻断RAB5A基因的翻译过程,相关体外试验研究结果为有效治疗肿瘤转移奠定了基础。     

肠屏障损伤后通透性与形态学改变的相关性研究

目的 观察大鼠应激下肠屏障损伤后通透性与形态学改变的相关性研究。方法 建立大鼠失血性休克模型,分别于复苏后1、3、6、12、24 h时间段观察肠黏膜形态学改变,包括常规检查、绒毛改变和肠上皮损伤指数;同时通过口服乳果糖和甘露醇,检测尿中二者的比值的变化来观察肠通透性改变情况。结果 休克复苏后肠道上皮产生明显的损伤改变,复苏后1 h最明显,3 h起局部肠黏膜开始出现修复,6 h大部分修复,24 h肠黏膜结构恢复正常,肠黏膜绒毛高度呈进行性下降;乳果糖甘露醇比值(L/M)于3、6 h达高峰,12、24 h仍高于对照组。结论 应激状态下肠屏障严重受累,其通透性的恢复明显滞后于形态学重建,肠黏膜形态学改变与肠通透性可能无直接关联性     

进驻高原人群淋巴细胞脆性的变化及意义研究

目的研究不同海拔高度进驻人员外周血淋巴细胞脆性的变化,分析其意义.方法 以3个月为界将驻训人员分为急进人员和常驻人员,按不同海拔高度将驻训人员分成3组,采用淋巴细胞脆性试验检测淋巴细胞应急损伤的情况,淋巴细胞和抗原靶细胞在37℃下温育5~30 min,高倍镜下观察淋巴细胞破碎的程度,与靶细胞接触的淋巴细胞膜完整无破坏者其脆性为阴性,与靶细胞接触的淋巴细胞中30%以内被破坏者为脆性阳性.采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清白细胞介素-2（IL-2）含量的变化.结果 不同海拔高度的急进人员其淋巴细胞脆性都有不同程度的损伤,显著高于常驻人员和平原居住人群平均水平,其中海拔3 700 m损伤最为严重.IL-2水平随海拔升高无论急进人员还是常驻人员都有下降趋势,同一海拔急进人员血清IL-2明显高于常驻人员.结论 高原环境下无论急进人员还是常驻人员其淋巴细胞都存在不同程度的损伤,在3 700 m淋巴细胞易受损伤的程度最重.     

不同种属细菌感染患者机体免疫功能变化的实验研究

目的 通过检测不同种属细菌感染患者外周血淋巴细胞亚群分布情况,探讨不同种属细菌感染患者细胞免疫功能的变化.方法 利用流式细胞仪对409例健康体检者和53例细菌感染患者体内T淋巴细胞及其亚群、B细胞、NK细胞进行检测.结果 (1)总感染组T4细胞、DN-T细胞、T4/T8比值显著低于健康对照组(P＜0.05),T8细胞显著高于健康对照组(P＜0.01);单纯细菌感染组T4细胞、DN-T细胞、DP-T细胞显著低于健康对照组(P＜0.05),T8细胞显著高于健康对照组(P＜0.01);细菌病毒混合感染组T4细胞、T4/T8比值、NK细胞显著低于健康对照组(P＜0.05),B细胞和T8细胞显著高于健康对照组(P＜0.01);单纯细菌感染组DN-T细胞、DP-T细胞、B细胞显著低于细菌病毒混合感染组(P＜0.05),NK细胞显著高于细菌病毒感染组(P＜0.01).(2)铜绿假单胞菌感染组T4细胞和T4/T8比值显著低于对照组,而T8细胞和B细胞显著高于对照组(P＜0.05);不动杆菌感染组T8细胞显著高于对照组,而T4/T8比值、DN-T细胞、DP-T细胞和NK细胞显著低于对照组(P＜0.05);克雷伯菌感染组和肠杆菌感染组T4细胞和T4/T8比值显著低于对照组,而T8细胞显著高于对照组(P＜0.05);结核杆菌感染组T4细胞和T4/T8比值显著低于对照组,NK细胞显著高于对照组(P＜0.05);葡萄球菌和链球菌感染组与对照组的淋巴细胞亚群检测结果无统计学差异(P＞0.05).结论 细菌感染者体内存在淋巴细胞亚群失衡和细胞免疫功能紊乱.     

淋巴细胞经氟达拉滨培养后免疫表型变化的体外实验

背景:近年来国外一些体外实验和动物模型证实经氟达拉滨处理的供者淋巴细胞具有显著的抑制急性移植物抗宿主病的作用,但其作用机制还不十分清楚。目的:通过体外实验观察供者淋巴细胞经氟达拉滨培养后的免疫表型变化。设计、时间及地点:观察性细胞学实验,于2007-07/2008-01在常州市第一人民医院血液科完成。材料:供者淋巴细胞标本取自4例行异基因外周血造血干细胞移植的健康供者,氟达拉滨由德国先灵公司提供。方法:将COBO SPECTRA采集的外周血造血干细胞用RPMI1640液洗涤2遍。镜下计数后用含体积分数为0.10FBS的RPMI1640液将细胞密度调整至2×109L-1备用。取其中1mL的造血干细胞,PBS洗1遍后加入荧光标记的CD3、CD4、CD8、CD44 mAb 10μL,对照为Mouse Ig-G1-FITC/PE,低温孵育30min后PBS稀释,流式细胞仪检测。其余细胞以每孔1mL置于24孔培养板中,再加入终浓度为8mmol/L氟达拉滨,将培养板置于37℃、体积分数为0.05的CO2培养箱中培养24h。主要观察指标:流式细胞仪检测细胞免疫表型变化。结果:经氟达拉滨培养前及培养24h后供者淋巴细胞中CD4 CD44 T细胞的比例无明显变化,而CD8 CD44 T细胞的比例下降,组间比较差异有显著性意义(P<0.05)。结论:氟达拉滨可能是通过下调CD44的表达来减少效应性CD8 T细胞向相应组织器官移行,减轻移植后急性移植物抗宿主病的发生。     

小青龙汤对哮喘小鼠肺组织Th1/Th2作用的实验研究

目的:观察小青龙汤对哮喘模型小鼠肺组织内Th1/Th2比值的影响并探讨其作用机制.方法:将49只雌性BALB/cA组)、哮喘组(B组)、小青龙汤小剂量组(C组)、小青龙汤大剂量组(D组)、地塞米松组(E组)、必可酮组(F组)及联合用药组(减半的小剂量小青龙汤加地塞米松,G组),每组7只.卵蛋白致敏复制哮喘模型,激发哮喘前1 h,各组小鼠分别使用相应药物治疗.激发12 d后断头处死小鼠,立即取肺脏进行免疫组化染色,观察组织中Th1和Th2表达.结果:①各组哮喘小鼠肺组织内Th1和Th2数量均显著增多(P均<0.01);D组较C组显著减少(P<0.05);D、E、F、G组之间差异均无显著性(P均>0.05).②B组小鼠肺组织内Th1/Th2±<0.01),肺内细胞因子呈明显的Th2表型变化;各治疗组较B组均呈非常显著性升高(P均<0.01),肺内细胞因子呈明显的Th1表型变化;各治疗组间差异均无显著性(P均>0.05),且接近A组.结论:①哮喘小鼠肺组织内Th1/Th2比值明显降低,支持哮喘发病中存在Th1/Th2比值失衡学说.②小青龙汤选择性降低肺组织内Th1、Th2数量,逆转失衡的Th1/Th2比值是其治疗哮喘的重要机制之一.③小青龙汤与糖皮质激素合用有药效相加作用.④小青龙汤逆转Th1/Th2比值的作用与用药时间和用药剂量有关.     

消化系统肿瘤术后化疗患者社会支持、应对方式与疾病不确定感的相关性研究

目的探讨消化系统肿瘤术后化疗患者社会支持、应对方式与疾病不确定感的相关性。方法采取横断面调查的方法,对符合纳入标准的448例消化系统肿瘤术后化疗患者应用一般资料问卷、社会支持评定量表(SSRS)、癌症应对问卷(CCMQ)和Mishel疾病不确定感量表(MUIS-A)进行问卷调查。结果消化系统肿瘤术后化疗患者疾病不确定感得分(89.86±11.84)分,处于中等水平;社会支持与疾病不确定感呈负相关(r=-0.209,P0.01);面对的应对方式与疾病不确定感呈负相关(r=-0.141,P0.01),回避与压抑、屈服、发泄、幻想的应对方式与疾病不确定感呈正相关(r=0.196,r=0.329,r=0.303,r=0.307,P0.01)。结论医护人员应重视消化系统肿瘤术后化疗患者应对方式、社会支持及疾病不确定感的评估和管理,通过优化患者应对方式,寻求有效的社会支持系统,降低疾病不确定感。     

术后病理性腹腔粘连小鼠模型制作的实验研究

目的探讨术后病理性腹腔粘连小鼠模型的制作及运用。方法昆明小鼠30只,分成2组,分别用什锦锉与干纱布制作术后病理性腹腔粘连小鼠模型,术后饲养7d,分析这两种造模的区别。结果2组造模效果均达到Nair腹腔粘连五级评分标准Ⅲ～Ⅳ级,但什锦锉组死亡率73．3％显著高于纱布组26．7％(P＜0．05)。结论选择小鼠作为术后病理性腹腔粘连动物模型,以干纱布为造模工具较好。     

壶腹部胆道内支架置入术后局部微环境变化的初步研究

目的：探讨低位恶性胆道梗阻的患者行壶腹部胆道内支架置入术后,胆管局部微环境的改变状况。方法：15例因壶腹周围恶性病变造成低位胆道梗阻的患者,经皮置入金属胆道内支架,内支架跨越壶腹部,分别检测支架置入术术前和术后胆汁的脂肪酶、淀粉酶、酸碱度,并对胆汁进行细菌培养。支架置入后患者服用核素,检查是否存在肠胆返流。结果：行胆道支架置入术后,患者胆汁内脂肪酶、淀粉酶明显升高,pH值降低,胆汁内有肠道内细菌生长。大部分患者存在肠胆返流。结论：壶腹部胆道内支架置入后胆汁成分、酸碱度均明显改变,胰液、肠液可能逆入胆道,需要临床关注。     

小鼠心肌内转基因后压力超负荷模型的实验研究

目的::探索在短时间内建立小鼠心肌内转基因后压力超负荷模型,为深入研究心脏肥大的分子机制提供可靠的实验对象。方法:雄性C57BL/6小鼠随机分为升主动脉缩窄组(手术组)和同期假手术组(对照组),手术组根据暂时阻断主动脉血流5s、10s、20s、30s同时左心腔内分别注射Ad-LacZ或PBS后又分为LacZ组和PBS组,观察术后4周不同时间小鼠体重、颈动脉血压和心脏超声等变化HE染色和X-gal染色分别观察心肌肥厚情况和基因转染情况。结果:手术成活率88.8%。升主动脉缩窄小鼠的血压较对照组明显升高。缩窄术后2周心肌明显肥厚,4周时出现失代偿性心力衰竭。X-gal染色显示阻断血流5s以上心脏有蓝染,但10s、20s、30s之间无明显区别。结论:该方法简单有效,重复性好,可在短时间内建立小鼠心肌内转基因和压力超负荷心肌肥厚模型,为心脏肥大的深入研究提供可靠的实验对象。左心室心腔直接注射转染Ad-LacZ基因同时阻断升主动脉血流10s以上可以使目的基因有较好的表达。     

腰椎生物代偿性变化生物力学机理的实验研究

目的通过对青老年组腰椎三维运动范围的比较研究,探讨腰椎生物代偿性变化的生物力学机理及其与老年人腰椎稳定性的关系。方法选取１５具新鲜成人男性尸体分为两组：青年组（２０～３０岁）７例,老年组（６０～７０岁）８例。切取腰椎（Ｌ１－Ｓ１）,用加载系统和计算机三维空间力学系统测量Ｌ１－Ｓ１各节段的三维运动范围。结果老年组腰椎三维运动范围较青年组有减少趋势,在前屈时ＮＺ有显著性差异。结论老年人腰椎未因腰椎退变而失稳,稳定性反而加强,原因是腰椎退变刺激腰椎产生生物代偿性变化而重塑稳定。     

Ly49A基因转染的淋巴细胞对H-2~d小鼠正常和肿瘤细胞杀伤活性的实验研究

目的　观察Ly49A基因转染的C5 7BL/ 6小鼠的淋巴细胞对BALB/c小鼠正常成纤维细胞和 4T1乳腺癌细胞杀伤能力的变化与差异。方法　构建逆转录病毒表达载体pLXSN Ly49A ,经由PA317包装细胞包装后转染C5 7BL/ 6小鼠淋巴细胞。流式细胞仪检测Ly49A受体在转染后淋巴细胞上的表达率。MTT法检测转染后淋巴细胞对BALB/c小鼠正常成纤维细胞和 4T1乳腺癌细胞的杀伤活性 ,以空载体转染和未转染的淋巴细胞作对照。结果　Ly49A基因转染的C5 7BL/ 6小鼠的淋巴细胞 2 4h后Ly49A受体表达率为 (4 6 .6 7± 0 .35 ) % ,空载体转染组为 (18.73± 0 .85 ) % ,未转染对照组为 (19.6 0± 0 .2 7) % ,其对BALB/c小鼠正常成纤维细胞的杀伤活性明显降低 (抑制率 2 2 %～ 2 5 % ) ,对 4T1乳腺癌细胞的杀伤活性无明显改变 (P >0 .0 5 )。结论　转染Ly49A的C5 7BL/ 6小鼠淋巴细胞对BALB/c小鼠正常细胞的杀伤作用明显降低 ,但仍保留了对肿瘤细胞的杀伤活性 ,为解决异基因骨髓移植后移植物抗宿主病提供了实验依据     

心脏骤停复苏后血粘度变化的实验研究

目的：探讨心肺复苏（CPR）后血粘度变化及肝素治疗对CPR后血粘度的影响。方法：30只新西兰兔随机分成空白对照组、实验对照组、实验组、治疗组4组，动态观察实验前及实验后血粘度变化。结果：CPR后全血粘度、血浆粘度均较对照组明显升高（P＜0．01），尤以CPR后10min最高，以后逐渐下降；肝素治疗可使CPR后高血粘度降低（P＜0．01）。结论：CPR后血粘度明显增高，早期肝素治疗可使其得到改善。     

超声对周围神经慢性卡压损伤引起神经形态学变化的实验研究

目的探讨周围神经慢性卡压损伤后不同时间的声像图变化,以及卡压时间与病理变化之间的关系。方法健康家兔20只,随机均分为5组。4只分离坐骨神经不进行卡压,作为对照组;16只分为4组,分离坐骨神经后,分别神经卡压2,4,6,8周,作为卡压2周组、卡压4周组、卡压6周组、卡压8周组;各组分别去除卡压后即取材行组织形态学观察和病理学检查。超声观察坐骨神经的直径、连续性、外膜边缘整齐与否及内部回声情况;诱发电位仪测定运动神经传导速度(MNCV)和感觉神经传导速度(SNCV)。结果对照组在观察时间段内未见明显改变。各卡压组随卡压时间的延长,神经卡压段及两端内径逐渐增粗,卡压两端局部形成瘤样改变,内部回声逐渐减低,线性回声连续性差,神经外膜逐渐增厚,MNCV和SNCV随着卡压时间延长而减慢。各卡压组神经卡压区域均发生不同程度的轴突肿胀和阶段性脱髓鞘改变,卡压时间越长病理变化越重。卡压2周组神经束内髓鞘轴索和神经束膜纤维出现明显水肿,余各卡压组可见髓鞘崩解,轴突变性,纤维结缔组织增生逐渐明显。各卡压组坐骨神经远端、近端直径较对照组增大,MNCV和SNCV较对照组减慢,差异均有统计学意义(P0.05)。各卡压组坐骨神经直径与MNCV和SNCV均呈负相关(r分别为-0.76和-0.69,P0.05)。结论超声可实时、准确地反映神经慢性损伤后形态的动态变化,周围神经卡压损伤程度与卡压时间成正相关,及早去除卡压有利于损伤神经再生与修复。     

上消化道大出血后口腔pH值变化及护理对策的研究

2010年1月—2011年1月对我院上消化道大出血病人禁食期间口腔pH值进行系统监测,并进行干预取得良好效果。现报告如下。1资料与方法1.1一般资料2010年1月—2011年1月我院诊断为上消化道大出血病人60例,其中男38例,女22例,年龄38岁～83岁,     

烟雾吸入伤大鼠肺组织α_1-AR的变化与哌唑嗪保护作用的实验研究

目的　探讨α1肾上腺素受体 (α1-AR)在烟雾吸入伤大鼠肺组织变化与哌唑嗪对烟雾吸入伤的保护作用。方法　采用大鼠烟雾吸入伤模型致伤大鼠 ,干湿重法测定肺组织含水量 ,伊文斯蓝法测定肺微量血管通透性 (PMVP) ,放射受体分析法测定肺组织α1-AR的变化。结果　烟雾吸入致伤后大鼠PMVP增大 ,2h达显著水平 ,6h达高峰 ,2 4h仍显著高于正常 ;肺含水量伤后 2h明显升高 ,6h达非常显著水平 ,2 4h达高峰 ;肺组织α1-AR密度于烟雾致伤后 2、4、6及 2 4h显著升高 ,但亲和力除伤后 2h升高之外 ,无明显变化。相关分析显示 ,肺组织α1-AR密度的升高与PMVP增大呈显著正相关。腹腔给予α1-AR阻断剂哌唑嗪 0 5、1 5及 3 0mg/kg能明显降低PMVP及肺水含量 ,减轻肺损伤。结论　大鼠烟雾吸入性肺损伤的发病机制与α1-AR密度升高有关 ,哌唑嗪对烟雾吸入伤具有一定保护作用。     

大鼠心肺复苏后神经细胞线粒体通透性转换孔的变化

目的 研究大鼠心肺复苏后神经细胞线粒体通透性转换孔(MPTP)的变化规律.方法 建立窒息联合冰氯化钾致大鼠心搏骤停、心肺复苏(CA/CPR)的动物模型,断头后提纯大脑皮层组织内线粒体,采用分光光度法测定线粒体MPTP在不同时相的开放程度.结果 心肺复苏后大鼠神经细胞线粒体功能明显受损,恢复自主循环(ROSC)后神经细胞MPTP持续处于开放状态,开放程度具有时间依赖性,具体表现为在ROSC后6 h以内开放程度保持低水平,6 h以后开始迅速大量开放,直至12 h开放程度达到最大,但并没有一直维持这一水平,而是在ROSC后24 h开放程度略有缩小,表明线粒体开始收缩,至48 h开放程度再次加大,72 h MPTP明显缩小,但未达到正常水平.结论 CA/CPR后大鼠线粒体MPTP出现明显规律性改变,复苏后12 h以内可能是改善复苏后脑功能的最佳治疗窗.