小鼠精原干细胞系自我更新和分化能力的体外观察

目的:体外观察小鼠精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)的自我更新和分化能力?方法:体外构建稳定的小鼠SSCs系,利用EdU细胞增殖分析试剂盒检测小鼠SSCs体外自我更新的能力;利用活细胞工作站进一步观察小鼠精原干细胞体外增殖现象;运用TUNEL法检测SSCs凋亡现象;通过维甲酸(retinoic acid,RA)诱导小鼠SSCs,观察其体外分化的能力?结果:EdU孵育小鼠SSCs 2 h后,流式检测细胞增殖率平均为40.75%;活细胞工作站下可见正在分裂的干细胞;TUNEL检测显示干细胞中凋亡信号很少;RA诱导后,标记SSCs分化的基因(C-kit?Scp3和 Stra8)表达量明显升高(P < 0.05)?结论:稳定构建的小鼠 SSCs系与体内的SSCs类似,具有较强的自我更新以及细胞分化能力,为下一步开展精原细胞相关基因和蛋白功能研究提供了良好的技术平台?     

单细胞转录组测序技术在人精原干细胞研究中的应用

精原干细胞的自我更新、增殖与分化对于维持精子发生至关重要。然而,调控这一过程的分子机制尚未完全阐明。精原干细胞具有不同细胞亚型,其在精子发生过程中扮演不同角色。单细胞转录组测序技术提供有效的手段,揭示各精原细胞亚型及其转录组水平和生物学功能变化,为精原干细胞的分子机制研究提供新思路。     

大鼠胚胎大脑皮层源性神经干细胞体外培养及增殖分化特点

目的 建立大鼠胚脑皮层神经干细胞体外培养及鉴定技术,探讨其增殖分化特性,为应用神经干细胞移植治疗神经疾病提供基础。方法 采用含有丝分裂源表皮生长因子(EGF)的无血清培养基培养SD大鼠孕14．5d的胚胎大脑皮层神经干细胞,应用免疫细胞化学方法了解其增殖分化特性;以单细胞克隆实验及BrdU免疫标记证实神经干细胞自我增殖能力。结果 培养细胞在EGF作用下可分裂增殖,并表达神经干细胞特异性抗原nestin,分化细胞MAP2及GFAP抗原表达阳性。结论 SD大鼠胚脑皮层可分离培养出神经干细胞;并具有增殖、自我更新能力和多向分化潜能特性。     

干细胞分化调控机制研究的新进展

干细胞是一类具有自我更新、高度增殖和多向分化潜能的细胞，理论上具有无限分裂能力，在特定条件下，可分化成特定组织。如下图所示：     

生精细胞的体外培养

目的：在体外培养中,观察精原细胞的增殖、分化和形态变化规律。方法：用胶原酶、透明质酸酶和胰蛋白酶分次消化法制取睾丸组织的细胞悬液．密度梯度离心法富集生精细胞,贴壁培养后观察生精细胞的存活、分裂和形态变化,并行Annexin V—FITC／PI染色,采用激光共聚焦扫描显微镜检测细胞的凋亡情况。结果：睾丸组织细胞悬液中的体细胞在培养中较早贴壁,胞质形成多个突起;精原细胞贴壁较迟．贴壁后呈规则的圆形或卵圆形,以链状或团块状位于体细胞层之上,细胞分裂不完全,相互间以细胞间桥相连。Annexin V—FITC／PI染色显示,培养第2天时精原细胞已出现凋亡,但数量极少,后逐渐增多。结论：在本实验所提供的体外培养条件下,精原细胞能够存活并发生贴壁、分裂、分化等行为,但同时也有细胞凋亡。     

表皮干细胞研究进展

干细胞是来自于胚胎、胎儿或成体内具有在一定条件下无限制自我更新与增殖分化能力的一类细胞,能够产生表现型与基因型和自己完全相同的子细胞,也能产生组成机体组织、器官的已特化的细胞,同时还能分化为祖细胞[1].皮肤外层的表皮终身不断自我更新,其基底部的干细胞持续增殖分化以取代外层终末分化细胞,外层细胞的死亡脱落与基底干细胞的分裂维持动态平衡,从而维持正常的组织结构[2].在创伤与烧伤等损伤情况下,表皮干细胞发挥增殖分化潜能,完成损伤的修复.有关表皮干细胞的研究已逐渐成为皮肤损伤后愈合过程的中心环节.在形态学上,表皮由外向内分别由角质层、透明层、颗粒层、棘层和基底层组成;其中基底层又称为生发层,由单层柱状上皮组成,呈栅状排列于基膜带上,邻接真皮.根据细胞动力学分析,在表皮中有三种细胞:干细胞、短暂扩充细胞和终分化细胞,只有干细胞在体外培养能形成完全克隆.现就表皮干细胞的研究作一综述.     

精原干细胞移植及其相关研究进展

睾丸功能有赖于精原干细胞持续不断的增殖，这些细胞紧贴于曲细精管基膜，埋嵌在支持细胞间，经过同源性扩增形成分化型精原细胞链，分化形成的精母细胞经过两次减数分裂形成精子细胞，后者经过变态过程最后形成成熟的精子。在整个精子发生过程中，精原干细胞在所有生殖细胞类型中展现出巨大的细胞群扩增能力。另外，DNA在复制和减数分裂的过程中，很可能会出现DNA缺失，     

4例异体骨髓间充质干细胞和外周血造血干细胞联合移植治疗白血病的护理

造血干细胞(HSC)是来源于红骨髓．能自我更新,有较强分化发育和再生能力．可以产生各种类型血细胞的一类细胞。而骨髓间充质干细胞(BM-MSC)是不同于HSC的另一类骨髓干细胞．具有分裂、增殖、分化形成多种间质细胞潜能,在骨髓中它是造血间质细胞的来源．通过胞体接触和分泌多种造血因子．为HSC的分裂、增殖、分化提供适合的微环境。外周血造血干细胞移植(PBSCT)已广泛用于临床,     

海马神经干细胞的分化特征及鉴定

目的从新生SD大鼠海马分离、培养并鉴定神经干细胞.方法分离新生SD大鼠海马组织,经机械吹打后,加入含有20 ng/mL的b-FGF以及B27的DMEM/F12无血清培养基悬浮培养具有自我更新和多向分化能力的细胞群,7 d后将一部分细胞固定并采用免疫细胞化学技术检测这些细胞中神经上皮干细胞巢蛋白(Nestin)的表达;另一部分细胞加入含10%小牛血清的DMEM/F12培养基使其贴壁分化生长7 d后固定并检测特异性成熟神经元抗原Tuj1以及星形胶质细胞抗原GFAP,少突胶质细胞抗原Galc的表达.结果从海马分离的细胞群具有自我更新能力,表达神经上皮干细胞特异性巢蛋白,它们分化成熟后可以表达神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的特异性抗原.结论从新生SD大鼠海马分离出具有自我更新能力和多向分化潜能的神经干细胞群,它们有很强的分裂、增殖能力,是中枢神经系统的干细胞.     

角膜上皮干细胞的研究进展

机体所有能自我更新的组织中都有干细胞的存在。干细胞是成熟机体中具有多潜能的细胞 ,能自我维持 ,细胞周期长 ,能进行不对称的细胞分裂 ,缺乏分化特性 ,形态和生化处于原始幼稚阶段 ,是细胞自我更新和增殖的源泉。角膜上皮也存在干细胞。目前对角膜上皮干细胞的研究日益深入 ,其研究结果在基础研究和临床应用中具有重要作用。1　角膜上皮干细胞的定位早在 1971年 ,Ｄａｖａｎｇｅｒ等[1 ] 观察到角膜上皮有向角膜中央做向心性运动的特性 ,于是提出了存在角膜上皮干细胞的假说。 1986年Ｓｃｈｅｍｅｒ等[2 ] 首次实验证明角膜上皮干细胞位…     

体外培养的嗅上皮神经干细胞具有多潜能性

目的:探讨成体嗅上皮神经干细胞(olfactory epithelium neural stem cells)的培养方法及其体外分化的多潜能性。方法:使用中性蛋白酶和Ⅰ型胶原酶分阶段酶解消化嗅上皮,富集嗅上皮神经干细胞,扩增细胞,用加入生长因子bFGF和EGF的无血清培养液促使其形成神经球。血清诱导神经球分化并用免疫细胞化学染色方法鉴定分化细胞。结果:原代培养的嗅上皮神经干细胞呈集落样增殖,集落中的细胞表达在体分子标记GBC2和细胞角蛋白5。传代细胞用含生长因子的无血清培养液培养可增殖形成神经球。用含血清的培养液可诱导神经球分化;从神经球迁移出的分化细胞具有很高的异质性,其中包含有TUJ1阳性的神经元、P75NGFR阳性的嗅鞘细胞、GFAP阳性的星形胶质细胞和NG2阳性的寡突胶前体细胞,同时也存在有nestin阳性的神经干细胞。结论:成体嗅上皮神经干细胞可体外培养增殖形成神经球,神经球细胞具有向神经元、星形胶质细胞和寡突胶前体细胞分化的潜能。     

肿瘤干细胞研究进展

干细胞（stem cell）是一类具有自我更新能力和多向分化增殖潜能的原始细胞,包括胚胎干细胞（embryonic stem cell,ES）、成体干细胞（adult stem cell）。研究发现肿瘤细胞与干细胞都具有无限增殖和分化潜能的特点,而且还存在相似的调节自我更新的信号通路。人们提出了肿瘤干细胞（cancer stem cells）学说,认为肿瘤组织中存在极少量肿瘤细胞,具有自我更新能力和分化潜能,是肿瘤增殖生长、转移和复发的根源,而其他的大多数肿瘤细胞,并不具有这种能力。     

肠道干细胞

肠道陷窝干细胞的持续增殖、分化对于促进肠道损伤后结构与功能的完全修复意义重大。自我更新是干细胞的基本特点。一般认为陷窝有多个干细胞，这些干细胞之间存在竞争，占优势的干细胞迅速分裂、增殖，使陷窝表现为单克隆性。干细胞位于陷窝的底部，根据抗损伤能力的不同可以分为三级结构。干细胞的周期较长，通常进行非对称性分裂，在损伤后发生对称性分裂。各种细胞因子、生长因子和细胞外基质分子可以通过不同方式影响干细胞的功能。     

circSEC31A调控miR-324-5p对脂肪干细胞增殖、凋亡和成骨分化的影响

目的 探讨环状非编码RNA SEC31A(circSEC31A,又名hsa_circ_0006618)对脂肪干细胞增殖、 凋亡和成骨分化的影响和机制.方法 在脂肪干细胞中分别转染sh-circSEC31A和LV-circSEC31A后,细胞增殖采用CCK8法检测;细胞凋亡采用流式细胞仪检测;circSEC31A和miR-324-5p靶点结合情况采用双荧光素酶测定法检测;成骨分化相关分子RUNX2和OPN的mRNA和蛋白水平分别采用Western blot和RT-qPCR检测.结果 在脂肪干细胞中转染sh-circSEC31A后能够明显抑制细胞的增殖和成骨分化相关分子RUNX2、OPN的表达水平(P<0.05),促进细胞的凋亡(P<0.05).在脂肪干细胞中转染LV-circSEC31A后能够明显促进细胞的增殖和成骨分化相关分子RUNX2、OPN的表达水平(P<0.05),抑制细胞的凋亡(P<0.05).双荧光素酶结果 显示circSEC31A能够靶向结合miR-324-5p(P<0.05).回复实验显示,在脂肪干细胞中共转染LV-circSEC31A和miR-324-5p mimics后能够反转单独转染LV-circSEC31A对脂肪干细胞增殖、凋亡和成骨分化的影响;共转染LV-circSEC31A和miR-324-5p inhibitors后能够进一步加强单独转染LV-circSEC31A对脂肪干细胞增殖、 凋亡和成骨分化的影响.结论 circSEC31A能够通过靶向调控miR-324-5p参与脂肪干细胞增殖、 凋亡和成骨分化,circSEC31A可能成为干预脂肪干细胞生物学功能的靶点.     

干细胞的研究及其在临床上的应用

干细胞是一群较原始的细胞,他们具有极强的自我更新能力及多项分化潜能.在特定条件下,干细胞即可对称分裂为二个新的子代干细胞或二个功能细胞,也可不对称分裂为一个子代干细胞和一个功能细胞,从而使组织和器官保持生长和衰退的动态平衡.     

神经干细胞研究进展

神经干细胞是具有自我更新和多向分化潜能等特性，可在细胞因子等各种信号调节下最终分化为神经元和神经胶质细胞。神经干细胞特性已经显示了它在临床上治疗神经退行性疾病或其它疾病具有诱人的应用前景。目前对神经干细胞的增殖、分化、来源的研究已经取得了一定的进展，但临床上应用还处于摸索阶段。     

干细胞治疗神经系统疾病的研究进展

<正>干细胞是一类未分化的具有高度自我更新和多向分化潜能的细胞,包括胚胎干细胞和成体干细胞胚胎干细胞是全能性、无限增殖的干细胞,具有形成所有类型细胞的潜能,包括胚胎干细胞、胚胎生殖干细胞;成体干细胞包括神经干细胞、造血干细胞、骨髓间充质干细胞、表皮干细胞等,成体干细胞具有自我更新和分化为组织特异细胞的能力,即分化为相应组织和器官中细胞的专能细胞,它是存在于人体组织中的多潜能干细胞。按其分化潜能的大小,干     

角膜缘干细胞培养后移植的研究进展

角膜上皮具有自我更新的能力。为保持上皮的完整性．其表层细胞不断更新，基底层细胞不断增殖以取代脱落细胞。1986年Schimer等通过研究首次明确指出角膜缘干细胞位于约1．5mm的角膜缘环形区域内的上皮细胞基质层内。此处的Vogt栅栏内的网状嵴上皮被认为是干细胞储存所。研究表明，角膜缘干细胞是角膜上皮细胞增殖、分化和移行的源泉。角膜缘缺损或角膜干细胞的丧失将导致角膜表面顽固的     

小生境与神经干细胞相互作用研究进展

神经干细胞的自我更新和分化成神经系统有赖于神经干细胞小生境。而成人脑干细胞小生境的成分已被确定：神经干细胞、基质细胞、细胞外基质、基底膜、可溶性因子、脉管系统等。小生境中的细胞之间相互交流、转换,不断地实时感知和响应。促进神经干细胞的增殖和分化。脉管系统是成体脑室下带神经干细胞小生境的重要成分。细胞外基质通过调节黏着性和迁移能力等方面来调节神经干细胞的形态、增殖和分化。     

胚胎大鼠中枢神经系统神经干细胞的分离培养与观察

目的建立神经干细胞分离、培养、分化鉴定技术,观察神经干细胞增殖、分化特点.方法利用无血清培养和细胞克隆培养技术,从胚胎大鼠海马、纹状体、脊髓等区分离神经干细胞,进行体外扩增培养、传代、贴壁分化观察.采用免疫细胞化学、透射电镜检测技术,观察鉴定神经干细胞和分化的神经细胞.结果从胚胎大鼠海马、纹状体、脊髓等区分离的细胞具有增殖能力,可进行传代培养,获得的细胞克隆中有nestin表达阳性细胞,透射电镜观察见典型的干细胞特征和不对称分裂现象.贴壁分化后可以出现MAP2、NSE、GFAP和GC表达阳性的细胞.结论用上述方法分离培养的神经干细胞具有自我更新和增殖能力,并具有向神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞分化的潜能.