高脂联合动脉内膜机械性损伤法复制动脉粥样硬化动物模型的实验研究

[目的]探索一种采用球囊损伤联合高脂饮食的方法建立大鼠腹主动脉内膜损伤,诱导大鼠腹主动脉粥样硬化动物模型,旨在为研究者们提供一种更能贴切模拟动脉粥样硬病变的动物模型,为AS发病机制探讨和治疗方法的探索提供与临床病例更为相似的实验对象。[方法]SD大鼠20只,随机分为空白对照组和模型组,每组10只,空白对照组正常饲养,不做任何处理。模型组以高脂饲料喂养4周,自由饮水。4周后,行腹主动脉球囊损伤术,术后继续高脂饲料喂养6周。实验结束后对两组大鼠腹主动脉进行病理切片,观察其病理变化。[结果]光镜下观察,模型组大鼠腹主动脉可见粥样斑块病理改变。[结论]高脂联合动脉内膜机械性损伤方法复制动脉粥样硬化大鼠模型具有方法可靠,可重复性高,更符合临床动脉粥样硬化疾病的发生发展过程等优点。     

动脉粥样硬化兔造模的常用方法简介

动脉粥样硬化是一种慢性动脉疾病,可引起冠心病和脑梗死等,是严重危害人类生命健康的疾病之一,其发病率和病死率均居各种疾病前列。有关动脉粥样硬化的确切病因尚不清楚,有多个学说,如脂质浸润学说、血栓形成学说、损伤反应学说、免疫炎症学说等,从不同侧面反映了形成动脉粥样硬化的复杂因素。积极研究并建立可靠的动脉粥样硬化动物模型对于探明动脉粥样硬化的病因、发病机制及防治药物的研究与开发均具有重要的意义。     

免疫损伤、应激和高脂饮食多因素所致高脂血症血瘀动物模型的建立与机理研究

动脉内膜脂质浸润是动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)形成的主要原因,内皮损伤是引起动脉粥样硬化的始动因素.高脂血症(hyperlipidemia)往往损伤内皮细胞结构和功能,促使血小板活化、聚集黏附,最终损伤动脉内膜,而粥样斑块的形成是动脉对内膜损伤做出反应的结果.在这一过程中,血管活性物质、内皮功能改变、白细胞黏附活化、炎性细胞因子改变等多因素参与其中.近年来不少文献报道动脉硬化的发生还与免疫有关[1],免疫网络中各因素的相关改变也说明了这一点.本研究采用高脂饮食结合免疫损伤、应激等多因素综合造成高脂血症血瘀动物模型[2～4],以期为活血化瘀方药干预AS作用的客观评价提供一个可靠的依据.     

化痰法通过降钙调脂抑制高脂饲料喂养导致的大鼠动脉粥样硬化和血管钙化研究

目的:利用高脂饲料加腹腔注射维生素D3诱发动脉粥样硬化(AS)模型,探讨化痰法防治大鼠动脉粥样硬化的作用机制。方法:清洁型健康雄性SD大鼠40只,随机分5组,空白对照组(n=6)、模型组(n=8)、低剂量中药组(n=9)、高剂量中药组(n=9)、阳性药物对照组(n=8),连续喂养10周,血清学检测血脂、血钙,HE染色观察主动脉和肝脏的病理组织学变化。结果:HE染色结果显示,模型组血管壁多处可见近似动脉粥样硬化的斑块形成,同时伴有局部钙化。低剂量中药组和他汀组的血管钙化和内皮增生程度明显低于模型组。高剂量中药组血管壁未见斑块和钙化。结果表明,高剂量中药组对血管的保护作用更明显;中药和他汀组均能明显改善肝脏脂肪变性;高剂量中药组可明显降低LDL及血钙水平(P0.05)。结论:化痰法可通过调节血脂、血钙,抑制血管内膜增生和钙化进而防治AS的发生。     

赤芍防止高脂喂养兔颈总动脉球囊损伤术后血管狭窄的实验研究

目的 观察赤芍提取物对高脂喂养兔颈总动脉球囊损伤术后血管狭窄有无防止作用。方法 采用Clowes方法建立兔颈总动脉球囊损伤模型,并给予赤芍提取物。免疫组化染色测定兔颈动脉新生内膜成分、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)及巨噬细胞表达;血管特殊染色观察Ⅰ型胶原增生;图像分析系统测定新生内膜面积。结果赤芍提取物可减少PCNA阳性细胞数,抑制Ⅰ型胶原增生,减轻新生内膜形成。结论 赤芍对高脂喂养所致动脉粥样硬化兔颈总动脉球囊损伤术后再狭窄血管有显著防治作用。     

探秘高血压发生的“新密码”——免疫损伤-免疫失衡

<正>改革开放以来,人们生活水平提高了,医保覆盖面扩大了,心脑血管疾病的发病率却节节高升。据《2012中国卫生统计年鉴》统计:1993年我国心脏病发病率只有千分之十三,十五年后,也就是2008年增长到千分之十七点六。心脑血管发病率上升的主要原因是对高血压、糖尿病、高脂血症和肥胖症的预防和诊治不够有力。由于诊断不力,有一半人自己得了高血压却不知道,更谈不上及时治疗。     

高脂饲料结合免疫损伤、应激所致高脂血症血瘀模型的实验研究

目的:采用高脂、免疫损伤、应激等方法,探讨较为切合动脉粥样硬化(AS)病理变化的高脂血症血瘀动物模型造模方法。方法:应用单纯高胆固醇(模型组简称高脂组)、异体血清蛋白加高胆固醇(免疫损伤高脂组)、高胆固醇加异体血清蛋白加肾上腺素(免疫损伤应激高脂组)、单纯肾上腺素(应激组)等不同方法造模,观察不同模型脂质代谢、血小板功能、白细胞活化粘附、白细胞介质、血管内皮功能的变化。结果:与空白组比较:高脂组大鼠的脂质代谢、血管活性物质、炎症介质明显升高(P<0.05,P<0.01);应激组大鼠的白细胞活化和血小板活化显著升高(P<0.05,P<0.01);免疫损伤高脂组血管活性、脂质代谢、炎症介质、白细胞活化显著增高(P<0.05,P<0.01);免疫损伤应激高脂组的血小板活化显著升高,血小板聚集性增强,白细胞活化增强,炎症介质、脂质代谢变化异常,增高显著(P<0.05,P<0.01)。结论:多因素的高脂血症血瘀模型的脂质代谢、白细胞介素、白细胞粘附与活化及血小板活化、聚集、粘附程度都显著升高,为中医药多环节干预 AS 和血瘀证的作用研究提供了一个较为可靠的模型。     

高脂高糖大鼠模型建立及血清PAI-1、APN表达的研究

目的：探讨高脂高糖大鼠模型的建立方法,并观察血清PAI-1、APN的表达。方法：利用高糖高脂饲料及给予L-NAME建立高脂高糖模型大鼠,观察模型大鼠血清葡萄糖（GLU）、总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白（HDL-C）、低密度脂蛋白（LDL-C）、纤溶酶原激活物抑制物-1（PAI-1）、脂联素（APN）的表达。结果：造模72 h后测量空腹血糖≥7.8 mmol·L-1,模型组血清GLU、TC、TG、LDL-C含量均较正常对照组明显升高（P〈0.01）,提示造模成功。高脂高糖模型大鼠血清PAI-1明显升高、APN明显下降,较正常对照组有显著性差异（P〈0.01）。结论：利用高脂高糖饮食和灌胃给予LNAME,加上链脲佐菌素（STZ）诱导,成功制作了高脂高糖症大鼠模型。高脂高糖模型大鼠血清PAI-1水平明显上调、APN水平明显下调。     

高脂饲养结合腹主动脉球囊损伤制作兔腹主动脉粥样硬化模型的研究术

目的探索制作快速、稳定可靠的动脉粥样硬化家兔模型的方法。方法采用高脂饲料喂养结合动脉内膜球囊损伤的方法建立家兔动脉粥样硬化模型。于高脂喂养的第10周末取颈动脉血测定总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白（HDL）和低密度脂蛋白（LDL）的含量,并于腹主动脉取样作HE染色观察。结果高脂饲养10周后,动物TC、TG和LDL显著升高（P＜0．05或0．01）,主动脉内壁肉眼可见典型动脉粥样斑块,光镜下见内膜明显增厚,形成明显的斑块及纤维帽结构,斑块厚度与内中膜厚度比值增加明显。结论高脂饲料喂养动脉内球囊损伤法可以短期内成功复制出家兔动脉粥样硬化模型。     

几种冠状动脉粥样硬化大鼠模型建立方法比较

动脉粥样硬化（AS）是一种慢性动脉疾病,可引起冠心病和脑梗死等,是我国和世界上严重危害人类生命健康的疾病之一,其发病率和死亡率均居各种疾病前列。有关AS的确切病因尚不清楚,有多个学说,如脂质浸润学说、损伤反应学说、免疫炎症学说等,     

高脂饮食诱发胰岛素抵抗大鼠模型的建立与评价

目的建立饮食性胰岛素抵抗大鼠模型及评价方法。方法高脂饲料喂养不同年龄和体质量Wistar大鼠,4周后检测血糖、血脂、游离脂肪酸和胰岛素水平并行高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验。结果青年高脂组较青年对照组、老年对照组较老年高脂组相比,高脂喂养大鼠体质量虽有所增加,但差异无统计学意义（P均〉0.05）。青年高脂组与青年对照组、老年高脂组与老年对照组、老年对照组与青年对照组及老年高脂组与青年高脂组相比,血清总胆固醇、血清甘油三酯及空腹胰岛素升高,空腹血糖升高,葡萄糖输注率下降,有显著性差异（P〈0.05或0.01）。结论高脂饲料喂养青年和老年大鼠,均可成功建立胰岛素抵抗大鼠模型,钳夹实验用于胰岛素抵抗大鼠模型的评价更准确、可靠。年龄和体质量因素与胰岛素抵抗有关。     

高脂饮食诱发胰岛素抵抗大鼠模型的建立与评价

目的建立饮食性胰岛素抵抗大鼠模型及评价方法。方法高脂饲料喂养不同年龄和体质量Wistar大鼠,4周后检测血糖、血脂、游离脂肪酸和胰岛素水平并行高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验。结果青年高脂组较青年对照组、老年对照组较老年高脂组相比,高脂喂养大鼠体质量虽有所增加,但差异无统计学意义(P均>0.05)。青年高脂组与青年对照组、老年高脂组与老年对照组、老年对照组与青年对照组及老年高脂组与青年高脂组相比,血清总胆固醇、血清甘油三酯及空腹胰岛素升高,空腹血糖升高,葡萄糖输注率下降,有显著性差异(P<0.05或0.01)。结论高脂饲料喂养青年和老年大鼠,均可成功建立胰岛素抵抗大鼠模型,钳夹实验用于胰岛素抵抗大鼠模型的评价更准确、可靠。年龄和体质量因素与胰岛素抵抗有关。     

脉平片对高脂血症模型兔血管内皮损伤标志物的影响

血管内皮细胞(VEC)是衬贴于血管内腔面的单层扁平细胞。高胆固醇血症中内皮功能受损时一氧化氮(NO)的合成和释放减少,进而造成α-肾上腺素能受体引起的血管收缩反应增强。因此,将NO及内皮素(ET)作为血管内皮细胞损伤的标志物。本文通过相关     

大鼠高血脂及脂肪肝模型的建立及停止高脂饲料干预后自愈时间的研究

目的:建立大鼠高血脂及脂肪肝模型,研究停止高脂饲料干预后观察其自愈时间.方法:SD大鼠高脂饲料饲养连续3周,测定大鼠血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆同醇(LDL-C).然后间隔一周左右测血脂及取部分大鼠肝脏,固定、染色后光镜下进行组织病理学检查.结果:给予高脂饲料3周模型组大鼠血清TG、TC明显高于正常组,高密度脂蛋白胆同醇(HDL-C)/总胆固醇(TC)明显低于正常组.停止高脂饲料干预后第12天、22天、29天,模型组大鼠血清TC明显高于正常组;停止高脂饲料干预后第12天、22天,模型组大鼠血清(HDL-C)/TC明显低于正常组;病理组织学检查表明,模型组大鼠在停止高脂饲料干预后第12天,肝小叶结构模糊不清,部分肝细胞胞浆内出现大小不等的空泡,大部分肝细胞呈气球样变,部分动物肝细胞出现点状或灶状坏死;第22天,可见肝细胞肿胀,轻度脂肪变及气球样变;第29天肝脏组织细胞结构恢复正常.结论:大鼠给予高脂饲料喂养3周,可出现非常明显的高脂血症,停止高脂饲料干预后第22天,模型组动物仍出现高胆固醇血症及脂肪肝,在停止高脂饲料干预4周后各项指标基本恢复正常.     

脑安萃取液对实验性兔动脉粥样硬化血管重构的影响

目的:探讨脑安萃取液对实验性兔动脉粥样硬化模型血管重构的影响及其可能的机制.方法:采用高脂喂饲制备兔动脉粥样硬化模型,给药组给予脑安萃取液[40mg/(kg·d)]治疗12周.分别于实验前、实验12周末,经耳缘静脉抽血,测定血脂、SOD、MDA含量,取各组动物胸主动脉标本做病理形态学检查,并利用计算机图象分析系统观察动脉硬化进程中血管重建相关指标的变化及药物对其的影响.结果:脑安萃取液可以显著降低实验兔血清总胆固醇、甘油三酯、LDL、MDA含量,增加血清SOD含量,并能减低血管内膜-中层厚度,减少硬化斑块面积,与高脂模型组比较差异显著(P<0.01).结论:脑安萃取液具有调节血脂水平,抗氧化损伤的作用,逆转动脉粥样硬化血管病理性重构,延缓动脉粥样硬化斑块的形成.     

斑马鱼心脏损伤模型的建立及桔梗提取物对其心脏损伤的干预作用研究

目的:建立阿霉素诱导的斑马鱼心脏损伤模型,观察桔梗提取物对其心脏损伤的干预作用。方法:选取受精后48 h心脏特异表达绿色荧光转基因Tg(cmlc2:EGFP)斑马鱼,随机分为正常组和阿霉素低、中、高剂量组。干预24 h后,观察各组斑马鱼生存情况,计算生存率。荧光显微镜下观察各组斑马鱼心脏相关指标,包括心脏形态、心率,测量并记录静脉窦和动脉球(SV-BA)距离。确定建立斑马鱼心脏损伤模型的阿霉素用量。另取斑马鱼随机分为正常组、模型组(阿霉素10 μmol/L)和桔梗提取物低、中、高剂量(阿霉素10 μmol/L联合20、40、80μg/mL桔梗提取物)组,分别干预24 h后,观察各组斑马鱼生存情况,计算生存率。荧光显微镜下观察各组斑马鱼心脏收缩和舒张形态,测量并计算各项心脏功能指标,包括心率、SV-BA距离、每搏输出量、心输出量。结果:阿霉素各剂量组斑马鱼生存率均为100%;与正常组比较,10 μmol/L、20 μmol/L阿霉素诱导后斑马鱼活动能力受到限制,心包出现水肿,心率下降(P0.05),SV-BA距离增加(P0.05)。选取10 μmol/L阿霉素建立斑马鱼心脏损伤模型。与模型组比较,中、高剂量桔梗提取物能够缓解斑马鱼心包水肿,提高心率(P0.05),缩短SV-BA距离(P0.05),提高每搏输出量及心输出量(P0.05)。结论:阿霉素10 μmol/L处理24 h可成功并安全建立斑马鱼心脏损伤模型,桔梗提取物对心脏损伤斑马鱼的心脏功能具有一定的保护作用。     

颈总动脉套管法与颈外动脉结扎法建立局部低切应力动脉粥样硬化兔模型的比较

目的:通过对比颈总动脉套管法与颈外动脉结扎法建立动脉粥样硬化兔模型的试验研究,比较2种方法在制模时间,模型稳定性方面的差异.方法:雄性新西兰兔30只,随机分成空白组(n=6);套管组(n=8);结扎组(n=8);高脂组(n=8).所有试验兔在高脂喂养前、后分别检测血脂水平,于第8周处死动物,取套管近心端与结扎近心端血管行病理学检查.结果:高脂组饲养8周形成明显的高脂血症;与高脂组相比,单纯套管法颈动脉内膜脂质沉积较轻,但内膜明显增厚,内膜、中膜、外膜均出现不同程度的坏死;结扎法病变比套管法轻,但仍严重于正常组.结论:与单纯高脂饲养法相比,单纯套管法试验兔8周也可形成明显的动脉粥样性血管病变,套管近心端可形成局部低切应力模型,模型稳定性好.     

微米复方黄连制剂对高脂饮食喂养家兔炎症因子表达的影响

黄连解毒汤出自《外台秘要》，由黄连、黄芩、黄柏、栀子组成，为常用清热解毒代表方。近年已有报道发现该方具有抑制细胞黏附，并可抑制小鼠球囊损伤的颈动脉的再狭窄，并抑制血管平滑肌细胞的增殖，从而表现出抗动脉粥样硬化的作用，但其作用机制尚未完全阐明。本研究在黄连解毒汤基础上加入甘草调节上述药物的苦寒特性，并将其加工成10～100μm级颗粒，探讨微米复方黄连制剂抗动脉粥样硬化的作用及其机制。     

养心汤对家兔不稳定型心绞痛模型心肌细胞凋亡的影响

目的：通过观察养心汤对家兔心肌细胞凋亡的影响，探讨其治疗不稳定型心绞痛的确切作用机制。方法：将24只雄性家免随机分为3组，即正常对照组、模型对照组、治疗组，在高脂饮食形成动脉粥样硬化斑块的基础上，采用颈总动脉球囊扩张引起动脉粥样斑块不稳定的方式复制成类似于人类不稳定型心绞痛病理变化的家兔心肌缺血模型。结果：养心汤能明显降低动脉粥样硬化引起的细胞凋亡。结论：养心汤通过抑制心肌细胞凋亡而减轻心肌损伤，这可能是治疗不稳定型心绞痛的作用机制之一。