深圳市公务员华支睾吸虫感染情况调查

目的调查深圳市公务员华支睾吸虫感染情况。方法采用系统抽样方法抽取1918份公务员血清样本,以酶联免疫吸附试验（ELISA）检测其华支睾吸虫IgG抗体。结果共调查1918人,血清华支睾吸虫IgG抗体阳性者为126人,感染率6.6%。其中男性感染率为6.8%,女性感染率为5.2%。在各年龄组中以50～59岁年龄组感染率最高。结论公务员华支睾吸虫感染率高于居民总体感染水平,应将公务员作为华支睾吸虫病防治的重点人群。     

广州市某医科院校学生华支睾吸虫感染情况调查

目的了解广州某医学院学生华支睾吸虫的感染状况。方法分别采用直接涂片法和酶联免疫吸附试验（ELISA）方法对学生的粪便和血清进行检查。结果粪便检查4438人,华支睾吸虫卵阳性5人,感染率约为0．11％;ELISA法检查415人,血清华支睾吸虫IgG抗体阳性10人,阳性率约为2．41％。结论广州市医科大学生华支睾吸虫感染率低于广州市平均水平,但仍需注意高校学生华支睾吸虫感染的防治工作。     

江门市新会区华支睾吸虫病流行现状调查与分析

目的 了解江门市新会区华支睾吸虫病的流行现状,确定华支睾吸虫病的高危人群,提供当地华支睾吸虫病感染因素的线索.方法 采用免疫酶联吸附法检测血清中华支睾吸虫特异性抗体;采用改良加藤氏法检测粪便虫卵;采用消化法检测淡水鱼中华支睾吸虫囊蚴;进行问卷调查华支睾吸虫感染相关的生活和行为方式;同时采用病例对照方法分析影响华支睾吸虫感染的相关流行因素.结果 共调查1 720人,华支睾吸虫平均感染率为18.14%,男性感染率高于女性(P<0.001).各年龄组均有感染,感染率差异有统计学意义(P<0.001).共调查常见淡水鱼6种共273尾,6种淡水鱼体内均查到华支睾吸虫囊蚴.病例对照研究显示,吃半熟鱼习惯及外出饮食等行为是最重要的危险因子.结论 新会区华支睾吸虫病流行范围广,感染率高,已经成为一个严重的公共卫生问题,应积极开展综合性防控工作.     

广州花都地区华支睾吸虫病流行现状及防治对策

[目的]了解广州市花都区华支睾吸虫病的人群感染现状及流行特征,研究当地华支睾吸虫病的感染因素,为当地华支睾吸虫病的防治工作提供科学依据.[方法] 2011年8月～10月对花都区各乡镇常住居民进行华支睾吸虫病流行病学调查.采用酶联免疫吸附法检测血清中华支睾吸虫特异性抗体;改良加藤厚涂片法检测粪便虫卵;同时通过问卷调查了解与华支睾吸虫感染相关的内容.[结果]共调查1 800人,粪检检获华支睾吸虫卵者705人,平均感染率为39.17％,平均每克粪便虫卵数(EPG)为367.男性感染率为43.06％,女性感染率34.51％,差异有统计学意义(P＜0.01).各年龄组均有感染,成年人感染率较高,各年龄组华支睾吸虫的感染率差异有统计学意义(P＜0.01).不同职业人群华支睾吸虫感染存在显著差异,以渔民、饮食服务人员和商人感染率最高.问卷调查结果显示,69.2％的被调查者吃过淡水鱼生,48.5％的家庭生熟食物所使用的刀具、砧板没有分开,80％以上的居民对华支睾吸虫病防治知识知之甚少.[结论]广州市花都区仍然是华支睾吸虫重点流行区之一,居民的不良饮食及生活习惯是华支睾吸虫流行的重要因素,应加强宣传教育,积极开展综合性防控工作.     

深圳市福田区华支睾吸虫病流行现状调查

目的了解福田区华支睾吸虫感染现状和流行特征。方法用血清免疫学筛查,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法查抗体,同时进行问卷调查与华支睾吸虫感染相关的生活和行为方式。结果全区共调查2176人,华支睾吸虫感染率为2.30%,男性为3.02%,女性为1.73%,差异有统计学意义。人群中不同年龄组表现了不同的感染率,最高感染率的年龄组主要分布在30～49岁。73%的被调查者吃过淡水鱼生,55%的家庭刀具、砧板没有生熟分开。结论福田区华支睾吸虫感染率较高,吃淡水鱼生、生熟混用刀具是感染的主要原因,应加强宣传教育,改变人们不良饮食习惯。     

深圳市南山区人群华支睾吸虫感染现状调查

目的了解深圳市南山区各类人群华支睾吸虫感染现状。方法采用整群抽样方法调查不同类型人群,使用“肝吸虫抗体检测试剂盒”,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清华支睾吸虫IgG抗体。结果共调查5185人,华支睾吸虫感染率5．77％。其中,机关事业单位工作人员感染率为6．47％,本地企业员工感染率为3．04％,外来务工人员感染率为1．59％,主动检测人员感染率为32．26％。男性感染率高于女性,40岁年龄组感染率最高。结论本地区属于华支睾吸虫感染的低流行区,机关事业单位工作人员是重点防治人群,应加强宣传教育,同时做好食品卫生整治工作,切断华支睾吸虫的感染来源。     

华支睾吸虫重组蛋白应用于ABC-ELISA检测特异性循环抗体的研究

目的 评价重组蛋白在华支睾吸虫病诊断上的价值，探索以重组蛋白替代天然抗原用于ELISA等血清学方法诊断华支睾吸虫感染的可能性。方法 分别使用重组华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶(CysB)与华支睾吸虫成虫可溶性抗原(CAA)，以ABC-ELISA检测华支睾吸虫病、其它寄生虫感染及健康人血清特异性IgG．比较两种抗原用于检测的敏感性与特异性。结果 共检测了112份华支睾吸虫感染血清，使用重组抗原CysB与成虫粗抗原CAA的阳性检出率分别为92．9％(104／112)及94．6％(106／112)；分别检测健康人血清56例、日本血吸虫病血清20例及肺吸虫病血清10例．对于两种抗原，华支睾吸虫特异性IgG检测阴性率均相同．上述三类血清的阴性率分别为96．5％(54／56)、95％(19／20)及90％(9／10)。结论 华支睾吸虫重组蛋白CysB用于血清特异性抗体检测具有较高的敏感性及特异性，与成虫可溶性抗原(CAA)的诊断应用价值相近，有望成为应用于华支睾吸虫病诊断的替代抗原之一。     

重组华支睾吸虫26kDaGST蛋白用于检测特异抗体的研究

目的 评价重组华支睾吸虫26kDaGST蛋白(rCs26GST)在华支睾吸虫病血清学诊断上的价值。方法使用rCs26GST抗原,以酶联免疫吸附法(ELISA)和免疫增强化学发光法(immuno-enhanced chemilmninescence,immuno-ECL)检测华支睾吸虫病者、其它寄生虫感染者及健康人血清特异性IgG和IgE抗体,分析rCs26GST抗原用于检测的敏感性和特异性。结果使用rCs26GST抗原,ELISA法检测了30份华支睾吸虫感染者血清、肺吸虫病人血清15份、日本血吸虫病人血清20份、无寄生虫感染的健康人血清40份,华支睾吸虫感染者血清IgG的阳性检出率为73．3％(22／30),健康人、肺吸虫病和日本血吸虫病人的阴性率分别为92．5％(37／40)、80．0％(12／15)、85．0％(17／20)。hnmuno-ECL法检测华支睾吸虫感染者血清rCs26GST-特异性IgE的阳性检出率为867％(26／30),肺吸虫病为26．7％(4／15),日本血吸虫病人和阴性对照组的血清未测出,此法的特异度是95．5%。结论 rCs26GST蛋白用于血清特异性IgG和IgE抗体的检测具有较高的敏感性和特异性,可用于华支睾吸虫病的血清学诊断,组合成“鸡尾酒”式的复合诊断抗原之一。     

华支睾吸虫病血清酶学及肝脏病理学实验研究

华支睾吸虫病为华支睾吸虫寄生于肝胆管内所致的疾病,由于其临床症状复杂及以往的诊断方法滞后,故临床上常有误诊。2004-2006年,我院以犬为实验模型,在人工感染华支睾吸虫后,分别就不同感染程度、不同病程的实验犬进行了血清酶学及肝脏病理学观察,现报告如下。     

华支睾吸虫ICT和PCR检测方法的建立及其应用研究

目的建立华支睾吸虫的免疫胶体金(ICT)和实时荧光定量PCR检测体系,比较两者检测华支睾吸虫的效果。方法以华支睾吸虫成虫抗原包被胶体金,检测血液样本中的相应抗体,建立华支睾吸虫ICT检测方法;以华支睾吸虫18S r RNA基因作为靶基因,设计RT-PCR的特异性引物和探针,检测粪便样本中的核酸实时荧光定量PCR方法;以两种检测体系与商品化的酶联免疫(ELISA)检测试剂盒平行测定比较,考核检测体系的应用价值。结果对200份华支睾吸虫重点人群样本进行检测,ELISA法检出的华支睾吸虫Ig G抗体阳性例数为20例,阳性率为10.0%;ICT法为16例,阳性率为8.0%,灵敏度为80.0%,特异度为100.0%,符合率为98.0%,ICT和ELISA两种检测方法差异无统计学意义(χ2=2.25,P0.05);RT-PCR法检出的粪便样本中华支睾吸虫核酸阳性例数为18例,阳性率为9.0%,灵敏度为90.0%,特异度为100.0%,符合率为99.0%,RT-PCR和ELISA两种检测方法差异无统计学意义(χ2=0.05,P0.05)。说明ICT、RT-PCR两种检测方法与ELISA的测定结果比较一致。结论建立的ICT及RT-PCR两种检测方法特异性好、灵敏度高,两种检测方法均适用于华支睾吸虫现场的快速检测及定量分析。     

华支睾吸虫感染对野生型和Tlr2-/-C57BL/6J小鼠肝胆管损伤差异的研究

目的 观察C57BL/6J野生型、Tlr2-/-两种小鼠感染华支睾吸虫后肝脏的病理变化,探讨Toll样受体2(TLR2)对华支睾吸虫感染致胆管损伤的影响.方法 建立野生型、Tlr2-/-小鼠华支睾吸虫感染模型即每只小鼠灌胃45只华支睾吸虫囊蚴,对照组灌胃等量生理盐水.感染第4周安乐死法处死小鼠,采用比色法检测小鼠血清中...     

抗华支睾吸虫抗体Fab段基因的克隆及重组表达载体的构建

为了制备抗华支睾吸虫基因工程抗体,本文从感染华支睾吸虫患者的淋巴细胞中提取总RNA,逆转录成cDNA。用相应的引物进行PCR,扩增出约700bp的重链Fd段和轻链κ、λ基因,经Xho　I和Spe　I,SacI和 Xba　I双酶切后,分别和质粒载体pComb3连接,再经电穿孔转化大肠杆菌XL 1-blue菌株,将轻链和重链Fd基因先后克隆人pComb3中,成功地构建了抗华支睾吸虫Fab段抗体基因的表达载体,为进一步构建噬菌体抗体库奠定基础。     

深圳市福田区华支睾吸虫病流行现状调查

目的 了解福田区华支睾吸虫病感染现状和流行特征.方法 用血清免疫学筛查,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)方法 查抗体,同时进行问卷调查与华支睾吸虫感染相关的生活和行为方式.结果 全区共调查2 176人,华支睾吸虫感染率2.30%,男性为3.02%,女性为1.73%,二者间差异有统计学意义.人群中不同年龄组表现了不同的感染率,最高感染率的年龄组主要分布在30～49岁.73%的被调查者吃过淡水鱼生,55%的家庭刀具、砧板没有生熟分开.结论 福田区华支睾吸虫病感染率较高,吃淡水鱼生、生熟混用刀具是感染的主要原因,应加强宣传教育,改变人们不良饮食习惯.     

珠海市农村地区2010年华支睾吸虫感染情况调查及其危险因素分析

目的了解珠海市农村地区华支睾吸虫感染和流行现状,为制定防治规划提供科学依据。方法采用改良加藤厚涂片法(kato-katz法)检查华支睾吸虫虫卵,并进行华支睾吸虫知晓和防治状况调查。结果本次抽样调查斗门区5个乡镇共1000人,检出华支睾吸虫感染者63人,以中年男性为主,总感染率为6.3%(63/1000)。被调查者对于肝吸虫防治知识的知晓率为87.8%,生熟食品砧板分开成为感染华支睾吸虫病的保护性因素(OR=0.11,OR95%C.I.(0.02-0.62)。结论珠海市农村地区华支睾吸虫感染率低于全省平均水平,肝吸虫防治知识知晓率较高,生熟食品砧板分开是感染华支睾吸虫病的保护因素。     

免疫球蛋白检测在华支睾吸虫病诊断上的应用价值

华支睾吸虫病是我区主要寄生虫病之一。以往诊断此病主要依靠粪检,近年来,血清学检测技术已应用于华支睾吸虫病的诊断。为了评价各类免疫球蛋白在华支睾吸虫病诊断中的应用价值,1990年5月,我们应用ELISA法同时检测华支睾吸虫病人血清中的特异性IgG、IgM和IgA抗体.现将结果报告如下。材料、方法和结果一、可溶性蛋白抗原的制备:从实验感染的家兔肝胆管内获取华支睾吸虫成虫,用     

特异抗体联合血液指标在无症状胆囊结石患者华支睾吸虫感染诊断的应用

目的探讨多项血液指标联合检测在胆囊结石患者合并华支睾吸虫感染诊断中的作用和意义。方法连续检测192例无症状胆囊结石病人的胆囊结石、胆汁和血液。以胆囊胆汁和/或结石中发现虫卵为华支睾吸虫病确诊依据,同时分析评价有关血液指标的独立和联合诊断价值,指标包括:嗜酸性粒细胞百分比(EO%)、单核细胞百分比(MO%)、华支睾吸虫IgG抗体(C.sinensis IgG)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)、γ-谷氨酰基转移酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆汁酸(TBA)、胆碱酯酶(CHE)和α-L-岩藻糖苷酶(AFU)。结果所有患者中确诊华支睾吸虫病117例,阳性率为60.9%(117/192)。Logistic回归分析显示有诊断意义(阳性或升高)的单项指标为EO%、C.sinensis IgG、ALT和GGT,其ROC曲线下面积(AUC)分别是0.638、0.817、0.514和0.602,以C.sinensis IgG诊断价值最高;4个指标不同组合模式的诊断价值比较:所有组合模式中,以不包含C.sinensis IgG的EO%+ALT+GGT组合诊断价值最差(AUC=0.695);四者联合的诊断价值最高(AUC=0.876);三联组合中价值最高为C.sinensis IgG+EO%+GGT(AUC=0.869);二联组合最高为GGT+C.sinensis IgG(AUC=0.854)。结论血清华支睾吸虫抗体联合EO%、ALT和GGT检测可提高无症状胆囊结石患者华支睾吸虫感染的诊断效率。     

开平市华支睾吸虫病调查与防治研究

目的：为了解开平市华支睾吸虫感染状况，探索大规模调查华支睾吸虫病流行病学的诊断技术和防治措施。方法：采用改良加藤氏厚涂片法粪检和ELISA法血检水口镇东方红村和黎村人群华支睾吸虫卵和抗体。华支睾吸虫感染患者作腹部B超检查及服用阿苯哒唑驱虫糖。开展中间宿主和保虫宿主调查。结果：华支睾吸虫总感染率为34．1％。其中东方红人群感染率34．8％，黎村感染率33．3％。男、女性感染率分别为44．4％和26．8％。以15～60岁年龄组最高。虫卵密度EPG平均值男、女性分别为200．2和164．8，多属轻度感染。酶标检测感染率36．0％，与粪检的34．1％无显著性差异。服用阿苯哒唑驱虫糖后虫卵阴转率为95．5％。在当地鱼塘的鱼苗中找到华支睾吸虫囊蚴，解剖当地犬和猫发现有华支睾吸虫成虫。结论：开平市已是华支睾吸虫流行区之一，酶标检测可做为大规模流行病学调查。阿苯哒唑驱虫糖可有效防治华支睾吸虫感染。     

免疫金银染色技术对华支睾吸虫病人血清中抗体检测的研究

应用免疫金银染色技术(IGSS)首次在国内报道诊断华支睾吸虫病的研究。初次探索方法时曾检测50份华支睾吸虫病人血清,46份阳性反应,阳性率92％,间接萤光抗体(IFAT)阳性率为74％。第2次适当改进方法,检测40份病人血清,阳性率为100％,40份正常人血清,假阳性率为0,可疑为2.5％,显示IGSS对华支睾吸虫病人血清的检测,具有很高的特异性和敏感性。     

华支睾吸虫成虫特异性诊断抗原分析

目的:寻找诊断华支睾吸虫病的特异性抗原.方法:应用SDS-PAGE和Western blot对华支睾吸虫成虫可溶性抗原中的蛋白组分进行分析,试验血清包括旋毛虫感染的大鼠和小鼠血清,正常大鼠和小鼠血清,旋毛虫病、华支睾吸虫病、并殖吸虫病、日本血吸虫病及囊虫病患者血清,斯氏狸殖吸虫感染的大鼠血清和正常人血清.结果:华支睾吸虫成虫可溶性抗原蛋白经SDS-PAGE后显示17条蛋白带,其中相对分子质量为65 000、54 000、31 000、25 000、13 000的为主带.Western blot结果显示,相对分子质量为108 000、94 000、71 000、65 000、56 000、53 000、43 000的蛋白带可被华支睾吸虫病患者血清识别,108 000、71 000、65 000、63 000、53 000的蛋白带可被并殖吸虫病患者血清识别,108 000、94 000、71 000可被日本血吸虫病患者血清、旋毛虫感染的大鼠血清及旋毛虫病患者血清识别;56 000的蛋白组分只能被华支睾吸虫病患者血清识别,而不与其他试验血清发生交叉反应.结论:华支睾吸虫成虫可溶性抗原中相对分子质量为56 000的蛋白组分为华支睾吸虫成虫的特异性抗原.     

华支睾吸虫硫氧还蛋白过氧化物酶的表达定位及其酶活性的研究

目的克隆和表达有酶活性的华支睾吸虫硫氧还蛋白过氧化物酶(CsTPx),并进行组织定位研究,为进一步研究其功能奠定基础。方法利用生物信息学方法从华支睾吸虫基因组文库中识别硫氧还蛋白过氧化物酶(TPx)基因,并对蛋白的结构特征和相关生物学和免疫学功能进行预测。从华支睾吸虫成虫cDNA中扩增目的基因,克隆到原核表达载体pET-30a(+)中,进行蛋白纯化,免疫印迹鉴定、组织定位及其酶活性的检测。结果华支睾吸虫TPx基因全长2 175 bp,有一大一小的两个内含子,其编码区序列长度为636 bp,编码212个氨基酸;该蛋白第1~17位氨基酸为其信号肽序列,第51~74位氨基酸为跨膜区,属于经典的2-Cys过氧化物还原酶。重组蛋白可被感染了华支睾吸虫的大鼠血清识别,免疫组化结果表明该蛋白定位于成虫的皮层、肠支、卵黄腺、虫卵和囊蚴的体壁中。酶活性检测结果表明,在一定范围内,CsTPx还原H2O2呈剂量和时间依赖性。抗体对酶活性有影响,在合适的抗体水平可以促进酶活性。结论 CsTPx可在大肠杆菌中进行功能性表达,其产物具有良好的免疫学和生物学活性。