三七皂苷对糖尿病大鼠肾脏保护作用的实验研究

目的：观察三七皂苷（PNS）对糖尿病（DM）大鼠肾脏转化生长因子β1（TGFβ1）、纤溶酶原激活物抑制因子-1（PAI-1）mRNA表达的影响,探讨PNS对DM大鼠肾脏的保护作用及其机制。方法：以四氧嘧啶复制DM大鼠模型,动物分为正常组、模型组、PNS高、低剂量治疗组。生化检测空腹血糖（FBG）、尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）及尿蛋白（Upro）;HE、PAS染色,光镜观察肾组织形态学改变;RT—PCR检测肾组织TGFβ1、PAI—mRNA表达。结果：与正常组比较,模型组大鼠FBG、BUN、Cr、Upro、TC、TG水平升高（P〈0．01）,肾小球基底膜增厚,TGFβ1、PAI-1mRNA表达增加（P〈0．05）。PNS治疗组大鼠以上生化指标均降低,肾小球纤维化程度减轻,TGFβ1、PAI-1mRNA表达减少,与模型组比较,有显著性差异（P〈0．01）。结论：三七皂苷可能通过降低TGFβ1、PAI-1mRNA表达,进而对DM大鼠肾脏具有保护作用。     

通心络对2型糖尿病大鼠肾脏血管紧张素Ⅱ表达的影响

目的:观察2型糖尿病（T2DM）大鼠肾损伤过程中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的表达,探讨通心络对糖尿病早期肾小球高滤过的影响及其作用机制。方法:8周龄SD雄性大鼠40只,采用高脂饲料+低剂量链脲佐菌素建立T2DM大鼠模型,随机分为空白组、模型组、缬沙坦组（10 mg·kg-1·d-1）和通心络组（0.4 mg·kg-1·d-1）,分别于4周和8周观察T2DM大鼠血糖（FBG）、尿白蛋白排泄率（UAER）及肾功能（Scr,BUN,Ccr）的变化;8周末次给药后取肾组织,计算肾重指数（KW/BW）,采用western blot及real time-PCR技术检测AngⅡ和AngⅡ1型受体（AT1R）蛋白和基因的表达。结果:T2DM大鼠的FBG、UAER、Scr、BUN、Ccr及KW/BW较空白组有不同程度的升高（P<0.05）,通心络组FBG无明显变化（P>0.05）,其他各指标水平较模型组均显著降低（P<0.05）;WB及RT-PCR结果显示通心络可以降低肾组织中AngⅡ和AT1R基因蛋白的过度表达(P<0.05)。结论:通心络可以改善T2DM大鼠早期的高滤过状态,抑制尿白蛋白的排泄及肾脏肥大,保护肾功能;通心络可能是通过下调肾组织中AngⅡ的表达,抑制异常活化的RAS来延缓糖尿病肾病的发生发展。     

化瘀通络中药对糖尿病肾病大鼠肾皮质血管紧张素转化酶2-血管紧张素（1-7）-Mas轴的影响

目的观察化瘀通络中药对糖尿病肾病大鼠肾皮质血管紧张素转化酶2-血管紧张素（1-7）-Mas［ACE2-Ang-（1-7）-Mas］轴的影响。方法将89只雄性SD大鼠按随机数字表法分为空白对照组（C组,22只）、高糖高脂对照组（H组,10只）和1%链尿佐菌素（streptozotocin, STZ）注射组（57只）。STZ注射组以高糖高脂饲料联合腹腔注射STZ制备糖尿病模型（50只）,再分为模型组（M组,24只）、厄贝沙坦组（I组,13只）和化瘀通络中药组（Z组,13只）。I组和Z组大鼠分别给予厄贝沙坦和化瘀通络中药混悬液灌胃,共16周,其余各组给予等体积饮用水。检测各组大鼠4个时间点的血糖和24 h尿蛋白定量,分别采用实时荧光定量PCR（Real-time PCR）、免疫组化法、蛋白印迹（Western blot）方法检测不同时间点各组肾皮质ACE2、Mas蛋白的表达变化,第16周末对各组肾皮质2种蛋白表达进行定量分析。结果与C组比较,H、M组血糖均升高,且M组高于H组（P〈0.01）。不同时间点24 h尿蛋白与C组比较,M组升高,且M组高于H组（P〈0.05）。与M组比较,I组8周末和Z组8、16周末均降低（P〈0.05）,且第16周末Z组优于I组 （P〈0.05）。与C、H两组比较,M组第16周末肾皮质ACE2 mRNA的表达降低（P〈0.01）;与M组比较,Z组表达升高（P〈0.01）。与C组比较,M组第16周末Mas mRNA的表达差异无统计学意义（P〉0.05）;与H组比较,M组表达降低（P〈0.05）;与M组比较,Z组表达升高（P〈0.05）,且高于I组（P〈0.05）。M组ACE2、Mas蛋白表达的定量随时间呈递减趋势。第16周末ACE2、Mas蛋白的表达定量,与C组比较,M组两者表达均降低（P〈0.05）;与M组比较,Z组ACE2的表达和I、Z两组Mas的表达均升高 （P〈0.05）。结论化瘀通络中药可能通过上调ACE2、Mas mRNA及其蛋白的表达,促进ACE2-Ang-（1-7）-Mas轴发挥作用,降低尿蛋白,对糖尿病肾病大鼠起到肾保护的作用。     

通心络对糖尿病大鼠心肌微血管炎症损伤及血管痉挛的防治作用

目的观察通心络对链脲佐菌素（STZ）糖尿病大鼠心肌微血管炎症损伤及血管痉挛的防治作用。方法38只STZ糖尿病大鼠分为STZ对照组、胰岛素组、通心络组,另取8只正常Wistar大鼠作为正常对照组。正常对照组、STZ对照组予生理盐水灌胃,胰岛素组皮下注射胰岛素,通心络组灌胃通心络混悬液,共8周。取心肌切片作HE染色、组织核因子-κB（NF-κB）免疫组化染色。取心肌匀浆测定细胞间粘附分子-1（sICAM-1）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、内皮素-1（ET-1）、血管紧张素-Ⅱ（AT-Ⅱ）,取血浆测定AT-Ⅱ、神经肽Y（NPY）。sICAM-1采用酶联免疫法,其余采用放射免疫法。对NF-κB染色切片采用计算机图像分析,取其阳性面密度比值的均值以评价其表达程度。结果与正常大鼠比较,STZ糖尿病大鼠心肌匀浆sICAM-1、TNF-α、ET-1、AT-Ⅱ含量及NF-κB阳性表达升高（P〈0．01或0．05）,通心络组降低（P〈0．01或0．05）,胰岛素组有升高或降低趋势（P〈0．05或P〉0．05）。STZ糖尿病大鼠血浆AT-Ⅱ升高（P〈0．05）,通心络组AT-Ⅱ升高（P〈0．05）。STZ糖尿病大鼠血浆NPY明显降低（P〈0．01）,通心络组NPY升高（P〈0．01）,而胰岛素组明显降低（P〈0．01）。通心络组血糖无明显变化。HE染色显示通心络组心肌病变减轻。结论通心络对STZ糖尿病大鼠心肌微血管炎症损伤及血管痉挛具有防治作用。     

糖尿病大鼠肾脏PPARγmRNA表达及解毒通络保肾胶囊干预研究

目的：研究糖尿病大鼠肾脏组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）mRNA表达及中药解毒通络保肾胶囊的调节作用。方法：42只Wistar大鼠用链脲佐菌素诱发糖尿病后，随机分为DM组、罗格列酮治疗组和解毒通络保肾胶囊治疗组，以正常10只大鼠作为对照。连续处理12周后，应用RT-PCR检测肾皮质过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）mRNA的表达水平。结果：DM大鼠肾皮质PPARγmRNA表达降低，解毒通络保肾胶囊治疗组PPARγmRNA高于DM组（P〈0．05）。结论：解毒通络保肾胶囊对DM肾脏病变有保护作用，其机制可能是通过激活PPARγ途径，调控相关基因表达，改善糖脂代谢，减少细胞外基质的积聚。     

鹿茸方对糖尿病肾病大鼠TIMP—1mRNA表达的调节

目的观察鹿茸方对糖尿病肾病大鼠肾皮质组织型基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）基因表达的影响,在基因水平探讨鹿茸方疗效的分子机制。方法应用雄性wistar大鼠腹腔注射链脲霉素诱导糖尿病肾病动物模型,造模成功后分为模型组、鹿茸方小剂量治疗组、鹿茸方中剂量治疗组、水飞蓟宾治疗组及正常对照组。干预治疗8周后,测定各组大鼠24h尿微量白蛋白排泄量（UAER）;用RT—PCR法测定各组大鼠TIMP-1mRNA的表达。结果模型组大鼠uAER、肾皮质TIMP-1mRNA表达显著增高,均较正常大鼠显著上调（P〈0．05）;治疗组显著降低模型UAER,显著下调肾皮质TIMP-1mRNA的表达（P〈0．05）。结论鹿茸方及对照药物水飞蓟宾均对糖尿病肾病有一定治疗作用,其作用机制与下调肾皮质TIMP-1mRNA的表达有关。     

通心络对自发性2型糖尿病KK-Ay小鼠肾功能及肾组织MMP-9、TIMP-1表达的影响

目的：观察通心络对自发性2型糖尿病KK-Ay小鼠肾功能及肾组织降解酶系MMP-9、TIMP-1及细胞外基质成分FN、ColⅣ表达的影响,探讨通心络防治DN的作用机制。方法：采用自发性2型糖尿病KK-Ay小鼠建立糖尿病肾病模型、随机分为模型组、通心络组、西药组各16只,设立C57BL/6J小鼠16只为空白组,予通心络及缬沙坦干预12周后,测定空腹血糖（FPG）、24h尿微量白蛋白排泄率（UAER）,糖化血红蛋白（HbA1c）、血清尿素氮（BUN）、血清肌酐（SCr）含量,采用WesternBlot及Realtime-PCR方法检测基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）蛋白及基因表达水平,采用免疫荧光方法检测纤维连接蛋白（FN）、Ⅳ胶原（Col-Ⅳ）蛋白表达水平。结果：与空白组比较,模型组小鼠24hUAER、BUN、SCr、FPG、HbA1c均明显升高（P〈0.05）,肾组织TIMP-1、FN、ColⅣ表达明显升高、MMP-9表达明显降低（P〈0.05）;与模型组比较,经通心络及缬沙坦干预后FPG及HbA1c无明显变化（P〉0.05）,24hUAER、BUN、SCr显著降低,肾组织TIMP-1、FN、ColⅣ表达降低、MMP-9表达升高（P〈0.05）。结论：通心络可降低自发性2型糖尿病KK-Ay小鼠尿白蛋白、保护肾功能,调控降解酶系MMP-9/TIMP-1表达抑制细胞外基质沉积是其作用机制之一。     

DM120方为主治疗2型糖尿病30例临床观察

目的观察DMl20方治疗2型糖尿病（T2DM）的临床疗效。方法采用随机方法将60例T2DM患者随机分为两组,治疗组和对照组各30例。在原先治疗方案不变的条件下,治疗组给予DMl20方,对照组给予糖脉康;疗程均为12周。观察治疗前后空腹血糖（FPG）、餐后2h血糖（2hPG）、糖化血红蛋白（HbAlc）、空腹血浆胰岛素（FINS）、空腹C肽、体重指数（BMI）、腰围（wc）的变化,计算胰岛素抵抗指数（HOMA2．IR）。结果两组治疗后FPG、2hPG、HbAlc、FINS、空腹C肽、HOMA2一IR均有改善（P〈0．05,P〈0．01）,治疗组WC改善（P〈0．05）;组问治疗后比较2hPG、FINS有统计学差异（P〈0．05）。结论DMl20方对降低T2DM患者的餐后向糖、减郫睛岛素柢杭疗效确切。‘     

冬梅饮对糖尿病大鼠肾组织非酶糖基化终产物形成的抑制作用

目的：研究中药冬梅饮对糖尿病大鼠肾组织非酶糖基化终产物（advanced glycation end products，AGEs）形成的抑制作用，探讨冬梅饮防治糖尿病肾脏并发症的作用机制。方法：用链尿佐菌素（STZ）建立糖尿病（DM）大鼠模型，观察冬梅饮对其血糖、尿微量白蛋白（uAlb）、尿α1-微球蛋白（uα1-MG）、肾脏病理和肾皮质AGEs的影响。结果：模型大鼠的血糖、尿微量白蛋白（uAlb）、尿α1-微球蛋白（uα1-MG）和肾皮质AGEs均显著高于正常组（P〈0．05或P〈0．01）；冬梅饮能降低模型组肾皮质AGEs（P〈0．01），并明显降低uAlb、uα1-MG（P〈0．05，P〈0．01），改善模型大鼠的病理改变。结论：冬梅饮可抑制肾皮质中AGEs沉积，阻止糖尿病肾脏并发症的发展。     

解聚复肾宁对糖尿病大鼠肾脏PKC和TGF-β1的影响

目的：观察中药复方解聚复肾宁（JJFSN）对糖尿病（DM）大鼠肾脏PKC和TGF-β1的影响及肾保护作用。方法：建立STZ诱导的糖尿病SD大鼠模型,将成模糖尿病大鼠随机分成模型组、解聚复肾宁组、厄贝沙坦组、厄贝沙坦加解聚复肾宁组,同时设正常对照组。各组大鼠采用相应的干预措施处理12周。常规方法检测各组大鼠肾指数、血糖、尿素氮、血肌酐、尿白蛋白排泄率（UAER）,免疫组化法检测肾PKC表达,Westernblot检测肾组织TGF-β1的表达。结果：模型组大鼠肾皮质PKC和TGF-β1表达显著升高,血糖、UAER、尿素氮、血肌酐、肾指数显著增高。解聚复肾宁组、厄贝沙坦组和厄贝沙坦加解聚复肾宁组上述指标显著低于模型组（P〈0．05）,厄贝沙坦加解聚复肾宁组各项指标改善明显优于模型组、解聚复肾宁组和厄贝沙坦组（P〈0．05）但未达到正常对照组水平。结论：解聚复肾宁对DN大鼠肾脏形态和功能有明显保护作用,其机制可能与减少肾组织中PKC和TGF-β1的表达有关。     

贞清方与地龙对2型糖尿病大鼠肾组织TGF-β1及PAI-1表达的影响

目的 研究中药复方贞清方和方中的地龙对糖尿病大鼠肾组织转化生长因子β1 (TGF-β1)和纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)表达的影响。     

糖肾颗粒对2型糖尿病大鼠肾脏的保护作用及对炎症的影响

目的：进一步探讨糖肾颗粒对2型糖尿病大鼠肾脏的保护作用及从炎症角度探讨其机制。方法：SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组和糖肾颗粒治疗组（含生药21g/kg）。以高脂高糖饮食加低剂量注射链脲佐菌素（STZ,30mg/kg）复制2型糖尿病大鼠模型。观察各组生化指标,光镜（HE和PAS染色）观察肾脏病理,免疫组化技术检测转化生长因子β1（TGFβ1）蛋白表达,荧光定量PCR技术检测肾脏组织中TGFβ1mRNA表达,ELISA技术检测血清巨噬细胞趋化因子1（MCP-1）、细胞间黏附分子1（ICAM-1）和肿瘤坏死因子α（TNFα）的浓度。结果：实验8周末,模型组血糖、胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL）、24h尿微量蛋白（U-alb）均升高,肾脏TGFβ1蛋白和mRNA表达增加,血液中MCP-1、ICAM-1和TNFα水平均增高,与正常对照组比较,均P〈0.01;肾间质炎症细胞浸润。与模型组比较,糖肾颗粒治疗可改善生化指标P〈0.05;减轻肾脏病变及炎症细胞浸润;抑制TGFβ1基因和蛋白的表达,P〈0.05;降低血液中炎症因子的含量,ICAM-1和TNFα,P〈0.05。结论：糖肾颗粒对糖尿病肾脏具有保护作用,其部分机制可能通过抑制炎症因子的释放,减少炎症细胞浸润实现的。     

缺血再灌注损伤大鼠脑组织细胞因子VEGF mRNA的变化及通心络对其的影响

目的探讨血管内皮生长因子（VEGF）mRNA在大鼠缺血/再灌注损伤（MCAO）脑组织的表达情况及通心络对其的影响。方法采用MCAO模型并予通心络灌胃,应用反转录集合酶链式反应（RT-PCR）检测缺血再灌注损伤后5d、7d、14d、21d、30d神经干细胞增殖分化相关细胞因子VEGF mRNA的变化。结果缺血再灌注模型组VEGF mRNA在不同时间段均有表达,VEGF mRNA在造模后第3天开始表达增强,第5天表达最高;给予通心络处理后第3天缺血侧VEGF mRNA开始表达增强,5d、7d、14d、21d、30d时PCR表达灰度值均高于缺血对照组。结论缺血/再灌注损伤大鼠脑组织细胞因子VEGF mRNA表达增强,通心络胶囊可强化此反应,进而可能诱导神经干细胞增殖。     

怡心饮对糖尿病心脏病大鼠心肌CTGF-mRNA和MCP-lmRNA表达的影响

目的观察怡心饮对糖尿病心脏病大鼠心脏单核趋化因子1（MCP-1）和结缔组织生长因子（CTGT）mRNA表达的影响。方法运用高糖高脂饲料加链脲佐茵素腹腔注射建立大鼠2型糖尿病心肌病模型,分为怡心饮高剂量组、怡心饮低剂量组、生脉饮对照组、正常组、模型组。灌胃治疗8周后,观察糖尿病心肌病大鼠的心脏单核趋化因子1和结缔组织生长因子mRNA的表达,以及血清结缔组织生长因子的变化,分析其减轻大鼠心肌病变的机制。结果怡心饮能明显降低大鼠心肌单核趋化因子1和结缔组织生长因子ITIRNA表达,降低大鼠血清结缔组织生长因子含量。结论怡心饮对糖尿病大鼠心肌病变有一定的改善作用,其作用机制可能与降低单核趋化因子1和结缔组织生长因子mRNA的表达有关。     

复方益肾胶囊对糖尿病大鼠肾组织中TNF-α表达的实验研究

目的：研究复方益肾胶囊对糖尿病肾病保护作用。方法：将雄性Wistar大鼠手术切除右肾后合并注射小剂量链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型;应用免疫组化SABC法检测左肾TNF-α的表达。结果：TNF-α在正常肾组织中呈弱阳性表达,在DN组表达明显增强（与正常对照组相比,P〈0．01））,复方益肾胶囊高剂量组大鼠肾组织TNF-α表达与模型组比较明显降低（P〈0．05）,且与西药对照组效果接近（P〉0．05）。结论：复方益肾胶囊能一定程度下调肾组织TNF-α的表达,有利于改善DN大鼠肾小球滤过率以及控制血糖,并阻断糖尿病大鼠肾脏病变发展的作用。     

青蒿素对糖尿病大鼠肾组织c-jun及c-fos基因表达上调的抑制作用

目的探讨青蒿素对糖尿病大鼠肾组织c-jun及c-fos基因表达上调的抑制作用。方法15只大鼠分成正常对照组（A组）、糖尿病非治疗组（B组）及糖尿病青蒿素治疗组（c组）,B组、c组应用腹腔单剂量注射链脲佐菌素（STZ）65mg／kg制备糖尿病大鼠实验模型,c组大鼠给予青蒿素300mg／（kg·d）腹腔注射。在实验进行到第4周时每组处死大鼠,留取右侧肾脏部分皮质,采用免疫组化及RT-PCR方法分别检测大鼠肾细胞c-iunmR-NA、c-fosmRNA及其蛋白表达情况,并观察肾组织细胞的病理改变。结果B组大鼠肾细胞C-junmRNA、c-fosmRNA及其蛋白表达显著增加;C组上述指标表达水平分别对2组患者,大鼠肾脏组织病理学改变明显改善。结论青蒿素可通过抑制糖尿病大鼠肾组织细胞c-jun及c-fos基因表达上调而缓解糖尿病大鼠肾脏功能损伤及病理学改变。     

大黄酸对糖尿病大鼠肾脏中神经肽Y及其Y1、Y2受体表达的影响

 目的 观察大黄酸对链脲佐菌素(streptozotocin, STZ)诱导的糖尿病大鼠肾脏中神经肽Y（neuropeptide Y,NPY）及其Y1(NPY1R)、Y2(NPY2R)受体表达的影响。方法 STZ诱导糖尿病大鼠模型,将糖尿病大鼠随机分为糖尿病对照组和大黄酸治疗组,并以正常对照组作为对照,每组动物12只。大黄酸治疗组给予100 mg·kg-1·d-1大黄酸灌胃,其他两组给予相同体积的溶剂灌胃,共10周。运用放射免疫法测定NPY浓度,荧光定量逆转录聚合酶链反应测定NPY及其Y1、Y2受体基因表达水平,Western印迹法检测Y1、Y2受体蛋白表达水平。结果 大黄酸可降低糖尿病大鼠血糖、甘油三酯、总胆固醇、24 h蛋白尿水平（P<0.01）,缓解糖尿病肾病的病理变化。与正常对照组相比,糖尿病大鼠下丘脑和肾脏中NPY浓度明显升高（P<0.01）,肾脏中Y1和Y2受体的mRNA和蛋白表达增加（P<0.05）;大黄酸干预后NPY及其Y1、Y2受体表达量显著低于糖尿病组（P<0.05）。 结论 大黄酸对STZ诱导的糖尿病大鼠糖脂代谢紊乱、肾脏病变有一定程度的保护作用,可能与其调节神经肽Y及其Y1、Y2受体的表达有一定关系。