香青兰总黄酮对血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞增殖与迁移的影响

目的:研究香青兰总黄酮对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)增殖与迁移的作用。方法:采用贴壁法培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞,以Ang Ⅱ为诱导剂,建立VSMC细胞增殖的模型,分别应用质量浓度为10^-7 mol·L^-1 Ang Ⅱ以及Ang Ⅱ+不同浓度香青兰总黄酮组(25,50,100 mg·L^-1)作用24 h,并设空白对照组进行比较。采用MTT法检测细胞的增殖;transwell法检测细胞的迁移;免疫组化法检测细胞内增殖细胞核抗原(PCNA)的表达水平。结果:与对照组比较,Ang Ⅱ组能显著刺激大鼠VSMC的增殖和迁移,香青兰总黄酮不同剂量组联合Ang Ⅱ可在一定程度上抑制Ang Ⅱ诱导的VSMC增殖,迁移以及细胞内PCNA的表达,且呈现一定的剂量依赖关系趋势。结论:香青兰总黄酮具有抑制Ang Ⅱ诱导VSMC增殖与迁移的作用。     

叶酸抑制同型半胱氨酸诱导大鼠血管平滑肌细胞增殖的研究

目的探讨叶酸抑制同型半胱氨酸致大鼠血管平滑肌细胞增殖的研究。方法培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMC),流式细胞仪检测VSMC周期,[3H]TdR参入测定VSMC的DNA合成。结果同型半胱氨酸以剂量依赖关系使VSMC周期中的G0/G1期细胞比例明显减少,S期细胞比例显著增多,增加VSMC的[3H]TdR参入。叶酸可明显抑制同型半胱氨酸诱导的作用。结论同型半胱氨酸能诱导VSMC增殖,叶酸能抑制同型半胱氨酸诱导的VSMC增殖。     

扇贝裙边糖胺聚糖对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响(英文)

目的　研究扇贝 (Placopectamagellanicus)裙边中提取的糖胺聚糖 (SS GAG)是否如肝素一样抑制血管平滑肌细胞 (VSMC)的增殖。方法　采用胎牛血清和碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)所诱导的大鼠胸、腹主动脉VSMC增殖模型 ,通过细胞计数、结晶紫染色及MTT比色法观察SS GAG对VSMC增殖的影响 ,并运用免疫组织化学技术和计算机图像分析系统检测SS GAG对VSMC的增殖细胞核抗原(PCNA)和血小板衍化生长因子 (PDGF)表达的影响。结果　SS GAG 5 0 ,10 0和 2 0 0mg·L- 1对 2 0 %胎牛血清和 5 0 μg·L- 1bFGF所诱导的VSMC增殖均有明显抑制作用 ,并能抑制VSMC增殖时PCNA和PDGF的表达。结论　SS GAG能抑制VSMC的增殖 ,该作用可能是通过抑制PDGF和PCNA的表达而实现的。     

叶酸抑制同型半胱氨酸诱导大鼠血管平滑肌细胞增殖的研究

目的探讨叶酸抑制同型半胱氨酸致大鼠血管平滑肌细胞增殖的研究。方法培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMC),流式细胞仪检测VSMC周期,[³H]TdR参入测定VSMC的DNA合成。结果同型半胱氨酸以剂量依赖关系使VSMC周期中的G₀/G₁期细胞比例明显减少,S期细胞比例显著增多,增加VSMC的[³H]TdR参入。叶酸可明显抑制同型半胱氨酸诱导的作用。结论同型半胱氨酸能诱导VSMC增殖,叶酸能抑制同型半胱氨酸诱导的VSMC增殖。     

羟基红花黄色素A通过影响PCNA表达和MEK-ERK1/2信号通路抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖

目的探讨羟基红花黄色素A(HYSA)影响增殖细胞核抗原(PCNA)表达和MEK-ERK1/2信号通路抑制血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的分子机制。方法采用贴块法培养大鼠血管平滑肌细胞,用血小板源生长因子(PDGF)诱导其增殖,采用MTT法检测HYSA对平滑肌细胞增殖的抑制作用;采用Western blot和免疫组织化学方法检测HYSA对PCNA表达及对MEK-ERK1/2信号通路的影响。结果HYSA浓度依赖性地抑制PDGF诱导的VSMC增殖,降低PCNA的表达,阻断PDGF受体的激活和MEK/ERK信号通路的活化,但不影响JNK和p38MAPK的活性。结论 HYSA通过降低PCNA表达和阻断MEK-ERK1/2信号通路抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖。     

选择性钠-氢交换抑制剂HOE642抑制血管平滑肌细胞增殖

采用家兔主动脉贴块培养法培养血管平滑肌细胞 (VSMC) .用 15 %小牛血清刺激VSMC增殖 .运用双盲法细胞计数和 [3H]TdR参入法检测平滑肌细胞的增殖 ,观察选择性钠 氢交换蛋白 (NHE 1)抑制剂HOE 6 4 2 (3 甲磺酰基苯甲酰胍 4 甲磺酸异丙酯 )对VSMC增殖作用的影响 .结果显示 ,选择性钠 氢交换抑制剂HOE 6 4 2能显著抑制 15 %小牛血清刺激的VSMC的增殖 ,2 0 μmol·L- 1HOE 6 4 2抑制VSMC增殖程度达 6 0 % .其抑制作用呈剂量依赖性     

阿托伐他汀对肌细胞增强因子2A基因突变型血管平滑肌细胞的作用

目的 观察阿托伐他汀对肌细胞增强因子2A (MEF2A)基因突变型血管平滑肌细胞(VSMC)的作用.方法 将人主动脉血管平滑肌细胞分为3组:①WT组,转染野生型(WT) MEF2A质粒;②△21组,转染21碱基缺失突变型(△21) MEF2A质粒;③阿托伐他汀组,转染MEF2A△21质粒,并在实验前向该组细胞培养基中加入阿托伐他汀溶液至终浓度100 μmol·L-1.通过溴化噻唑基蓝四唑(MTT)法和Millicell小室观察VSMC的增殖和迁移变化,免疫印迹(Western blotting)检测VSMC内平滑肌α肌动蛋白、SM22α、骨桥蛋白、p38和ERK1/2丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)信号通路表达差异.结果 MEF2A基因△21突变可促进VSMC增殖、迁移和表型转化.而阿托伐他汀可抑制这些变化,并且明显下调磷酸化p38和ERK1/2信号通路表达.结论 阿托伐他汀通过作用于p38和ERK1/2 MAPK信号通路,以抑制MEF2A基因突变诱导的VSMC增殖、迁移和表型转化.     

丹参酮ⅡA对血管紧张肽Ⅱ诱导增殖的 大鼠血管平滑肌细胞中c-fos与c-myc的影响

［摘要］目的探讨丹参酮ⅡA对血管紧张肽Ⅱ（AngⅡ）诱导的大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的影响及其机制。方法分离大鼠胸主动脉中层平滑肌，贴壁法培养平滑肌细胞，建立AngⅡ诱导的VSMC增殖模型；以四甲基偶氮唑蓝（MTT）法观察丹参酮ⅡA对VSMC增殖的影响；流式细胞仪检测药物对细胞周期的影响；应用免疫细胞化学方法观察原癌基因c fos和c myc表达水平的变化。结果成功建立AngⅡ诱导的VSMC增殖模型；随着丹参酮ⅡA浓度增加，VSMC增殖活性呈明显下降趋势（P＜0.05）；流式细胞术结果显示丹参酮ⅡA使VSMC G0/G1期比例升高（P＜0.01），S期比例下降（P＜0.01）;丹参酮ⅡA各组随着浓度的增加，VSMC中c fos和c myc表达水平显著下降（P＜0.05）。结论丹参酮ⅡA具有抑制血管平滑肌细胞增殖的作用，并呈浓度依赖性。其机制可能与丹参酮ⅡA下调VSMC中c fos及c myc表达水平有关。     

萘哌地尔衍生物YMⅢ对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响及其机理研究

目的：本实验旨在观察萘哌地尔衍生物YMⅢ对体外培养的自发性高血压大鼠（SHR）及Wistar大鼠胸主动脉平滑肌细胞（VSMC）增殖的影响，为该药的开发研究提供基础资料。方法：（1）将SHR及Wistar大鼠胸主动脉平滑肌细胞进行体外培养，以SHR胸主动脉平滑肌细胞为研究对象，以Wistar大鼠作对照。（2）应用四甲基偶氮唑盐（MTT）微量酶反应法检测细胞增殖活性；real-time PCR技术检测其对Agt、     

血管紧张素Ⅱ与血管平滑肌细胞中自噬水平的关系及机制研究

目的研究血管紧张素 Ⅱ(Ang Ⅱ)是否能够引起血管平滑肌细胞( VSMC)自噬,探讨其相关作用机制。方法以 VSMC为研究对象,设立组别分别为空白组、 Ang Ⅱ组、自噬抑制剂( 3?MA)组、自噬促进剂雷帕霉素( Rap)组、血管紧张素 Ⅱ(AT1)受体抑制剂( ARB)组、 3?MA+Ang Ⅱ组、 Rap+Ang Ⅱ组、 ARB+Ang Ⅱ组,采用四唑盐( MTT)比色法检测细胞存活率,蛋白质免疫印迹法检测自噬相关蛋白脂化和膜相关蛋白( LC3 Ⅱ)表达的变化,免疫荧光法检测自噬小体数目的变化。结果实验中空白组吸光度为( 0.159±0.001)Ang Ⅱ组吸光度为( 0.151±0.003),相比空白组,加入 Ang Ⅱ药物对细胞存活率变化不明显,差异无统计学意义(P＞0.05)。蛋白,质免疫印迹结果显示加入 Ang Ⅱ促进 VSMC的 LC3?Ⅱ表达量增多,呈现时间依赖性、浓度依赖性,表明 Ang Ⅱ促进 VSMC自噬发生。 3?MA对 Ang Ⅱ(10-7 mol/L,24 h)引起的 LC?3Ⅱ表达量增多起到抑制作用, Rap对 AngⅡ(10-7 mol/L,24 h)引起的 LC?3Ⅱ表达量增多起到叠加作用。 ARB对 Ang Ⅱ(10-7 mol/L,24 h)引起的 LC?3Ⅱ表达量增多起到抑制作用,表明自噬是由 Ang Ⅱ通过 ATI受体引起的。结论 Ang Ⅱ通过 AT1受体引起血管平滑肌细胞发生自噬。