标本的处理对PCR检测结核杆菌结果的影响

目的:应用核酸纯化法处理结核标本在PCR中的价值.方法:从12例诊断为活动性肾结核的病人处,收集尿液标本,分别用核酸纯化法与常规法处理尿液标本.两种处理方法用定量PCR与定性PCR各重复做3次扩增,分析其结果.结果:用核酸纯化法处理的标本,定量PCR检出率为91.67 %(11/12)CV(0.3413),定性PCR检出率为83.33 %(10/12).用常规法处理的标本,定量PCR检出率为75 %(9/12)CV(0.7438),定性PCR检出率为50 %(6/12).经配对χ2检验核酸纯化法与常规法对结核杆菌PCR检出率差异有显著性P<0.05.结论:在结核标本的前处理时,必须要进行核酸纯化,减少标本中的抑制物,可提高结核杆菌PCR的检出率,对结核病的诊断治疗起着非常重要的作用.     

荧光定量PCR法在结核杆菌检测中的价值

目的探讨荧光定量PCR法检测技术在结核病诊断中的价值。方法采用荧光定量PCR法和抗酸染色法同时检测231例结核患者体液标本(121例痰标本、67例胸腹水及43例尿液标本),对检测结果进行比较。结果荧光定量PCR法的检测灵敏度为102Copy/ml,是抗酸染色法方法检测灵敏度100倍,且对除结核杆菌外的其他呼吸道病原体检测结果均为阴性。本研究痰标本、胸腹水标本及尿液标本的荧光定量PCR法阳性率均要高于抗酸染色法阳性率,比较差异均有显著性(﹤0.01)。结论荧光定量PCR方法检测结核杆菌具有特异性强、灵敏度高、简便、快速的特点,明显优于抗酸染色法,可作为结核病诊断的常规方法。     

核酸体外扩增技术诊断骨结核病的临床研究及应用价值

目的 :探讨核酸体外扩增 (polymerasechainreaction ,PCR )技术在骨结核病诊断与鉴别诊断中的应用价值。方法 :对 6 0例骨结核病标本与 30例非骨结核病标本分别进行核酸体外扩增技术 ,抗酸染色镜检及结核杆菌分离培养法检测结核杆菌 ,分析影响核酸体外扩增技术结果的相关因素及处理方法。结果 :骨结核标本结核杆菌检出阳性率 :PCR法 83%,抗酸染色镜检法 3%,培养法 7%。非骨结核标本结核杆菌检出阳性率 :PCR法 10 %,其他方法均未检出 ,经统计学处理P <0 .0 0 5 ,PCR法与镜检法及培养法相比较差异具有显著性。结论 :PCR技术是一种快速、敏感、简便、特异的检测骨结核标本结核杆菌的方法 ,明显优于镜检法及培养法 ,在骨结核的诊断与鉴别诊断中有重要价值。     

聚合酶链反应-微孔板杂交技术检测临床标本中结核分枝杆菌

目的评价聚合酶链反应 (PCR) -微孔板杂交技术检测临床标本中结核分枝杆菌的价值。方法 :应用结核病细菌学涂片、培养常规检测方法及PCR -微孔板杂交技术检测 138例结核病患者痰标本 ,4 2例非结核呼吸系统疾病患者痰标本。结果 :用常规细菌学方法检测临床标本中结核杆菌敏感度为 37% (5 1/ 138) ,用PCR-微孔板杂交技术检测敏感度为 5 6 % (77/ 138) ,高于常规检测法 19%。用PCR -微孔板杂交技术检测临床标本特异性为 10 0 %。结论 :PCR -微孔板杂交技术将PCR扩增、核酸杂交的技术及酶免技术相结合 ,简便、快速、敏感度高、特异性强 ,是结核病辅助诊断的有效方法之一。     

聚合酶链反应法与结核抗体法对结核杆菌检测的比较

目的比较聚合酶链反应(PCR)法与结核抗体法对结核杆菌检测的结果.方法选取活动性肺结核病人124例,其他疾病患者55例,健康对照50例,用PCR法对各组的痰标本进行DNA的检测,用抗结核菌抗体测试卡(ICT-TB卡)和免疫金渗滤法(DIGFA)两种方法分别对各组的血清标本进行结核抗体的检测.结果PCR法与结核抗体法对结核杆菌检测的结果无显著性差异.结论PCR法与结核抗体法对结核杆菌的检测各有优缺点,联合使用可提高结核杆菌的阳性检出率.     

荧光定量PCR和抗酸染色在联合诊断结核病及其疗效考核中的应用

目的探讨荧光定量PCR法和抗酸染色检测技术在结核病联合诊断中的价值。方法对89例临床确诊的结核病患者和22例非结核呼吸系统疾病患者的痰标本同时应用荧光定量PCR法和痰涂片抗酸染色法检测结核杆菌,并检测外周血血清结核抗体,对3种检测方法的结果进行分析比较。结果治疗前后荧光定量PCR阳性率为60.67%、25.84%,涂片抗酸染色法阳性率为23.60%、6.74%,结核抗体阳性率为71.91%和86.51%。痰标本的荧光定量PCR法阳性率均要高于抗酸染色法阳性率,比较差异有统计学意义（P〈0.01）。结论荧光定量PCR技术对肺结核诊断方面灵敏度和特异性较高,同时反映抗结核治疗过程中痰标本中结核杆菌数量的变化,不仅提高了结核菌检出的阳性率,同时对抗结核药物有一定的疗效考核效果。     

定量PCR结合混合标本检测献血者HCV-RNA

目的:探讨应用核酸扩增技术(NAT)定量检测献血者混合标本方法的可行性。方法:用荧光定量PCR法检测38例抗-HCV阳性标本、3 274例抗-HCV阴性标本及二者随机抽样组成的混合标本的HCV-RNA含量。结果:在38例抗-HCV阳性标本中有15例核酸检测阳性,两者阳性符合率39.5%(15/38)。15例双阳性标本与抗-HCV阴性标本混合检测核酸,仍为阳性。常规血清学检测阴性的标本NAT检测为阴性。结论:定量PCR检测HCV-RNA的方法适用于献血者的筛查。     

结核病实验室快速诊断方法的研究

目的:应用BACTEC TB 960快速培养法、ELISA、荧光定量PCR法检测痰标本中结核分枝杆菌,评价三种方法在结核病实验室快速诊断方法中的作用和地位。方法:对735例临床确诊的结核病患者和100例非结核呼吸系统疾病患者的痰标本应用荧光定量PCR法和BACTEC TB 960快速培养法检测,并分离患者外周血血清检测结核抗体,对3种检测方法的结果进行分析比较。结果:BACTEC TB 960快速培养法检测结核杆菌阳性率为30%,特异性为100%;血清结核抗体检测阳性率为55%特异性为75%;荧光定量PCR检测阳性率为48.6%,特异性为100%。结论:荧光定量PCR是一种快速、防污染、敏感性高、特异性强的结核分枝杆菌辅助诊断方法,在临床上有重要应用价值。     

取合酶链反应法与结核抗体法对结核杆菌检测的比较

目的：比较聚合酶链反应（PCR）法与结核抗体法对结核杆菌检测的结果。方法：选取活动性肺结核病人124例,其他疾病患者55例,健康对照50例,用PCR法对各组的痰标本进行DNA的检测,用抗结核菌抗体测试卡（ICT－TB）和免疫金渗滤法（DIGFA）两种方法分别对各组的血清标本进行结核抗体的检测。结果：PCR法与结核抗体法对结核杆菌检测的结果无显著性差异。结论：PCR法与结核抗体法对结核杆菌的检测各有优缺点,联合使用可提高结核杆菌的阳性检出率。     

荧光定量PCR检测结核分枝杆菌

目的比较荧光定量PCR与抗酸染色、结核抗体检测结核分枝杆菌的灵敏度和特异性,评价荧光定量PCR检测临床标本中结核杆菌的应用价值。方法对48例临床确诊的结核病患者和21例非结核呼吸系统疾病患者的痰标本应用荧光定量PCR法和痰涂片抗酸染色法检测,并分离患者外周血血清检测结核抗体,对3种检测方法的结果进行分析比较。结果抗酸染色法检测结核杆菌阳性率为22.9%,特异性为100%;血清结核抗体检测阳性率为77.1%特异性为85.7%;荧光定量PCR检测阳性率为52.1%,特异性为100%。结论荧光定量PCR是一种快速、防污染、敏感性高、特异性强的结核分枝杆菌辅助诊断方法,在临床上有重要应用价值。     

荧光定量PCR技术在结核杆菌检测中的初步探讨

目的:探讨荧光定量PCR技术在结核病诊断中的价值。方法:应用荧光定量PCR技术对我院102例门诊及住院病人的痰、胸腔积液、尿等标本进行结核杆菌DNA检测,同时涂片镜检与培养,并对3种方法检测的阳性率进行比较。结果:荧光定量PCR阳性率为48%、涂片抗酸染色法阳性率为15%、结核培养法阳性率为14%。结论:荧光定量PCR技术较传统方法具有较高的敏感性与特异性,尤其对涂片染色与结核培养阴性的结核病具有更大的诊断价值。     

荧光定量PCR技术在结核分枝杆菌检测中的应用

目的 探讨荧光定量PCR(FQ-PCR)在结核分枝杆菌检测中的价值.方法 收集患者痰液、灌洗液、胸水和尿液等标本,分别作涂片检测(萋纳染色和荧光染色)和FQ-PCR检测,比较两者的阳性率.结果 169例标本中,萋纳染色阳性共7例(4.1%),38例疑似标本中荧光染色阳性共15例,FQ-PCR检测结核分枝杆菌 DNA阳性共17例(10.1%),FQ-PCR与荧光染色符合率为88.2%.结论 涂片检查结核分枝杆菌阳性率较低,FQ-PCR法检测结核分枝杆菌 DNA阳性率高于涂片法,可列入结核分枝杆菌实验诊断的常规项目.     

荧光定量PCR技术在结核分枝杆菌检测中的应用

目的探讨荧光定量PCR(FQ-PCR)在结核分枝杆菌检测中的价值。方法收集患者痰液、灌洗液、胸水和尿液等标本,分别作涂片检测(萋纳染色和荧光染色)和FQ-PCR检测,比较两者的阳性率。结果169例标本中,萋纳染色阳性共7例(4.1%),38例疑似标本中荧光染色阳性共15例,FQ-PCR检测结核分枝杆菌DNA阳性共17例(10.1%),FQ-PCR与荧光染色符合率为88.2%。结论涂片检查结核分枝杆菌阳性率较低,FQ-PCR法检测结核分枝杆菌DNA阳性率高于涂片法,可列入结核分枝杆菌实验诊断的常规项目。     

荧光定量PCR在结核分枝杆菌快速诊断中的研究

目的 在痰液标本中,探讨荧光定量PCR技术快速检测结核分枝杆菌应用的诊断价值。方法 选取210例初诊的疑似结核病患者的痰液标本,分别进行痰涂片、MGIT960液体培养以及荧光定量PCR的检测,其中103例标本还进行了Xpert MTB/RIF检测,通过比较来分析荧光定量PCR在检测结核分枝杆菌方面的敏感度和特异性。结果 荧光定量PCR方法从痰液中检出结核分枝杆菌的阳性率高达28%,显著高于痰涂片15.2%的检出率,并且与结核培养的30.9%检出率相接近。以MGIT960液体培养为金标准,荧光定量PCR方法检测痰液标本中的结核分枝杆菌的敏感度和特异度分别为67.7%、 89.7%,阳性预测值和阴性预测值分别为74.6%和86.1%,两者之间差异没有统计学意义。将荧光定量PCR方法与Xpert MTB/RIF诊断方法相比较,分析发现荧光定量PCR方法的敏感度和特异度分别为85.9%、94.9%,阳性预测值和阴性预测值分别为96.5%和80.4%,两者之间差异没有统计学意义。结论 荧光定量PCR方法在检测结核分枝杆菌时具有较好的敏感度和特异度,效果优于传统的痰涂片方法,并且与Xpert MTB/RIF方法具有较好的一致性。荧光定量PCR检测成本较低,且结果准确,在快速检测结核菌方面具有比较好的应用前景。     

PCR反向膜杂交技术检测临床标本中结核分支杆菌的临床意义

目的探讨聚合酶链反应(PCR)反向膜杂交技术检测临床标本中结核分支杆菌(TB)DNA的价值.方法用PCR反向膜杂交技术检测522例结核及60例非结核患者临床标本中的TB-DNA,同时用培养、抗酸染色涂片及常规PCR法作对照.结果PCR反向膜杂交法阳性率为80.6%(556/690),培养为18.1%(125/690),镜检为13.9%(96/690),常规PCR为59.6%(411/690),PCR反向膜杂交法与常规法比较(P＜0.001),差异具显著意义.PCR反向膜杂交法阳性检出率高于常规PCR,差异具显著意义(P＜0.001);该技术假阳性为零.结论PCR反向膜杂交技术检测临床标本中TB-DNA具有快速、高度特异性和敏感性,可为结核病的临床早期诊断提供一种新的病原学诊断手段.     

两种HBV—DNA核酸提取法对荧光定量PCR结果的影响

目的比较免核酸提取法与煮沸裂解法对HBV—DNA提取后荧光定量PCR检测结果的影响。方法用两种前处理方法不同的试剂盒检测7．0×102～7．0×107IU／ml的HBV—DNA阳性标准品和84例临床小三阳患者血清,对结果进行重复性、相关性分析。并计算两种方法对低浓度HBV—DNA值的阳性检出率。结果阳性标准品HBV—DNA浓度大于103IU／ml样本的均值两种方法比较,相关性良好（线性相关,r=0．993）,CV比较发现,免核酸提取比煮沸裂解的CV要小。临床小三阳患者84例HBV—DNA浓度在1酽～103IU／ml的标本,免核酸提取法阳性检出率为25％高于煮沸裂解法的11．9％（P=0．015）。结论免核酸提取法操作简单,结果稳定可靠,线性范围宽,有益于乙肝病毒感染窗口期的早期诊断。     

荧光定量PCR分析法在结核病诊断中的应用

目的 探讨荧光定量PCR(FQ-PCR)技术检测结核分枝杆菌的临床应用。方法 采用FQ-PCR技术检测145例标本，并与培养法、抗酸染色法和PCR-电泳法进行比较。结果 在115例来自结核病人的高度怀疑有结核分枝杆菌的标本中，FQ-PCR法检出阳性为53例，其检出率高于PCR-电泳法检出率(48／115)、培养法检出率(43／115)和抗酸染色法检出率(31／115)，30例非结核病病人标本，四种方法均未检出结核分枝杆菌。FQ-PCR法的阳性检出最低值为10^3拷贝／ml，PCR-电泳法为10^4拷贝／mL。结论 FQ-PCR技术是高度灵敏、高度特异的快速定量检测结核分枝杆菌方法。     

结核分枝杆菌DNA检测在肺部疾病患者临床诊断及治疗中的指导意义

目的:探讨结核分枝杆菌DNA检测在临床诊断及治疗中的指导意义。方法:选取肺部疾病患者1 000例,收集患者胸膜炎的胸水标本与咳痰标本,根据患者临床症状及涂片检测等结果将1 000例患者分为初治涂阳肺结核组(271例),初治涂阴肺结核组(265例),肺外结核组(266例)和肺部其他疾病组(198例)。另随机抽取医院80例医护人员的健康血样标本设为正常对照组。所有研究对象均采取双盲法诊断PCR扩增与ABI-7500仪器荧光检测结核分枝杆菌DNA定量。结果:271例初治涂阳肺结核组患者阳性检出率为85.98%,特异性96.25%,检测敏感性85.98%,阳性预测值98.73%,阴性预测值66.96%;265例初治涂阴肺结核组患者结核杆菌DNA阳性检出率为41.89%,特异性96.25%,检测敏感性41.89%,阳性预测值97.37%,阴性预测值33.33%;266例肺外结核组患者结核杆菌DNA阳性检出率为33.83%,特异性96.25%,检测敏感性33.83%,阳性预测值96.77%,阴性预测值30.43%。结论:采用结核分枝杆菌DNA检测具有极高的特异性与敏感度,提高了结核病患者的诊断准确率,为临床防治结核病提供重要依据。     

聚合酶链反应技术检测儿童肺结核效果初探

目的 评价聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR)技术在儿童结核中的检测效果。方法 应用PCR技术同时检测106例可疑儿童肺结核胃抽出液和外周血白细胞标本中的结核杆菌DNA（TB－DNA0，比较两种方法在临床上对儿童肺结核病诊断的应用价值。结果 对PCR技术检测儿童肺结核胃抽出液和外周血白细胞检出率进行了比较，胃抽出液检出率为45.0%，外周血白细胞检出率为75.0%。结论 用PCR技术检测外周血白细胞，可能是临床儿童肺结核的一种较好的诊断，而胃抽出液PCR检测不仅会使儿童带来痛苦，而且诊断价值有限。     

结核菌PCR检测在附睾结核诊断中的应用

目的 探讨结核菌PCR检测在附睾结核诊断中的价值.方法 68例附睾结节患者中40例患者取精液做结核杆菌PCR检测,28例患者取附睾结节穿抽标本做结核杆菌PCR检测.结果 40例精液标本结核杆菌PCR检测,TB-DNA阳性13例,阳性率为32.5%; 28例附睾结节穿抽标本结核杆菌PCR检测,TB-DNA阳性8例,阳性率为28.5%.68例标本结核杆菌PCR检测,TB-DNA阳性21例,总阳性率为30.8%.结论 精液和附睾结节穿抽标本结核杆菌PCR检测,有助于提高附睾结核的诊断率,具有临床应用价值.