通脉口服液对柯萨奇病毒抑制作用及对小鼠急性CVB3m心肌炎治疗作用的实验研究

目的探讨通脉口服液对柯萨奇病毒感染的小鼠心肌炎模型的治疗作用和抑制病毒效果。方法用通脉口服液和病毒唑注射液分别于模型小鼠（CVB3m所致Balb／c小鼠心肌炎）连续给药7d，第8日取心肌和血标本；观察病死率、心肌炎发病率和心肌病理以及心肌组织与血的病毒滴度。结果通脉口服液能明显降低心肌炎模型小鼠心肌中的病毒滴度，其中高剂量组的作用强度明显大于低剂量组和病毒唑对照组；通脉口服液可以明显降低模型小鼠心肌炎的病死率（高剂量与低剂量），明显减少心肌组织病理积分（高剂量）。结论通脉口服液对心肌炎具有较明显的治疗作用，可以明显减轻病毒对心肌细胞直接损害。     

茱萸颗粒体外抗CVB3病毒的实验研究

茱萸颗粒是我院心内科李七一教授经临床多年摸索,拟定治疗病毒性心肌炎的有效良方.目的:观察茱萸颗粒对CVB3病毒的作用.方法:采用体外抗CVB3病毒和大鼠心肌细胞感染CVB3实验.结果:茱萸颗粒20mg/ml对CVB3感染Vero细胞具有明显保护作用,同时可抑制CVB3毒力.茱萸颗粒0.5mg/ml至4mg/ml可减轻CVB3感染心肌细胞CPE,心肌酶谱显示:茱萸颗粒可明显降低感染CVB3心肌细胞中LDH,LDH1,AST和HBDH释放,减少心肌细胞损坏.结论:茱萸颗粒具有抗CVB3感染和保护心肌细胞的作用.     

黄芪注射液对柯萨奇B3心肌炎小鼠心肌穿孔素表达

目的：探讨黄芪注射液治疗小鼠柯萨奇B3（CVB3）病毒性心肌炎（VMC）的疗效及其机制。方法：Balb/C鼠24只腹腔感染柯萨奇病毒B3亲心肌细胞株后，随机等分为两组；实验第8日留取心肌和血液标本，分别进行心肌病理检查，心肌穿孔素（Perforin,PFP)mRNA逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）分析及血清肌酸激酶-MB（CK-MB）测定。结果：心肌组织病理改变；黄芪治疗组明显轻于对照组；心肌穿孔素RT-PCR半定量；黄芪治疗组心肌Perforin的表达明显低于对照组；血清CK-MB含量；黄芪治疗组明显低于对照组；心肌PFPmRNA表达水平与血清CK-MB含量呈显著正相关，结论：可能在病毒性心肌炎的发病中起重要的作用。黄芪注射液具有抗病毒，调节免疫和减轻心肌损伤的作用穿孔素介导的细胞毒性作用有关。     

芪冬颐心口服液对柯萨奇B3病毒感染的乳鼠心肌细胞的保护作用研究

柯萨奇B组病毒(CVB)是病毒性心肌炎(Viral My.ocarditis,VMC)的主要致病原,该病毒与心肌炎、心肌病的发生具有高度的相关性[1],但临床治疗VMC仍缺乏有效的抗病毒药物.本研究采用体外培养心肌细胞技术,选用CVB3作为致病病毒,观察芪冬颐心对培养心肌活细胞的直接作用,从而证明了该制剂对VMC心肌细胞的保护作用.     

黄芪注射液对病毒性心肌炎细胞感染模型的影响

目的研究黄芪注射液体外对病毒性心肌炎细胞感染模型的影响.方法以柯萨奇 B3m病毒感染新生SD 大鼠的培养心肌细胞,将黄芪注射液加入培养体系后,观察病毒感染前后细胞病变、搏动情况,检测培养液中心肌酶的改变.结果培养的SD大鼠搏动心肌细胞感染柯萨奇B3m病毒后,逐步出现细胞病变,细胞停止搏动.经黄芪注射液处理后病变减轻,心肌酶水平明显下降.结论黄芪注射液具有良好的抗病毒作用,能显著减轻病毒性心肌炎心肌细胞的损伤.     

益心康对感染柯萨奇病毒B3的大鼠体外心肌细胞CVB3 mRNA复制及相关细胞因子的影响

[目的]通过检测益心康药液作用于感染柯萨奇病毒B3(CVB3)后的乳鼠心肌细胞中柯萨奇病毒mRNA的复制情况及其所释放的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及转化生长因子-β(TGF-β)表达情况,进一步探讨益心康对病毒性心肌炎的病毒复制及相关细胞因子的作用机制。[方法]使益心康的药液作用于乳鼠心肌细胞,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测心肌细胞中柯萨奇病毒mRNA的复制情况及其所释放的TNF-α及TGF-β的表达水平。[结果]益心康在CVB3感染的病毒性心肌炎的发病及发展过程中有抑制CVB3复制的作用,同时可以减少相关细胞因子TNF-α、TGF-β的分泌。益心康组(D组)、益心康加地塞米松组(E组)的细胞中的CVB3 mRNA、TNF-α、TGF-β表达水平明显低于病毒感染组(P<0.01),同时低于利巴韦林组(P<0.05),均有统计学意义;D组、E组之间P>0.05,无统计意义。[结论]益心康对柯萨奇病毒感染心肌细胞具有显著保护作用。     

益气活血中药复方对CVB3病毒性心肌炎心肌细胞损伤的影响

目的观察益气活血中药复方对CVB3病毒性心肌炎心肌细胞损伤的影响。方法以体外细胞培养方法,建立CVB3病毒性心肌炎心肌细胞感染模型。将细胞分为正常组、病毒组、中药组。采用荧光探针Hoechst33258染色法检测心肌细胞凋亡;采用激光共聚焦显微镜检测心肌细胞内钙离子浓度;采用SABC免疫组化法检测心肌细胞心肌肌钙蛋白（cTnI）表达;采用透射电镜检测各组心肌细胞超微结构。结果病毒组与正常组心肌细胞相比,细胞超微结构损伤严重,并可见明显的凋亡细胞核形态,而中药组心肌细胞形态及细胞器结构接近正常组,未见明显的凋亡细胞核形态;正常组心肌细胞cTnI呈阴性表达,病毒组cTnI呈强阳性表达,与正常组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）,中药组cTnI呈弱阳性表达,与病毒组比较,差异有统计学意义（P〈0.01）;正常组心肌细胞经中药干预后,钙离子荧光强度无明显变化（P〉0.05）,而病毒组心肌细胞经中药干预后,钙离子平均荧光强度升高（P〈0.01）,与正常组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论益气活血中药复方可抑制CVB3感染后细胞凋亡发生,抑制cTnI蛋白表达,防御并减轻CVB3造成的心肌损伤,具有修复损伤心肌细胞超微结构、改善心肌细胞舒缩功能和血液动力学作用。     

黄芩、柴胡及其配伍提取物对柯萨奇病毒B3m感染Balb/c小鼠心肌炎治疗作用

目的:探讨黄芩、柴胡及其配伍提取物对柯萨奇病毒B3m(CVB3m)感染小鼠心肌炎的治疗作用。方法:采用腹腔注射CVB3m诱导Balb/c小鼠心肌炎模型,用黄芩、柴胡及其配伍提取物对此动物模型进行治疗,观察各组小鼠给药后不同时间点的一般状态、存活率、心脏/体质量比值、心肌组织病理积分和心肌CVB3m病毒滴度情况。结果:3组药物均能不同程度改善模型小鼠的一般状态、心脏/体质量比值、存活率及心肌组织病理积分,同时降低模型小鼠的心肌组织病毒滴度;柴胡组和配伍组心肌组织病理积分明显低于黄芩组;黄芩组的病毒滴度明显低于柴胡组。结论:柴胡在减轻心肌病理损伤方面作用显著;黄芩在抑制病毒增殖作用方面作用显著;配伍组药物具有抑制病毒复制和减轻病理损伤作用。     

中药防治柯萨奇B_3病毒性心肌炎实验研究进展

综述了近年关于中医药防治柯萨奇 B3 病毒性心肌炎(CVB3 - VMC) 的实验室研究。其中单味中药以黄芪、人参、苦参等为主 ,中药复方则以多种自制方药 ,通过离体细胞培养和柯萨奇 B3 病毒亲心肌株 (CVB3 m) 诱导 VMC的整体动物实验模型 ,采用微量细胞培养、同位素示踪、细胞微电极、血清药理学、分子杂交等技术和方法 ,从抑制 CVB3 m繁殖、调节细胞免疫作用、保护心肌细胞的角度进行较深入的实验室研究。     

茱萸颗粒体外抗CVB3病毒的实验研究

茱萸颗粒是我院心内科李七一教授经临床多年摸索，拟定治疗病毒性心肌炎的有效良方。目的：观察茱萸颗粒对CVB3病毒的作用。方法：采用体外抗CVB3病毒和大鼠心肌细胞感染CVB3实验。结果：茱萸颗粒20mg／ml对CVB3感染Vero细胞具有明显保护作用，同时可抑制CVB3毒力。茱萸颗粒0．5mg／ml至4mg／ml可减轻CVB3感染心肌细胞CPE，心肌酶谱显示：茱萸颗粒可明显降低感染CVB3心肌细胞中LDH，LDH1，AST和HBDH释放，减少心肌细胞损坏。结论：茱萸颗粒具有抗CVB3感染和保护心肌细胞的作用。     

黄芪对柯萨奇B_3病毒感染培养大鼠心肌细胞Ca~（2＋）内流及该病毒RNA复制

本研究结果发现，黄芪对柯萨奇Ｂ_３病毒（ＣＶＢ_３）感染大鼠心肌细胞及正常对照心肌细胞的Ｃａ~（２＋）内流均呈显著抑制作用（ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５））；若在病毒感染１ｈ后加黄芪，经４８ｈ培养，对正常对照及感染细胞的Ｃａ~（２＋）内流亦有抑制作用（Ｐ＜０．０５）；同时细胞中ＣＶＢ_３－ＲＮＡ含量显著少于病毒对照组（Ｐ＜０．００１）。提示黄芪具有钙拮抗作用，可减少病毒感染引起的心肌Ｃａ~（２＋）内流量，有可能减轻感染细胞的继发性Ｃａ~（２＋）损伤；且对细胞中病毒ＲＮＡ的复制具有抑制作用，显示了其在病毒性心肌炎临床治疗上的应用价值。     

益心康对柯萨奇B_(3m)病毒性心肌炎小鼠作用的实验研究

目的 :实验观察中药复方益心康 ,对实验性病毒性心肌炎小鼠心肌细胞保护作用和对心肌细胞内病毒复制的抑制作用。方法 :诱导Balb/c小鼠形成病毒性心肌炎模型 ,分别予益心康、病毒唑稀释液、生理盐水灌胃。测每个小鼠血清磷酸肌酸激酶 (CK)及其同功酶MB(CK -MB) ,测心肌细胞感染CVB3mRNA量。结果 :中药治疗组小鼠的血清CK和CK -MB明显低于其它两个治疗组。中药治疗组小鼠的心肌细胞含有的病毒RNA量明显少于其它两个治疗组。结论 :益心康对柯萨奇B3m病毒性心肌炎小鼠有保护作用 ,并抑制柯萨奇病毒B3m在心肌细胞中的复制。     

中药调节细胞因子治疗病毒性心肌炎的研究进展

病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)为内科常见病之一,是由病毒(主要是柯萨奇B3病毒CVB3)侵犯心肌引起的以心肌细胞变性坏死和周围间质细胞浸润为主要病理变化的一种疾病.其确切的发病机理至今还不十分清楚,目前认为一方面是由病毒侵袭引起心肌损伤,另一方面是细胞介导的免疫反应引起的心肌细胞的损伤[1].其中,细胞介导的自身免疫反应已经被认为在VMC发病心肌细胞损伤过程中起主要作用[2].而在病毒诱发的炎症至感染后自身免疫反应的产生和进展中,细胞因子被认为具有重要作用[3].目前,利用中药调节细胞因子治疗VMC的相关报道很多,现综述如下.     

黄芪对感染柯萨奇病毒的人胚心肌细胞LDH释放量的影响

黄芪对感染柯萨奇病毒的人胚心肌细胞ＬＤＨ释放量的影响广州市第一人民医院（５１０１８０）汪建新中山医科大学第三临床学院余步云【关键词】黄芪心肌细胞培养柯萨奇病毒乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）黄芪是祖国医学中常用的一种补气药物，据报道，黄芪有抗病毒、调节免疫失控及...     

黄芪甲苷对CVB3所致病毒性心肌炎模型小鼠TIMP-1和MMP-1的影响

目的:探讨黄芪甲苷对CVB3病毒所致病毒性心肌炎模型小鼠心脏内基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)和基质金属蛋白酶-1(MMP-1)的影响。方法:取90只小鼠,随机分为空白对照组、模型对照组、阳性药物(广枣总黄酮)组、黄芪甲苷低剂量组、黄芪甲苷中剂量组、黄芪甲苷高剂量组。除空白对照组外,其余5组均腹腔注射柯萨奇B3(CVB3)标准病毒株建立小鼠病毒性心肌炎模型。造模开始第8天,各组分别灌胃相应药物。给药第16天,脱颈椎处死小鼠,迅速开胸摘取心脏,采用试剂盒法测定小鼠心肌组织中TIMP-1和MMP-1的含量。结果:黄芪甲苷可显著提高CVB3病毒所致病毒性心肌炎模型小鼠心肌组织中TIMP-1的含量,同时,降低MMP-1的含量。结论:黄芪甲苷可提升基质金属蛋白酶抑制剂-1的活性,抑制基质金属蛋白酶-1的活性,显著降低CVB3病毒对病毒性心肌炎模型小鼠的心肌损害,防止心肌细胞纤维化。     

归黄颗粒对病毒性心肌炎小鼠的心肌保护作用

目的 :探讨归黄颗粒对实验性病毒性心肌炎的防治作用。方法 :腹腔注射柯萨奇B3m亲心肌病毒株造成Balb/C乳鼠心肌炎模型 ,观察小鼠症状和死亡率、心肌病理变化、血清酶学等指标。结果 :归黄颗粒可降低心肌炎小鼠的死亡率 ;降低心肌感染病毒的滴度及组织病理损伤积分 ;抑制CVB3m感染后所致的LDH活性异常升高 ,并可使CK的水平降低。结论 :归黄颗粒对感染CVBB3m小鼠心肌损害具有保护作用     

参白口服液对病毒性心肌炎心肌细胞凋亡及其相关调控基因影响的研究

目的：研究病毒性心肌炎（VMC）与心肌细胞凋亡及其相关调控基因的关系及参白口服液的防治作用。方法;给BALB／C小鼠接种嗜鼠心肌柯萨奇B3病毒（CVB3m）诱发VMC,在接种后3,7,14,20,30d动态对照观察心肌细胞凋亡（电镜、TUNEL）和相关调控基因c-myc,Bcl-2蛋白的表达（免疫组化技术）情况。结果：CVB3m可引起VMC心肌细胞凋亡,c-myc,Bcl-2蛋白的阳性表达支持心肌细胞凋亡情况。结论：心肌细胞凋亡及其相关调控基因可能参与VMC的发生和发展,参白口服液有良好的防治作用。     

黄芪甲甙对慢性心肌炎心肌纤维化的影响

目的 探讨中药黄芪的活性成分黄芪甲甙对慢性心肌炎心肌纤维化的影响及其相关机制.方法 80只Balb/c小鼠随机分为3组,分别为空白对照组（对照组,20只）、慢性心肌炎组（模型组,30只）和黄芪甲甙干预心肌炎组（干预组,30只）.模型组和干预组小鼠每月1次腹腔接种柯萨奇病毒B3（CVB3）,对照组腹腔注射等量病毒培养液.对照组和模型组小鼠每日以饮用水喂养,干预组小鼠以加有羧甲基纤维素钠助溶的黄芪甲甙饮用水（浓度300 mg/L）喂养.3个月后处死所有存活小鼠,小鼠心脏组织经苦味酸天狼星红染色后以自动图像分析系统计算胶原容积积分（CVF）,以Western blot方法检测各组小鼠心脏组织中转化生长因子β1（TGF-β1）、血小板衍生生长因子BB（PDGF-BB）、基质金属蛋白酶1（MMP-1）及其组织抑制物（TIMP-1）、MMP-13和MMP-14的表达情况.结果 黄芪甲甙干预后,与模型组比较,小鼠死亡率降低（53.3%、23.3%,χ^2=4.23,P＜0.05）、心脏CVF明显下降[模型组为（17.4±1.2）%、干预组为（8.6±0.9）%,χ^2=5.38,P＜0.05];与对照组比较,TGF-β1、MMP-1和TIMP-1表达减少而MMP-13和MMP-14的表达增多.结论 黄芪甲甙可以降低慢性心肌炎小鼠死亡率、减轻其心肌纤维化,其抗纤维化作用是通过抑制TGF-β1、促进MMP-13和MMP-14在心脏中的表达而实现.     

芪冬颐心口服液对柯萨奇B3病毒感染的乳鼠心肌细胞的保护作用研究

柯萨奇B组病毒(CVB)是病毒性心肌炎(Viral Myocarditis，VMC)的主要致病原，该病毒与心肌炎、心肌病的发生具有高度的相关性，但临床治疗VMC仍缺乏有效的抗病毒药物。本研究采用体外培养心肌细胞技术，选用CVB3作为致病病毒，观察芪冬颐心对培养心肌活细胞的直接作用，从而证明了该制剂对VMC心肌细胞的保护作用。     

中药调节细胞因子治疗病毒性心肌炎的研究进展

病毒性心肌炎（viral myocarditis，VMC）为内科常见病之一，是由病毒（主要是柯萨奇B3病毒CVB3）侵犯心肌引起的以心肌细胞变性坏死和周围间质细胞浸润为主要病理变化的一种疾病。其确切的发病机理至今还不十分清楚，目前认为一方面是由病毒侵袭引起心肌损伤，另一方面是细胞介导的免疫反应弓l起的心肌细胞的损伤。其中，细胞介导的自身免疫反应已经被认为在VMC发病心肌细胞损伤过程中起主要作用。而在病毒诱发的炎症至感染后自身免疫反应的产生和进展中，细胞因子被认为具有重要作用。目前，利用中药调节细胞因子治疗VMC的相关报道很多，现综述如下。