胶质母细胞瘤PPFIBP1的表达及其临床意义

目的 探讨PPFIA结合蛋白1(PPFIBP1)在胶质母细胞瘤中的表达及其与病人生存预后的关系。方法 选取2011年6月至2018年6月手术切除的胶质母细胞瘤116例,另选取颅脑损伤内减压术中切除的非肿瘤脑组织68例为对照,用免疫组化染色法检测PPFIBP1的表达。随访截止2021年6月,记录总生存期和无进展生存期。结果 胶质母细胞瘤组织PPFIBP1高表达率[67.24%(78/116)]明显高于对照组[17.65%(12/68);P<0.05]。多因素Cox回归分析显示,PPFIBP1高表达是胶质母细胞瘤病人总体生存预后和无进展生存预后不良的独立危险因素（P<0.05）。生存曲线分析显示,PPFIBP1高表达组中位总体生存期和中位无进展生存期较低表达组均明显缩短（P<0.05）。结论 PPFIBP1在胶质母细胞瘤中呈高表达,与病人不良生存预后有关。     

胶质母细胞瘤铜死亡相关lncRNA预后模型的构建

目的 采用生物信息学方法分析胶质母细胞瘤差异表达的铜死亡相关长链非编码RNA(lncRNA)并构建预后模型。方法 计算机检索TCGA数据库下载胶质母细胞瘤的RNA-seq数据及其临床信息,应用单因素Cox分析和LASSO回归筛选铜死亡相关lncRNA,并计算风险评分=基因系数×基因表达量,以风险评分中位数分为低风险组和高风险组;将胶质母细胞瘤样本随机分为测试组和训练组,再进行整合生物信息学分析。结果 共下载胶质母细胞瘤样本169例,对照样本5例,共表达分析发现791个铜死亡相关lncRNA,其中正相关lncRNA有753个,负相关lncRNA有38个。单因素Cox分析发现22个显著差异表达的lncRNA(P<0.05),LASSO回归分析筛选9个差异表达的lncRNA;多因素Cox回归分析显示风险评分增高是胶质母细胞瘤预后不良的独立危险因素（P<0.05）。生存曲线分析显示,无论是训练组,还是测试组,高风险组总体生存期和无进展生存期显著缩短（P<0.05）。ROC曲线分析显示模型对1、2、3年生存期具有良好的预测价值（P<0.05）,而且风险评分预测效能显著优于...     

多形性胶质母细胞瘤预后因素分析

目的 探讨多形性胶质母细胞瘤(GBM)预后相关的临床因素.方法 回顾性分析160例随访资料完整的GBM,采用Kaplan-Meier法计算生存率及进行单因素分析,Log-rank法进行生存率显著性检验,Cox比例风险回归模型作多因素分析.结果 本组病人术后1年、2年、5年生存率分别是65.3％、34.1％、9.1％.单因素分析显示年龄、肿瘤切除程度、治疗方式是影响GBM生存率的因素.多因素分析显示年龄、肿瘤部位、肿瘤切除程度及治疗方式是与GBM预后相关的独立因素.结论 年龄、肿瘤部位、肿瘤切除程度和治疗方式是影响GBM预后的主要因素,积极的手术治疗和规范化、个体化的综合治疗可有效提高GBM病人的生存率.     

影响胶质母细胞瘤切除术后的预后因素分析

目的 探讨影响胶质母细胞瘤切除术后的预后因素.方法 对山东省三家医院1999-2004年经手术治疗且随访资料完整的205例胶质母细胞瘤进行回顾性研究,Kaplan-Meier单因素分析筛选预后相关因素,并通过Cox回归模型对筛选出的相关因素进行多因素分析.结果 患者中位生存期为12.0个月,术后6、12、18、24个月的积累生存率分别为82%、52%、27%、17%.多因素分析显示年龄、肿瘤部位、术前KPS评分、手术切除程度、术后放疗、化疗是影响预后的主要因素.结论 经多因素分析证实肿瘤的切除程度、术后放疗和化疗均能显著影响胶质母细胞瘤的预后,其中放疗是最具统计学意义的治疗方式.     

多形性脑胶质母细胞瘤化疗对预后的评价

多形性胶质母细胞瘤（glioblastoma multiforme,GBM）,按Kernohan分类属于星形细胞瘤Ⅲ～Ⅳ级,WHO2007年中枢神经系统肿瘤分类标准将其归类为星形细胞瘤Ⅳ级,占中枢神经系统恶性肿瘤的25％。该病男性发病率高于女性,具有家族聚集倾向。以往研究认为该病平均发病年龄为60岁,但近些年患者呈现出年轻化的趋势。     

人脑胶质母细胞瘤miR-4516表达与病人预后的关系

目的 探讨人胶质母细胞瘤（GBM）组织微小核糖核酸-4516(miR-4516)的表达情况及其与病人预后的关系。方法选取2015年1月～2019年5月手术切除的GBM组织89例和颅脑损伤内减压术切除的非肿瘤脑组织35例为对照组,采用qRTPCR检测miR-4516的表达水平,根据miR-4516表达水平的中位数分为高表达和低表达。GBM病人术后随访2年,记录生存情况。结果 GBM组织miR-4516表达水平[（5.32±1.75）]明显高于对照组[（1.13±0.45）;P<0.01]。术后2年随访,42例（47.19%）生存,47例47(52.81%)死亡。多因素Cox回归分析显示,miR-4516高表达是GBM生存预后病例的独立危险因素（P<0.05）。生存曲线分析显示miR-4516高表达组2年累积生存率（27.45%）明显低于低表达组（73.68%;P<0.001）。结论 GBM组织miR-4516表达增高,其高表达是病人预后不良的危险因素。     

复发性多发胶质母细胞瘤的预后分析

目的 探讨复发性多发胶质母细胞瘤（GBM）预后的影响因素。方法 2005年1月至2012年12月手术切除并获得完整随访的复发性GBM 106例,其中单发78例,多发28例（多发组）;根据患者年龄、性别、肿瘤部位、手术切除程度、术后是否放化疗、术前KPS评分从单发GBM中选取与多发GBM相匹配的病例28例作为对照（单发组）;多发组根据肿瘤切除程度进一步分为全切组和部分切除组。结果 本组复发性多发GBM占26.4%。多发组中位生存期（4.5个月）明显短于单发组（8.5个月;P <0.05）。多发患者中,全切组中位生存期（7.9个月）明显长于部分切除组（3.7个月;P <0.05）。结论 复发性多发GBM预后较单发患者差;肿瘤切除程度越高,患者预后也越好,建议术中在保证重要功能的基础上尽量多切除肿瘤。     

影响胶质母细胞瘤患者预后的多因素分析

目的 探讨影响胶质母细胞瘤患者预后的临床因素.方法 回顾2008年1月至2013年1月于南方医科大学南方医院行显微手术治疗的198例原发胶质母细胞瘤患者的临床资料,对性别、年龄、起病至就诊时间、术前有无癫痫发作、术前KPS评分、肿瘤部位、肿瘤直径、肿瘤是否发生囊变、手术切除程度、术后是否行同步放化疗、术后是否存在颅内感染共11项因素进行生存分析.结果 单因素分析结果示术前有无癫痫发作、肿瘤部位、术前KPS评分、手术切除程度、术后是否同步放化疗、术后是否存在颅内感染对胶质母细胞瘤患者的预后有影响(P＜0.05);多因素分析结果示手术切除程度、肿瘤部位、术前KPS评分、术后是否同步放化疗、术后是否颅内感染具有统计学意义(P＜0.05).结论 手术切除程度、肿瘤部位、术前KPS评分、术后同步放化疗是影响胶质母细胞瘤患者的主要预后因素,其中手术切除程度是最重要的预后因素;而术后颅内感染的患者生存时间延长,可能与感染诱导的肿瘤免疫有关.     

miR-153下调FOXR2、CDK8和CDK13的表达抑制胶质母细胞瘤细胞增殖

目的 探讨miR-153对胶质母细胞瘤细胞增殖的影响。方法 体外培养胶质母细胞瘤细胞系U87、U251、SHG-44和T98G细胞,分别转染miR-153质粒（miR-153组）、空载质粒（载体组）和miR-153突变质粒（miR-153突变组）,另设置空白对照组（不转染任何质粒）。RT-PCR检测miR-153、FOXR2、CDK8和CDK13的表达,MTT法检测细胞增殖能力。结果 miR-153组U87、U251、SHG-44和T98G细胞miR-153表达水平较载体组和空白对照组显著上升（P<0.05）,细胞增殖水平较载体组和空白对照组均显著降低（P<0.05）。miR-153组U87、U251、SHG-44和T98G细胞FXOR2、CDK8和CDK13的mRNA水平较miR-153突变组、载体组和空白对照组均显著下降（P<0.05）,而后三组之间均无统计学差异（P>0.05）。结论 miR-153抑制胶质母细胞瘤细胞增殖,其机制可能与抑制FXOR2、CDK8和CDK13表达有关。     

原发性脊髓胶质母细胞瘤的临床特点及预后因素分析

目的 探讨原发性脊髓胶质母细胞瘤的临床特点及其预后影响因素.方法 回顾性纳入2008年1月至2015年12月四川大学华西医院神经外科行手术治疗的14例原发性脊髓胶质母细胞瘤患者,总结其临床特征并分析影响患者预后的因素.结果 14例患者中,近全切除4例,部分切除5例,活检5例.9例术后接受放、化疗,3例仅行化疗,2例未行放、化疗.中位随访时间为15个月（5-26个月）,1年和2年生存率分别为79％ （11/14）和7％（1/14）.中位总生存期（OS）为15个月,中位无进展生存期（PFS）为8个月.单因素Log-rank分析显示,年龄以及是否进行术后放疗均为OS和PFS的影响因素（均P〈0.05）;术前Karnofsky功能状态评分（KPS）为OS的影响因素（P=0.033）,但并非PFS的影响因素（P=0.106）;性别、肿瘤切除程度以及病理学结果均非OS及PFS的影响因素（均P〉0.05）.单因素Cox回归分析显示,年龄、术后是否放疗均影响OS和PFS（均P〈0.05）;而术前KPS仅影响OS（P=0.046）.多因素Cox逐步回归分析显示,术后是否放疗为影响OS和PFS的惟一因素（均P 〈0.05）,放疗者较未放疗者的生存期长.结论 原发性脊髓胶质母细胞瘤临床罕见且预后极差.肿瘤切除程度与患者的预后无关,术后联合放疗能在一定程度上延长患者的生存期.     

阿苯达唑抑制胶质瘤裸鼠模型肿瘤生长

目的 探讨阿苯达唑（ABZ）对胶质瘤裸鼠模型肿瘤生长的影响。方法 将术中获取的胶质母细胞组织消化为单细胞悬液用无血清干细胞培养基进行培养胶质母细胞瘤干细胞（GSC）,用含10%胎牛血清的DMEM培养基培养胶质瘤细胞系U87、U251、U172,以25、50、100、200 ng/ml的终浓度ABZ作用细胞,采用MTT法检测细胞增殖。右侧腋窝皮下注射0.2 ml（5×106个细胞）GSC及U87细胞悬液构建胶质瘤裸鼠模型,将30只胶质瘤裸鼠模型随机分为6组,GSC和U87细胞移植各3组,每种移植瘤模型均分为模型组（腹腔注射等体积DMSO）、低剂量ABZ组（腹腔注射ABZ,50 mg/kg）、高剂量ABZ组（腹腔注射ABZ,100 mg/kg）。定时测量肿瘤长径与短径,计算肿瘤体积;PCR法和免疫印迹法检测裸鼠肿瘤组织血管内皮生长因子（VEGF）mRNA和蛋白表达水平。结果 ABZ对GSC、U87、U251和A172细胞生长均具有明显抑制效果（P<0.05）,而且抑制效果具有浓度依赖性（P<0.05）,浓度>50 ng/ml抑制效果较好。腹腔注射ABZ后,高剂量和低剂量ABZ组移植瘤体积增长较对照组均明显减慢（P<0.05）。高剂量ABZ组和低剂量ABZ组肿瘤VEGF mRNA和蛋白表达水平较对照组均明显降低（P<0.05）。结论 ABZ可以抑制胶质瘤裸鼠模型肿瘤生长,可能与抑制肿瘤细胞增殖和血管生成有关。     

Functional activation of EphA5 receptor does not promote cell proliferation in the aberrant EphA5 expressing human glioblastoma U-118 MG cell line

Eph receptors are a subfamily of receptor tyrosine kinases (RTKs), that are activated by ephrin ligands and appear to play important roles in axon guidance and cell migration during development of the nervous system. Over-expression or constitutive activation of Eph receptors has been linked with increased proliferation in various tumours. We have recently described lineage aberrant expression of EphA5 in primary human astrocytomas, glioblastomas and in the human glioblastoma U-118 MG cell line. A role for EphA5 expression in these tumours is not apparent, and we have investigated the cellular effects of EphA5 activation using the human glioblastoma U-118 MG cell line as a model. Immunofluorescent staining demonstrated cell surface expression of EphA5. Activation of the EphA5 receptor using an ephrin-A1 recombinant fusion protein resulted in tyrosine phosphorylation of EphA5 in a time-dependent manner. Exposure of U-118 MG glioblastoma cells to ephrin-A1 did not result in significant spontaneous or FCS-stimulated cell proliferation, though a marginal decrease was observed. This is in converse to the effects of Eph activation in other tumour cell lines, and is the first study to investigate EphA5 in glioblastoma cell lines.     

胶质母细胞瘤组织RBM8A表达与病人预后及替莫唑胺化疗敏感性的关系

目的 探讨胶质母细胞瘤（GBM）组织RNA结合基序8A（RBM8A）蛋白表达与病人预后及替莫唑胺（TMZ）化疗敏感性的关系。方法 选取2015年6月至2020年6月手术切除的GBM组织130例及颅脑损伤减压术中切取的非肿瘤脑组织20例（对照）,用免疫组化法检测组织RBM8A表达。术随访时间3~50个月,中位随访时间为12个月。结果 GBM组织RBM8A高表达率[86.15%（112/130）]明显高于对照组[20%（4/20）;P<0.05]。随访期间死亡98例,失访2例;多因素Cox回归分析显示,RBM8A高表达是GBM病人生存预后不良的独立危险因素（P<0.05）。生存曲线分析显示,RBM8A高表达GBM病人中位无复发生存时间和总生存时间均明显低于低表达病人（P<0.05）;RBM8A低表达GBM病人中,TMZ化疗病人无复发生存时间和总生存时间均明显高于未化疗病人（P<0.05）;TMZ化疗与RBM8A高表达GBM病人无复发生存时间和总生存时间无明显关系（P>0.05）。结论 GBM组织RBM8A呈高表达,与病人不良生存预后有关。检测RBM8A有助于评估GBM病人对TMZ化疗敏感性。     

人脑肿瘤组织块裸小鼠原位移植方法研究及移植瘤的亲本特征分析

目的 用肿瘤组织块直接接种法建立人脑肿瘤裸小鼠原位移植模型,通过分析移植瘤的生物学特征来证明本操作方法 的可行性. 方法 取人肺腺癌脑转移瘤的新鲜组织或人脑多形性胶质母细胞瘤(GBM)裸小鼠皮下移植瘤组织,剪成小块,置入专用套管针,通过事先钻好的颅骨孑孔,徒手推入裸小鼠右尾状核.观察致瘤率、移植瘤的组织细胞形态、相关标志物、MRI图像特征和荷瘤鼠生存期. 结果肺腺癌脑转移瘤和GBM组织在鼠与鼠之间分别传了6代和13代.荷瘤鼠生存期分别为(38.0±0.9)d和(19.0±1.3)d.肺腺癌脑转移瘤移植瘤不向周围正常鼠脑组织侵袭,分泌酸性粘液及表达癌胚抗原等生物学特征与其亲本肿瘤一致:而GBM移植瘤具有向周围正常鼠脑组织高度侵袭及高表达表皮生长因子受体的生物学特征也与其亲本肿瘤一致. 结论 肿瘤组织块直接注入裸小鼠脑内建立的实验动物模型比肿瘤细胞悬液接种方法 相对简易.且移植瘤能更好地保持亲本肿瘤的特征.此法可进一步在各种腩肿瘤动物原位移植实验中推广应用.     

多聚凝胶介导IGF-IR反义寡核苷酸治疗体内胶质瘤的实验研究

目的探讨反义寡核苷酸阻断IGF-IR基因表达对裸鼠移植胶质瘤的抑制作用。方法首先建立胶质瘤裸鼠移植模型,随机分为4组:空白对照组、多聚凝胶组、正义核酸组和反义核酸组,反义核酸组在瘤内注射多聚凝胶包裹的反义寡核苷酸,其他每组均作相应的瘤内注射处理。利用多聚凝胶缓释反义寡核苷酸的作用,观察肿瘤的抑制情况、肿瘤病理和IGF-IR表达结果。结果反义核酸组用反义核苷酸开始治疗后的第1周、第2周和第3周,肿瘤的生长速度明显减慢,与空白对照组相比,抑制率分别为65.2%、76.38%和69.6%;而多聚凝胶组和正义核酸组肿瘤生长速度与空白对照组相比无明显差异,其抑制率在各时间点均低于10%。肿瘤的组织病理发现多聚凝胶组、正义核酸组如同空白对照组(野生型),肿瘤细胞密集分布,呈明显的恶性增殖表现,而反义核酸组肿瘤细胞稀疏,可见部分细胞呈凋亡改变,细胞染色质浓聚边缘化。在空白对照组(野生型)、多聚凝胶组和正义核酸组IGF-IR蛋白均呈高表达,而反义核酸组IGF-IR的表达明显减弱。结论IGF-IR的反义寡核苷酸对体内胶质瘤的生长具有明显的抑制作用,并能诱导部分肿瘤细胞凋亡。因此,IGF-IR可作为胶质瘤基因治疗的靶。     

人脑胶质瘤细胞裸鼠原位移植动物模型的建立

目的探讨人脑胶质瘤细胞裸鼠原位移植动物模型建立的技术方法。方法借助动物立体定向仪的引导,采用微注射方法将体外培养人脑胶质瘤细胞U87MG(悬浮于无血清RPMI 1640培养液中,细胞数为108/ml)接种于裸鼠(BALB/c)额叶白质区。接种后观察不同种实验鼠的生存状态,分别于接种后1 h至63 d的不同时间进行裸鼠脑肿瘤组织病理学检查和免疫组织化学分析。结果裸鼠脑内注射体外培养的人脑胶质瘤细胞U87MG的合适速率为0.05μl/min =1μl/20 min,细胞悬液体积1μl,细胞数105,注射时间20 min。按此方案注射U87MG细胞无沿针道返流,恰好在尾状核区形成近圆球形肿瘤体,成瘤率高(100%),肿瘤颅内生长稳定,组织病理学检查符合人脑胶质瘤形态特征,未见脑外转移。结论本研究的人脑胶质瘤细胞裸鼠原位移植动物模型建立方法精确可靠,重复性好。肿瘤符合人脑胶质瘤的生物学特性,该动物模型可作为研究人脑胶质瘤发生、生物学特性以及各种治疗评价的可靠动物模型。     

Progesterone promotes the survival of newborn neurons in the dentate gyrus of adult male mice

This study investigated the effects of progesterone (P4) on the production and survival of neurons in the hippocampal dentate gyrus of adult male mice. The administration of P4 (4 mg/kg) for 3 consecutive days beginning on the 0–2nd day after the first BrdU‐injection (BrdU‐D_0–2) produced an approximately twofold increase in the number of 28‐ and 56‐day‐old BrdU⁺ cells in comparison to the controls, whereas it did not alter the number of 24/48‐h‐old BrdU⁺ cells. P4 preferentially promoted the survival of newborn neurons when administered at BrdU‐D_5–7, but not at BrdU‐D_10–12 and BrdU‐D_15–17. Androstenedione (Ad), testosterone (TE), or estradiol (E2) at the same‐dose of P4, when administered at BrdU‐D_0–2, could not replicate the effect of P4, while the inhibition of 5α‐reductase by finasteride did not affect the P4‐action, indicating that the P4‐effect is exerted by P4 itself but not by its metabolites. On the other hand, the P4R antagonist RU486 partially suppressed the P4‐effect, while inhibitors for Src, MEK, or PI3K totally suppressed the P4‐effect. Finally, the P4‐enhanced survival of newborn neurons was accompanied by a potentiation of spatial learning and memory, which was P4R‐dependent. These findings suggest that P4 enhances the survival of newborn neurons through P4R and/or the Src‐ERK and PI3K pathways independent of its influence on cell proliferation, which is well correlated with the potentiated spatial cognitive function of P4‐treated animals. © 2009 Wiley‐Liss, Inc.     

Cell Cycle Reentry and Cell Proliferation as Candidates for the Seizure Predispositions in the Hippocampus of EL Mouse Brain

Summary:  We have recently found that there was DNA fragmentation without cell loss in the hippocampus in EL mice, an epileptic mutant. Neurotrophic factors are also expressed at high levels during the early developmental stages. In the present study, we used EL mice to examine how altered cyclin and the corresponding cyclin dependent kinase (CDK) family are related to cell proliferation during development and during epileptogenesis. Developmental changes of cyclin family and corresponding CDK family (cyclin D/CDK-4, cyclin E/CDK-2, cyclin A/CDK-2, cyclin A/CDK-1, cyclin B/CDK-1) were examined by Western blotting in the hippocampus of EL mice and in nonepileptic control animals (DDY mice). In addition, we attempted to quantify cell proliferation during this period. The developmental changes in cell proliferation were determined by using systemic injections of Bromo-deoxyUridine (BrdU) to label dividing cells. As compared with the control DDY mice, EL mice show an upregulation of cell cycle specific Cyclins/CDKs during early developmental stages suggesting that reentry into the cell cycle is enhanced prior to the onset of seizure activity, possibly due to the abundance of neurotrophic factors. These results show that Cyclins/CDKs are activated during early stages of development in an epileptic animal, before the mouse exhibits seizures. These results suggest that reentry of cells into the cell cycle, with consequent cell proliferation in the hippocampus, contribute to the seizure predispositions of EL mice.     

The significance of increase in striatal D(2) receptors in epileptic EL mice

The present study systematically and quantitatively analyzed the immunohistochemical distribution of various substances involved in synthesis, binding, and transport of dopamine in the forebrain of epileptic mice (EL mouse strain) using a brain mapping analyzer. A reduction in serum calcium levels decreases calcium/calmodulin-dependent-dopamine synthesis in the brain and subsequently increases susceptibility to epileptic convulsions and induces abnormal behavior in EL mice. The immunohistochemical levels of D(2) receptors in the medial area of the neostriatum were significantly higher in EL mice than in ddY mice (mother strain of EL mice), while there were no differences in the levels of tyrosine hydroxylase, calcium/calmodulin-dependent protein kinase II, calmodulin, D(1) receptors, and dopamine transporters. Together with our previous findings, the results suggest that the decrease in serum calcium levels and subsequent decrease in brain dopamine synthesis comprise the primary physiologic disorder in EL mice, and convulsions or increased D(2) receptors are secondarily-induced phenomena to improve or compensate for the principal disorder.